专利名称：：用于升高的脑钠肽的雷诺嗪的制作方法
技术领域：
：本发明涉及鉴定哺乳动物患者血浆中的利钠肽，例如脑钠肽(或脑型利钠肽，BNP)和N-末端脑钠肽原(NT-proBNP)的水平，如果BNP的水平升高，则对该患者给予雷诺嗪。本发明还涉及用于减少在血浆BNP大于约80pg/mL的患者中的有害冠脉事件的风险的方法，这样的事件包括但不限于冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等，该方法包括给予雷诺嗪。
背景技术：
：利钠肽系统由结构上类似的利钠肽组成，这些利钠肽通过促进钠离子从血液中的排出来补偿体积和压力的改变。在患有冠脉疾病的患者中会发现高水平的动脉利钠肽(ANP,心房利钠肽)和BNP。临床研究已经表明，测试高水平的BNP或NT-proBNP可以便于心脏衰竭的诊断并且通过生物标记来证实增加的风险。Persson等人，“DiastolicDysfunctioninHeartFailurewithPreservedSystolicFunction:NeedforObjectEvidence，，JACC，49(6):687_694(2007)；Bibbins-Domingo等人，“N-TerminalFragmentoftheProhormoneBrain-TypeNatriureticPeptide(NT-proBNP),CardiovascularEvents,andMortalityinPatientswithStableCoronaryHeartDisease，，JAMA,297(2)169-176(2007)。雷诺嗪是一种新近发现的‘抑制剂，在美国其现在可以以用于心绞痛的商标名为Ranexa而购得，其适用于以诸如压缩片剂之类的口服剂(量)的形式或静脉剂量的形式来递送。美国专利第4，567，264号披露了雷诺嗪，S卩(士)_N_(2，6_二甲基苯基)_4_[2_羟基-3-(2-甲氧基苯氧基)-丙基]-1-哌嗪乙酰胺，及其药用盐，以及它们在治疗心血管疾病中的应用，包括心律失常、变异型心绞痛和运动诱发的心绞痛，以及心肌梗塞，其全部内容结合于本文作为参考。雷诺嗪的二盐酸盐形式由下式表示美国专利第5，506,229号披露了雷诺嗪及其药用盐和酯用于治疗经受物理或化学损伤的组织的应用，包括心脏停搏、心脏或骨骼肌或脑组织的缺氧损伤或再灌注损伤，以及在移植中的应用，其全部披露内容以引用方式结合于本文作为参考。披露了口服制剂和肠胃外制剂，包括控释制剂。尤其是，美国专利第5，506，229号中的实施例7D描述了胶囊形式的控释制剂，其中包含涂覆有控释聚合物的雷诺嗪微球和微晶纤维素。该专利还披露了IV雷诺嗪制剂，其最少包含5mg雷诺嗪/毫升IV溶液，该IV溶液含有以重量计约5%的葡萄糖。目前优选的雷诺嗪及其药用盐的给药途径是口服给药。一种典型的口服剂型是压缩的片剂，其是一种填充有粉末混合物或颗粒的硬质明胶胶囊，或者是一种填充有溶液或悬浮液的软质明胶胶囊(软胶囊)。美国专利第5，472，707号披露了一种采用过冷液态雷诺嗪作为硬质明胶胶囊或软胶囊的填充溶液的高剂量口服制剂，其全部披露内容以引用方式结合于本文作为参考。美国专利申请公开第2006/0177502号披露了一种口服持续释放剂型，其中含有的雷诺嗪的量为35-50%，优选40-45%，其全部披露内容以引用方式结合于本文作为参考。在一种实施方式中，本发明的雷诺嗪持续释放制剂包括PH依赖型粘结剂；pH非依赖型粘结剂；以及一种或多种药用赋形剂。适合的PH依赖型粘结剂包括，但不限于，甲基丙烯酸共聚物，例如与强碱(例如氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化铵)部分中和的Eudragit(EudragitLI100-55、EudragitL100-55的假胶乳等)，该强碱的用量为足以中和该甲基丙烯酸共聚物的量，达到约1_20%，例如约3-6%。适合的pH非依赖型粘结剂包括，但不限于，羟丙基甲基纤维素(HPMC)，例如MethocelE10MPremiumCR级HPMC或MethocelE4MPremiumHPMC。适合的药用赋形剂包括硬脂酸镁和微晶纤维素(AvicelpHIOI)。
