专利名称：淋巴管的稳定剂的制作方法
技术领域：
本发明提供包含Tie2活化(磷酸化)剂的淋巴管的稳定剂。
背景技术：
血液从心脏被送入经过毛细血管和/或静脉回到心脏。淋巴管与该血管系统分开 地形成组织液的排水途径。淋巴管通过在末梢组织中使从血管渗漏出的间质液、蛋白质、 脂肪、细胞等向血管系统回流来保持一定的血液量，从而维持封闭循环系统。在存在于皮 肤的毛细血管中，内皮细胞的外侧被基底膜包围、进而附着有周皮细胞。另一方面，在毛细 淋巴管中，内皮细胞的外侧几乎没有基底膜，也没有附着周皮细胞。该结构对于有效地从 间质摄取体液和/或细胞是有用的(非专利文献1)。迄今为止，已显示出酪氨酸酶型受体 VEGi7R(血管内皮细胞生长因子受体，vascularendothelial growth factor receptor)-3 在淋巴管内皮细胞中特异性表达，并显示出作为其配基的VEGF-C和VEGF-D诱导淋巴管新 生。此外明确了，VEGF-A是介由在淋巴管内皮细胞中表达的VEGFR2来诱导淋巴管新生(非 专利文献2)。此外，关于淋巴管的功能，有以下报导。在感染了表达VEGF-A的腺病毒的小 鼠耳部观察到了显著的淋巴管新生，但是结构异常，并且由在耳部注入了胶态炭的实验明 确了，淋巴管的回收功能也被显著抑制(非专利文献3)。即，认为对淋巴管的功能而言，淋 巴管内皮细胞适当地配置并被支撑是必要的。我们将这定义为“淋巴管的稳定化”。对皮肤的物理或化学刺激会诱导血管新生和/或VEGF-A等引起的血管渗透性，结 果发生组织液的蓄积和浮肿。另一方面，还已知这些刺激直接诱导淋巴管的新生和/或扩 张。迄今为止，可观测到紫外线炎症引起的淋巴管扩张，由注入了染料的实验明确了淋巴管 的功能发生障碍。认为随着血管扩张，水分向真皮内渗漏出，从而淋巴管扩张而要回收间质 液。然而，认为过量的淋巴管扩张反而会降低其回收功能并延迟浮肿(非专利文献4)。艮口， 认为为了迅速回收组织间液，避免诱导淋巴管的过量扩张的“淋巴管的稳定化”是必要的。迄今为止，作为与淋巴管的功能不全相关的病态，已知先天性淋巴浮肿，以及 伴随丝虫病、手术、恶性肿瘤、炎症所产生的继发性淋巴浮肿。作为先天性淋巴浮肿， 有米耳罗伊病(Mi Iroy病，原发性淋巴水肿)、梅杰病(Me i ge病)、淋巴水肿-重睫 (lymphedema-distichiasis)综合征。报告了在米耳罗伊病中淋巴管不发育和/或发育不 全，另一方面，报告了在淋巴水肿-重睫综合征中淋巴管增生。由此也可认为，保持回收功 能不仅需要通过淋巴管的新生，还要通过淋巴管的稳定化(非专利文献5)。非专利文献1 実験医学 Vol. 24，No. 18 (2006)，pp. 133-1382 Jussila L and Alitalo K, (2006) Vascular growth factorsand lymphangiogenesis (血管生长因子和淋巴管生成).Phisiol Rev82 :673-7003 :Nagy et al. , (2002) Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor induces lymphangiogenesis as well asangiogenesis (血 管通透因子/血管内皮生长因子诱导淋巴管生成以及血管生成).J Exp Med 196 1497-1506
非专利文献4 =Kajiya K. , Hirakawa S.，and Detmar Μ.，(2006) VEGF-A mediates UVB-induced impairment of lymphatic vessel function (VEGF-A ^^ UVB-管功能的损伤).Am J Pathol 169:1496-1503非专利文献5 実験医学 Vol. 24，No. 18 (2006)，pp. 139-143非专利文献 6 :Kajiya K. , et al. , (2005)Hepatocyte growth factorpromotes lymphatic vessel formation and function (肝细胞生长因子促进淋巴管形成和功 能).EMBO J 24 :2885-95非专利文献7 実験医学 Vol. 20，No. 8 Q002)，pp. 52-57
发明内容
本发明的课题是提供在实现淋巴管的稳定化、维持和/或增强淋巴管的回收功能 方面有效的药剂。以VEGF被分子克隆为开端，作为特异性地在血管形成中发挥作用的因子，已经相 继鉴定出VEGF家族和血管生成素(angiopoietin ;Ang)家族的分子。VEGF及其受体与从 被称为脉管形成的血管早期发生至随后的血管新生的非常宽范围的血管形成相关。另一方 面，Ang在脉管形成后，在伴有血管内皮细胞的芽生、分枝、嵌入、萎缩等细胞现象的管腔形 成中发挥作用。可以理解，Ang介由在血管内皮细胞中表达的受体型酪氨酸激酶Tie (含Ig 禾口 EGF 同源结构域的酷氛酸激醇，tyrosine kinase with Ig andEGF homology domain) -2 来控制血管内皮细胞与周皮细胞(周细胞)和/或血管平滑肌细胞这样的血管壁细胞的粘 着，在血管的结构稳定化中发挥作用(非专利文献7)，但是Tie2与淋巴管的关系还未充分 阐明。本发明者着眼于Ang-I与在淋巴管内皮细胞中表达的Tie2的关系而进行了研究， 结果发现，Ang-I介由Tie2的活化来促进淋巴管的回收功能，从而完成以下发明(1) 一种淋巴管的稳定剂，包含Tie2活化剂。