专利名称：一种治疗中老年记忆力减退的药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗中老年记忆力减退的药物及其制备方法，属于中成药技术领域。
背景技术：
老年性健忘，顾名思义，此病与年龄关系密切，只有老年以后才发生，与衰老有关。由于老年人脏腑功能衰退，尤以心肾亏虚，精血不足，脑髓空虚，则脑转耳鸣，懈怠安卧，腰膝酸软，健忘，早老早衰等脑肾具虚的症状为多见。诚如《类证治裁》所说“人之神宅于心，心之精依于肾，而脑为元神之府、精髓之海，实记性所凭也”。
国内外防治智能障碍或减退的药物很多，“本”“标”兼治者少，祖国医学对于诊治健忘和益智中药的研究积累有丰富的实践经验。
发明内容
本发明的目的是提供一种本、标兼治的治疗中老年记忆力减退的药物。
本发明的另一目的是提供治疗中老年记忆力减退的药物的制备方法。
本发明由西洋参、猪脑粉、何首乌、益智仁、五味子、天麻、石菖蒲、紫苏子、丹参、远志、葛根原料药组成。
方中西洋参补气益阴，扶虚益损，《医学衷中参西录》所“西洋参能补气分，并能补益血分”，本品性凉而补，无温燥之偏颇。猪脑粉补肾益精，健脑益智，属动物药，为血肉有情之品，具以脏补脏之义。《名医别录》所“主风眩脑鸣”。得配西洋参双补气血，生精化气，气生神，神御精，共为主药，充髓以养脑。
臣何首乌补血生精，黑发悦颜，《开宝本草》所“益气血，黑髭鬓，悦颜色，久服长筋骨，益精髓，延年不老”。益智仁补肾温阳，固精缩尿。《本草经疏》说“遗精虚漏，及小便余沥”。五味子补肾纳气，敛汗生津，《神农本草经》说“主益气，咳逆上气，劳伤羸瘦，补不足，强阴，益男子精”。天麻平肝息风，育阴潜阳，《卫生宝鉴》说“眼黑头眩，风虚内作，非天麻不能治”。四药伍用，可增强补益精血，充盈脑髓之用。
佐用远志宁心安神，祛痰开窍，《神农本草经》说“主咳逆伤中，补不足，除邪气，利九窍，益智慧，耳目聪明，不忘强志倍力”。石菖蒲开窍避秽，安神醒脑，《神农本草经》说“开心孔，补五脏，通九窍，明耳目”。二药伍用，善避秽涤痰而卫心神，宣心思之结而通神明。紫苏子理气宽隔，开郁祛痰，《本草汇言》说“最能清理上下诸气，定喘祛痰有功，并能通二便，除风寒湿痹”。丹参活血化瘀，宁心除烦，《滇南本草》说“补心定志，安神宁心。治健忘，怔忡，惊悸不寐”。四药合用，能舒心和畅气血，以上奉濡脑，脑得血养，脑神自健。
使以葛根鼓舞清阳上达，偕群药上通于脑而至病所。
诸药合用，共奏调补心肾，健脑益智，活血通络之功效。
本发明的重量份配比是西洋参 1-3、猪脑粉 45-35、何首乌 6-14、益智仁 4-9、五味子 4-9、 天麻4-9、石菖蒲 6-14、 紫苏子 6-14、 丹参6-14、远志4-9、葛根4-9。
本发明的优选重量份配比是西洋参 1-2、猪脑粉 42-38、何首乌 8-12、益智仁 5-8、五味子 5-8、 天麻5-8、石菖蒲 8-12、 紫苏子 8-12、 丹参8-12、远志5-8、葛根5-8。
本发明药物活性组分的制备方法如下a)按配比量称取各原料药，备用。
b)取猪脑去杂质洗净绞碎，经丙酮脱脂、脱胆固醇三次，依次加丙酮7-4倍、6-3倍、5-2倍量，每次绊拌20分钟以上，常温绊拌擅搅，滤过，滤渣80℃下干燥，粉碎成细粉，取此粉加蒸馏水调成浆状，调PH值至6.5-7.0，水浴恒温40-50℃，在经蛋白酶水解后，真空干燥，粉碎成细粉，过100目筛，备用。
c)取西洋参、石菖蒲、紫苏子等三味，粉碎成细粉；备用。
d)其余何首乌等加水12-9、9-6、7-4倍量，煎煮三次，依次为3.5-2.5、1.5-2.5、0.5-1.5小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.25-1.35(80℃)的稠膏，加西洋参、石菖蒲、紫苏子的细粉混匀，真空干燥，粉碎成细粉，再加猪脑粉混匀，即得本发明药物活性组分。
