血管支架的制作方法

专利名称：血管支架的制作方法
技术领域：
本发明涉及血管支架。更具体地，本发明涉及用于血管成形术以防止再狭窄现象的具有聚合物涂层的血管支架。
支架在目前的血管成形术中得到广泛接受并用于冠状动脉闭塞的治疗中是公知的。支架为置于经历狭窄的血管部分中的网状金属假体，其在已经撤回释放系统和气囊系统之后保留在该病灶位置。因此，支架压缩板并为血管壁提供机械支持以保持由气囊膨胀重建的血管直径和防止血管塌陷。
然而，使用冠脉内支架的长期效果仍产生血管成形术后冠脉再狭窄的主要问题，即冠状血管再闭塞的现象。事实上，据例如WilliamsDO、Holubkov R、Yeh W等人，“Percutaneous coronary interventions in thecurrent era are compared with 1985-1986The National Heart，Lung andBlood Institute Registries”，Circulation，2000，1022945-2951中描述的，这种再狭窄的现象在15-30％的支架血管成形术患者中发生。
支架插入引起的狭窄是由于新形成的内膜的增生。具体地，支架引起的动脉壁机械损伤和支架的存在诱导的异物反应在血管中引起慢性的炎性过程。这种现象随后引起细胞因子和生长因子的释放，其促进平滑肌细胞(SMC)的增殖和移动的活化。这些细胞的生长与细胞外基质的产生一起引起新生内膜占据的血管的截面增加，从而引起血管内腔缩小，导致上述的再狭窄。
试图通过系统途径的许多药理学方法还没有在降低血管成形术之后的再狭窄水平方面产生有用的结果。这种给药方法的问题实际上可认为是到达狭窄病灶的药理活性成分的浓度低。
由使用覆层支架提供引起在需要治疗区域中活性成分更大释放而防止再狭窄问题的选择性方法，所述覆层支架用作能够释放药物的局部来源(DES，药物洗脱支架)。例如，在Takeshi Suzuki等人的“Stent-Based Delivery of Sirolimus Reduces Neointimal Formation in a PorcineCoronary Model，”Circulation，2001，1041188-1193的文章中，描述了涂有基于聚甲基丙烯酸正丁酯和聚乙烯-醋酸乙烯酯的非降解性聚合物基质的支架，其包含用于减少新生内膜增生的治疗浓度的活性成分。
用于释放活性成分的聚合物涂层为已知的，其中聚合物可为降解性的或非降解性的。然而，这些以前只发挥惰性功能，即它们只限于起到活性成分的储存器从而控制活性成分释放速率的作用，但其本身不能以任何方式对动脉粥样硬化病灶起作用。
然而，与刚刚所述的相反，实际上还有能够在再狭窄过程的控制中起积极作用的聚合物。在多种哺乳动物的组织中发现的分子形式的天然多糖，即透明质酸的有用性质在生物医学领域是人所共知的。透明质酸实际上在减少异物反应和由此随后产生的炎症过程中有值得重视的性质。除此之外，由于透明质酸与平滑肌细胞(SMC)和内皮细胞的特异性相互作用，其在再狭窄过程中扮演重要的角色。由于这些特征，已经在动物模型中表明，动脉病灶接触高浓度的透明质酸引起新生内膜生长显著减少。
然而，还不能立即将透明质酸作为涂层和活性成分的储存器用于支架。事实上，透明质酸极易溶于水，因此其立即溶解并离开病变位置。因此，其立即溶解引起可能包括的所有任何活性成分立即释放，有使病变位置暴露于过量和毒性剂量的活性成分下的危险，和完全不可能控制活性成分从天然聚合物的释放。
为了克服这些缺点，已经报到了将透明质酸固定在支架表面上的多种技术实例。总的说来，在文献中已经描述的表面改性的方法中，将透明质酸共价结合于支架表面。然而，通过这种方法，天然聚合物不再能够以有效治疗的高浓度在植入位置释放。除此之外，因为在必须涂覆的材料和透明质酸之间的界面发生固定反应，聚合物层的厚度只限于单分子层，其当然不适合作为治疗有效量的活性成分的储存器。因此，其后果是可得到的透明质酸的量和能够结合的活性成分的量极小，从而不足以预防再狭窄现象。
