专利名称：一种舒筋通络颗粒的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及药品的质量控制方法，具体地说一种舒筋通络颗粒的质量控制方法。 现有技术舒筋通络颗粒是治疗颈椎病的一种新药，它是由骨碎补、牛膝、川芎、天麻、黄芪、 威灵仙、地龙、葛根、乳香组成的复方制剂。具有补肝益肾、活血舒筋之功效，主要用于治疗 颈椎病属于肝肾阴虚、气滞血淤证，症见头晕、头痛、胀痛或刺痛，耳聋、耳鸣，颈项僵直，颈、 肩、背疼痛，肢体麻木，倦怠乏力，腰膝酸软，口唇色暗，舌质暗红或有瘀斑。经临床观察，舒 筋通络颗粒治疗颈椎病的总有效率达98. 33%。CN1515273公开了该药物制剂的具体配方 及详细的制备方法。其制备工艺成熟，疗效确切，安全可靠，是治疗颈椎病少有的中药品种。 但目前尚未发现关于其产品质量控制的有关报道。
发明内容
本发明的目的就是要提供一种针对舒筋通络颗粒的质量控制方法，以期为舒筋通 络颗粒的工业化生产提供一种质量控制标准。本发明的目的是这样实现的本发明所述的舒筋通络颗粒由骨碎补、天麻、牛膝、川芍、葛根、地龙、威灵仙、黄 芪、乳香。其原料配比可选择骨碎补10-18%、天麻5-12%、牛膝10_20%、川芎7_15%、葛 根 8-14%、地龙 8-14%、威灵仙 10-18%、黄芪 10-18%、乳香 4-8%。其制备方法可选择_乳香以蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，以环糊精包结，备用。其余骨碎补等 八味，以3. 5倍40-60 %乙醇提取3次，提取液合并，浓缩至适当密度，减压干燥，粉碎，过 100目筛，加入挥发油包结物到浸膏粉。将以上得到的浸膏粉加适量糊精，以80%乙醇为润湿剂，制粒，干燥(60°C以下)， 分装即得颗粒剂。本发明所提供的舒筋通络颗粒的质量控制方法，包括定性、定量检测。其中的定性检测，可采用薄层色谱法，将吸附剂或支持剂在玻璃板、塑料板或铝片 上均勻地涂铺一薄层，将样品和对照品点在同一块薄层板上在同一条件下依次层析展开， 经显色或用其它方法检出色谱斑后，对比斑点的位置、颜色或荧光颜色作出判断。其质量控制的关键点是利用高效液相色谱法对该颗粒中的柚皮苷的含量进行定 量检测，其具体步骤为(a)对照品溶液的制备精密称取110°C干燥至恒重的柚皮苷对照品12mg，置IOOml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，即得；(b)供试品溶液的制备取本品细粉约lg，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇50ml 提取5小时，回收甲醇至干，残渣加20ml，热水溶解并转移至分液漏斗中，放冷至室温，以三氯甲烷萃取3次(20ml、15ml、10ml)，弃去三氯甲烷层，水溶液照柱色谱法试验，加在已处理 好的聚酰胺柱上，以水40ml洗脱，弃去洗脱液，继以乙醇70ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣 加甲醇溶解并定容于IOml量瓶中，摇勻，以0. 45 μ m微孔滤膜滤过，即得；(c)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲 醇-水-冰乙酸=30 70 0.21为流动相；检测波长为283nm ；柱温40°C，理论板数按柚 皮苷峰计算应不低于3000 ；(d)测定法按照2005版中国药典一部附录VI D高效液相色谱法，分别吸取对照品 溶液10μ 1，供试品溶液15μ 1，注入液相色谱仪，测定；(e)每袋舒筋通络颗粒以柚皮苷计，不得少于12. Omg0上述方法经线性关系、精密度、重复性以及稳定性考察均表明该方法，精确度高、 重复性好，稳定性强。由此可通过对舒筋通络颗粒中的柚皮苷含量测定来控制舒筋通络颗 粒质量的稳定性。为了进一步提高质量检测的严谨性和可控性，其定性检测方法优选以下几种方 式利用薄层色谱法鉴别该颗粒中的川芎，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧化 铝柱上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取川芎对照药材0. 2g，按供试品溶液制备方法处理，制得 对照药材溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品溶液 和对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯为展 开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。利用薄层色谱法鉴别该颗粒中的地龙，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝 柱上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取地龙对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对 照药材溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品溶液 和对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯为展 开剂，展开，取出，晾干，在365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。利用薄层色谱法鉴别该药物中的葛根，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧 化铝柱上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，继以50%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸 干，残渣加乙醇Iml使溶解，制得供试品溶液；
(b)对照品溶液制备取葛根素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得对 照品溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品 溶液和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水= 15 5 0.5为展开剂，展开，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分钟，置365nm紫外光灯下检视， 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。利用薄层色谱法鉴别该药物中的天麻，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧 化铝柱上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，继以50%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸 干，残渣加乙醇Iml使溶解，制得供试品溶液；(b)对照品溶液制备取天麻素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得对 照品溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品溶 液和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸= 6:2: 0. 15为展开剂，展开两次，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至 斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。利用薄层色谱法鉴别该药物中的黄芪，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加70%乙醇40ml。