发明内容人们已经发现，雷诺嗪，一种新近发现的lNa抑制剂，能够减少在表现出利钠肽水平升高的患者中有害冠脉事件发生的风险，这样的事件包括冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等。通过鉴定患有冠脉疾病的患者体内的BNP水平，并且，如果该BNP水平为约80pg/mL或更大，则发现给予雷诺嗪减少在这样的患者体中发生有害的冠脉事件的风险。此外，人们发现通过对BNP水平为约80pg/mL或更大的患者给予雷诺嗪，能够减少与舒张期功能障碍和/或急性冠脉综合征有关的有害冠脉事件的发生。本发明的一种实施方式涉及减少在血浆和/心脏组织中表现出利钠肽水平升高的患者中的有害冠脉事件发生的风险的方法，这样的事件包括但不限于，冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等，该方法包含识别表现出利钠肽水平升高的患者；以及对该患者给予治疗有效量的雷诺嗪。雷诺嗪可以通过口服剂(量)给予或者作为IV溶液给予。在有些情况下，可以在给予患者IV溶液后再给予口服剂。优选地，当以口服剂的方式给予时，以持续释放片剂的形式给予雷诺嗪。在一种实施方式中，高水平的利钠肽与患有疾病的患者中的有害冠脉事件的较高5风险有关，这样的事件包括，但不限于，冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等。在一种实施方式中，利钠肽是BNP或NT-proBNP，而高水平是约80皮克或更多的利钠肽/ml血液。在另一种实施方式中，本发明涉及包含检测哺乳动物患者的血浆和/或心脏组织中的利钠肽水平的测试以及雷诺嗪的药物剂量(pharmaceuticaldosage，药用配剂)的成套的试剂盒。该药物剂量可以是IV溶液和/或口服剂(oraldose，口服剂量)的形式。口服剂可以是一种或多种持续释放片剂的形式。图1示出了对呈BNP阳性的患者给予安慰剂(曲线A)，对呈BNP阳性的患者给予雷诺嗪(曲线B)，或对呈BNP阴性的患者给予安慰剂或雷诺嗪(2条曲线C)的心血管死亡、心肌梗塞、或再发性局部缺血的累积发生率(％)与随机选择的天数(daysfromrandomization)具体实施例方式如上所述，本发明涉及在表现高水平利钠肽的患者中减少有害冠脉事件的风险的方法，这样的事件包括，但不限于，冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等，所述方法包括对这些患者给予雷诺嗪。然而，在更加详细地描述本发明之前，首先要定义以下术语。1、定义在本说明书和所附的权利要求书中，将涉及许多应被限定为具有以下含义的术语。术语“利钠肽”是指导致尿钠排泄增多(即尿液中排泄过多量的钠)的肽。禾IJ钠肽是由心脏和脉管系统产生的A型利钠肽(或“ANP”)主要由心房的心肌层响应于扩张而分泌。B型利钠肽(或“BNP”)主要是由心室的心肌层产生的。C型利钠肽(或“CNP”)是由沿血管排列的内皮细胞产生的。优选地，利钠肽是“BNP”和“NT-proBNP”。二者均是由在心室中合成的108个氨基酸前体形式得到的。响应于压力负载，该前体断裂为BNP(32个氨基酸)和NT-proBNP(78个氨基酸)。释放到循环系统中之后，BNP作为系统血管舒张剂和利尿剂而起到稳定体内环境的作用。NT-proBNP作为副产物产生。BNP的半衰期比NT-proBNP短，这对于实验室制药而言是特别感兴趣的。因此，BNP在较快的时程上波动(变动)，而NT-proBNP则在血液样品中保持更加稳定。可以利用以下所述的可商购的检测方法来测定BNP和NT-proBNP的水平。“高水平的利钠肽”是指患者体内的未来发生有害冠脉事件的预兆性的内源性利钠肽的浓度。例如，在BNP的情况下，高水平是指约80皮克(pg)或更多的利钠肽/毫升血液，优选100皮克或更多的利钠肽/毫升血液。在另一个实例中，BNP浓度为约100至约300皮克利钠肽/毫升血液之间。在另一个实例中，BNP浓度为约300至约600皮克利钠肽/毫升血液之间。在另一个实例中，BNP浓度为约600至约900皮克利钠肽/毫升血液之间。在另一个实例中，BNP浓度为大于约900皮克利钠肽/毫升血液。已经发现，确定冠脉疾病患者体内的高水平利钠肽并对该患者给予雷诺嗪，减小了该患者未来发生有害冠脉事件的风险。“有害冠脉事件”或“有害心脏事件”是指由于冠脉疾病或心脏疾病导致的患者冠脉性能的非增量下降(non-incrementaldecrease)，这样的事件与发病率或住院(率)有关。