本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如丸剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液等。
本发明的有益效果是以下通过试验例来进一步阐述发明所述药物的有益效果，这些试验例包括了本发明药物(以下称参苏补肾胶囊)的药效学试验及急性毒性试验和长期毒性试验。
实验材料药物本发明药物由靖宇西洋参药业集团提供，试制批号940310。甲状腺片，批号940301，天津市第二生化制药厂产品；樟柳碱为北京药物所提供；人参根总皂苷(SRG)，维参锌，长春市人民制药厂，批号940802。
动物昆明小鼠，体重20-22g，动物合格证号940000012。健康雄性Wistar大鼠，体重140-170g，动物合格证号940000017。均购自吉林省中医中药研究院动物室。昆明种老龄小鼠，体重45-55g，吉林省药检所提供，动物合格证号9400013。从液氮中复苏冻存的2BS(37代龄)细胞。
仪器与器材752紫外-可见分光光度计(上海分析仪器厂)；20PR-520型高速冷冻离心机(日本产)；RF-540荧光分光光度计；自动酶标光度计，四川仪表九厂生产；GXM-230二氧化碳培养箱(SANYO，MCO-175T，Japan)；手术器械；精密微量电子天平；高压消毒锅。
实验方法及结果实验例1对樟柳碱引起小鼠记忆获得障碍的影响小鼠，按表1分组并灌胃给药，连续给药14天。末次给药后50分钟，除第一组外，其余各组均腹腔注射樟柳碱10mg/Kg。10分钟后将小鼠放入跳台中，进行学习训练，以电击后迅速回至橡皮垫上为正确反应，从橡皮垫上跳下为错误反应，纪录24小时后测验成绩。结果见表1。
表1对樟柳碱引起小鼠记忆获得障碍的影响(x±s)组别 剂量例数 错误反应次数对 照 10 0.10±0.32**樟柳碱(A)0.01g/kg10 1.70±0.67参苏补肾胶囊 2.0+Ag/kg 10 0.50±0.71**参苏补肾胶囊 1.0+Ag/kg 10 0.70±0.82**注与对照组比较**P＜0.01实验结果表明，该药可以显著减少樟柳碱所致小鼠错误反应次数。
实验例2对肾虚小鼠学习记忆的影响小鼠，按表2分组并灌胃给药，同时灌胃200mg/Kg甲状腺素，连续给药15天，末次给药后1小时，用跳台法观察肾虚小鼠的错误反应次数。结果见表2。
表2对肾虚小鼠学习记忆的影响(n＝10)(x±s)
错误反应次数组别 剂量学习 记忆对照1.90±0.99** 0.20±0.42**甲状腺素(B) 0.2g/kg3.80±1.41.20±0.79参苏补肾胶囊 2.0+Bg/kg 2.40±1.89 0.20±0.63**参苏补肾胶囊 1.0+Bg/kg 2.70±1.56** 0.60±1.35注与对照组比较**P＜0.01实验结果表明，该药能够显著减少肾虚小鼠错误反应次数，说明本品有显著促进肾虚小鼠学习记忆的作用。
实验例3对小鼠在食物迷宫中学习记忆的影响将小鼠放入食物迷宫中，进行筛选，剔除嗜卧，不愿意动小鼠和30分钟以上找不到食物的小鼠。将合格小鼠随机分4组，按表3灌胃给药，每天一次，连续给药10天，分别在前4日和第10日观察小鼠在食物迷宫中行走方向错误次数。结果见表3。
表3对小鼠在食物迷宫中学习记忆的影响(x±s，n＝10)组别 一天二天 三天 四天十天方向错误方向错误 方向错误 方向错误方向错误空白对照 34.5±8.1 25.0±9.218.5±11.3 13.0±6.9 16.7±6.6参苏补肾胶囊 18.1±3.5**9.6±4.6*5.2±3.2**2.0g/Kg12.0±3.9**4.5±2.5**参苏补肾胶囊 15.1±6.7**10.9±10.3 7.8±2.7**1.0g/Kg14.3±5.1**5.9±3.9*注与对照组比较*P＜0.05**P＜0.01实验结果表明该药能使小鼠找到食物途中，方向错误次数显著减少。