超声处理30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氨试液IOml使溶解，用经氨水饱和过的正丁醇萃取3次，每次 20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，回收正丁醇液，残渣加甲醇-乙酸乙酯 为1 1的混合液5ml使溶解，加在中性氧化铝柱上，用甲醇-乙酸乙酯为1 1的混合液 35ml洗脱，弃去洗脱液，继以40%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇Iml使溶 解，制得供试品溶液；(b)对照品溶液制备取黄芪甲苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为 对照品溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品溶 液和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为 6:2: 0. 15的混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热 至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。利用薄层色谱法鉴别该药物中的牛膝，其具体步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，加70%乙醇40ml，加热回流30分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用三氯甲烷20ml振摇提取，弃去三氯甲烷层水层用水 饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水20ml洗涤， 弃去水洗涤液，取正丁醇液适当浓缩后，加入5g中性氧化铝，拌勻，挥尽溶剂，置玻璃柱上， 用乙酸乙酯-乙醇为4 1的混合溶液40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使 溶解，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取牛膝对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对 照药材溶液；
(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VI B薄层色谱法，吸取供试品溶液 和对照药材溶液各 ομ ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇为4 1的混 合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液，在105°C加热 至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其中对二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液的制备方法为取对二甲氨基苯甲醛 0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻。本发明方法用于针对舒筋通络颗粒的质量控制，其专属性强、定量准确、操作简 便。它有效保证了舒筋通络颗粒质量的稳定性。
图1是本发明方法中供试品的色谱图。图2是本发明方法中对照品的色谱图。图3是本发明方法中川芎鉴别薄层色谱图。图中的a为对照品，b为供试品。图4是本发明方法中地龙鉴别薄层色谱图。
图中的a为对照品，b为供试品。图5是本发明方法中葛根鉴别薄层色谱图。图中的a为对照品，b为供试品。图6是本发明方法中天麻鉴别薄层色谱图。图中的a为对照品，b为供试品。图7是本发明方法中黄芪鉴别薄层色谱图。图中的a为对照品，b为供试品。图8是本发明方法中牛膝鉴别薄层色谱图。图中的a为对照品，b为供试品。以下结合具体实施例对本发明作进一步的详述。
具体实施例方式实施例取中药材骨碎补450g、牛膝450g、川芎360g、天麻300g、黄芪450g、威灵仙450g、 地龙360g、葛根360g和乳香360g，乳香以水蒸汽蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，以β -环 糊精包结，备用。其余骨碎补等八味，用60%乙醇回流提取三次，第一次加乙醇5倍量，提取 2小时，第二、三次加乙醇3倍量，各提取1小时，滤过，合并滤液。减压回收乙醇，浓缩成相 对密度1. 32 1. 35(50°C )，减压干燥，粉碎，过100目筛，加入挥发油包结物及糊精矫味剂 适量，混勻，以80%乙醇为润湿剂，制成颗粒，干燥(60°C以下)，即制成舒筋通络颗粒(以下 简称本品)。分装，每袋装12g。药物质量控制方法如下1、用高效液相色谱法测定本品中的柚皮苷含量。(1)照高效液相色谱法(2005版中国药典一部附录VI D)测定。(2)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂醇-水-冰乙酸(30 70 0.21)为流动相；检测波长为283nm。柱温40°C，理论板数按 柚皮苷峰计算应不低于3000。(3)对照品溶液的制备精密称取在110°C干燥至恒重的柚皮苷对照品12mg，置 100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，即得。(4)供试品溶液的制备取本品细粉约lg，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇50ml 提取5小时，回收甲醇至干，残渣加20ml热水溶解，并转移至分液漏斗中，放冷至室温，以三 氯甲烷萃取3次(20ml ,15ml, 10ml)，弃去三氯甲烷层，水溶液照柱色谱法(2005版中国药典 一部附录VI C)试验，加在已处理好的聚酰胺柱(聚酰胺3. 2g, 80-100目，柱内径约1. 2cm, 湿法装柱)上，以水40ml洗脱，弃去洗脱液，继以乙醇70ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加 甲醇溶解并定容于10ml量瓶中，摇勻，以0. 45 y m微孔滤膜滤过，即得。(5)测定法分别吸取对照品溶液10iU，供试品溶液15iU，注入液相色谱仪，记录 色谱图，色谱图结果见图1和图2。(6)测定结果每袋含柚皮苷14. 6mg，符合规定。线性关系考察精密吸取柚皮苷对照品溶液(浓度为0. 12mg/ml)6、8、10、12、14ia，分别注入色 谱仪，按照上述色谱条件进行测定。柚皮苷对照品的进样量为横坐标，相应峰面积积分值为 纵坐标，计算回归方程。结果表明，柚皮苷在(0.72 1.68) yg范围内成良好线性关系。重复性考察称取本品6份，按照上述供试品溶液的制备方法制备，分别测定其含量，平均含量 为14. 58mg, RSD为1. 62%。表明该方法重线性好。稳定性考察取同一供试品溶液，间隔2小时，进样一次，共6次。测定峰面积并计算含量。RSD 为 1. 72%。平均回收率为99.5%。2、薄层色谱法鉴别本品中的药材(1)川芎鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，研细，混合溶剂(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100 200 目，5g，内径约15mm，干法装柱)上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得 供试品溶液。(b)对照药材溶液制备取川芎对照药材0. 2g，按供试品溶液制备方法处理，制得 对照药材溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(2005版中国药典一部附录VI B)试验，吸取供试品 溶液和对照药材溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。(d)试验结果薄层色谱照片见图3。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。(2)地龙鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，研细，混合溶剂(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml,超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100 200 目，5g，内径约15mm，干法装柱)上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得 供试品溶液。