这样的有害冠脉/心脏事件包括，例如，冠状动脉疾病(“CAD”)、心血管死亡(⑶)、心肌梗塞(Ml)、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血(RI)、急性冠脉综合征(ACS)、舒张期功能障碍等。“雷诺嗪”为化合物(士)-N_(2，6-二甲基苯基)-4-[2_羟基-3-(2_甲氧基苯氧基)丙基]-1-哌嗪乙酰胺及其药用盐，以及它们的混合物。除非另外说明，本说明书和实施例中所使用的雷诺嗪的血浆浓度是指雷诺嗪游离碱。当PH约为4时，在用氯化氢滴定的水溶液中，雷诺嗪以其二盐酸盐的形式大量存在。“生理学可接受的pH”是指相容于递送到人类患者体内的静脉输注溶液的pH。优选地，生理学可接受的pH的范围为约4到约8.5的范围，并优选大约4至7。不受到任何理论的束缚，使用PH为大约4至6的静脉输注溶液被认为是生理学可接受的，因为体内大量血液有效地缓冲了这些静脉输注溶液。“冠脉疾病”或“心血管疾病”是指由例如心脏衰竭，包括充血性心脏衰竭、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、心肌梗塞、心律失常、心绞痛(包括运动诱发的心绞痛、变异型心绞痛、稳定心绞痛、不稳定心绞痛)、急性冠脉综合征、糖尿病以及间歇性跛行中的任一种或多于一种引起的心血管疾病。不同的美国专利和专利申请披露了这样的疾病的治疗，包括美国专利第6，503，911号和第6，528，511号，美国专利申请序列号第2003/0220344号和第2004/0063717号，它们的全部披露内容以引用方式结合于本文作为参考。“急性冠脉综合征”或“ACS”是指一系列急性心肌缺血状态。其包括不稳定心绞痛和非ST段抬高性心肌梗塞(UA/NSTEMI)，以及ST段抬高性心肌梗塞(STEMI)。术语“舒张期功能障碍”是指且特征为舒张期填充压增加，其可能是发生呼吸困难的原因。这种症状会在运动过程中(“隐性(latent，或潜在的)”的舒张期功能障碍)或者也可能在休息时(“显性”的舒张期功能障碍)出现。“可选的”或“可选地”意指随后描述的事件或状况可以发生或不发生，并且该描述包括该事件或状况发生的情况和其不发生的情况。例如，“可选的药用赋形剂”是指除了那些明确指出存在的，所描述的制剂可以包括药用赋形剂也可以不包括药用赋形剂，并且所述的该制剂包括存在可选的赋形剂的情况和不存在赋形剂的情况。“治疗”和“处理”是指对患者的任何疾病的治疗，包括使易患病但还未诊断出已经患病的患者避免患病；抑制疾病，即，阻止疾病的进一步发展；抑制疾病的症状；缓解疾病，即，使疾病消退，或减轻疾病的症状。“患者”是哺乳动物，优选人。术语“治疗有效量”是指如上文所限定的，当对需要这样的治疗的哺乳动物给予雷诺嗪时，足以进行有效治疗的雷诺嗪的量。治疗有效量将根据受治疗者以及所治疗的疾病状况、受治疗者的体重和年龄、疾病状况的严重程度、给药方式等而不同，本领域普通技术7人员能够容易地确定治疗有效量。“立即释放”(“IR”)是指在体外迅速溶解并且预计会在胃和上胃肠道中完全溶解和吸收的制剂或剂量单位。一般而言，这样的制剂在给药的30分钟内释放至少90%的活性成分。“持续释放”(“SR”)是指本文中所使用的在6小时或更长的时间内在胃和胃肠道中缓慢并持续溶解和吸收的制剂或剂量单位。优选的持续释放制剂是如下文所述的表现适合用于每天给药不超过两次，每次给予两片或少于两片的雷诺嗪血浆浓度的持续释放制剂。“静脉输液(IV输(注)液，intravenousinfusion)”或“静脉给药”是指本文中所使用的通过静脉途径对患者给药的溶液或剂量单位。为了使患者的心血管病症稳定化，可以为患者提供这样的IV输(注)液直至长达约96小时。递送IV输(注)液的方法和时间是接受过医学训练的医务工作者的常规技能。2、本发明的方法在患有冠脉疾病(例如心脏衰竭)的患者中，人们认为心脏体积增加和心脏中的压力增加会导致利钠肽水平升高。如上所述，本发明涉及一种确定哺乳动物患者血浆中的利钠肽水平的方法，所述利钠肽例如是脑钠肽(BNP)和N-末端脑钠肽原(NT-proBNP)，如果BNP的水平升高，则对该患者给予雷诺嗪。本发明还涉及用于减少在血浆BNP水平大于约80pg/mL或更高的患者中的有害冠脉事件的风险的方法，包括给予雷诺嗪，这样的事件包括，但不限于，冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等。