专利名称：：一种维血康咀嚼片质量标准及其检验方法
技术领域：
：-本发明涉及一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法。
背景技术：
：维血康咀嚼片方出自《中华人民共和国药品标准中药成方制剂》第十四册收载的维血康糖浆剂。由党参、熟地黄、山药、陈皮、黑豆、砂仁、何首乌、山楂、硫酸亚铁九味药组成。功能补肾健脾，补血养阴。适用于脾肾不足，精血亏虚，面色萎黄，眩晕耳鸣，腰膝酸软，倦怠体瘦。营养性贫血或缺铁性贫血属上述证候者。为补益脾肾，养阴补血之良方。原剂型为糖浆剂，糖浆剂作为液体制剂，在一定程度上存在有贮存、运输、携带及服用不便等弊端。又因原标准仅有性状及陈皮一味药材的鉴别，缺少必要的药品内在质量检控指标，因而在一定程度上限制了本品的生产、销售及临床应用。因此，我们在原方工艺基础上，经成型工艺研究，研制而成新型固体制剂一一咀嚼片，并按照国家药品监督管理局颁布的《中药新药研究技术要求》中有关质量标准研究的技术要求等，釆用薄层色谱法，建立和制订了维血康咀嚼片中主要组成药物的薄层鉴别系统和鉴别指标。采用高效液相色谱法测定维血康咀嚼片中主要组成药物陈皮所含主要有效成分橙皮苷的含量。与原剂型相比，维血康咀嚼片具有贮存、运输、携带、服用方便及口感好等特点，又具有质量可控，安全卫生，药品稳定等创新性与可行性。从而为开发维血康咀嚼片奠定基础和依据。维血康咀嚼片是专门治疗贫血的药品。本方为临床补肾健脾、养阴补血之良方。运用本方的基本指征是由于脾肾不足，精血亏损而引起面色萎黄，眩晕耳鸣，腰膝酸软，倦怠体瘦属祖国医学"血虚"之范畴。现代医学称之"营养不良性贫血"及"缺铁性贫血"。本病属临床常见病，多发病，尤以儿童、妇女、老年人为多见。方中取用党参、熟地黄补中益气，滋阴补血为君药，重用山药、陈皮理气燥湿，健运脾胃为臣药，佐以黑豆、何首乌、山楂、砂仁等，健脾胃，生津血，诸药配伍，共奏补肾健脾，补血养阴之良效。党参性平，味甘，具补中益气，生津之功效。为祖国医学治疗脾胃虚弱，气血两亏，体倦乏力等之要药。《本草正义》载"党参力能补脾养胃，润肺生津，健运中气，本与人参不甚相远。其尤可贵者，则健脾运而不燥，滋胃阴而不湿，润肺而不犯寒凉，养血而不偏滋腻，鼓舞中阳，振动中气，而无刚燥之弊"。现代研究证明党参具有显著的抗缺氧，抗贫血，抗溃疡及增强机体免疫功能等作用。熟地黄味甘，性温，具滋阴补血之功能。治阴虚血少，腰膝痿弱，耳聋目昏等。《纲目》曰"填骨髓，生精血，补五脏，通血脉，黑须发……"。《本草从新》载"治一切肝肾阴亏，虚损百病，为壮水之主药"。现代研究证明熟地黄具多方面显著的生理活性。抗衰老，补血，增强免疫功能等作用。山药味甘，性平，为健脾，固肾，益精之品。主治脾虚食少，久泻不止，肾虚遗精，虚热消渴等。现代药理研究证明山药具有提高免疫功能，耐缺氧，降血糖等作用。陈皮味苦，辛，温，具理气健脾，燥湿化痰之功能，用于胸腹胀满，食少吐泻等症。现代研究证明陈皮水煎液能使离体唾液内淀粉酶活性增高，保护胃粘膜、松驰肠平滑肌、抗休克、抗炎抗过敏等作用。
发明内容本发明的目的在于提供一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法，通过确定质量标准及其检验方法，可增强该药的有效性、质量可控性及稳定性。本发明的目的是通过以下技术方案实现的-一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法，其特点在于该方法中的a鉴别方法和含量测定方法是以下方法的一种或几种a鉴别党参的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加乙醇2575ml，超声处理或热回流1545分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水1545ml使溶解，加盐酸13ml，三氯甲烷1545ml，加热回流2060分钟，放冷，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇0.51.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材0.51.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1020W，对照药材溶液515W，分别点于同一薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(217:62:0.750.25)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；何首乌的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加水饱和的正丁醇2575ml，加热回流0.51.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.51.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.51.5g，研碎，加水饱和的正丁醇1030ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各515W，分别点于同一薄层板上，以苯-丙酮-甲醇(93:31:1.50.5)为展开剂，展开，取出，晾千，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；陈皮的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加乙酸乙酯2575ml，超声处理2060分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇12ral使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml含13mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1020W，对照品溶液515W，分别点于同一薄层板上，以三氯甲垸-甲醇-水(4816:25.58.5:7.52.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以13%三氯化铝甲醇溶液，置紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b含量测定橙皮苷的含量测定方法包括下列步骤照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶或辛基硅烷键合硅胶或氰基或氨基键合硅胶为填充剂，以乙腈-O.1%磷酸溶液(2515:8575)为流动相，检测波长为250350nm,理论板数按橙皮苷峰计算应不低于20004000;对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含10~20Ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取维血康咀嚼片515片，精密称定，研细，取约0.51.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇2575ml，密塞，称定重量，超声处理2060分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液13ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得；维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷(C28H34015)计，不得少于1.5mg。