(b)对照药材溶液制备取地龙对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对 照药材溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(本品中国药典一部附录VI B)试验，吸取供试品溶 液和对照药材溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1)为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。(d)试验结果薄层色谱照片见图4。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。(3)葛根鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，研细，混合溶剂(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100 200 目，5g，内径约15mm，干法装柱)上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，再用50 %乙醇 40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，制得供试品溶液。(b)对照品溶液制备取葛根素对照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，制得对 照品溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(2005版中国药典一部附录VI B)试验，吸取供 试品溶液和对照品溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水 (15 5 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分钟，置紫外光灯(365nm)下 检视。(d)试验结果薄层色谱照片见图5。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。(4)天麻鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，研细，混合溶剂(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100 200 目，5g，内径约15mm，干法装柱)上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，再用50 %乙醇 40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，制得供试品溶液。(b)对照品溶液制备取天麻素对照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，制得对 照品溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(现行中国药典一部附录VI B)试验，吸取供试 品溶液和对照品溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸 (6:2: 0.15)为展开剂，展开两次，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热 至斑点显色清晰。(d)试验结果试验结果见图6。结果显示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点。(5)黄芪鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，研细，加70%乙醇40ml。超声处理30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加氨试液10ml使溶解，用经氨水饱和过的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，回收正丁醇液，残渣加甲醇-乙酸乙酯(1 l)5ml 使溶解，加在中性氧化铝柱(100 200目，5g，内径约15mm，干法装柱)上，用甲醇-乙酸乙 酯(1 l)35ml洗脱，弃去洗脱液，继续用40%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙 醇1ml使溶解，制得供试品溶液。(b)对照品溶液制备取黄芪甲苷对照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作为 对照品溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(现行中国药典一部附录VI B)试验，吸取供试品 溶液10 iil，对照品溶液各5 iil，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸 (6:2: 0. 15)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点 显色清晰。(d)试验结果试验结果见图7。结果显示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点。(6)牛膝鉴别(a)供试品溶液制备取本品5g，加70%乙醇40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液 蒸干，残渣加水25ml使溶解，用三氯甲烷20ml振摇提取，弃去三氯甲烷层水层用水饱和的 正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水20ml洗涤，弃去水 洗涤液，取正丁醇液适当浓缩后，加入5g中性氧化铝，拌勻，挥尽溶剂，置玻璃柱(内径约 lcm)上，用乙酸乙酯-乙醇(4 1)的混合溶液40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇 0. 5ml使溶解，制得供试品溶液。(b)对照药材溶液制备取牛膝对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对 照药材溶液。(c)鉴别试验照薄层色谱法(2005版中国药典一部附录VI B)试验，吸取供试品 溶液和对照药材溶液各10yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇(4 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液(取对二甲氨基苯 甲醛0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻，置棕色瓶中保 存)，在105°C加热至斑点显色清晰。(d)试验结果试验结果见图8。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点。
权利要求
一种舒筋通络颗粒的质量控制方法，包括定性、定量检测，其特征在于所说的定量检测是利用高效液相色谱法对该颗粒中的柚皮苷的含量进行定量检测，其步骤为(a)对照品溶液的制备精密称取110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品12mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；(b)供试品溶液的制备取舒筋通络颗粒细粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇50ml提取5小时，回收甲醇至干，残渣加20ml，热水溶解并转移至分液漏斗中，放冷至室温，以三氯甲烷萃取3次，每次20ml、15ml、10ml，弃去三氯甲烷层，水溶液照柱色谱法试验，加在已处理好的聚酰胺柱上，以水40ml洗脱，弃去洗脱液，继以乙醇70ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容于10ml量瓶中，摇匀，以0.45μm微孔滤膜滤过，即得；(c)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 水 冰乙酸＝30∶70∶0.21为流动相；检测波长为283nm；柱温40℃，理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000；(d)测定法按照2005版中国药典一部附录VI D高效液相色谱法，分别吸取对照品溶液10μl，供试品溶液15μl，注入液相色谱仪，测定；(e)每袋舒筋通络颗粒以柚皮苷计，不得少于12.0mg。