然而，透明质酸可通过交联透明质酸本身的反应以几微米水平的更显著厚度用作涂层。这种交联反应与例如聚氨酯进行。然而，这种交联方法不适合用于支架涂层的情况中。事实上，已经被证明这难以在具有复杂几何形状的装置如血管支架上进行，其引起由于交联剂的附属作用(collateral effect)，诸如例如由于聚氨酯的附属作用，和最主要地由交联固定的透明质酸丧失了其生化特性，因此不能在再狭窄的控制中积极地起作用。
最后，用于降低透明质酸溶解度的另一个已知的方法为与天然或合成材料形成混合物，然后用其涂布支架。其例子为用得自Genzyme公司的可再吸收性膜Seprafilm涂布支架。这种膜包括透明质酸与羧甲基纤维素的混合物。然而这些膜还有羧甲基纤维素对狭窄病灶的炎性应答有附属作用的主要缺点。
因此，对开发可用于血管成形术和能够有效地预防再狭窄现象的支架的需要是显而易见的。
因此，本发明的技术问题在于提供没有本领域上述支架的所有缺点的新型支架。
这一问题通过如权利要求中所述的包括由透明质酸酯衍生物构成的聚合物涂层的本发明的支架得到解决。
本发明的其它优点和特征从参考附图给出的以下详细说明变得清楚，该说明仅仅作为非限制性例子提供，其中

图1表示详细说明本发明实施方案的支架用聚合物涂层的截面图。
图2表示详细说明本发明另一个实施方案的支架用聚合物涂层的截面图。
图3为表示活性成分从图1中图解说明的实施方案的支架的聚合物涂层的释放曲线和对该涂层中活性成分释放浓度的作用的图。
适合用于涂布本发明支架的透明质酸酯为例如在Fidia AdvancedBiopolymers company的欧洲专利EP 216453中描述的那些，所述文献被包括在本文中作为参考。
这些化合物为其中所有或部分羧基被选自脂肪醇、芳基脂肪醇、脂环醇和杂环醇的醇酯化。
用于酯化透明质酸的羧基的脂肪醇选自具有2到12个碳原子的直链或支链的、饱和或不饱和醇，其选择性地被一个或多个基团取代，所述基团选自羟基、胺、醛、硫醇或羧基或衍生自诸如例如酯、醚、缩醛、缩酮、硫醚、硫酯、脲的基团。
当醇为饱和的、非取代的脂肪醇时，优选其选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、或戊醇。
当醇为二元脂肪醇时，优选其选自乙二醇、丙二醇、丁二醇，或如果其为三元醇，优选其为甘油。
当脂肪醇为氨基醇时，优选其选自氨基乙醇、氨基丙醇、氨基丁醇、或其二亚甲基或二亚乙基胺衍生物，如哌啶乙醇、吡咯烷乙醇、哌嗪乙醇。
当醇为羧基醇时，优选其选自乳酸、酒石酸、马来酸和羟基乙酸。
最后，当醇为不饱和脂肪醇时，优选其为烯丙醇。
优选用于酯化透明质酸的羧基的芳基脂肪醇为选自具有选择性地被1到3个甲基或羟基或卤素原子取代的苯和其中脂肪链具有1到4个碳原子并选择性地被一个或多个选自伯胺基、单或二甲基化物或吡咯烷或哌啶基团取代的那些，其中卤素原子具体为氟、氯、溴和碘。
优选用于酯化透明质酸的羧基的芳基脂肪醇为苯甲醇和苯乙醇。
优选用于酯化透明质酸的羧基的脂环醇选自单环醇或多环醇，其包含3到34个碳原子并选择性地包含1到3个选自O、S、N的杂原子，和选择性地被一个或多个选自用于脂肪醇的那些基团取代。
具体地，对于单环脂环醇，本发明特别感兴趣的那些为包含5到7个碳原子并选择性地被一个或多个选自羟基、甲基、乙基、丙基或异丙基的基团取代的那些。例如，使用环己醇、环己二醇、肌醇和薄荷醇。
透明质酸与上述醇的酯衍生物的酯化度随着希望赋予支架上涂层如具有大或小的亲脂性或亲水性特性的涂层的特征的不同而不同。
通常，事实上较高的酯化度增加酯衍生物的亲脂性性质，因此降低其在水中的溶解度。这使得有可能得到本发明的支架，其具有在狭窄位置缓慢降解的涂层，从而与立即溶解并被从病变位置运走的透明质酸涂层相比，作用时间更长。
