专利名称：：一种活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，涉及一种活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，特别是涉及由当归、赤芍、北败酱、香附、炮姜、泽兰、川芎、红花、柴胡、海藻、车前子、延胡索等中药组方制成的具有活血化瘀、解毒消肿之功效的颗粒药物的质量控制方法。
背景技术：
：用于治疗妇科疾病的具有活血化瘀、解毒消肿之功效的颗粒药物较多，其中的"宫炎康颗粒"是采用当归、赤芍、北败酱、香附、炮姜、泽兰、川芎、红花、柴胡、海藻、车前子、延胡索等十多味纯天然中药材，经制备而成的中成药，主要用于治疗慢性盆腔炎，其疗效确切可靠，无副作用。"宫炎康颗粒"在卫生部颁布的药品标准《中药成方制剂》第二十册中刊登，并已在临床应用多年，在治疗慢性盆腔炎方面取得了较满意的治疗效果。但经研究发现，现有"宫炎康颗粒"的质量控制标准存在着质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，在产品生产过程中，用现有的质量控制方法不能有效控制该药物的质量，从而将影响其临床疗效。
发明内容本发明的目的在于，提供一种活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法。本发明针对具有活血化瘀、解毒消肿之功效的颗粒制剂药物，尤其是针对现部颁标准收载的"宫炎康颗粒"质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，对颗粒制剂的质量控制方法进行了研究，拟订了对制剂中当归和川芎、赤芍、延胡索的薄层色谱鉴别，以及对制剂中赤芍所含芍药苷的含量测定，提高了活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制标准，该质量标准中的控制方法可有效地控制活血化瘀、解毒消肿颗粒剂"宫炎康颗粒"的质量，从而保证了该颗粒制剂的临床疗效。本发明所述的活血化瘀、解毒消肿颗粒剂是这样构成的处方当归90g、赤芍90g、北败酱240g、香附(醋制)90g、炮姜90g、泽兰90g、川芎60g、红花60g、柴胡90g、海藻90g、车前子(盐灸)120g、延胡索60g。制法以上十二味，除延胡索粉碎成细粉，过筛；当归、香附、川芎、柴胡，提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与赤芍、炮姜、海藻、车前子加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，药液备用，其余北败酱、红花、泽兰三味加水煮沸后，于8(TC温浸二次，第一次加8倍量水温浸2小时，第二次加6倍量水温浸1小时，滤过，合并以上各药液，浓縮至相对密度1.321.38(506(TC)的浸膏，取全部浸膏，加入适量糊精，与上述延胡索粉混匀，加入乙醇适量，制成颗粒，干燥，加入上述当归、香附、川芎、柴胡挥发油，混匀，制成450g颗粒，即得。本发明所述的质量控制方法主要包括性状、鉴别、检査、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对颗粒剂中当归和川芎、赤芍、延胡索的薄层色谱鉴别；含量测定是对颗粒剂中赤芍所含芍药苷的含量测定。当归和川芎的鉴别方法是以当归和川芎对照品为对照，以正己烷醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂的薄层色谱鉴别法。芍药苷的鉴别方法是以芍药苷对照品为对照，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:1624:713:23为展开剂的薄层色谱鉴别法。延胡索的鉴别方法是以延胡索对照品为对照，以正己垸氯仿甲醇=510:35:0.61.5为展开剂的薄层色谱鉴别法。所述鉴别方法包括以下项目的部分或全部-(1)取本颗粒剂，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液水浴挥千，残渣加醋酸乙酯使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材适量，同法分别制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、两种对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己垸醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑占./"、，(2)取本颗粒剂，研细，加入乙醇，加热回流处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:1625:713:23为展开剂，展开，取出，晾干，喷以28%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本颗粒剂，研细，加入甲醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己垸氯仿甲醇=510:35:0.61.5为展开剂，在用展开剂预饱和的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。更具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本颗粒剂9g，研细，加入乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材各lg,同法分别制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、两种对照品溶液各510ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己垸醋酸乙酯=9:l为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本颗粒剂9g，研细，加入乙醇30ral,加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，每次25ml,合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次10ml,弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=50:20:10:2.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取本颗粒剂18g，研细，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取三次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液各5lU，分别点于同一用rfc氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=7.5:4:1为展开剂，在用展开剂预饱和l小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本颗粒剂中赤芍所含芍药苷的含量测定是以芍药苷对照品为对照，以乙腈0.1%磷酸溶液=1020:70IOO为流动相的高效液相色谱法。