在本发明的第一步骤中，确定具有高水平的利钠肽的患者。优选地，测量BNP和/或NT-proBNP的水平。优选地，测量NT-proBNP水平，因为其倾向于具有较长的血浆半衰期并且其体外稳定性优于化学激活的BNP。由于对肽的测量通常出现在企业为患者提供的健康保健中，因此其可以在医院、医生的诊所或其他适合的环境中进行。通常，在抽取5cc和25cc血液之前，会要求患者休息10至15分钟。对于大多数的利钠肽测量，将血液置于一个装有螯合剂(例如EDTA)的试管中，然后在低于室温的温度下进行离心。然后分离出血浆并进行免疫测定。该测定提供了与血浆中利钠肽浓度有关的数据。如果患者表现出如上文所述的高水平的利钠肽，则该患者适合于本发明的治疗方法。对于心脏衰竭，以下的一览表代表性地示出了患者心脏状况的严重程度BNP水平低于100pg/mL表示没有或几乎没有心脏衰竭的风险。BNP水平为100_300pg/mL暗示了存在心脏衰竭的风险。BNP水平高于300pg/mL表示轻微心脏衰竭的风险。BNP水平高于600pg/mL表示中度心脏衰竭的风险。BNP水平高于900pg/mL表示重度心脏衰竭的风险。本领域技术人员可以实施多种测试来测量这些水平。例如，能够迅速测量出BNP水平的ElecsysproBNP(Roche，巴塞尔，瑞士)测试。测定法的另一个实例是能够迅速测量出BNP7jC平的ADVIACentaurBNPAssay(BayerDiagnosticsCorporation,Tarrytown，纽约)。BNP测定的另一个实例是TriageBNPTest(BiositeInc.，圣地亚哥，加利福尼亚)。在确定具有升高水平的利钠肽的患者之后，临床医生能够根据以下的详述给予雷诺嗪。3、本发明的组合物如上文所述，本发明的方法采用雷诺嗪的IV溶液和/或雷诺嗪的口服剂(量)。这些制剂均将在下文中进行详述。口服剂在一种实施方式中，以口服剂(量)给予雷诺嗪。在一种实施方式中，雷诺嗪的口服制剂是片剂。该片剂可以被配制成立即释放片剂或持续释放片剂。在一种实施方式中，雷诺嗪片剂中含有高达约750mg雷诺嗪。在另一种实施方式中，雷诺嗪片剂中含有高达约lOOmg雷诺嗪。在一种优选实施方式中，雷诺嗪片剂中是375mg雷诺嗪，和/或500mg雷诺嗪。在另一种优选实施方式中，雷诺嗪片剂是约250mg雷诺嗪。美国专利第6，303，607号和美国公开第2003/0220344号中已经全面论述了雷诺嗪口服制剂，其全部披露内容以引用方式结合于本文作为参考。为了使血浆雷诺嗪水平维持高于阈值治疗水平且低于最大耐受水平，本发明的口服持续释放雷诺嗪制剂在24小时内给予一次、两次或三次，其中患者体内的血浆水平优选为约550至约7500ng碱/mL。在一种优选实施方式中，患者体内的雷诺嗪血浆水平的范围为约1500至约3500ng碱/mL。为了达到优选的血浆雷诺嗪水平，优选每天给予本文中所述的口服雷诺嗪剂量形式一次或两次。如果每天给予该剂量形式两次，则优选间隔约12小时给予该口服雷诺嗪剂量形式。除了以控制血浆雷诺嗪水平的方式配制和给予本发明的口服持续释放剂量形式之外，使峰值和谷值血浆雷诺嗪水平的差最小化也是很重要的。峰值血浆雷诺嗪水平通常会在最初摄入该剂量形式之后约30分钟至8小时或更长的时间达到，而谷值血浆雷诺嗪水平会在大约摄入下一预定时间的剂量形式时达到。优选以使得峰值雷诺嗪水平不超过谷值雷诺嗪水平的8倍的方式给予本发明的持续释放剂量形式，优选不超过谷值雷诺嗪水平的4倍，优选不超过谷值雷诺嗪水平的3倍，以及最优选不超过谷值雷诺嗪水平的2倍。本发明的持续释放雷诺嗪制剂提供了当容许最多每天给药两次时使雷诺嗪血浆浓度变化最小的治疗优势。该制剂可以单独给予，或如果需要迅速达到治疗有效的雷诺嗪血浆浓度时(至少在开始时)可与立即释放的制剂组合给药或通过可溶解IV制剂和口服剂(量)形式给药。静脉输注溶液一方面，本发明采用包含所选浓度的雷诺嗪的静脉输注溶液(IV溶液，intravenoussolution)。具体地，该IV溶液优选包含约1.5至约3.Omg的雷诺嗪/毫升药用水溶液，更优选包含约1.8至约2.2mg,以及更优选约2mg。为了使雷诺嗪迅速通过静脉流入到患者体内，IV溶液优选不含有包括例如丙二醇或聚乙二醇(例如聚乙二醇400)之类的粘稠组分。