对于本发明的目的，透明质酸酯衍生物的酯化度为透明质酸的50％到100％的羧基被上述醇的醇基酯化。优选地，酯化度为透明质酸的70％到100％的羧基被上述醇的醇基酯化。
在本发明的优选实施方案中，支架用苯甲醇酯化透明质酸得到的产物涂布。
更有利地，使用由苯甲醇将透明质酸完全酯化得到的衍生物或由苯甲醇酯化透明质酸的75％残留羧基得到的衍生物。
这些产物已经证明对于生产本发明支架用涂层特别有用。事实上，透明质酸酯化的方法有利地使得有可能得到能够控制透明质酸本身在水中的溶解度和释放的聚合物衍生物。事实上，水分子对酯的攻击过程包括酯衍生物的脱脂作用，随后是透明质酸和醇的释放。
在其中这种醇为苯甲醇的具体实施方案中，透明质酸酯也是生物相容的和没有附属作用。
因此，酯衍生物的降解引起透明质酸的逐步释放，由此其溶解并用于积极地在病变位置起作用。
具体地，上述优选的用苯甲醇将透明质酸完全酯化得到的或用苯甲醇酯化透明质酸的75％羧基得到的衍生物在水中分别在多于一个月的时间内和两周以内的时间内降解。
令人惊讶地还发现，这些透明质酸酯衍生物在金属支架上形成良好地黏附于支架网状表面的均一涂层。
因此，本发明得到的支架包括能够有效地将其本身与药理活性成分结合的涂层。
根据本发明，选择用于与聚合物涂层结合的活性成分为具有抗炎、抗增生、和抗迁移作用的活性成分、和免疫抑制剂。
更优选地，与本发明支架的聚合物涂层结合的活性成分为甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)，即4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐，Novartiscompany上市，商品名为Glivec。
用于结合到透明质酸酯涂层中的活性成分的量根据活性成分种类的改变而改变。
当活性成分为具有抗炎作用的活性成分时，优选其以0.001mg到10mg的量与聚合物涂层结合。
当活性成分为具有抗增生作用的活性成分时，优选其以0.0001mg到10mg的量与聚合物涂层结合。
当活性成分为具有抗迁移作用的活性成分时，优选其以0.0001mg到10mg的量与聚合物涂层结合。
当活性成分为免疫抑制剂时，优选其以0.0001mg到10mg的量与聚合物涂层结合。
更具体地，当活性成分为甲磺酸伊马替尼(Glivec)时，其以0.001mg到10mg的量与聚合物涂层结合。
与透明质酸不同，用于涂布本发明支架的透明质酸酯在有机溶剂中也有一定的溶解度，特别是在偶极非质子有机溶剂中。
具体地，透明质酸的酯在二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮和二甲基甲酰胺中具有良好的溶解度。这些溶剂也可溶解不同的活性成分。
某些酯也可溶解于低沸点溶剂1，1，1，3，3，3-六氟-2-丙醇(六氟异丙醇)，中，该溶剂又是甲磺酸伊马替尼的溶剂。六氟异丙醇的沸点在环境压力下为59℃，这是使得有可能在与活性成分的稳定性不矛盾的温度下除去溶剂的特点。
这些溶解度性质为本发明的另一个优点。事实上，这使得有可能从单一的共同溶液直接将透明质酸衍生物和活性成分通过浸涂技术以期望的浓度施用于支架表面上。溶剂通过蒸发除去，如有必要在真空下进行，使得有可能得到厚度可以通过主要的工艺参数控制、附着于支架表面的薄膜。
支架上的透明质酸酯涂层的厚度为0.5微米到40微米，优选1到30微米，更优选为5到10微米。
与包括在水相环境中立即溶解随后完全和立即释放活性成分和透明质酸的透明质酸膜的类似支架不同，本发明的支架包括在水相环境中经历降解过程并由此通过酯的性质控制活性成分和透明质酸分子的释放的膜。事实上，通过膜的厚度和聚合物的固有性质，特别是通过酯化度控制降解和随后释放透明质酸和活性成分的时间。
因此在狭窄病灶附近能够长时间释放活性成分和透明质酸，其等于透明质酸酯衍生物基聚合物涂层的降解时间。具体地，在上述优选实施方案中，通过用苯甲醇分别酯化100％和75％的羧基得到的透明质酸酯衍生物中，活性成分的释放时间分别是超过1个月或最多2周。