所述芍药苷含量测定照中国药典高效液相色谱法测定，包括以下色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=1020:70100为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备称取80'C减压干燥至恒重芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含20Ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本颗粒剂，研细，取lg，置具塞锥形瓶中，加入7TO甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，滤过，量取续滤液5ral，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；'测定法分别吸取对照品溶液10ul与供试品溶液510w1，注入液相色谱仪，测定，即得；本颗粒剂含赤芍以芍药苷(CMH280)计，不得少于5mg。所述质量控制方法包括性状本颗粒剂为棕黄色的颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取本颗粒剂，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材适量，同法分别制成对照溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、两种对照药材溶液，分别点于同—硅胶G薄层板上，以正己垸醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本颗粒剂，研细，加入乙醇，加热回流处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，弃去水液，正丁醇液蒸千，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:1624:713:23为展开剂，展开，取出，晾干，喷以28%香草醒硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取本颗粒剂，研细，加入甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=510:35:0.61.5为展开剂，在用展开剂预饱和后的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査本颗粒剂应符合中国药典颗粒剂项下有关规定；含量测定芍药苷含量测定照中国药典高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=1020:70100为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备称取8(TC减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本颗粒剂，研细，取lg，置具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液，超声处理，滤过，量取续滤液，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别吸取对照品溶液10U1与供试品溶液510H1，注入液相色谱仪，测定，即得；本颗粒剂每袋含赤芍以芍药苷(C2:,H20)计，不得少于5mg。为了确保本发明的质量控制方法科学、合理、可行，本申请人对方法中各药品的鉴别和含量测定方法进行了研究，具体试验资料如下一、当归、川芎鉴别研究此鉴别是TLC鉴别，为当归、川芎挥发油成分的鉴别，当归、川芎的挥发油中主要含有丁烯呋基内酯、蒿本内酯等共同成分，并在紫外区有一定的吸收。本方法采用缺当归的空白、缺川芎的空白及双缺空白(即按处方用量，不加当归、川芎药材，模拟样品相同的制备工艺制备)作为空白对照和当归、川芎对照分别作为对照品，以乙醇超声提取，水浴挥干，醋酸乙酯溶解作为供品试液，操作简单，易于点样；分别以正己垸-醋酸乙酯(9-1)、TE己烷-醋酸乙酯(17:3)作为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯(365nrn)下检视。缺当归的空白、缺川芎的空白对照的主斑点与样品有共同的主斑点，而双缺空白对照无此些主斑点；后一展开剂，斑点略有扩散，故采用正己烷-醋酸乙酯(9:1)。二、芍药苷的薄层鉴别研究按"宫炎康颗粒"在卫生部颁布的药品标准中药成方制剂第二十册中收载的方法对我公司连续三批生产的"宫炎康颗粒"进行鉴别实验，样品与对照品色谱斑点位置相对应，且显相同的蓝色斑点，结果与卫生部颁标准中所描述的内容一致，故此项采用卫生部颁标准。三、延胡索乙素的薄层鉴别研究参照中国药典2000年版一部收载的"元胡止痛片"中的元胡的鉴别方法，并经反复实验，结果均显示样品与对照品色谱斑点位置相对应，且显相同的荧光斑点，故确定了本颗粒中延胡索的薄层鉴别方法与"元胡止痛片"中元胡的薄层鉴别方法基本一致。四、芍药苷的含量测定研究1、含量测定成分及方法的选择赤芍为本处方主药之一，芍药苷为赤芍的主要活性成分，具有抗炎、血管扩张等药理作用，与本制剂治疗作用一致；芍药苷在生药中含量较高，且易溶于水，很容易转入水提浸膏等制剂中，故选择赤芍中芍药苷为其含量测定对象，以控制本制剂的内在质量。由于处方组成复杂，未找到合适的内标物，芍药苷含量测定按外标法进行计算，在实际含量测定中，考虑到流动相配制的误差等因素影响，采取中国药典(2000年版一部附录VID)计算供试品中芍药苷的含量。在宫炎康颗粒提高后的质量标准的基础上，对宫炎康颗粒进行了含量测定方法学研究，并拟订所述含量测定方法。2、实验仪器及试药高效液相色谱仪HP—1100series,四泵，自动混合器，VWD紫外检测器，手动进样器，HPchemstationforLC(Rev.A.06.01)数据处理器。色谱柱D0S柱(天津)；超声波清洗机波达成004型；电子分析天平梅特勒T24(1/100000)，AB-104-N(上海，1/10000);离心机台式高速离心机TGL-16G型微量进样器10ul，美国HAMITON。实验试药对照品芍药苷(购自北京中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号为0736-200015);样品宫炎康颗粒，9g/袋，铝箔内包装，纸盒外包装，四川美大康制药有限公司生产，批号080301，080302，080303;缺赤芍阴性对照由四川美大康制药有限公司提供，除缺赤芍外，处方比例与工艺模拟成品制备。流动相用水超纯水；乙腈色谱纯；磷酸分析纯，含量不少于85%。3、含量测定方法学研究(1)色谱条件与系统适用试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磯酸溶液(15:85)为流动相；检测波长为243nm。不同流动相比较实验其他实验条件不变，将乙腈-0.1%磷酸溶液(15:85)与甲醇-水(34:66)、乙腈-水-三乙胺(13:87:0.2)(磷酸调PH为2.3)两流动相进行了比较，结果，乙腈-0.1%磷酸溶液(15:85)的芍药苷峰对称性较好，半峰宽较小，保留时间适中。不同品牌色谱柱适应性实验按标准上述操作，国产柱(天津SNTEKKromasilC18(15X4.6咖，5u)和进口柱(WatersNovaPakC18(150X3.9咖，4u)均能使样品中的芍药苷峰达到基线分离，峰形对称，说明本色谱系统适应性良好。