专利名称：猪胎素的生产方法
技术领域：
本发明属于保健品生产方法领域，涉及一种猪胎素的生产方法。
背景技术：
胎素是来源于动物胚胎、胎盘的一类复合活性成分。胎素含有丰富的核酸、多肽、蛋白成分，具有健脑、提高免疫、养颜美容的功效。
目前国内外保健食品市场上常见的是羊胎素保健食品。由于羊与人类的亲缘关系较远，羊胎提取物有效成分不易被人体充分利用。同时国内羊群农牧区主要集中在宁夏、青海、甘肃、内蒙等西北地区，每年的屠宰季节集中在秋冬，导致原料供应受到季节、交通等因素的严重干扰，胚胎质量难以保障。和国内已经规模化、规范化的养猪产业比较起来，国内羊群放牧区大多数仍然保持着自然放养的状态，缺乏严格的检验检疫和繁殖控制，让人无法放心羊胎的质量。
在动物胚胎中，猪胚胎功效成分与人类高度同源，不易发生排斥反应。细胞学实验已经证实猪胚胎中刺激上皮细胞增殖和激活淋巴细胞的活性成分较羊胚胎更丰富。一头母猪一次怀孕可获10～12头猪胚胎，一年可怀孕两次。普遍而言，母猪的孕后流产率高达20％～40％。因此结合目前遍布国内的高度发达的养猪业，以及配套的严格检验检疫措施，一年四季都可稳定获得品质高度专一而成本低廉的胚胎原料来源。目前国内保健食品市场上尚未见以猪胚胎为主要原料开发的保健食品，猪胎素的生产方法也未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效率的猪胎素生产工艺。发明人采用现代生化技术，在充分保护活性成分的前提下，从猪胎中提取并浓缩了其有效成分，制成了原料粉，完成了本发明。
本发明公开的猪胎素是选用猪胚胎、猪胎盘为原料，经破碎、匀浆、冷冻干燥、超细粉碎步骤获得的活性组分提取物，含有蛋白质、卵磷脂、激素、核酸等成分。
本发明提供了一种猪胎素的生产方法，它包括如下步骤(1)将猪胚胎和/或胎盘清洗、破碎；(2)加入保护剂，匀浆；(3)真空冷冻干燥；(4)超细粉碎。
所述方法详述如下(1)收集新鲜猪胚胎及胎盘，用纯净水洗涤干净，用打浆机搅拌破碎，使呈粥样流动状，过60目筛网。
(2)在上述物料中添加保护剂后，用高压匀浆机充分匀浆，温度控制在0℃～4℃。
(3)将上述物料进行冷冻干燥，冻干后样品水分含量不高于3％。
(4)将上述物料送入低温研磨机内研磨，温度控制在0℃～4℃，细度达到100目～400目。
本发明中保护剂选自抗氧化剂食品添加剂、食品乳化剂添加剂、冻干保护剂中的一种或多种。
本发明中抗氧化剂食品添加剂的加入按重量计用量为0.001％～0.04％。抗氧化剂食品添加剂选自丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、没食子酸丙酯(PG)、茶多酚(维多粉)、植酸(肌醇六磷酸)植酸钠、4-己基间苯二酚、甘草抗氧物、抗坏血酸钙、硫代二丙酸二月桂酯、脑磷脂、D-异抗坏血酸钠、抗坏血酸棕榈酸酯、特丁基对苯二酚TBHQ、竹叶提取物中的一种或多种。
本发明中冻干保护剂的加入按重量计用量为0.001％～10％。冻干保护剂选自脂酸甘油酯、海藻酸钠、吐温-80、蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、甘油、L-丝氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐中的一种或多种。
本发明在步骤(1)破碎和/或步骤(2)匀浆过程中添加碎冰效果更好。其中碎冰选自由纯净水、生理盐水、磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液制成的碎冰中的一种或多种。优选纯净水制成的碎冰。
生产出的猪胎素产品，按规格包装后，进行射线灭菌。
本发明采用低温高压匀浆法破碎细胞，高压可将粥状胚胎组织样品充分破碎，使其流动性大为改善。匀浆设备局部低温(0℃～4℃)并且在高压匀浆前添加保护剂，实现最大限度释放和保护猪胚胎组织中的有效成分。匀浆前向样品添加保护剂，则活性保留达到85％～92％，比不添加保护剂活性平均提高40％以上。该方法摈弃了周期长、成本高的反复冻融法和液氮冷冻设备的使用。
本发明提供的工艺能显著提高猪胚胎有效成分的提取效率，同时有效保障各种营养因子活性。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作详细说明实施例1取新鲜猪胚胎(包括胎盘)，纯净水洗涤干净后，用电动搅拌机将胚胎及胎盘搅碎成糊(粥)状。将样品过60目筛网，收集滤过样品。添加抗氧化剂(茶多酚(维多粉)0.02％、特丁基对苯二酚TBHQ0.01％)和冻干保护剂(海藻酸钠0.5％、吐温-80 0.5％、甘露醇4％、丙氨酸1％、甘氨酸1.5％)后进行低温高压匀浆。匀浆条件为压力40Kg/cm2，处理速度40L/hr，匀浆体积控制在每次1L，匀浆时间为5分钟(视匀浆流速、样品体积而定)，温度控制在0℃。将匀浆后样品分装冷冻盘，样品高度不超过5cm，置真空冷冻干燥器内冻干。冻干条件为预冷-50℃，时间1小时；抽真空，真空度小于0.5mbar，维持30分钟。保持冷凝器-50℃，将隔板温度在30分钟内梯度上升至-20℃，连续冻干10小时，此后将隔板温度在30分钟内梯度上升至0℃，继续冻干10小时，最后将隔板温度在30分钟内梯度上升至5℃，继续冻干10小时。本技术措施可取保冻干后样品水分小于3％。将样品从冻干机中取出，送入低温研磨机内研磨，温度控制0℃，细度达到100目～400目。