因此，显而易见，根据本发明有可能有利地得到包括聚合物涂层的支架，该聚合物涂层能够保持透明质酸本身的所有固有的生物和治疗性质，其在水相环境中具有低的溶解度，使得其不会被立即从支架表面除去，并且其厚度适合于结合活性成分，使活性成分以控制方式和在临床上有用的时间内递送和释放。
因此，本发明的支架具有另外的优点，在于其可以在延长的和可控制的时间内将活性成分以细胞水平在病变位置的作用与透明质酸本身减少炎症过程和控制细胞移动的作用结合，使得能够有效地预防再狭窄现象。
在图1中图解说明的本发明的特别优选实施方案中，将结合有活性成分的透明质酸酯的层施用于已经首先涂有共价结合于支架表面的透明质酸薄层的支架。通过共价键将透明质酸层固定在支架表面上的过程可以根据Fidia Advanced Biopolymers的美国专利6,129,956中和如以下实施例9中所述的方法进行。
共价结合于支架表面的透明质酸层的厚度为1nm到20nm，优选为10nm。
这样，当透明质酸酯衍生物涂层在狭窄病灶附近降解、释放透明质酸和活性成分时，血管组织仍然有利地接触比支架本身的钢表面更具有生物相容性和生物可耐受性的透明质酸层。
本发明的另一个实施方案提供具有除上述透明质酸酯衍生物涂层之外的疏水性合成聚合物的第二涂层的支架。
优选所述疏水性合成聚合物涂层直接施用于支架表面，然后又通过本发明先前描述的透明质酸酯衍生物涂层涂布。
使用与水的接触角的技术测量组成这种第二涂层的聚合物的疏水性。具体地，适合用于形成支架上的第二聚合物涂层的疏水性合成聚合物与水的接触角大于60℃。
优选这些疏水性聚合物选自聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、聚甲基丙烯酸异丁酯、烯烃聚合物(olefinic polymer)、聚丁二烯、聚异戊二烯、聚(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)或聚醋酸乙烯酯。
在更优的选实施方案中，疏水性合成聚合物为聚苯乙烯。
此外，第二合成聚合物涂层又能够有效地与药理活性成分结合。因此，其起到惰性涂层的作用、作为透明质酸衍生物第一活性涂层的底层、能够起到作为活性成分的第二储存器的作用、和由此还控制与其结合的所述活性成分在病变位置的释放速率。
优选与所述疏水性聚合物涂层结合的活性成分的种类、与所述疏水性聚合物涂层结合的活性成分的量与先前描述的用于从透明质酸酯衍生物获得的涂层的活性成分的种类和量相同。
因此，可将相同或不同的活性成分(取决于所要达到的治疗目的)在同一支架上与两个聚合物涂层结合，所述涂层为疏水性涂层和透明质酸酯衍生物基涂层。同时在支架上与两个涂层结合的活性成分的相应量可根据治疗需要相同或不同。
疏水性聚合物涂层和与其结合的活性成分可通过以类似于先前描述用于施用透明质酸衍生物涂层的方式施用。将疏水性聚合物和活性成分溶解或悬浮在相同的有机溶剂中，形成单一的共同溶液或悬浮液。适合于这种目的溶剂应该为低沸点的，其在环境压力下的沸点应低于100℃，优选低于80℃。优选所述有机溶剂选自二氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、脂肪烃或环己烷，优选二氯甲烷。
通过蒸发所述溶剂，根据工艺参数，从而得到不同厚度的、附着于支架表面的涂层。随后以这种方式对预处理过的支架施用透明质酸酯衍生物基涂层。
支架上的疏水性合成聚合物涂层的厚度为0.5微米到40微米，优选1到30微米，更优选为5到10微米。
因此，显而易见，支架的这一实施方案另外的优点在于能够通过支架上的双涂层调节活性成分的释放速率，进一步延长所述活性成分随时间的释放，并由此延长其在狭窄病灶的药理作用。事实上，对于这一实施方案，在动脉粥样硬化病变位置有由于由透明质酸酯衍生物涂层降解过程释放的活性成分和透明质酸二者的作用相结合的第一双重作用，随后由第二惰性聚合物涂层释放的活性成分的作用。