实验例4对大鼠方向辨别能力的影响预选取大鼠放入三等分Y型MG-2迷路箱中，脉冲周期2S，脉冲电压40V，每臂顶端装有15W信号灯，灯光信号示安全区，安全区以顺时针方向方式改变。大鼠受电击后从起步区直接逃至安全区为正确反应，否则为错误反应。选择25次内连续4次正确大鼠为合格鼠。
按大鼠学习成绩分4组，按表4灌胃给药，每天一次，连续给药14天，末次给药后1小时开始测验，记录连续5次正确前的错误反应次数。结果见表4。
表4对大鼠方向辨别能力的影响(n＝10)(x±s)错误反应次数组别 剂量给药前成绩测试成绩对 照 5.4±4.4 3.2±1.7参苏补肾胶囊 2.0+Ag/kg 5.6±4.9 1.6±1.2*参苏补肾胶囊 1.0+Ag/kg 5.3±3.1 1.5±1.0*注与对照组比较*P＜0.05实验结果表明该药可显著减少大鼠的错误反应次数。
实验例5对大鼠脑组织核酸、蛋白质和单胺类神经介质含量的影响取上项大鼠脑组织，用匡培根法测定5-羟色胺(5-HT)，5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)，取甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)含量。用Lowry法测定蛋白质含量，用Schjeide法测定RNA含量，用Burton法测定DNA含量。结果见表5和表6。
表5对大鼠脑核酸和蛋白质的影响(mg/g组织)(n＝10)组别剂量 RNA DNA Pro对照 2.78±0.10 1.53±0.21 138.27±17.44参苏补肾胶囊2.0g/Kg 3.02±0.23** 1.46±0.20 155.05±15.67*参苏补肾胶囊1.0g/Kg 2.78±0.18 1.51±0.18 134.62±17.06注与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01表6对大鼠脑神经介质的影响(g/g组织)(n＝10)组别 5-HT 5-HIAA DANE对照 4.25±0.39 0.79±0.11 2.87±0.261.85±0.15参苏补肾胶囊 4.53±0.62 0.68±0.02*3.30±0.29**2.26±0.312.0g/Kg参苏补肾胶囊 4.55±0.77 0.72±0.07 2.79±0.181.96±0.101.0g/Kg注与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01实验结果表明该药可增加大鼠脑内RNA和蛋白质、NE和DA的含量，对5-HT含量无明显影响；该药高剂量可以减少5-HIAA的含量。
实验例6对老龄小鼠SOD、MAO-B和LPO的影响取14月龄小鼠40只，随机等分4组，按表7灌胃给药，每天一次，连续给药三周后动物采血，处死取脑，分别做SOD、MAO-B和LPO的测定。结果见表7。
表7对小鼠SOD、MAO-B、和LPO的影响 (n＝10)组别 SOD(/gHb)MAO-B(OD) LPO(OD)对照 1106.1±264.70.207±0.0340.225±0.035参苏补肾胶囊 1508.1±197.8**0.144±0.030**0.109±0.017**2.0g/Kg参苏补肾胶囊 1457.3±187.0**0.162±0.018**0.146±0.020**1.0g/Kg注与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01
实验结果表明该药可明显增强SOD活性，降低MAO-B和LPO的活性，差异极显著。