该方法中的a鉴别方法和b含量测定方法是以下方法的一种或几种a鉴别党参的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水30ml使溶解，加盐酸2ral，三氯甲烷30ml，加热回流40分钟，放冷，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15W，对照药材溶液lO)il，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(14:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；何首乌的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加水饱和的正丁醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材lg，研碎，加水饱和的正丁醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1014,分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-甲醇(6:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；陈皮的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加乙酸乙酯50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇12ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15W，对照品溶液10W，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32:17:5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b含量测定橙皮苷的含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-o.1%磷酸溶液(20:80)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含15ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取维血康咀嚼片10片，精密称定，研细，取约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率150W，频率40kHz)40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45txm)滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10)4，注入液相色谱仪，测定，即得；维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷(C28Hs4015)计，不得少于1.5mg。本发明的有益效果本发明经过多次试验在该品种的质量标准中制定了薄层色谱鉴别及含量测定项目，是提供维血康咀嚼片质量检验方法及标准，通过建立明确专属性强的鉴别及重现性、稳定性及精密度良好的含量测定方法，能够有效控制维血康咀嚼片的质量，使维血康咀嚼片质量达到稳定、可控、高效及安全，是对产品的投料要求及质量控制严格，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，产品质量高，能保证产品疗效，更好地满足医疗的需要。-图1是本发明党参的薄层色谱鉴别；图2是本发明何首乌的薄层色谱鉴别；图3是本发明陈皮的薄层色谱鉴别；图4是本发明橙皮苷对照品的高效液相色谱图5是本发明维血康咀嚼片供试品的高效液相色谱图6是本发明阴性对照的高效液相色谱图7是本发明橙皮苷标准曲线图8是本发明含量测定之批号20050116的高效液相色谱图；图9是本发明含量测定之批号20050117的高效液相色谱图；图10是本发明含量测定之批号20050118的高效液相色谱图；图11是本发明含量测定之批号20050312的高效液相色谱图；图12是本发明含量测定之批号20050315的高效液相色谱图；图13是本发明含量测定之批号20050316的高效液相色谱图；具体实施例方式实施例一种维血康咀嚼片质量标准及其检验方法，该片剂品种的质量标准包括性状指标、薄层色谱鉴别指标、含量测定指标，所述各项指标如下-O).性状指标维血康咀嚼片为棕色或棕褐色的片；气香，味甜；(2).薄层色谱鉴别指标供试品色谱中，应具党参药材、陈皮、何首乌药材的斑点特征；(3).含量测定指标维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷(C28Hs4015)计，不得少于1.5mg。本发明质量标准的检验方法是(1)性状采用目测、鼻嗅及口尝(2)薄层色谱鉴别采用薄层色谱法；(3)含量测定采用高效液相色谱法。本发明所说的薄层色谱鉴别检验方法为①其中所述的党参的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加乙醇2575ml，超声处理或热回流1545分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水1545ml使溶解，加盐酸l3ml，三氯甲烷1545ml，加热回流2060分钟，放冷，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇0.51.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材O.51.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1020ri，对照药材溶液515Kl，分别点于同一薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(217:62:0.750.25)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图1。②其中所述的何首乌的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加水饱和的正丁醇2575ml，加热回流O.51.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇O.51.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.S1.5g，研碎，加水饱和的正丁醇1030ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各515W，分别点于同一薄层板上，以苯-丙酮-甲醇(93:31:1.50.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图2。③其中所述的陈皮的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片1020片，研碎，加乙酸乙酯2575ml，超声处理2060分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加甲醇l2ffll使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml含13mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1020W,对照品溶液515W,分别点于同一薄层板上，以三氯甲垸-甲醇-水U816:25.58.5:7.52.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以13%三氯化铝甲醇溶液，置紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图3。(2)含量测定橙皮苷的含量测定方法包括下列步骤照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅垸键合硅胶或辛基硅烷键合硅胶或氰基或氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-O.1%磷酸溶液(2515:8575)为流动相，检测波长为250350nm。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于20004000。对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含1020Pg的溶液，即得。