这样，在病变位置的治疗作用可延长到等于活性成分从疏水性聚合物涂层释放的时间。
在其中疏水性聚合物涂层基于聚苯乙烯的具体实施方案中，活性成分的释放时间进一步延长到一个月的时间。
类似于上面已经描述的和如图2中图解说明的，这种用于支架的双层涂层的特别优选实施方案提供了疏水性聚合物底层用以共价方式化学结合的透明质酸薄层涂布。然后将透明质酸酯衍生物的涂层施用于这一共价结合的透明质酸层。这样当上层的透明质酸酯层降解时，血管组织不暴露于合成聚合物，而是暴露于透明质酸层。
在疏水性聚合物涂层和透明质酸层之间形成共价键的过程根据例如上述的Fidia Advanced Biopolymers的美国专利6,129,956中所述的方法进行。
共价结合于疏水性聚合物涂层表面的透明质酸层的厚度为1nm到20nm，优选10nm。
通过以下本发明的说明性和非限制性实施例进一步描述本发明，并由此使本发明的特点和优点更加显而易见。
实施例1制备具有不同厚度的透明质酸酯衍生物的膜，所述膜通过用苯甲醇将羧基完全酯化得到。
使用由公司Fidia Advanced Biopolymers生产的具体用HYAFF 11构成的Laserskin膜形成得自用苯甲醇将羧基完全酯化得到的透明质酸酯衍生物(商品名HYAFF 11的产品)的膜。从膜切取总重量为70mg的一些片段。将其溶解于3ml二甲亚砜(DMSO)中。溶解在环境温度下进行1小时。当形成均一溶液时，分别取得三个试样量的溶液，0.5ml、1ml和1.5ml。向每个试样量溶液中加入DMSO，使得每种溶液为3毫升，分别得到三种溶液A、B和C。将如此得到的三种溶液倾入到聚苯乙烯陪替氏培养皿中并置于60℃的炉内直到溶剂完全蒸发。回收在陪替氏培养皿的底上淀积的膜并通过扫描型电子显微镜观察评价其厚度。观察得到的以下结果如表1中所示，其表示为四次测量值的平均值。
表1
实施例2将实施例1的膜施用于不锈钢支架。
使用实施例1中获得的溶液A。将尺寸为13mm的不锈钢支架浸入烧杯中的溶液中并从中取出，转移到真空下的60℃炉中。在干燥之后，将支架浸入能够使透明质酸着色的着色剂甲苯胺蓝的溶液中，用于评价薄膜形成。然后观察颜色的存在和均一性。由此该试验证实支架表面上HYAFF 11膜的存在及其均一分布。
实施例3活性成分在HYAFF 11中的结合及其释放如实施例1中所述制备HYAFF 11的DMSO溶液。将得自药物Glivec溶解在水中、过滤除去不溶性赋形剂并蒸发水得到的10mg活性成分甲磺酸伊马替尼加入到溶液中。在溶解之后，将溶液置于炉中并蒸发溶剂。
使用Balb/3T3细胞进行细胞毒性试验，以评价活性成分的存在。将0.5cm2的膜部分置于包含这种细胞铺满层的陪替氏培养皿中。对于实施例1中的所述透明质酸酯衍生物A、B和C的不同样品的每种浓度，制备了包括所述透明质酸酯衍生物A、B和C而没有活性成分的对照。在接触一天之后，评价对细胞的作用，用0到5的数值表示细胞毒性水平数值0表示没有任何细胞毒作用，而数值5表示所有细胞死亡。以下表2表示如此得到的结果。
表2
从得到的结果显而易见，先前确立的纯的活性成分细胞毒作用证实从支架上的HYAFF 11膜释放了活性成分。
实施例4监测与HYAFF 11膜结合的活性成分的浓度。
在上述实施例3中得到A型的HYAFF 11膜，但在其中结合不同量的活性成分，10mg、5mg、1mg和0.1mg。如实施例3中报告的，进行细胞培养试验，得到表3中所示的结果。
表3
这一实验证明有可能控制膜中活性成分的浓度，从而控制对细胞的作用时间，从毒性作用到亚毒性作用。
实施例5活性成分在HYAFF 11膜中的结合及其随时间的释放制备实施例3中所述的A型HYAFF 11膜和没有活性成分的对照膜。然后将膜再分成0.5cm2的部分。将每种膜的四个部分浸入生理溶液中，浸入时间分别为为一天、两天、一周和两周。在浸入期间结束时，将样品从生理溶液取出并在与实施例3中报告的相同条件下进行细胞毒性试验。得到的结果如表4中所示。
