专利名称：一种藏药的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种藏药的制备方法，特别是涉及一种治疗消化系统疾病的藏药制剂的制备方法。
“石榴健胃丸”、“石榴健胃散”是藏药部颁标准收载品种，由石榴子、荜茇、红花、肉桂、豆蔻五味药组成，临床应用多年，具有温胃益火、化滞降温、温通脉道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹泻。这两种药品在藏药方中堪称组方精当之剂，具有组方合理、配伍严谨、疗效显著、服用量小、主治征候明确、所用药物易得等诸多优点。
藏药部颁标准收载的“石榴健胃丸”属水泛丸剂，崩解慢，药效缓慢，而且放久后质坚硬，难以嚼碎，此外含较多挥发油，口感苦涩、辛辣，给患者服用带来诸多不便，限制了该药的推广使用。
藏药部颁标准收载的“石榴健胃散”是国家中药保护品种，制法简便，具有易分散、奏效快的特点。但石榴健胃散由于药物粉碎后比表面积较大，故其嗅味、刺激性、吸湿性及化学活动性等也相应地增加，使得药物稳定性降低，方中挥发性成分易散失，而且依然存在口感不适、服用不便的缺点。
藏药传统制剂石榴健胃丸由石榴子、荜茇、红花、肉桂、豆蔻五味药组成，方中石榴子为君药。
处方中藏药石榴子种皮含有机酸类成分，种仁主含脂肪油、雌二醇激素。石榴子脂肪油不溶于水，可采用乙醇提取。石榴子又含鞣质，其中含诃子酸、原诃子酸、没食子酸、等化学成分，均为水溶性成分，故又可采用水提。由于未见与本品相关的药理试验研究报道，对石榴子进行了提取工艺的化学药理初步试验研究。
采用不同极性大小的乙醇、氯仿对500克石榴子进行了提取分离，提取流程见说明书附2，制备出相应的石榴子提取部位A(乙醇提取物)、提取部位B(氯仿提取物)和提取部位C(水提取物)，供药效学实验的样品。制得水提物浸膏500g药材提取33g，收膏率为6.6％；氯仿浸膏相当于200g药材提取1g，收膏率为0.5％；醇提物浸膏相当于300g药材提取25.5g收膏率为8.5％。
为了进一步确定提取路线，保证制剂疗效和减少服用量，采用小鼠止泻试验进行对比筛选。根据药典规定石榴用量为5~12g，即人用量为12g/50kg，相当于0.24g/kg。根据出膏率计算并且分别配制三种浸膏人用量的10倍、30倍。阳性对照药硫酸阿托品(厂家江苏盐城制药有限公司“苏卫药准字1982第276803号”批号20000701规格0.3mg*100)配制溶度5片/30ml即5mg/100ml。实验结果表明氯仿提取物的两个剂量组能明显(p＜0.01)地延长小鼠出现稀便潜伏期，并且其高剂量组也能明显(p＜0.05)减少小鼠排便的次数。氯仿提取物低及高两个剂量组对小鼠小肠推进运动有抑制作用，此外，水提物低剂量组及醇提物低剂量组也出现此趋势但无统计学意义，即石榴子不同提取物对正常小鼠推进运动无明显影响。各给药组的高剂量组均有抑制新斯的明致小鼠亢进作用，以水提取物最为显著，其效果次序为水提取物高剂量组＞氯仿提取物高剂量组＞乙醇提取物提高剂量组＞氯仿提取物提低剂量组＞乙醇提取物低剂量组＞水提取物低剂量组。
对石榴子进行植物化学预试试验。取石榴子药材150g，用5倍量70％乙醇提取3次，每次2小时，滤过，滤液浓缩至20ml无醇味，用40ml，30ml，30ml石油醚(60～90℃)分次萃取，萃取液挥发得药材油脂部分。萃取残留物加在28*4cm的聚酰胺柱上，加水2000ml水洗至无色，水洗液浓缩至40ml，得试样1；用50％乙醇1500ml洗至近无色，洗脱液减压浓缩，残渣挥干，50％乙醇40ml溶解，得试样2；再用95％乙醇1000ml洗脱至无色，洗脱液减压浓缩，残渣加95％乙醇40ml使溶解，得试样3。结果表明在试样2中有皂苷类成分存在。故对方中石榴子的提取工艺采用乙醇进行提取，才能将其抗腹泻有效组分提取出来，以保证临床疗效。
处方中红花含红花醌甙、新红花甙、红花甙和6-羟基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黄酮类成分，据文献报道6-羟基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黄酮类具有抗炎作用，而该类成分在甲醇和乙醇中的溶解性大于水，可采用乙醇提取。
处方中肉桂、豆蔻、荜茇含挥发油。肉桂挥发油具抗溃疡，调整平滑肌功能，利胆，止泻的作用；豆蔻含桉油精等成分，理气止呕，消除胃脘胀闷。由于以上两味的水溶性成分具有抗炎等药理作用，在临床中广泛运用，均为本方的有效组分，有必要使其有效成分充分提取。因而拟定将以上三味首先提取挥发油，然后再将药液保存备用。肉桂、豆蔻主要含挥发油，在水中溶解较小，故采用采用水蒸汽蒸馏后，再进行水提或醇提工艺。荜茇含胡椒碱、棕榈酸等，具促进胆固醇酯化和排泄的功效，而胡椒碱水中溶解性差，且遇热、光不稳定，因而考虑打粉直接加入。