(2)根据⑴所述的淋巴管的稳定剂，所述Tie2活化剂是选自血管生成素 1 (Ang-I)、樟(Cinnamomum)属植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物和丁香树 脂醇中的至少1种。(3)根据( 所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物来源于肉桂种植物(Cirmamomum cassia Blume)0(4)根据⑵所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物来源于桂枝或桂皮。(5)根据⑵ (4)的任一项所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物是水提取物。(6) 一种用于改善或预防水肿的美容学方法，其中，应用(1) (5)的任一项所述 的淋巴管的稳定剂。通过使用本发明涉及的淋巴管的稳定剂，能够改善和/或预防水肿等。
图1是将Ang-I引起的淋巴管的回收功能的变化通过视觉判定评分来数值化而得 的图。图2显示桂皮提取物产生的Tie2磷酸化的结果。4
图3显示刺五加提取物产生的Tie2磷酸化的结果。
具体实施例方式对Tie2的活化剂没有特别的限制，可列举血管生成素1等众所周知具有活化 Tie2的活性的活化剂，和/或来源于樟(Cirmamomum)属植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物或丁香树脂醇等本发明者新发现的具有该活性的活化剂。另外，此处所谓 的Tie2的活化是指可以通过将Tie2磷酸化而转换成其活性体(磷酸化Tie2)的能力。樟属是樟目(Lauraceae)、樟科(Lauraceae)的植物，存在300以上的种，已知例 如肉桂(Cinnamomum cassia Blume)、樟(C. camphora)、圆叶肉桂(C. daphnoides)、柴肉 桂(C. doederleinii)、天竺桂(C. japonicum)、圆叶薮肉桂(C. pseudo-pedunculatum)、日 本肉桂(C. sieboldii)、锡兰肉桂(C. verum)、锡兰肉桂(C. ζeyIanicum)。作为本发明中的 Tie2活化剂，优选使用肉桂(Cinnamomum cassia Blume)、特别是来源于作为肉桂的嫩枝的 桂枝(肉桂枝)或桂皮(肉桂皮)的提取物。已知来源于作为肉桂的树皮的桂皮的提取物 例如作为生发剂的有效成分是有用的(特开平10-265350号公报)，但是完全不知道其具有 淋巴管的稳定化活性。刺五加(Siberian Ginseng)提取物在传统上被认为对滋养强壮有效。在虚弱、极 度疲劳、注意力降低等精神和/或身体能力的降低、病后的恢复方面显示优异的效力。在美 国，作为膳食补充剂(diet supplement)被使用。上述提取物可以通过常规方法获得，例如可以将作为其来源的植物与提取溶剂一 起在常温或加热下浸渍或加热回流，然后过滤、浓缩而获得。作为提取溶剂，只要是通常提 取所使用的溶剂就可以任意使用，可以单独使用或组合使用下述溶剂例如，水性溶剂，例 如水、生理盐水、磷酸缓冲液、硼酸缓冲液；或者有机溶剂，例如乙醇、丙二醇、1，3_ 丁二醇、 甘油等醇类，含水醇类，氯仿，二氯乙烷，四氯化碳，丙酮，乙酸乙酯，己烷等。优选使用水作 为溶剂。用上述溶剂提取得到的提取物可以直接使用，或使用通过例如冻干等使其浓缩后 的提取物，还可以根据需要使用采用吸附法、例如离子交换树脂除去杂质后的提取物，和/ 或用多孔聚合物(例如7、"一’ ^卜XAD-2)的柱进行吸附、然后用所需溶剂溶出、再浓 缩后的提取物。丁香树脂醇是植物所特有的抗氧化物质木酚素类化合物，由于具有改善高血压症 的效果和/或抑制幽门螺旋杆菌(H. pylori)的效果，因此可用于食品、饮料和/或药品(例 如，特开平8468887号公报、特开2004-352652号公报等)。丁香树脂醇具有以下化学结构
权利要求
1.一种淋巴管的稳定剂，包含Tie2活化剂。
2.根据权利要求1所述的淋巴管的稳定剂，所述Tie2活化剂是选自血管生成素 1 (Ang-I)、樟(Cinnamomum)属植物的提取物、刺五加(SiberianGinseng)提取物和丁香树 脂醇中的至少1种。
3.根据权利要求2所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物来源于肉桂种植物 (Cinnamomum cassia Blume)0
4.根据权利要求2所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物来源于桂枝或桂皮。
5.根据权利要求2 4的任一项所述的淋巴管的稳定剂，所述提取物是水提取物。
6.一种用于改善或预防水肿的美容学方法，其中，应用权利要求1 5的任一项所述的 淋巴管的稳定剂。
全文摘要
本发明提供包含Tie2活化剂的淋巴管的稳定剂。Tie2活化剂优选为选自血管生成素1(Ang-1)、樟(Cinnamomum)属植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物和丁香树脂醇中的至少1种。
文档编号A61P17/16GK102056630SQ20098012165
公开日2011年5月11日 申请日期2009年6月17日 优先权日2008年6月18日
发明者加治屋健太朗, 大田正弘 申请人:株式会社资生堂