此方案获得猪胎素得率为15％。
实施例2取新鲜猪胚胎(包括胎盘)，纯净水洗涤干净后，添加纯净水制成的碎冰，用电动搅拌机将胚胎及胎盘搅碎成糊(粥)状。将样品过60目筛网，收集滤过样品。添加抗氧化剂(茶多酚(维多粉)0.02％、特丁基对苯二酚TBHQ 0.005％)和冻干保护剂(海藻酸钠0.1％、吐温-80 0.01％、甘露醇2％、丙氨酸2％、甘氨酸1％)，添加柠檬酸盐缓冲液制成的碎冰，进行低温高压匀浆。匀浆条件为压力60Kg/cm2，处理速度60L/hr，匀浆体积控制在每次5L，匀浆时间为10分钟(视匀浆流速、样品体积而定)，温度控制在4℃。将匀浆后样品分装冷冻盘，样品高度不超过5cm，置真空冷冻干燥器内冻干。冻干条件为预冷-80℃，时间3小时；抽真空，真空度小于0.5mbar，维持60分钟。保持冷凝器-50℃，将隔板温度在60分钟内梯度上升至-10℃，连续冻干36小时，此后将隔板温度在60分钟内梯度上升至4℃，继续冻干6小时。本技术措施可取保冻干后样品水分小于3％。将样品从冻干机中取出，送入低温研磨机内研磨，温度控制在4℃，细度达到100目～400目。
此方案获得猪胎素得率为20％。
实施例3将常规动物胚胎冻融工艺与本发明工艺进行1kg猪胚胎生产，进行有效成分回收率和活性比较。猪胎素活性按淋巴细胞玫瑰花结活性进行检测。检测方法如下按常规方法用淋巴分离液分离健康人外周血单核细胞，用1％台盼蓝染色检测细胞活性(应＞95％)并计数细胞。用小牛血清调整细胞数至2×106/mL。各取细胞液200μL入试管，分为冻融对照组及匀浆组，分别加入样品至终浓度为(1×10-2mg/L)(样品用细胞培养液稀释，并过滤除菌)。37℃水浴90分钟；用生理盐水洗涤绵羊红细胞，将细胞数调整至2×108/Ml；在每支试管中加入绵羊红细胞200μL，在4℃放置2h～3h；涂片、染色、于高倍镜下计数200个淋巴细胞中形成玫瑰花结的细胞数(结合3个及3个以上绵羊红细胞)，计算玫瑰花形成细胞的百分数。
表1冻融工艺与本发明工艺有效成分回收率和活性比较结果猪胚胎原料(单位g)冻干成品(单位g) 得率 E-玫瑰结形成率冻融工艺1000 107 10.7％ 48％本发明工艺 1000 185 18.5％ 52％实施例4对不同匀浆条件及不同温度下制备的猪胎素成品进行活性比较。
活性检测方法如实施例2。
表2不同匀浆条件、不同温度下制备的猪胎素活性比较结果工艺条件 常温匀浆常温匀浆+保护剂低温匀浆低温匀浆+保护剂E-玫瑰节形成率18％31％ 45％55％
权利要求
1.一种猪胎素的生产方法，它包括如下步骤(1)将猪胚胎和/或胎盘清洗、破碎；(2)加入保护剂，匀浆；(3)真空冷冻干燥；(4)超细粉碎。
2.根据权利要求1所述方法，其中步骤(1)，使物料破碎至呈粥样流动状，过60目筛网。
3.根据权利要求1所述方法，其中保护剂选自抗氧化剂食品添加剂、食品乳化剂添加剂、冻干保护剂中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述方法，其中抗氧化剂食品添加剂选自丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯、茶多酚、植酸、植酸钠、4-己基间苯二酚、甘草抗氧物、抗坏血酸钙、硫代二丙酸二月桂酯、脑磷脂、D-异抗坏血酸钠、抗坏血酸棕榈酸酯、特丁基对苯二酚、竹叶提取物中的一种或多种。
5.根据权利要求3所述方法，其中冻干保护剂选自脂酸甘油酯、海藻酸钠、吐温-80、蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、甘油、L-丝氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述方法，其中步骤(2)，采用高压匀浆机进行匀浆，温度控制在0℃～4℃。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在步骤(1)破碎和/或步骤(2)匀浆过程中添加碎冰。
8.根据权利要求7所述方法，其中碎冰选自由纯净水、生理盐水、磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液制成的碎冰中的一种或多种。
9.根据权利要求1所述方法，其中步骤(3)，真空冷冻干燥后样品含水量不高于3％。
10.根据权利要求1所述方法，其中步骤(4)，在低温研磨机内研磨，温度控制在0℃～4℃，细度达到100目～400目。
全文摘要
本发明涉及猪胎素的生产及其保健食品的制备方法。本发明工艺过程包括将经过精选的猪胚胎清洗、破碎，随后加入保护剂进行低温高压匀浆处理，经离心处理后进行真空冷冻干燥。然后进行超细粉碎，获得成品猪胎素。经本工艺低温高压匀浆和低温冷冻干燥技术加工的猪胚胎能保持其全部营养成分。
文档编号A61K35/50GK1686177SQ20051001154
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月8日 优先权日2005年4月8日
发明者黄明 申请人:广州拜迪生物医药有限公司