实验例7对人胚肺成纤维细胞传代寿命的影响1.MTT法测定取40代龄2BS细胞数瓶，用0.25％胰蛋白酶消化，并制备成细胞悬液。细胞接种在96孔培养板中，每孔接种100l细胞悬液(1.0×104细胞)，同时加入不同浓度的受试样品50l，含10％NCS，最高剂量为6.7mg/ml，以下剂量按倍比稀释，共设5个剂量组，每组四个平行样，对照组加不含药品的培养液50l，置5％CO2饱和的二氧化碳培养箱中，37℃孵育72小时。作用结束前4小时加噻唑蓝(溶解在PBS缓冲液中1mg/ml)20l，终止反应。弃培养液，加100％二甲基亚砜200l，经微量混合振荡器振荡10分钟，用酶标光度计测定各孔光密度值(OD值)，测定波长550nm，数据经“t”检验，结果见表8。
表8对人胚肺成纤维细胞传代寿命的影响(x±s)组别 剂量(mg/ml) OD值对照 0.00 0.325±0.033参苏补肾胶囊 6.7×1000.274±0.013参苏补肾胶囊 6.7×10-10.271±0.028参苏补肾胶囊 6.7×10-20.355±0.011参苏补肾胶囊 6.7×10-30.420±0.043**参苏补肾胶囊 6.7×10-40.395±0.022*注与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01实验结果表明该药对2BS细胞增殖的影响，当剂量在6.7×10-3mg/ml时，对衰老的2BS细胞增殖有明显的促进作用，从中选出做寿命试验的高剂量25g/ml和低剂量5g/ml。
2.寿命实验取汇合成单层的40代龄的人胚肺成纤维细胞(2BS)数瓶，每组两瓶。按表9进行分组，实验组与对照组平行传代培养，并记录各组每次传代的间隔天数，如果一周后细胞没有汇合成单层，可更换新鲜培养液，并根据传代次数和生长天数绘制坐标图。结果见表9。
表9对40代龄2BS细胞传代寿命的影响组别 剂量 传代次数 繁殖天数 群体死亡g/ml 天数对照 0.00 13 65 12SRG 25.0 23 87 21维参锌50.0 16 68 16参苏补肾胶囊 25.0 21 82 19参苏补肾胶囊 5.0 19 75 17下图为
图1参苏补肾胶囊对2BS细胞传代寿命的影响-○-对照组；-●-维参锌；-△-SRG； -×-参苏补肾胶囊高剂量；-□-参苏补肾胶囊低剂量。
实验结果表明参苏补肾胶囊、SRG、维参锌无论从传代次数、繁殖天数、群体死亡天数均多于对照组。从图1曲线特征可以看出，45代龄前各加药组与对照组曲线比较，各代间同步增殖；45代龄后，对照组比加药组生长缓慢，参苏补肾胶囊高、低剂量对对2BS细胞作用均强于维参锌。
实验例8急性毒性试验将参苏补肾胶囊配制成30％的混悬液供试验用，受试小鼠空腹14小时，24小时灌胃给药三次，给药容积按0.4ml/10g体重，给药后连续观察7天，逐日记录给药后动物出现的反应。
结果表明，给药后2小时内小鼠活动减少，进食量亦少；第2天至第7天，所有动物的外观体征、行为活动、精神状态、饮食二便、体重变化等均未见有异常改变；口、眼、鼻处无异常分泌物；无一死亡；其最大耐受量为36g/Kg(相当于92.16生药/Kg)以上，相当于成人日临床用量的705.9倍以上。
实验例6长期毒性试验(一)对受试动物一般状态和体重的影响经过三组动物在给药八周及停药二周后(每组1/2动物)这一期间的连续观察，参苏补肾胶囊高剂量及低剂量组动物均活动自如、毛色光泽、外观清洁(口、眼、鼻处无不良分泌物)、饮食尿便正常、发育良好，与对照组比较未见任何表现，各组动物体重增长情况详见表10。