专属性考察与波长的选择在230nm处测定时缺赤芍阴性对照略有干扰，选定测定波长243nm处测定，样品色谱中芍药苷的峰能达到完全分离，缺赤芍阴性对照色谱中，在芍药苷峰处基本无干扰，故本法具备实验的专属性。(2)标准曲线的绘制精密称取芍药苷对照品适量，用35%甲醇分别配制芍药苷标准品溶液9.82、19.64、39.28、58.92、78.56ug*ml—'。分别精密取10yl注入色谱仪。以峰面积积分值对进样量(wg)进行回归，得标准曲线与回归方程Area=774.8936*Amount4.2192，r=0.9997。结果表明进样量O.09820.7856yg范围内线性关系良好。(3)提取条件的考察由于样品为水提浸膏剂制成的颗粒剂，考虑到芍药苷的溶解行为，用同一批供试品分别对提取溶剂和超声提取时间进行考察，测定结果见表l、表2。表l不同溶剂提取芍药苷测定结果(n=3)提取溶剂水50%甲醇70%甲醇甲醇含量(mg/g)1.06531.12061.14001.0019表2不同提取时间芍药苷测定结果提取时间(分钟)5101520含量(％)0.97181.13021.13451.1327提取溶剂采用水、50%甲醇、70%甲醇和甲醇的测得值无明显差异，甲醇提取多出一个紧邻芍药苷峰的杂峰，但70%甲醇提取液的不溶物较少，杂效较少；超声提取时间1020分钟的测得值较高。结论供试品中芍药苷含量测定的最佳提取条件为以70%甲醇作为提取溶剂，超声处理1020分钟。结合样品粉末的细度的影响，质量标准中规定为超声处理20分钟。(4)供试品溶液与对照品溶液稳定性考察按质量标准含量测定项下方法操作，在同一天内不同时间测定对照品(39.28ug/ml)和供试品溶液的浓度与含量见表3。表3对照品溶液和供试品溶液稳定性考察测试时间03527x土RSD(%)对照品(ug/ml)39.2838.9539.1038.6538.995±0.68供试品(mg/g)1.09891.07581.10061.08921.0911±1.04试验结果表明对照品和供试品溶液在室温条件下放置27小时，芍药苷的浓度没有明显改变。在实验中也曾发现对照品溶液在冰箱中保存一个月，其浓度基本不变。(5)精密度试验对照品溶液(39.28yg/ml)10"l和供试品溶液10ul连续5次进样，RSD分别为2.42《和2.15%(见表4)。依据试验结果表明，进样精密度好。表4精密度试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(6)重复性试验对同一批供试品(批号000701)按质量标准中含量测定项下的方法，进行5次平行测定，结果见表5，该方法重复性好。表5重复性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(7)样品加样回收试验取供试品约0.55g，精密称定，加入芍药苷适量，按质量标准含量测定项下方法操作测定回收率，结果见表6。依据试验结果表明，该方法的回收率好。表6样品加样回收率试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(8)三批样品的含量按质量标准中芍药苷含量测定项下方法测定三批样品，其结果见表7。根据测定结果与生药来源及生产具体情况，标准中规定宫炎康颗粒中芍药苷的含量为每袋不少于5mg。表7三批宫炎康颗粒中芍药苷含量测定结果批号测定值(mg/袋)(1)(2)平均值(mg/袋)0803010803020803035.86135.71925.72015.90905.60675.60585.88525.66305.6630具体实施例方式实施例一本活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法包括处方当归90g、赤芍90g、北败酱240g、香附(醋制)90g、炮姜90g、泽兰90g、川芎60g、红花60g、柴胡90g、海藻90g、车前子(盐灸)120g、延胡索60g。制法以上十二味，除延胡索粉碎成细粉，过筛；当归、香附、川芎、柴胡，提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与赤芍、炮姜、海藻、车前子加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，药液备用，其余北败酱、红花、泽兰三味加水煮沸后，于8(TC温浸二次，第一次加8倍量水温浸2小时，第二次加6倍量水温浸1小时，滤过，合并以上各药液，浓缩至相对密度1.321.38(506(TC)的浸膏，取全部浸膏，加入适量糊精，与上述延胡索粉混匀，加入乙醇适量，制成颗粒，干燥，加入上述当归、香附、川芎、柴胡挥发油，混匀，制成450g颗粒，即得。性状本品为棕黄色的颗粒；味甜、微苦。鉴别(1)取本品9g,研细，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使其溶解，作为供试品溶液另分别取当归、川芎对照药材各lg，同法分别制成对照药材溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、当归对照药材溶液、川芎对照药材溶液各510nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以iF.己烷醋酸乙酯=9:l的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品9g，研细，加入乙醇30ml,加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提分别取两次，每次25ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水分别洗涤两次，每次10ml,弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、芍药苷对照品溶液各4yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=50:20:10:2.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。—(3)取本品18g，研细，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚分别提取三次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、延胡索对照药材溶液各5yl，分别点于同一用W氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=7.5:4:l为展开剂，在用展开剂预饱和l小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査本品应符合颗粒剂项下有关规定(中国药典一部附录IC)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=15:85为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500。