为了进一步确定提取工艺路线，保证制剂疗效和减少服用量，对处方药物的四种不同提取工艺路线进行了样品制备，并采用药效学指标作筛选试验。
采用醇提法制得样品a将肉桂、豆蔻、荜茇粉碎成粗粉，取石榴子、红花，加8倍量83％乙醇提取3次，每次1小时，提取液滤过。滤液减压浓缩成清膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成细粉。
采用部分醇提法制得样品b取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小时，收集挥发油。滤过，滤液备用。另取石榴子、红花加6倍量83％乙醇回流提取3次，每次1小时，分次滤过，合并两次提取液，滤液回收乙醇后，浓缩至相对密度为1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。将上述两种干膏粉碎成80目细粉混匀。荜茇粉碎成细粉，与干膏混匀，再加入挥发油混匀。
采用综合醇提法制得样品c取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小时，收集挥发油。滤过，滤液备用。另取石榴子、红花加83％乙醇回流提取3次，每次1小时，分次滤过，合并两次提取液，滤液回收乙醇后，浓缩至相对密度为1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。将石榴子、红花醇提取药渣与提取挥发油后的药渣，加6倍水煎煮二次，每次1.5小时，分次滤过，合并煎液，并与提取挥发油的滤液合并，浓缩干燥。将上述干膏粉碎成80目细粉混匀。荜茇粉碎成细粉，与干膏和挥发油混匀。
采用部分水提法制得样品d取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍水提取4小时，收集挥发油。滤过，滤液备用。石榴子、红花水提3次、每次1小时每次加8倍量水，滤过。滤液浓缩成浸膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成细粉。将上述两种干膏粉碎成80目细粉混匀，荜茇粉碎成细粉，与干膏混匀，加入挥发油混匀。
对上述四种样品进行药理筛选，实验结果如下表1 石榴健胃片不同提取方法对蓖麻油所致小鼠腹泻的影响剂量给药后排便次数(x±s)组别(mg/潜伏期 总数 1h 2h 3h4h5h6hkg)空白对96.14± 9.71± 0.43±2.71± 1.71± 0.93± 0.43± 0.21±照组- 25.32 3.22 1.16 1.90 0.83 1.07 0.76 0.58阳性对 1.0 111.71± 7.57± 1.07±1.92±2.00± 1.36± 0.93± 0.36±照组 79.17* 3.27 1.90 1.69 1.47 1.45 0.92 0.74*a低剂 124.75± 6.00± 0.92±2.33± 1.58± 0.67± 0.42± 0.08±量组 105.13**2.98**1.38 1.50 1.56 0.78 0.67 0.29**a高剂 134.83± 6.33± 0.58±1.17±2.00± 1.33± 1.08± 0.17±量组 88.11** 3.42* 1.08*1.70*1.54 1.44 1.24 0.39**b低剂 111.00± 8.16 0.33±2.25± 2.17± 0.50± 0.50± 0.58±量组 54.77* ±3.130.78** 2.49 1.62 0.67* 0.67 0.67b高剂 104.00± 6.00± 0.33± 1.92±2.08± 0.92± 0.42± 0.33±量组 49.71 3.25**0.78** 2.07 1.93 0.79 0.67 0.78*c高剂 126.42± 6.67± 0.92±2.25± 1.92± 0.92± 0.58± 0.08±量组 86.22** 3.17* 1.78 2.45 1.38 0.90 0.90 0.29**