表4
然而，没有活性成分的对照没有表现出任何细胞毒性的迹象。
这些数据证明，即使在将HYAFF 11膜保留在水相环境中两周之后，结合在其中的活性成分也是缓慢释放，证实了透明质酸酯衍生物层的活性成分储存功能。
实施例6具有HYAFF 11涂层的支架的生产和与涂层结合的活性成分的释放如实施例2所述制备多个支架，特别向实施例1制备的HYAFF 11的溶液A加入10mg的活性成分甲磺酸伊马替尼。然后将支架分别浸入生理溶液中0、1、和2天。使用如此制备的支架重复实施例5中所述的实验。得到如下表5中所示的结果。
表5
这一实验再次证实活性成分随时间从涂有HYAFF 11膜的支架释放。
实施例7使用低沸点溶剂生产具有HYAFF 11涂层的支架和与该涂层结合的活性成分的释放。
大体上如实施例2中所述制备一些具有HYAFF 11的支架，但使用六氟异丙醇作为溶剂。
为此目的制备HYAFF 11在六氟异丙醇中的溶液，其中加入活性成分甲磺酸伊马替尼。特别是制备包含5cc六氟异丙醇、40mgHYAFF 11和20mg甲磺酸伊马替尼的溶液。在真空炉中在25℃下从已经完成浸入溶液的支架除去溶剂。
然后将支架分别浸入生理溶液中0、1和2天和1周。使用如此制备的支架重复实施例5中所述的实验。得到表6中所述的以下结果。
表6
这一实验再次证实活性成分随时间从涂有HYAFF 11膜的支架释放。
实施例8具有HYAFF 1涂层和疏水性合成聚合物第二涂层的支架的生产和与涂层结合的活性成分的释放。
大体上如实施例7中所述制备多个支架，但是对预处理过的支架的处理如下制备甲磺酸伊马替尼在2％聚苯乙烯在二氯甲烷中的溶液中的悬浮液。通过将支架浸入溶液进行涂布随后在30℃下在真空炉中除去溶剂。重复该过程3次。
为了进行比较，其中使用HYAFF 11和甲磺酸伊马替尼的溶液进行同样的步骤而制备多个支架。
然后将支架分别浸入生理溶液中0、1和2天和1周和3周。使用如此制备的支架重复实施例5中所述的实验。得到表7中所述的以下结果。
表7
这一实验再次证实了活性成分从覆层支架随时间释放，并且证明包含活性成分的疏水性聚合物的存在可以帮助和延长活性成分在病变位置的释放。
实施例9在预涂布有共价结合的透明质酸层的支架上的HYAFF 11涂层的生产和与该涂层结合的活性成分的释放根据(Fidia Advanced Biopolymers的)美国专利6,129,956中所述的方法，用共价结合于支架表面的透明质酸层涂布多个钢支架。更具体地，在Europlasma反应器中用空气等离子体对支架进行1分钟的等离子体处理。然后在环境温度下将支架浸入0.5％的聚乙烯亚胺(PEI，Sigma)水溶液中2小时。然后重复洗涤支架并浸入包含1％的N-羟基琥珀酰亚胺(SIGMA)和1％的二甲氨基丙基乙基碳二亚胺(EDC，Sigma)的0.5％透明质酸(SIGMA)溶液中。结合反应在环境温度下继续过夜。第二天仔细洗涤支架。
通过将如此预处理过的支架浸入大体上如实施例7中所述的HYAFF 11的六氟异丙醇溶液中对其进行涂布。具体地，使用两种溶液，第一种包括5ml的六氟异丙醇、40mg的HYAFF和20mg的甲磺酸伊马替尼，第二种为相同的溶液但包含两倍浓度即40mg的甲磺酸伊马替尼。
将如此得到的每个支架置于包含1mL生理溶液的37℃的试管中，以进行甲磺酸伊马替尼从HYAFF 11涂层的释放的研究。取出溶液并在特定时间用Unicam UV-Visible分光光度计检查。通过在251nm波长处测量溶液的吸光度计算支架释放的甲磺酸伊马替尼的浓度。吸光度和甲磺酸伊马替尼浓度之间的关系通过绘制校正曲线建立，即测量已知浓度的甲磺酸伊马替尼在生理盐水溶液的吸光度。
更具这一试验，对分别由包含20mg甲磺酸伊马替尼的溶液或包含40mg甲磺酸伊马替尼的溶液得到的支架进行实验，提供图3所示的两个释放曲线。