对照品溶液的制备精密称取在80'C减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，力1]35%甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入7(m甲醇溶液25m1,超声处理20分钟，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10ixl与供试品溶液510u1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每袋含赤芍以芍药苷(aAsO,,)计，不得少于5mg。功能与主治活血化瘀，解毒消肿；用于慢性盆腔炎。用法与用量开水冲服，一次9g，一日2次。规格每袋装9g。贮藏密封。实施例二本活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法包括处方制法同实施例一。性状本品为棕黄色的颗粒；味甜、微苦。鉴别(1)取本品9g，研细，加入乙醇30ml,加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，每次25ml,合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次10ml,弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各4yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=58:22:12:2.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以7%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取本品18g，研细，加入甲醇50ml,超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取三次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各5yL,分别点于同一用W氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=9:5:1.2为展开剂，在用展开剂预饱和l小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査本品应符合颗粒剂项下有关规定(中国药典一部附录IC)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=19:95为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备精密称取80'C减压干燥至恒重芍药苷对照品适量，加35%甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取lg,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入7(^甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，滤过，精密量取续滤液5inl，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液10nl与供试品溶液约8li1，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每袋含赤芍以芍药苷(C23H2S0)计，不得少于5mg。功能与主治活血化瘀，解毒消肿；用于慢性盆腔炎。用法与用量开水冲服，一次9g，一日2次。规格每袋装9g。贮藏密封。实施例三本活血化瘀、解毒消肿颗粒制剂的质量控制方法包括处方制法同实施例一。性状本制剂为棕黄色的颗粒；味甜、微苦。鉴别U)取本制剂或其内容物9g，研细，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材适量，同法分别制成对照溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、两种对照药材溶液各510uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷醋酸乙酯=9:l的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本制剂或其内容物9g，研细，加入乙醇30ml，加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提分别取两次，每次25ml,合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水分别洗涤两次，每次10ml,弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各4"L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=45:22-12:2.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以18%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑卓清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取本制剂或其内容物18g，研细，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚分别提取三次，每次10ml,合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典一部附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各5ixl，分别点于同一用1W氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己垸氯仿甲醇=8:5:1.3为展开剂，在用展开剂预饱和1小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査本品应符合颗粒剂项下有关规定(中国药典一部附录IC)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂乙腈0.1%磷酸溶液=16:82为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备精密称取8(TC减压干燥至恒重芍药苷对照品适量，力[335%甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取本制剂装量差异项下的本品，研细，取lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入709i甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，滤过，精密量取续滤液5ral，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液lOiil与供试品溶液510u1，注入液相色谱仪，测定，即得。本制剂每袋含赤芍以芍药苷(C2晶A,)计，不得少于5mg。功能与主治活血化瘀，解毒消肿；用于慢性盆腔炎。用法与用量开水冲服，一次9g，一日2次。规格每袋装9g。贮藏密封。