d低剂106.83± 7.50±1.33± 2.50±1.58±0.67±0.58±0.50±量组 94.48*4.80 2.57 2.11 0.79 0.78 1.08 0.67d高剂90.42±5.91± 1.08± 2.00±1.33±0.58±0.50±0.42±量组 34.98 2.16**1.44 1.35 1.50 0.79 0.90 0.79*p＜0.05； **p＜0.01表2不同提取方法对新斯的明所致小鼠肠亢进模型的影响组别 剂量(mg/kg) 动物数(只) 推进百分率(x±s)空白对照组- 13 0.66±0.15阳性对照组 1.00 10 0.55±0.13A低剂量组 90.49±0.07*A高剂量组 90.51±0.13*B低剂量组 10 0.48±0.15**B高剂量组 90.50±0.16*C低剂量组 10 0.44±0.12**C高剂量组 10 0.44±0.13**D低剂量组 10 0.56±0.19D高剂量组 11 0.55±0.19*p＜0.05； **p＜0.01实验结果表明，四种样品对腹泻均有止泻作用，在相同剂量下，所试样品止泻作用强度有如下大致规律样品c＞样品b＞样品a＞样品d，样品c即综合醇提法效果最好，故本发明确定为综合提取工艺。
本品中挥发油含量较多，为了为减少挥发油散失，增加挥发油成分的稳定性，提高药品质量，保证疗效，可采用β-环糊精包结复方中的挥发油，可采用饱和水溶液法包结。
取肉桂、豆蔻一定量，过10目筛，加10倍量的水浸泡5小时后，加热煮沸提取5小时，将挥发油加无水硫酸钠脱水。称取适量β-环糊精，β-环糊精与水以1∶10的比例加热溶解于水中制成饱和溶液，保持35℃恒温。在搅拌速度800转/分下，用移液管量取复方挥发油1ml，缓慢滴加入一定量的β-环糊精水饱和溶液中，用搅拌器搅拌包结1小时，取出置冰箱中冷藏24小时，20ml，10ml，10ml乙醚洗涤三次，冷风吹干，在干燥器中放置一日，即得挥发油的β-环糊精包结物。
对包结前后挥发油进行薄层色谱及气质联用分析得知，复方的挥发油经β-环糊精包结后组分没有明显变化。
由于复方挥发油中以肉桂油含量最多，而桂皮醛占肉桂油的75％~85％，因而考虑用桂皮醛的包合率作为考察指标的一个重要因素，其中桂皮醛含量包合前较包合后基本相同。
采用红外光谱法考察挥发油中桂皮醛的包合程度。对β-环糊精，石榴子挥发油包合物，复方挥发油进行红外光谱的测定。通过比较包合前后红外线取特征吸收峰的变化，挥发油包合物，整个包合物主要呈现β-CD的红外光谱图形，其在1700nm处芳香骨架的特征红外峰几乎消失。
利用高效液相色谱法考察挥发油中桂皮醛的保留率。在三个月中，分别精密称取2个批号的挥发油包合物15mg左右，25ml乙醇超声30min，离心(5000转/分)，取上清液于10ml容量瓶中，吸取20ul注入高效液相色谱进行测定，计算每克挥发油包合物中桂皮醛含量，结果如下样品号 0月(mg) 1月(mg) 2月(mg) 3月(mg)批1 39.1 34.2 31.5 28.3批2 42.9 35.2 33.6 27.9结果表明，3个月内，桂皮醛峰形无大的改变，且桂皮醛含量衰减不到一半，说明包合物能减少挥发油的散失与变化，保证挥发油制剂的稳定性。
本发明涉及的药物由于挥发油含量较多，故不适合制成口服液等液体制剂，可根据需要添加辅料，依常规制剂技术，制成片剂、胶囊剂型。
本发明制得的浸膏粉由于其中所含油脂类成分较多，水分难以进入，故若制成片剂，片剂崩解较为困难，需要添加崩解剂。淀粉、羧甲淀粉钠(CMS-Na)、低取代羟丙基纤维素(L-HPC)和微晶纤维素(MCC)是常用的片剂崩解剂，都可应用于本品，经崩解实验证明其中尤以羧甲淀粉钠、微晶纤维素二者配合使用效果最好，片剂崩解速度快。
为了改善本品制成普通片剂的溶出性能，提高生物有效性，可以将本品制成分散片。
本发明涉及的药物可制成胶囊剂型，包括硬胶囊、软胶囊。
普通剂型挥发油容易散失，可选择将本品进行薄膜包衣，增加稳定性且外形美观。
为了检验本发明的药效作用，结合具体实施例，与石榴健胃丸进行了对比性的药效学实验。
石榴子 326g 荜茇 32.6g 肉桂 52g红花163g 豆蔻 26g荜茇粉碎成细粉，过筛，备用。肉桂、豆蔻以水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，滤液与残渣分别另器收集备用。挥发油用β-环糊精饱和水溶液混合，搅匀，冷藏过夜，滤过，干燥。取石榴子、红花加85％乙醇回流提取二次，提取时间分别为60分钟、40分钟。滤过，合并滤液，回收乙醇并减压浓缩至相对密度约为1.10(室温)的清膏。将乙醇提取后的药渣与提取挥发油后的药渣合并，加水煎煮二次，第一次60分钟，第二次30分钟，滤过，滤液与提取挥发油的滤液合并，浓缩至相对密度为1.10(室温)的清膏。将上述两种清膏喷雾干燥成细粉，加入荜茇细粉、羧甲淀粉钠、微晶纤维素、十二烷基硫酸钠、75％乙醇、微粉硅胶适量，混匀，制成颗粒，干燥，加入挥发油包合物，混匀，压片，制成石榴健胃片。