2.根据权利要求1所述的舒筋通络颗粒的质量控制方法，其特征在于所说的定性检测 包括利用薄层色谱法鉴别该颗粒中的川芎，其步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧化铝柱 上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取川芎对照药材0.2g，按供试品溶液制备方法处理，制得对照 药材溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液和对 照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯为展开 剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的荧光主斑点。
3.根据权利要求1或2所述的定性检测包括利用薄层色谱法鉴别该颗粒中的地龙，其 步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱 上，用无水乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至约1ml，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取地龙对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对照药 材溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液和对 照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯为展开 剂，展开，取出，晾干，在365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的荧光主斑点。
4.根据权利要求3所述的舒筋通络颗粒的质量控制方法，其特征在于所说的定性检测 包括利用薄层色谱法鉴别该药物中的葛根，其步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧化铝柱 上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，继以50%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣 加乙醇Iml使溶解，制得供试品溶液；(b)对照品溶液制备取葛根素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得对照品 溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液和对 照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水=15 5 0.5 为展开剂，展开，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
5.根据权利要求4所述的舒筋通络颗粒的质量控制方法，其特征在于所洗的定性检测 包括利用薄层色谱法鉴别该药物中的天麻，其步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶剂25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解后，加在中性氧化铝柱 上，先用无水乙醇25ml洗脱，弃去洗脱液，继以50%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣 加乙醇Iml使溶解，制得供试品溶液；(b)对照品溶液制备取天麻素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得对照品 溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液 和对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸= 6:2: 0. 15为展开剂，展开两次，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至 斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.根据权利要求5所述的舒筋通络颗粒的质量控制方法，其特征在于所说的定性检测 包括利用薄层色谱法鉴别该药物中的黄芪，其步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，研细，加70%乙醇40ml。超声处理30分 钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氨试液IOml使溶解，用经氨水饱和过的正丁醇萃取3次，每次 20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，回收正丁醇液，残渣加甲醇-乙酸乙酯 为1 1的混合液5ml使溶解，加在中性氧化铝柱上，用甲醇-乙酸乙酯为1 1的混合液 35ml洗脱，弃去洗脱液，继以40%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇Iml使溶 解，制得供试品溶液；(b)对照品溶液制备取黄芪甲苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照 品溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液 和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为 6:2: 0. 15的混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热 至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.根据权利要求6所述的舒筋通络颗粒的质量控制方法，其特征在于所说的定性检测 包括利用薄层色谱法鉴别该药物中的牛膝，其步骤为(a)供试品溶液制备取舒筋通络颗粒5g，加70%乙醇40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用三氯甲烷20ml振摇提取，弃去三氯甲烷层，水层用水饱 和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水20ml洗涤，弃 去水洗涤液，取正丁醇液适当浓缩后，加入5g中性氧化铝，拌勻，挥尽溶剂，置玻璃柱上，用 乙酸乙酯-乙醇为4 1的混合溶液40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶 解，制得供试品溶液；(b)对照药材溶液制备取牛膝对照药材lg，按供试品溶液制备方法处理，制得对照药 材溶液；(c)鉴别试验按照2005版中国药典一部附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液和对 照药材溶液各ΙΟμΙ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇为4 1的混合液 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液，在105°C加热至斑 点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其中对二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液的制备方法为取对二甲氨基苯甲醛 0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻。
全文摘要
本发明提供了一种舒筋通络颗粒的质量控制方法，包括定性、定量检测。其质量控制的关键点是利用高效液相色谱法对该颗粒中的柚皮苷的含量进行定量检测。每袋舒筋通络颗粒以柚皮苷计，不得少于12.0mg。本发明方法精确度高、重复性好，稳定性强。可用于准确测定舒筋通络颗粒中的柚皮苷含量。
文档编号A61K36/8988GK101926937SQ20091007452
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月23日 优先权日2009年6月23日
发明者卢树杰, 姜海, 张纲, 甄兰敏, 陈钟 申请人:神威药业有限公司