采用以上实施例一的质量控制方法，将更容易控制这种制剂的质量，更有利于保证该药物的临床疗效。权利要求1.一种活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，所述颗粒剂由当归、赤芍、北败酱、醋制香附、炮姜、泽兰、川芎、红花、柴胡、海藻、盐灸车前子、延胡索制备而成，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对颗粒剂中当归和川芎、赤芍、延胡索的薄层色谱鉴别；含量测定是对颗粒剂中赤芍所含芍药苷的含量测定。2.根据权利要求l所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于当归和川芎的鉴别方法是分别以当归和川芎的对照药材为对照，以正己烷醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂的薄层色谱鉴别法。3.根据权利要求l所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于芍药苷的鉴别方法是以芍药苷对照品为对照，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:1624:713:23为展开剂的薄层色谱鉴别法。4.根据权利要求l所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于延胡索的鉴别方法是以延胡索对照药材为对照，以正己烷氯仿甲醇=510:35:0.61.5为展开剂的薄层色谱鉴别法。5.根据权利要求l、2、3或4所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于所述鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本颗粒剂，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材适量，同法分别制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、两种对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本颗粒剂，研细，加入乙醇，加热回流处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:16~25:7~13:23为展开剂，展开，取出，晾干，喷以28%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰;.供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点(3)取本颗粒剂，研细，加入甲醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇410:35:0.61.5为展开剂，在用展开剂预饱和的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。6.根据权利要求5所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于更具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本颗粒剂9g,研细，加入乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材各lg，同法分别制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、两种对照品溶液各510ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷醋酸乙酯=9:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本颗粒剂9g,研细，加入乙醇30ml,加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，每次25ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱、法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液各4iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=50:20:10:2.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本颗粒剂18g，研细，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取三次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液各5P1，分别点于同一用W氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=7.5:4:l为展开剂，在用展开剂预饱和l小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。7.根据权利要求l所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于赤芍所含芍药苷的含量测定是以芍药苷对照品为对照，以乙腈0.1%磷酸溶液=1020:70ioo为流动相的高效液相色谱法。8.根据权利要求1或7所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于所述芍药苷含量测定照中国药典高效液相色谱法测定，包括以下色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=10~20:70100为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备称取80。C减压干燥至恒重的芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含20Pg的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本颗粒剂，研细，取0.5g,置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，滤过，量取续滤液5ni1，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别吸取对照品溶液10ul与供试品溶液510y1，注入液相色谱仪，测定，即得；本颗粒剂含赤芍以芍药苷计，不得少于5mg。9.根据权利要求l所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状本颗粒剂为棕黄色的颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取本颗粒剂，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材适量，同法分别制成对照溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、两种对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己垸醋酸乙酯=612:0.51.