专利名称：美兰预防龋病的新作用及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种解毒剂----美兰预防龋病的新作用。本发明还涉及美兰的这些预防龋病的新作用在防龋制剂(包括牙膏、漱口剂、口香糖、防龋涂膜和窝沟封闭剂)领域中的应用。
背景技术：
美兰(methylene blue，又称亚甲基蓝)是一种解毒剂，常作为氰化物和硝酸盐的解毒药物；也可作为消毒剂，用于皮肤或口腔粘膜消毒。Wilson等(Wilson M，Gibson M，Strahan D et al.A Preliminary evaluation of theuse of a redox agent in the treatment of chronic periodontitis.J Periodont Res，1992；27(5)522-527)报道在慢性牙周炎患者的牙周袋内应用美兰，可以达到减少牙周可疑致病菌、治疗牙周炎的目的。这方面的治疗技术获得英国专利(专利号2202442)，并在美国、日本和欧洲得到专利的使用权。但是，美兰对于龋病预防作用的研究，目前还未见报道。
变形链球菌作为口腔主要致龋菌，其致龋特性是基于其利用糖的产酸能力，耐酸能力以及对坚硬牙齿表面的附着能力。变形链球菌粘附于牙齿表面，形成菌斑，在菌斑环境中产生有机酸并保持菌斑环境较高的酸浓度，酸使得牙釉质发生脱矿破坏，导致龋病发生，同时在酸性环境中，变形链球菌能够生长良好，并进行正常的生化代谢活动。目前，文献报道美兰对变形链球菌的生长和产酸以及对体外人工菌斑的产酸具有抑制作用(王成龙等。美兰抑制变形链球菌产酸的实验研究。临床口腔医学杂志，2000；16(4)202-203；王成龙。美兰对体外菌斑糖代谢模型产酸代谢的抑制作用。实用口腔医学杂志，2001；17(5)419--421)。
发明内容
我们根据文献报道美兰对变形链球菌的生长和产酸以及对体外人工菌斑的产酸具有抑制作用，分析美兰抑制变形球菌的生长和减少变形球菌的产酸的作用机理生物体的正常生长和繁殖需要大量还原性物质的参与，如NADH和NADPH，这些还原性物质在生物体的合成代谢中起重要作用，而生物体的正常代谢过程中以可产成大量的NADH和NADPH，能够满足其合成代谢的要求，生物体的生长繁殖能够顺利进行，美兰作为需氧脱氢酶类的人工受氢体，它取代了氧的作用，使得生物体代谢过程中产生的电子(或者说氢离子)，不能传递给氧，而传递给了美兰。这样，一方面，生物体的氧化作用不能顺利进行，也就没有足够的能量产生，生物体的生长和繁殖必然受到抑制，另一方面，虽然氧化作用不能顺利进行，但需氧脱氢酶类催化的反应却仍然继续进行，这就意味着有大量的还原性物质被消耗，生物体合成代谢由于缺少“原材料”，其生长受到抑制。另外，还原性物质被消耗(如NADH)，也将影响生物体的其它代谢活动(如糖代谢)，缺乏NADH，生物体糖代谢不能顺利进行，特别是糖酵解过程，因此酸的产生也将受到抑制。通过实验证实美兰对由变形链球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的龋病发生具有明显的抑制作用，目的是寻找预防龋病的新途径。本发明的美兰预防龋病的新作用完全不同于上述美兰治疗牙周病的作用。
本发明的目的是提供美兰预防龋病的新作用。
本发明的另一目的是提供美兰预防龋病的新作用在防龋制剂(包括牙膏、漱口剂、口香糖、防龋涂膜和窝沟封闭剂)领域中的用途。
本发明的美兰预防龋病的新作用具体表现为美兰对由变形链球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的龋病发生具有明显的抑制作用。
传统上，人们使用杀菌、抑菌剂预防龋病的发生，效果并不理想。我们根据美兰是需氧脱氢酶类的人工受氢体，能够阻断生物体的氧化过程的作用，直接阻断致龋菌的产酸代谢，从根本上消除了龋病发生的病因，这就为龋病这一临床常见病和多发病的预防找到新的出路。
本发明对研制新型防龋制剂具有重要意义，并具有广泛的应用价值及广阔的市场前景。另外，美兰作为显色剂也有潜在的应用价值，如可用于窝沟封闭剂的显色或生产彩色牙膏等。
图1是美兰抑制Spraague-Dawley大鼠龋病发生的Keyes龋齿记分结果。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例、美兰对由变形链球菌引起的Spraague-Dawley大鼠龋病发生的作用1、实验方法将大鼠随机分为三组，每组12只(雌雄各半)。均于出生后21d断奶，记录体重，21--23d鼠龄期间给予含有广谱抗生素(氨苄青霉素0.5g/瓶×2瓶、氯霉素0.25g/瓶×4瓶、羧苄青霉素0.25g/粒×4粒)的致龋饲料2000#，用量为lg/kg饲料。24--27d鼠龄期间，连续4d于大鼠口腔内接种变形链球菌。自28d起各组分别用2.5×10-4g/L美兰溶液，0.2％氟化钠水溶液，蒸馏水处理大鼠取仰卧位，将药物用钝针头注射器注入0.3ml于大鼠牙面及口腔，维持15s，每天处理1次，处理后30min内禁饮、禁食。连续处理60d。89d鼠龄时，记录体重，麻醉大鼠(肌肉注射861合剂，0.75mg/kg体重)，处死大鼠，取颌骨标本，根据Keyes经典评分法，将龋病进展划分为釉质层(E级)、牙本质浅层(Ds)、牙本质中层(Dm)及牙本质深层(Dx)四个级别对鼠磨牙龋进行记分。
2、实验结果经统计分析，三组相差非常显著(P＜0.01)。E级龋损美兰组与蒸馏水相差非常显著(P＜0.01)；与氟化钠组无显著差异(P＞0.05)。Ds级龋损美兰组与蒸馏水相差十分显著(P＜0.01)；与氟化钠组没有统计意义上的差别(P＞0.05)。Dm级龋损仅见于蒸馏水组，美兰组及氟化钠组均未发生。Dx级龋损在三组中均未出现。参见附图1。
权利要求
1.美兰预防龋齿的新作用，其特征在于美兰对口腔龋病的发生具有抑制作用。
2.权利要求1所述的美兰预防龋齿的新作用在制备以美兰为有效成分的防龋制剂中的应用。
全文摘要
本发明涉及美兰预防龋齿的新作用。本发明的美兰预防龋齿的新作用可用于制备以美兰为有效成分的防龋制剂。
文档编号A61P1/00GK1672684SQ20041003351
公开日2005年9月28日 申请日期2004年3月27日 优先权日2004年3月27日
发明者王成龙, 刘洪臣, 李振钢, 储冰峰 申请人:中国人民解放军总医院