研究结论如下1.石榴健胃片0.9、1.8g/kg剂量对蓖麻油所致小鼠腹泻有明显的止泻作用(P＜0.01)，而石榴健胃丸0.45、0.9g/kg剂量对蓖麻油所致小鼠腹泻有良好的止泻作用(P＜0.05～0.01)。
2.2.石榴健胃片0.45、0.9g、1.8g/kg3个剂量组对番泻叶所致小鼠腹泻都有明显的止泻作用(P＜0.05～0.01)，而石榴健胃丸0.9g、1.8g/kg对番泻叶所致小鼠腹泻都有明显的止泻作用(P＜0.01)。
3.石榴健胃片0.9g/kg可促进小鼠的胃排空运动(P＜0.05)，而石榴健胃丸0.45g/kg也可促进小鼠的胃排空运动(P＜0.01)。
4.石榴健胃片0.9g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可抑制正常小鼠的小肠的推进动(p＜0.05)。
5.石榴健胃片0.45、0.9g/kg和石榴健胃丸0.45、0.9g/kg可明显抑制新斯的明致小鼠肠亢进模型的肠推进运动(p＜0.05～0.01)。
6.石榴健胃片0.9、1.8g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可促进大鼠胃液的分泌(P＜0.05)，使胃酸度和胃蛋白的活性增加(P＜0.05～0.01)。
以上实验表明，石榴健胃丸的新剂型石榴健胃片完全保留了石榴健胃丸的药效作用，并且该片剂剂型有效成分保持率较高，用量小，起效快。此外石榴健胃片改善了原剂型的苦涩辛辣口感，服用方便，贮运方便。
图2为石榴子药效学筛选样品提取流程图
权利要求
1.一种藏药的制备方法，其特征是以下述重量配比的原料组分按下述制法制成A、石榴子55重量份、肉桂9重量份、荜茇5重量份、红花27重量份、豆蔻4重量份；B、荜茇粉碎成细粉，过筛，备用；肉桂、豆蔻以水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏的水溶液滤过，滤液与残渣分别另器收集备用；石榴子、红花用乙醇提取二至三次，滤过，合并滤液，回收乙醇并减压浓缩成清膏；将乙醇提取后的药渣与提取挥发油后的药渣合并，加水煎煮提取，滤过，滤液与提取挥发油的滤液合并，浓缩成清膏；将上述两种清膏喷雾干燥成细粉，加入荜茇细粉和适量辅料，混匀，制成颗粒，干燥，加入挥发油，混匀，制剂成型。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是肉桂、豆蔻加6-10倍量水浸泡3-5小时后提取挥发油；
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述的挥发油的提取时间是3-6小时；
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是石榴子、红花加60％-85％乙醇以回流法提取，每次提取时间为30-90分钟；
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述的药渣加水提取的次数是1-3次，加水量是药渣的4-8倍，每次提取时间是30-90分钟；
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述的挥发油用β-环糊精包合；
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是其所涉及的药物制成药剂学所说的胶囊剂剂型；
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是其所涉及的药物制成药剂学所说的片剂剂型；
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征是压片后薄膜包衣；
10.据权利要求8所述的制备方法，其特征是以羧甲淀粉钠、微晶纤维素作为崩解剂；
11.根据权利要求8所述的制备方法，其特征是其所涉及的药物制成药剂学所说的分散片剂型。
全文摘要
本发明涉及一种藏药的制备方法，该药物以石榴子、肉桂、荜茇、红花、豆蔻为药物组分，其制法包括提取肉桂、豆蔻挥发油，提取石榴子、红花、肉桂、豆蔻有效成分，荜茇粉碎直接加入。本发明涉及的药物具有温胃益火、化滞降温、温通脉道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹泻。
文档编号A61P1/04GK1424085SQ0215644
公开日2003年6月18日 申请日期2002年12月16日 优先权日2002年12月16日
发明者张艺 申请人:北京正青星光生物医学科技有限公司