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本颗粒剂，研细，加入乙醇，加热回流处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=4060:1624:7~13:23为展开剂，展开，取出，晾干，喷以28%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本颗粒剂，研细，加入甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使其溶解，用浓氨试液调PH至8，用乙醚提取，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材适量，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=510:35:0.61.5为展开剂，在用展开剂预饱和后的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本颗粒剂应符合中国药典颗粒剂项下有关规定；含量测定芍药苷含量测定照中国药典高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=1020:70100为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备称取80'C减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每lml含20Ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本颗粒剂，研细，取0.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液，超声处理，滤过，量取续滤液，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别吸取对照品溶液10lil与供试品溶液510ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本颗粒剂每袋含赤芍以芍药苷计，不得少于5mg。10.根据权利要求9所述活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括-性状本颗粒剂为棕黄色的颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取本颗粒剂9g，研细，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液水浴挥干，残渣加醋酸乙酯O.5ml使其溶解，作为供试品溶液；另分别取当归、川芎对照药材各lg,同法分别制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、两种对照品溶液各510uL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己垸醋酸乙酯=9:l为展开剂，展开，取出，晾干，置365ran紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本颗粒剂9g，研细，加入乙醇30ml，加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用水饱和的正丁醇提取两次，每次25ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次10ml,弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各4nL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯浓氨试液=50:20:10:2.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本颗粒剂18g，研细，加入甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使其溶解，用浓氨试液调至PH至8，用乙醚提取三次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使其溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照中国药典薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液、对照品溶液各5yl，分别点于同一用W氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷氯仿甲醇=7.5:4:l为展开剂，在用展开剂预饱和l小时的展开缸内展开，取出，晾干，以碘蒸汽熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本颗粒剂应符合中国药典颗粒剂项下有关规定；含量测定照中国药典高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈0.1%磷酸溶液=15:85为流动相；检测波长为243nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备精密称取在80'C减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，力B35呢甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本颗粒，研细，取().5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入7(^甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中加水至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液10nl与供试品溶液510nl，注入液相色谱仪，测定，即得；本颗粒剂每袋含赤芍以芍药苷计，不得少于5mg。全文摘要本发明公开一种活血化瘀、解毒消肿颗粒剂的质量控制方法。该质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定项目中的部分或全部；所述鉴别包括对颗粒制剂中当归和川芎、赤芍所含芍药苷、延胡索的薄层色谱鉴别；含量测定是对颗粒剂中赤芍所含芍药苷的含量测定。本发明是针对原有“宫炎康颗粒”质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，对颗粒制剂的质量控制方法进行了研究，拟订了对制剂中当归和川芎、赤芍所含芍药苷、延胡索的薄层色谱鉴别，以及对制剂中赤芍所含芍药苷的含量测定，提高了活血化瘀、解毒消肿颗粒剂药物的质量控制标准，该质量标准中的控制方法可有效地控制宫炎康颗粒的质量，从而保证了该药物的临床疗效。文档编号A61P15/00GK101352565SQ200810046038公开日2009年1月28日申请日期2008年9月9日优先权日2008年9月9日发明者刘云龙,彦李申请人:四川美大康药业股份有限公司