供试品溶液的制备取维血康咀嚼片515片，精密称定，研细，取约O.51.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇2575ml，密塞，称定重量，超声处理2060分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液13ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45ym)滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得。维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷(C28H34015)计，不得少于1.5mg。1.仪器与试药1.1仪器Agilent-1100化学工作站，紫外检测器ApolloC185u(4.6X250mm)色谱柱1.2试剂与试药橙皮苷对照品(供含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供(批号为0721-9909)。乙腈为色谱纯，水为高纯水，其它试剂为分析纯。1.3样品由包头中药有限责任公司提供。2.实验条件的选择2.1提取方法的考察参照中国药典2000年版一部中有关橙皮苷的含量测定方法，比较了超声法和索氏回流提取法，结果表明，两种方法测得结果基本一致，为方便操作，节省时间，故选择了超声提取法。超声时间的确定分别考察了超声处理20、30、40、50分钟，结果表明，超声处理40分钟，含量不再增加，故确定超声处理40分钟。2.2色谱条件的选择流动相的选择参考中国药典2000年版一部中收载的有关橙皮苷的含量测定方法，比较了甲醇-水(35:65)、甲醇-0.1%醋酸溶液(40:60)、乙腈-0.2%磷酸溶液(20:80)、乙腈-O.1%磷酸溶液(20:80)等流动相，结果表明乙腈-O.1%磷酸溶液(20:80)为流动相，出峰时间适中，色谱峰峰形较理想，基线平稳，分离度好。故选择乙腈-O.1%磷酸溶液(20:80)为流动相。检测波长的选择据文献资料报道及紫外吸收图谱证明橙皮苷最大吸收波长为283nm，故检测波长选择283rnn。色谱条件ApolloC18柱(250咖X4.6，5um);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80);流速为1.Oml/min，检测波长为283nm。在上述所选定的色谱条件下，橙皮苷与前一峰的分离度大于1.5，理论板数按橙皮苷峰计大于3000，且阴性样品无干扰。见图4、图5、图6。3.方法学考察3.1线性关系考察取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含14.32yg的溶液，作为对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液6、8、10、12、14、16ul，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以进样量对峰面积值进行回归分析，结果橙皮苷在0.08590.2291ug范围内呈现良好的线性关系。回归方程为A=1567.1C+1.5014，r=0.9999。结果见表3、图7。表1标准曲线测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>3.2稳定性试验取同一批号供试品，按[含量测定]项下方法制备供试品溶液，分别于O、2、4、6、8/j时分别进样，记录橙皮苷峰面积积分值，并求得含量，结果见表2。表2稳定性试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果表明本品在8小时内测定结果稳定。3.3精密度试验取同一批号供试品，按[含量测定]项下方法制备供试品溶液，连续进样5次，测定结果见表3。表3精密度试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果表明本法精密度符合规定。3.4重复性试验取同一批号供试品5份，分别按[含量测定]项下方法操作并测定每份含量，结果见表4。表4重复性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>结果表明，本法重复'生较好。3.5回收率试验取已知含量的同一供试品5份，每份0.5g,精密称定，分别精密加入橙皮苷对照品溶液(0.328mg/ml)5ml，按[含量测定]项下方法操作并测定每份的含量，计算回收率。结果见表5。表5加样回收率试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>结果表明本法回收率符合规定。3.6样品的测定分别取不同批号样品约lg，精密称定，按[含量测定]项下方法操作并测定，结果见表6。表6样品测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>根据以上6批样品含量测定结果，暂定本品每片含陈皮以橙皮苷(C28H34015)计，不得小于1.5mg为宜。见图813。为了考察质量标准提高后维血康咀嚼片的稳定性情况，进行了加速稳定性和室温留样稳定性试验l.实验条件(1)、室温留样考察法取样品，在上市包装条件下，置室温条件下进行考察，结果见表79。(2)、加速稳定性实验法将样品置于温度为40。C士2。C,相对湿度75%±5%的条件下进行考察，结果见表1012。2.考察结果(1)、本品经常温下放置留样观察6个月，其各项检测指标与初始当月检査结果均无明显改变，各项指标符合规定。室温放置长期稳定性实验有待继续进行。(2)、本品经加速稳定性实验证明，在此实验条件下，其各项检测指标与初始当月检验结果均无明显改变。附表7室温留样考察结果样品名称维血康咀嚼片批号20050312<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>结果室温放置6个月，各项检测指标均符合规定。附表8室温留样考察结果样品名称维血康咀嚼片批号20050315<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>结果室温放置6个月，各项检测指标均符合规定。附表9室温留样考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>结果室温放置6个月，各项检测指标均符合规定。附表10加速试验考察结果样品名称维血康咀嚼片批号20050312实验时间项g、标准规定、结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>附表ll加速试验考察结果样品名称维血康咀嚼片批号20050315<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>结果加速试验3个月，各项检测指标均符合规定。附表12加速试验考察结果样品名称维血康咀嚼片批号20050316<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>结果加速试验3个月，各项检测指标均符合规定。木发明的有益效果本发明经过多次试验在该品种的质量标准中制定了薄层色谱鉴别及含量测定项目。本发明就是提供维血康咀嚼片质量检验方法及标准。本发明通过建立专属性强的鉴别及重现性、稳定性及精密度良好的含量测定方法，能够有效控制维血康咀嚼片的质量，使维血康咀嚼片的质量达到稳定、可控、高效及安全。权利要求1、一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法，其特征在于该方法中的a鉴别方法和b含量测定方法是以下方法的一种或几种a鉴别党参的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片10～20片，研碎，加乙醇25～75ml，超声处理或热回流15～45分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水15～45ml使溶解，加盐酸1～3ml，三氯甲烷15～45ml，加热回流20～60分钟，放冷，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇0.5～1.5ml使溶解，作为供试品溶液，另取党参对照药材0.5～1.5g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～20μl，对照药材溶液5～15μl，分别点于同一薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸21～7∶6～2∶0.75～0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；何首乌的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片10～20片，研碎，加水饱和的正丁醇25～75ml，加热回流0.5～1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5～1.