表10长期毒理经时动物体重变化情况(x±s)组别及剂量 例数0w 1w 2w 3w 4wg/Kg114.9± 133.0± 165.6± 185.5± 206.9±对照组208.6 15.8 16.0 16.2 19.7高剂量115.2± 134.2± 160.1± 189.9± 211.4±20组3.0 11.9 16.9 15.9 19.8 22.4低剂量114.3± 138.4± 166.4± 187.0± 208.5±20组1.5 12.0 16.8 9.5 9.9 14.8接下表组别及剂量 5w 6w 7w 8wg/Kg对照组 210.4±20.2 236.1±24.0 243.2±19.7 249.5±34.8高剂量组215.8±25.0 232.4±28.6 242.5±30.0 248.2±32.63.0低剂量组214.4±11.7 234.7±13.9 245.2±15.7 249.5±15.11.5(二)对受试动物血常规的影响血液学检测结果表明，连续给药八周及停药后二周，参苏补肾胶囊高剂量和低剂量组大鼠的RBC、WBC、Pit、Sg、Ly计数，HCT、HGB含量等各项生理指标都在正常值范围内；与对照组比较均无明显差异。详见表11。
表11连续给药四周后血常规检测结果(n＝20，x±s)检测项目 对照组高剂量组 低剂量组RBC(1012/L) 6.21±0.306.09±0.386.24±0.50HGB(g/L) 148.35±8.8 152.9±6.5152.1±6.6Pit(109/L)557.0±72.1 568.0±51.0 570.0±51.4WBC(109/L)8.43±0.948.40±0.738.51±1.34Sg(％) 42.4±5.0 42.8±5.8 42.1±6.7Ly(％) 57.6±5.0 57.2±5.8 57.9±6.1(三)对肝肾功能的影响参苏补肾胶囊连续给药八周及停药二周后的动物取血，对AST、ALT、BUN、CRE等肝肾功能有关的血液生化指标进行检测，结果见表12。
表12对肝、肾功能的影响(x±s)组别 例数 ALT AST BUNCRE(u/l)(u/l) (mmol/L) (mmol/L)对照组2048.2±3.217.6±2.4 7.4±1.5 109.9±7.5高剂量3.0 2049.3±5.318.0±2.8 7.4±1.7 109.4±10.0低剂量1.5 2051.3±4.618.9±2.5 8.3±1.6 110.3±7.3
(四)对主要器官脏器系统的影响将受试动物分两批(连续给药八周和停药后二周)处死，摘取心、肝、脾、肺、肾，用精密电子天平称重后，分别计算出各器官的脏器系统(mg/g体重)，结果见表13。
表13 长期毒性试验动物主要器官脏器系统(x±s)组别例数心 肝 脾肺肾3.72± 34.85± 3.32± 6.64± 3.25±对照组 100.51 3.05 0.83 1.25 0.41高剂量 3.45± 34.24± 3.25± 6.60± 3.54±103.0 0.32 2.61 0.81 1.34 0.42低剂量 3.54± 33.51± 2.74± 7.13± 3.45±101.5 0.33 4.53 0.63 1.05 0.34续上表组别 例数 肾上腺胸腺脑对照组100.19±0.051.60±0.77 6.63±1.34高剂量100.19±0.061.66±0.47 6.54±1.133.0低剂量10 0.20±0.041.55±0.55 6.83±0.921.5(五)病理解剖学和病理组织学检查将受试动物分两批(连续给药八周和停药两周)处死后，取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑，进行大体及镜下组织病理学检查，三组动物的上述主要脏器、器官标本肉眼观察，其外观、形态、大小、颜色正常，未发现充血、肿胀及坏死等异常现象；光镜下检查，亦未见组织萎缩、增生、炎细胞浸润及细胞退行性变等明显的病理变化及中毒性改变。