权利要求
1.包括透明质酸聚合物基涂层的支架，其特征在于所述透明质酸聚合物为透明质酸酯衍生物。
2.权利要求1的支架，其中所述透明质酸酯衍生物中透明质酸的羧基的全部或一些被选自脂肪醇、芳基脂肪醇、脂环醇和杂环醇的醇酯化。
3.权利要求2的支架，其中当所述醇为脂肪醇时，它们选自具有2到12个碳原子的直链或支链的、饱和或不饱和醇，选择性地被一个或多个基团取代，所述基团选自羟基、胺、醛、硫醇或羧基或衍生自诸如例如酯、醚、缩醛、缩酮、硫醚、硫酯、脲的基团；具体地，当所述醇为饱和脂肪醇时，其选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、或戊醇；当所述醇为二元脂肪醇时，其选自乙二醇、丙二醇、丁二醇，和当所述醇为三元脂肪醇时，优选其为甘油；当所述醇为氨基醇时，其选自氨基乙醇、氨基丙醇、氨基丁醇、及其二亚甲基或二亚乙基胺衍生物，哌啶乙醇、吡咯烷乙醇或哌嗪乙醇；当所述醇为羧基醇时，其选自乳酸、酒石酸、马来酸或羟基乙酸；当所述醇为不饱和脂肪醇时，优选其为烯丙醇，当所述醇为芳基脂肪醇时，它们选自具有选择性地被1到3个甲基或羟基或卤素原子取代的苯且其中脂肪链具有1到4个碳原子并选择性地被一个或多个选自伯胺基、其单甲基化基团或二甲基化基团或吡咯烷或哌啶基团取代的那些，具体地它们为苯甲醇或苯乙醇，卤素原子具体为氟、氯、溴和碘，当所述醇为脂环醇时，它们选自单环醇或多环醇，包含3到34个碳原子并选择性地包含1到3个选自O、S、N的杂原子并选择性地被一个或多个基团取代取代，所述基团选自羟基、胺、醛、硫醇或羧基或衍生自诸如例如酯、醚、缩醛、缩酮、硫醚、硫酯、脲的基团；具体地，当所述脂环醇为单环醇时，其选自包含5到7个碳原子、选择性地被一个或多个选自羟基、甲基、乙基、丙基、异丙基的基团取代的那些，具体地，它们为环己醇、环己二醇、肌醇或薄荷醇。
4.前述权利要求中任一项的支架，其中所述透明质酸酯衍生物的酯化度为透明质酸中50％到100％的羧基被酯化。
5.权利要求4的支架，其中酯化度为透明质酸中70％到100％的羧基被酯化。
6.权利要求1到5中任一项的支架，其中醇为苯甲醇，酯化度为透明质酸中100％的羧基被酯化。
7.权利要求1到5中任一项的支架，其中醇为苯甲醇，酯化度为透明质酸中75％的羧基被酯化。
8.前述权利要求中任一项的支架，其中将药理活性成分与所述透明质酸聚合物涂层结合。
9.权利要求8的支架，其中与所述透明质酸聚合物涂层结合的所述活性成分选自具有抗炎、抗增生、或抗迁移作用的活性成分和/或免疫抑制剂。
10.权利要求8的支架，其中所述活性成分为4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐。
11.权利要求9的支架，其中当活性成分为具有抗炎作用的活性成分时，其以0.001mg到10mg的量与透明质酸聚合物涂层结合。
12.权利要求9的支架，其中当活性成分为具有抗增生作用的活性成分时，其以0.0001mg到10mg的量与透明质酸聚合物涂层结合。
13.权利要求9的支架，其中当活性成分为具有抗迁移作用的活性成分时，其以0.0001mg到10mg的量与透明质酸聚合物涂层结合。
14.权利要求9的支架，其中当活性成分为免疫抑制剂时，其以0.001mg到10mg的量与透明质酸聚合物涂层结合。
15.权利要求10的支架，其中当活性成分为4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐时，其以0.001mg到10mg的量与透明质酸聚合物涂层结合。
16.前述权利要求中任一项的支架，其中支架上透明质酸聚合物涂层的厚度为0.5微米到40微米，优选为1到30微米，更优选为5到10微米。
17.前述权利要求中任一项的支架，其中活性成分和透明质酸在延长的时间内从透明质酸聚合物涂层释放。
18.权利要求6和17组合的支架，其中活性成分和透明质酸在超过一个月的时间内从透明质酸聚合物涂层释放。