可以理解，本发明的静脉输注制剂中可以含有不会实质上改变粘度的较少量粘稠组分。在一种尤其优选的实施方式中，IV溶液在20°C时的粘度优选小于lOcStkentistokes，厘司)，更优选在20°C时的粘度小于5cSt，并且更优选在20°C时的粘度小于2cSt。在一种实施方式中，该IV溶液包含约1.5至约3.Omg的雷诺嗪/mLIV溶液；以及约4.8至约5.0重量百分比的葡萄糖或约0.8至约1.0重量百分比的氯化钠。在一种实施方式中，该IV溶液包含约1.8至约2.2mg的雷诺嗪/mLIV溶液；以及约4.8至约5.0重量百分比的葡萄糖或约0.8至约1.0重量百分比的氯化钠。在一种实施方式中，本发明的IV溶液包含约2mg的雷诺嗪/mLIV溶液；以及(要么)约4.8至约5.0重量百分比的葡萄糖或(要么)约0.9重量百分比的氯化钠。本文所述的IV溶液能够由包含单独使用递送的20mL容器的储存溶液来制备，该容器中包含浓度为约25mg/mL的雷诺嗪无菌水溶液；约36mg/mL葡萄糖一水合物或约0.9重量百分比的氯化钠；并且PH约为4。出人意料的是，储存溶液中采用这样高浓度的雷诺嗪和葡萄糖一水合物或雷诺嗪和氯化钠提供了稳定的且具有足够半衰期的组合物，优选半衰期为大于6个月。实施例1和实施例2中描述了用于制备储存溶液的示例性方法。在一般情况下，将两支本文所述的20mL容器内含物注入到装有460mL无菌盐水(0.9重量百分比)的氯化钠)或葡萄糖水溶液(含有5重量百分比的葡萄糖一水合物的水)的IV容器中，以提供维持生理学可接受pH的约2mg/mL雷诺嗪的IV溶液。这里使用的容器(container)包括，但不限于，药瓶、注射瓶(yringe)、瓶、IV袋等。在另一种实施方式中，在使用前用无菌稀释剂来稀释如上文中所述的静脉输注制剂。在一种实施方式中，该无菌稀释剂为5%葡萄糖或0.9重量百分比的盐溶液。在一种实施方式中，在无菌稀释剂的袋中进一步稀释该静脉输注制剂。4、本发明的试剂盒本发明的一个方面涉及一种包含检测高水平的利钠肽的测试以及雷诺嗪的药物剂量的成套的(套装)试剂盒。该测试可以是上文所述的任何测试。雷诺嗪的药物剂量可以是IV溶液的形式或口服剂形式或二者。可将IV溶液包装成如上文所述的容器。口服剂优选为一片或两片如上文所述的压缩片剂。实施例除非另外限定，实施例中使用以下的定义。微米CC=立方厘米EDTA=乙二胺四乙酸g=克mg=毫克mL=毫升mm=毫米N=正常rpm=每分钟的转数实施例1制备雷诺嗪的IV溶液的方法20-mL雷诺嗪注射液的1型弗林特(flint)药瓶被装注以递送20mL(以1、5、或25mg/mL的雷诺嗪浓度)。组成雷诺嗪葡萄糖一水合物盐酸氢氧化钠注射用水容器/封闭系统药瓶1型Flint瓶，20-cc，20-mm磨光塞子橡胶，20-mm，West4432/50，灰色丁基橡胶，涂有特氟龙密封件铝，20-mm，掀盖式外封套(flip-topoversea)制造方法雷诺嗪的静脉输注制剂是通过以下的无菌灌装工艺制造的。在适合的容器中，将所需量葡萄糖一水合物溶解于占最终批料(batch)重量的约78%的注射用水(WFI)中。持续搅拌，边搅拌边将所需量的雷诺嗪加入到该葡萄糖溶液中。为了促进雷诺嗪的溶解，用0.1N或1.ON的HC1溶液将溶液的pH调至3.88-3.92的目标范围内。另外，可以利用1N的NaOH将溶液的pH进一步调至3.88-3.92的目标范围内。待雷诺嗪溶解之后，用WFI将该批料调整至最终的重量。在确认满足工艺中的(in-process)技术要求之后，使配制的雷诺嗪批量溶液通过两个0.2ym的无菌过滤器以通过无菌过滤对其进行灭菌。接着，将配制的雷诺嗪批量溶液无菌灌装到无菌玻璃药瓶中并用无菌塞子无菌地塞住。然后用清洁的掀盖铝外封套将被塞住的药瓶密封。然后，该药瓶通过最终的检验。0099]实施例20100]制备雷诺嗪的IV溶液的方法0101]20-mL雷诺嗪注射液的1型flint药瓶被装注以递送20mL(浓度为25mg/mL)0102]组成0103]雷诺嗪25.0mg/mL0104]葡萄糖一水合物36.0mg/mL0105]盐酸pH调至3.3-4.70106]注射用水适量0107]容器/封闭系统0108]药瓶1型药管(tubing)，未处理,20-mL,20-mm磨0109]光0110]塞子橡胶，20--mm,West4432/50，灰色丁基橡胶0111]密封件铝，20-mm,蓝色掀盖式外封套0112]制造方法0113]以最终批料重量的约90%将注射用水(WFI)装入适合的容器中。