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.5～1.5g，研碎，加水饱和的正丁醇10～30ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～15μl，分别点于同一薄层板上，以苯-丙酮-甲醇9～3∶3～1∶1.5～0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；陈皮的定性鉴别包括下列步骤取维血康咀嚼片10～20片，研碎，加乙酸乙酯25～75ml，超声处理20～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1～2ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1～3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～20μl，对照品溶液5～15μl，分别点于同一薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水48～16∶25.5～8.5∶7.5～2.5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1～3％三氯化铝甲醇溶液，置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b含量测定橙皮苷的含量测定方法包括下列步骤照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶或辛基硅烷键合硅胶或氰基或氨基键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1％磷酸溶液25～15∶85～75为流动相，检测波长为250～350nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000～4000；对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10～20μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取维血康咀嚼片5～15片，精密称定，研细，取约0.5～1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25～75ml，密塞，称定重量，超声处理20～60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1～3ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜0.45μm滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷C28H34O15计，不得少于1.5mg。2、根据权利要求1所述的方法，一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法，其特征在于:该方法中的a鉴别方法和b含量测定方法是以下方法的一种或几种a鉴别党参的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水30ml使溶解，加盐酸2ml，三氯甲烷30ml，加热回流40分钟，放冷，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验，吸取供试品溶液15W，对照药材溶液10W，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸14:4:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；何首乌的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加水饱和的正丁醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液，另取何首乌对照药材lg，研碎，加水饱和的正丁醇20ml，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各IOW，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-甲醇6:2:为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；陈皮的鉴别取维血康咀嚼片15片，研碎，加乙酸乙酯50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇12ml使溶解，作为供试品溶液，另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验，吸取供试品溶液15W，对照品溶液IOW，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水32:17:5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝甲醇溶液，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b含量测定橙皮苷的含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八院基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-o.1%磷酸溶液20:80为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含15Ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取维血康咀嚼片10片，精密称定，研细，取约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理功率150W，频率40kHz40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜0.45um滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各IOW，注入液相色谱仪，测定，即得；维血康咀嚼片每片含陈皮以橙皮苷(:28&4015计，不得少于1.5mg。全文摘要本发明涉及一种维血康咀嚼片的质量标准及其检验方法，经多次试验在该品种的质量标准中制定了薄层色谱鉴别及含量测定项目，提供了维血康咀嚼片质量检验方法及标准，能够有效控制维血康咀嚼片的质量，使维血康咀嚼片质量达到稳定、可控、高效及安全，是对产品的投料要求及质量控制严格，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，产品质量高，能保证产品疗效，更好地满足医疗的需要，本发明改进了原有质量标准，建立了其中党参、何首乌的定性鉴别，改进了其中陈皮的定性鉴别，建立了陈皮中橙皮苷的含量测定，通过本发明的质量控制，使维血康咀嚼片质量达到稳定、可控、高效及安全。文档编号A61K36/9064GK101181590SQ200710194569公开日2008年5月21日申请日期2007年11月23日优先权日2007年11月23日发明者何媛媛,朱贺年,贾金良申请人:包头中药有限责任公司