19.权利要求7和17组合的支架，其中活性成分和透明质酸在两周的时间内从透明质酸聚合物涂层释放。
20.支架，其包括共价结合于支架本身表面的透明质酸层和前述权利要求中任一项的透明质酸聚合物涂层。
21.前述权利要求中任一项的支架，其进一步包括第二涂层，第二涂层为结合有药理活性成分的疏水性聚合物涂层。
22.权利要求21的支架，其中所述疏水性聚合物涂层直接施用于支架表面、位于所述透明质酸酯聚合物基涂层之下。
23.权利要求21或22的支架，其中所述疏水性聚合物与水的接触角大于60°。
24.权利要求23的支架，其中所述疏水性聚合物选自聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、聚甲基丙烯酸异丁酯、烯烃聚合物、聚丁二烯、聚异戊二烯、聚(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)或聚醋酸乙烯酯。
25.权利要求23的支架，其中所述疏水性聚合物为聚苯乙烯。
26.权利要求21到25中任一项的支架，其中与所述疏水性聚合物涂层结合的所述活性成分选自权利要求9和10中列举的活性成分。
27.权利要求21到26中任一项的支架，其中与所述疏水性聚合物涂层结合的所述活性成分的量等于权利要求11到15中所述的量。
28.权利要求21到27中任一项的支架，其中支架上所述疏水性聚合物涂层的厚度为0.5微米到40微米，优选为1到30微米，更优选为5到10微米。
29.权利要求21到28中任一项的支架，其中所述活性成分在一个月的时间内从所述疏水性聚合物涂层释放。
30.权利要求21到29中任一项的支架，其中分别与所述两个聚合物涂层结合的活性成分和活性成分的量相同或不同。
31.权利要求21到30中任一项的支架，其进一步包括与所述疏水性聚合物涂层共价结合的透明质酸层。
32.制备权利要求1到19中任一项的支架的方法，其包括步骤a)将透明质酸酯和活性成分溶解在相同的有机溶剂中得到溶液，b)将支架浸入所述溶液中，然后取出支架，c)蒸发除去溶剂。
33.权利要求32的方法，其中所述有机溶剂为偶极非质子溶剂。
34.权利要求33的方法，其中所述有机溶剂选自二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮、二甲基甲酰胺或六氟异丙醇。
35.权利要求32到34中任一项的方法，用于得到权利要求20的支架，该方法包括对支架表面施用共价结合的透明质酸层而对支架表面进行预处理的步骤。
36.权利要求32到34中任一项的方法，用于得到权利要求21到30中任一项的支架，其中在所述步骤a)、b)、c)之前按顺序进行以下步骤a1)将疏水性聚合物和活性成分溶解在相同的有机溶剂中得到溶液或悬浮液，b1)将支架浸入所述溶液或悬浮液中，然后取出支架，c1)蒸发除去溶剂。
37.权利要求36的方法，其中所述有机溶剂为低沸点溶剂，其在环境压力下的沸点低于100℃，优选低于80℃。
38.权利要求37的方法，其中所述有机溶剂选自二氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、脂肪族烃、或环己烷。
39.权利要求36到38中任一项的方法，用于得到权利要求31的支架，其包括另外的步骤d1)，在该步骤中将共价结合的透明质酸层施用于疏水性聚合物涂层。
40.透明质酸酯在制备血管成形术中使用的支架用涂层中的应用。
41.与药理活性成分结合的权利要求40的应用。
全文摘要
本发明涉及血管支架。更具体地，本发明涉及包括透明质酸聚合物基涂层的支架，其中所述透明质酸聚合物为透明质酸酯衍生物。
文档编号A61F2/82GK1764482SQ03826263
公开日2006年4月26日 申请日期2003年5月22日 优先权日2003年4月4日
发明者詹鲁卡·加扎 申请人:拜克技术有限公司