将所需量1.0、5.0、25.0mg/mL55.0、52.0、36.0mg/mL适量pH调至4.0士0.2适量pH调至4.0士0.2适量1190-95%的5NHCl加入到该配制容器中。持续搅拌，边搅拌边缓慢加入所需量的雷诺嗪，之后向该雷诺嗪溶液中加入葡萄糖一水合物。为了使雷诺嗪增溶，用5N的HCl溶液将溶液的PH调至3.9-4.1的目标范围。随后用WFI将批料调节至最终的重量。在确认满足工艺中的技术要求之后，使配制的雷诺嗪批量溶液通过两个备用的0.22μm的无菌过滤器以对其进行过滤灭菌。然后，将配制的无菌雷诺嗪批量溶液无菌灌装到20mL的无菌/去热原药瓶中并用无菌/去热原塞子无菌地塞住。用清洁的掀盖铝外封套将被塞住的药瓶密封。通过有效的定期灭菌循环在121.1°C对该密封的药瓶最后灭菌30分钟。在最后的灭菌处理之后，对该药瓶进行检验。为了防止药品见光，将药瓶单独包装在纸板盒中。实施例3持续释放片剂的制备方法本发明中采用的雷诺嗪的一种持续释放制剂包括PH依赖型粘结剂和非PH依赖型粘结剂。这种制剂是通过将雷诺嗪(7500g)、EudragitL100-55(IOOOg)、羟丙基甲基纤维素(MethocelE5-来源)(200g)、以及微晶纤维素(Avicel)(I060g)直接混合而制备的。将混合的粉末与氢氧化钠(40g)水(1900至2500g)溶液一起造粒。将(所得)颗粒干燥并过筛，与硬脂酸镁(200g)混合，并被例如压制成称重667mg的片剂以达到每片的剂量为500mg的雷诺嗪游离碱。该片剂在24英寸的Accelacota圆筒形浅盘涂覆机中被喷雾涂覆OPADRY膜涂层溶液至增重2-4%。可从Colorcon(WestPoint,PA)获得具有各种颜色的OPADRY膜涂层溶液。用于制备这种制剂的分步式过程如下a)利用适当的混合器将雷诺嗪、微晶纤维素、甲基丙烯烯酸(酯)共聚物(C型)以及羟丙基甲基纤维素混合在一起。b)将氢氧化钠溶解于纯净水中。c)利用适当的造粒设备将氢氧化钠溶液缓慢加入到该混合物中并持续混合。如果必要的话，进一步加入等分部分的水(aliquotofwater)0d)持续混合以使其继续结块(massing)。如果必要的话，进一步加入等分部分的水。e)在流化床干燥器中对颗粒进行干燥。f)通过适当的研磨机使该干燥的颗粒过筛。g)向经过过筛的颗粒中加入硬脂酸镁并混合在一起。h)如果需要，使该颗粒状材料通过压片机。i)利用适当尺寸的工具将颗粒压制成片剂。j)将OPADRY粉分散在水中并利用适当尺寸的涂覆设备进行覆膜至以重量计2-4%的通常水平。k)利用通常水平为以重量计0.002-0.003%的棕榈蜡进行抛光。实施例4高水平BNP的确定让患者坐着或躺着休息10-15分钟。抽取IOmL等分试样的血并置于含有EDTA的试管中。在约0°C至约10°C以约1，000至2，OOOrpm对试样进行离心。然后除去血浆并在Elecsys2010(RocheDiagnostics,巴塞尔，瑞士)上利用ElecsysproBNP夹心免疫测定进行检测。小于约100pg/mL的水平暗示不存在或几乎不存在心脏衰竭的风险。水平在100pg/mL至300pg/mL之间暗示存在心脏衰竭的风险。水平高于300pg/mL表示轻微心脏衰竭的风险。水平高于600pg/mL表示中度心脏衰竭的风险。水平高于900pg/mL表示重度心脏衰竭的风险。水平高于约80pg/mL表示患者可能处于有害冠脉事件的风险之中。用雷诺嗪对患者进行治疗在确定患者具有高水平NT-proBNP后，临床医生根据上文所描述的给药方案给予雷诺嗪。实施例5在MERLIN-TIMI36试验中雷诺嗪对患有非ST段抬高性急性冠脉综合征的患者的效果背景雷诺嗪被认为是通过减少心肌细胞钠和钙过载而起到抗局部缺血作用，随之会导致细胞壁应力减小。B-型利钠肽(BNP)响应于增加的细胞壁应力而释放，其是急性冠脉综合征(ACS)风险的一种有效指示剂。这种研究是对BNP与雷诺嗪的效果之间的相互作用(作为随机试验、双盲试验、安慰剂_对照试验的一部分)的预测性评价。