以上五组实验表明，1.长期毒性试验期间，受试动物的外观体征、行为活动、饮食尿便等生理指标均无异常改变。2.对受试动物的生长发育无不良影响，三组大鼠体重增长基本一致。3.对血液及造血系统、肝功能、肾功能均无不良影响。4.对主要脏器、器官无明显毒副作用。6.停药后无继发性反应发生。
具体实施例方式
以下通过实施例来进一步阐述本发明药物及其制备方法。
实施例1 本发明药物的胶囊制备a)称取各原料药，西洋参20g、猪脑粉400g、何首乌100g、益智仁60g、五味子60g、 天麻60g、石菖蒲100g、 紫苏子100g、丹参100g、远志60g、 葛根60g备用。
b)取猪脑去杂质洗净绞碎，经丙酮脱脂、脱胆固醇三次，依次加丙酮7-4倍、6-3倍、5-2倍量，每次绊拌30分钟，常温绊拌擅搅，滤过，滤渣80℃下干燥，粉碎成细粉，取此粉加蒸馏水调成浆状，调PH值至6.5-7.0，水浴恒温45℃，在经蛋白酶水解后，真空干燥，粉碎成细粉，过100目筛，备用。
c)取西洋参、石菖蒲、紫苏子等三味，粉碎成细粉；备用。
d)其余何首乌等加水12-9、9-6、7-4倍量，煎煮三次，依次为3、2、1小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.25-1.35(80℃)的稠膏，加西洋参、石菖蒲、紫苏子的细粉混匀，真空干燥，粉碎成细粉，再加猪脑粉混匀，过筛，装胶囊，制成1000粒，即得。
实施例2本发明药物的片剂制备c)步骤之前与实施例1相同，在d)步骤粉碎成细粉后，喷入挥发油，压制成片。
权利要求
1.一种治疗中老年记忆力减退的药物，其特征在于它是由下列药物组合及重量份配比制成西洋参1-3、 猪脑粉45-35、 何首乌6-14、益智仁4-9、 五味子4-9、 天麻4-9、石菖蒲6-14、紫苏子6-14、 丹参6-14、远志4-9、 葛根4-9。
2.根据权利要求1所述的一种治疗中老年记忆力减退的药物，其特征在于它是由下列药物组合及优选重量份配比制成西洋参1-2、 猪脑粉42-38、何首乌8-12、益智仁5-8、 五味子5-8、 天麻5-8、石菖蒲8-12、紫苏子8-12、 丹参8-12、远志5-8、 葛根5-8。
3.一种治疗中老年记忆力减退的药物的制备方法，它包括下列步骤a)按配比量称取各原料药，备用；b)取猪脑去杂质洗净绞碎，经丙酮脱脂、脱胆固醇三次，依次加丙酮7-4倍、6-3倍、5-2倍量，每次绊拌20分钟以上，常温绊拌擅搅，滤过，滤渣80℃下干燥，粉碎成细粉，取此粉加蒸馏水调成浆状，调PH值至6.5-7.0，水浴恒温40-50℃，在经蛋白酶水解后，真空干燥，粉碎成细粉，过100目筛，备用；c)取西洋参、石菖蒲、紫苏子等三味，粉碎成细粉；备用；d)其余何首乌等加水12-9、9-6、7-4倍量，煎煮三次，依次为3.5-2.5、1.5-2.5、0.5-1.5小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.25-1.35(80℃)的稠膏，加西洋参、石菖蒲、紫苏子的细粉混匀，真空干燥，粉碎成细粉，再加猪脑粉混匀，即得本发明药物活性组分。
全文摘要
一种治疗中老年记忆力减退的药物及其制备方法，属于中成药技术领域。本发明由西洋参、猪脑粉、何首乌、益智仁、五味子、天麻、石菖蒲、紫苏子、丹参、远志、葛根原料药组成。经提取、过滤等步骤可制成药用制剂；其有益效果是1.长期毒性试验期间，受试动物的外观体征、行为活动、饮食尿便等生理指标均无异常改变。2.对受试动物的生长发育无不良影响，三组大鼠体重增长基本一致。3.对血液及造血系统、肝功能、肾功能均无不良影响。4.对主要脏器、器官无明显毒副作用。6.停药后无继发性反应发生。
文档编号A61P43/00GK1593482SQ20041001093
公开日2005年3月16日 申请日期2004年6月18日 优先权日2004年6月18日
发明者张广学, 刘德顺, 张福营 申请人:吉林省华洋药业股份有限公司