患有非ST段抬高性急性冠脉综合征(NSTEACS)的患者是指这样的患者，其在休息时会发生胸部不适或心绞痛等，持续>10分钟，并符合心肌缺血，并且在给药(admittance，准入)的48小时内休息时会发生局部缺血症状(>5分钟)(其包括指示发作)，并具有中度-高度风险的以下指示物中的至少一种·升高的心脏肌钙蛋白(上述局部MI限)或CK-MB(>ULN)·ST-下降(水平或向下的缓坡)彡0.ImV·糖尿病(需要胰岛素或口服治疗)·风险评分>3，其中一个点被赋予每个以下变量并且以其算数和来计算总评分-年龄彡65岁；-已知CAD(前MI、CABG、PCI或血管造影狭窄彡50%)；-三种或更多种心脏风险因素(DM、高胆固醇、高血压、家族病史)；·在之前24小时内休息时有多于一次的局部缺血性不适发作；·在症状上次发作的7天内长期服用阿司匹林；·ST段下降彡0.05mV；以及升高的心脏肌钙蛋白或CK-MB。方法在MERLIN-TIMI36试验中，针对雷诺嗪或安慰剂在开始(N=4543)(ADVIABNP)，14天(N=4079)，以及最终调查(FinalVisit)(N=3328)的随机选择的非ST段抬高ACS患者中测量血浆BNP。在试验期间，在1小时内静脉输注给予200mg雷诺嗪(或相匹配的安慰剂)，然后进行80mg/小时静脉输注，对于估计具有小于30mL/min(<0.50mL/s)的肌酸酐清除的患者减为40mg/小时，并持续12至96小时。在输液完成时或接近完成(完成前约1小时)时，从IV溶液转变为持久释放的雷诺嗪(或相匹配的安慰剂)，并且以每天两次每次IOOOmg的剂量持续口服持久释放的雷诺嗪(或相匹配的安慰剂)直至研究结束。[Morrow等人，J.Am.Med.Assoc'η·297(16)，1775-1783，2007]。基于之前的工作以13及本试验，用BNP>80pg/mL对患者进行分级。试验的主要终点为心血管死亡、心肌梗塞、或再发性局部缺血(CVD/MI/RI)的组合(composite)。结果具有高浓度BNP的患者(N=1935)具有明显较高的CVD/MK/RI(26.4%vs.20.4%,ρ<0.0001)风险，以及CVD/MI(16.2%vs.7.5%,ρ<0.0001)风险和单独的CVD(9.0%vs.2.4%,ρ<0.0001)风险。，与在具有消极BNP结果的患者中缺少可检测效应(参见图l，p_相互作用=0.052)的情况相比，在BNP>80pg/mL的患者中雷诺嗪与主要终点(HR0.79；95%CI0.66-0.94,ρ=0.009)的显著减少有关。这是由恶化中的心绞痛的终点组分得到的(对于BNP>80pg/mL,HR0.55；0.35-0.84；ρ=0.005；对于BNP彡80pg/mL,HR0.90；95%CI0.63-1.28，ρ=0.55；ρ-相互作用0.079)。结论高BNP与患有ACS的患者中的更严重后果有关。这种有计划的探索分析的结果暗示了雷诺嗪对于具有高BNP的患者的再发性局部缺血具有增强的效果。通过以上描述，本领域技术人员能够想到组合物和方法的各种修改和变化。在所附权利要求范围内的所有这样的修改和变化都包括在本发明中。权利要求一种用于减少哺乳动物患者中有害冠脉事件风险的方法，所述方法包括a.确定表现出高水平利钠肽的患者；以及b.对所述患者给予治疗有效量的雷诺嗪。2.根据权利要求1所述的方法，其中，患者中的有害冠脉事件的风险由有害冠脉事件引起，所述有害冠脉事件包括，但不限于，冠状动脉疾病(CAD)、心血管死亡、心肌梗塞、急性心脏衰竭、局部缺血、再发性局部缺血、急性冠脉综合征、舒张期功能障碍等。3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述有害冠脉事件是急性冠脉综合征。4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述有害冠脉事件是心血管死亡、心肌梗塞、或再发性局部缺血。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述利钠肽是脑钠肽(BNP)或N-末端脑钠肽原(NT-proBNP)。6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述患者是通过实施BNP测试来选择的。7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述患者表现为约80皮克或更高的利钠肽/毫升血液。8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述患者表现为约100至约300皮克的利钠肽/毫升血液。9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述患者表现为约300至约600皮克的利钠肽/毫升血液。10.根据权利要求7所述的方法，其中，所述患者表现为约600至约900皮克的利钠肽/毫升血液。11.根据权利要求7所述的方法，其中，所述患者表现为高于约900皮克的利钠肽/毫升血液。12.根据权利要求1所述的方法，其中，所述雷诺嗪是以口服剂量给药的。13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述口服剂量是持续释放片剂。14.根据权利要求13所述的方法，其中，以每天一次、每天两次或每天三次给予所述患者所述片剂。15.根据权利要求13所述的方法，其中，所述片剂包含约350至约1000毫克的雷诺嗪。16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述持续释放片剂包含以重量计至少50%的雷诺嗪、pH依赖型粘结剂、以及非pH依赖型粘结剂。17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述持续释放片剂包含以重量计至少50%的雷诺嗪、以重量计约5至约12.5%的甲基丙烯酸共聚物、以及以重量计约1至约3%的羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、氢氧化钠和硬脂酸镁。18.根据权利要求1所述的方法，其中，所述雷诺嗪是作为静脉输注(IV)溶液给予的。19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述IV溶液包含约1.5至约3毫克的雷诺嗪/毫升溶液。20.根据权利要求19所述的方法，其中，对所述患者给予所述IV溶液持续足以减少所述患者体内的所述有害冠脉事件风险的一段时间。21.根据权利要求20所述的方法，其中，以静脉输注200mg超过1小时的方式给予所述IV溶液。22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述IV溶液作为SOmg/小时的输液进一步给予。23.根据权利要求20所述的方法，其中，给予所述IV溶液长达约96小时。24.根据权利要求20所述的方法，其中，在对所述患者给予所述IV溶液之后，然后通过给予雷诺嗪的口服持续释放制剂将对所述患者的给药从给予所述IV溶液转变为给予口服剂量。25.根据权利要求20所述的方法，其中，在完成给予所述IV溶液的1小时之前，通过给予雷诺嗪的口服持续释放制剂将对所述患者的给药从所述给予IV溶液转变为给予口服剂量。26.根据权利要求24所述的方法，其中，当从给予所述IV溶液转变为给予雷诺嗪的所述口服持续释放制剂时，以60mg雷诺嗪/小时给予所述IV溶液而每天两次给予375mg的雷诺嗪的口服剂量。27.根据权利要求24所述的方法，其中，当从给予所述IV溶液转变为给予雷诺嗪的所述口服持续释放制剂时，以80mg雷诺嗪/小时给予所述IV溶液而每天两次给予IOOOmg的雷诺嗪的口服剂量。28.根据权利要求20所述的方法，其中，雷诺嗪的所述IV溶液以200mg静脉给予1小时，接着以80mg/小时的IV输液静脉给予12至96小时。29.根据权利要求28所述的方法，其中，对所述患者的给药从给予所述IV溶液转变为给予雷诺嗪的口服持续释放剂量，并且雷诺嗪的所述口服剂量为lOOOmg，每天两次。30.一种成套的试剂盒，包括a)检测哺乳动物患者的血浆和/或心脏组织中的利钠肽水平的测定，以及b)雷诺嗪的药物剂量。31.根据权利要求30所述的试剂盒，其中，雷诺嗪的所述药物剂量为IV溶液或口服剂。32.根据权利要求31所述的试剂盒，其中，所述药物剂量为IV溶液和口服剂。全文摘要本发明涉及雷诺嗪用于减少哺乳动物患者体内的有害冠脉事件的风险的应用。通常，利钠肽与冠脉疾病、急性冠脉综合征和/或舒张期功能障碍有关。雷诺嗪可以作为静脉输注溶液或口服剂量给予患者。文档编号A61P9/10GK101896181SQ200880100958公开日2010年11月24日申请日期2008年3月24日优先权日2007年5月31日发明者安德鲁·沃尔夫,布伦特·布莱克本,马库斯·耶林申请人:吉利德帕洛阿尔托股份有限公司