专利名称：将火绒草酸作为有效成分含有的改善皱纹用皮肤化妆料组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种通过下述化学式1所表示的作为有效成分含有火绒草酸 {Leontopodicacid ；2-[ (3S)-3-hydroxybutanate]_3，4,5-tris-[(2E)_3_(3,4-dihydroxy phenyl)-2-propenoate]-D-glucaricacid}的改善皱纹用皮肤化妆料组合物。化学式1皮肤是人体的第一防护膜，从温度及湿度变化和紫外线、公害物质等外部环境的刺激中保护体内的诸器官，并在调节体温等维持生物体恒常性的过程中发挥着重要作用。 但是，从外部所受到的过度的物理刺激、化学刺激及劳累、缺乏营养等会降低皮肤的正常功能，并促进弹力损失、角质化、生成皱纹等的皮肤老化现象，为了防止上述现象并维持健康且富有弹性的皮肤的而目前使用的化妆料大部分存在效果不理想或引发皮肤副作用等诸多问题。在进行不引发皮肤副作用且具有防止皮肤老化效果的原料的研究的过程中，发现将火绒草酸适用化妆料等的皮肤化妆料组合物时显示出优异的防止皮肤老化效果。对火绒草酸的现有研究有关于对抗氧化功效和防止DNA受损的功效 (Leontopodic acid-a novel highly substituted glucaric acid derivative from Edelweiss(Leontopodium alpinum Cass. ) and its antioxidative and DNA protecting properties. Tetrahedron, Volume 61, Issue 19,9May 2005, Pages 4621—4630)的研究，这与本发明的通过胶原酶表达抑制效果，胶原蛋白生物合成促进效果的皱纹改善效果是完全不同的。
发明内容
技术课题本发明是为了解决上述的现有技术的问题而提出的，本发明的目的在于提供一种改善皱纹用皮肤化妆料组合物，通过将皱纹改善效果优异的火绒草酸作为有效成分而含有而具有优异的胶原酶表达抑制效果，胶原蛋白生物合成促进效果及皱纹改善效果。课题解决方案为了实现上述目的，本发明提供改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，作为有效成分含有火绒草酸。并且，提供改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，含有收集在纳米脂质体内的火绒草酸。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，上述火绒草酸以整个组合物的总重量为基准含有0. 0001重量％至10重量％。并且，其特征在于，收集在上述纳米脂质体内的火绒草酸对组合物总重量含有 0. 001至50重量％。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，抑制胶原酶表达，并促进胶原蛋白生物合成。发明的效果如上说明，本发明的将火绒草酸作为有效成分而含有的改善皱纹用皮肤化妆料组合物的胶原酶表达抑制效果、胶原蛋白生物合成促进效果及皱纹改善效果优异。并且，在纳米脂质体内含有稳定化的火绒草酸时剂型稳定性及硬皮吸收能力更加优越。
图1是表示从单角鲨烷过氧化物(Squalane mono-peroxide)诱导的皱纹的生物体内(invivo)皱纹改善效果照片。图2是表示对从UV诱导的皱纹的生物体内(invivo)皱纹改善效果的照片。发明的最佳实施方式本发明提供改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，作为有效成分含有火绒草酸。并且，提供改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，含有收集在纳米脂质体内的火绒草酸。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，上述火绒草酸以整个组合物的总重量为基准含有0. 0001重量％至10重量％。并且，其特征在于，收集在上述纳米脂质体内的火绒草酸对组合物总重量含有 0. 001至50重量％。上述火绒草酸是高山火绒草中富含的主要成分之一。高山火绒草是双子叶植物桔梗目菊科的多年生草本，学名是Leontopodiumalpinum。原产地是欧洲阿尔卑斯山地域，属高山植物。在韩国的高山地带生长着类似的有黄花、山黄花、汉拿黄花等。高山火绒草从前
4就在民间用于腹痛、扁桃体炎、支气管炎、癌症、疟疾、腹泻、热病等疾病的治疗。高山火绒草裸露于阿尔卑斯环境的强紫外线、过度的温度、湿度变化、强风等极限环境。高山火绒草中含有酚酸，木脂素(Iignans)，类黄酮，倍半萜(sesquiterpenes)，苯并呋喃，吡喃衍生物， 聚乙炔,香豆素(coumarins)，二萜酸(diterpeneacids)等多种成分。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物中，上述火绒草酸可以通过粉碎高山火绒草的步骤(a)；将上述步骤(a)的粉碎物通过由水，碳数1 4个的无水或者含水酒精及丙酮构成的溶剂中选择的一种以上提取的步骤(b)；及将上述步骤(b)的提取物由乙酸乙酯、 乙醚(diethyl ether)、苯、氯仿及己烷构成的溶剂中选择的一种以上再提取的步骤(c)而得到，上述碳数1 4个的无水或者含水酒精可以是甲醇、乙醇、1，3_丁二醇、正丙醇、异丙醇或者正丁醇，上述步骤(b)及步骤(c)的提取可以通过冷浸，渗滤或者温浸的方法进行。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物中，上述纳米脂质体的平均粒子直径可以是 10-500nm。本发明的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于抑制胶原酶表达、促进胶原蛋白生物合成。下面，对本发明进行进一步地详细说明。根据本发明的一个实施例的皮肤化妆料组合物中所含有的火绒草酸以将高山火绒草在无水或者含水的低级酒精、水或者丙酮中第一次提取后再以乙酸乙酯、乙醚、苯、氯仿、己烷等的低极性溶剂进行再提取的高山火绒草提取物制造，从而含量增大，并去除了杂物，其稳定度也得到提高。对上述火绒草酸的制造方法进一步详细说明如下。但是，火绒草酸制造方法并不限于此。首先，将高山火绒草细粉碎后，对高山火绒草粉碎物的干燥重量按重量比5 20 倍施加将极性溶剂水、碳数1 4个的无水或者含水低级酒精(甲醇、乙醇、1，3- 丁二醇、正丙醇、异丙醇或者正丁醇等)，水和上述低级酒精的混合物、丙酮、或者上述溶剂的混合物等提取溶剂而沉积提取、过滤及减压浓缩。之后，在上述浓缩液添加水而使其分散后，在浓缩液添加相同量的乙酸乙酯、氯仿、乙醚等的低极性有机溶剂后进行震荡。震荡后分离有机层并进行减压浓缩而得到活性优异的高山火绒草提取物。作为提取方法使用冷浸及渗滤时优选提取约12 96小时，也可以将碳数1 4 个的无水或者含水低级酒精，乙酸乙酯或者乙醚作为溶剂在4 25°C常温下放置熟成3 20日而提取有效活性成分。使用温浸时根据所使用的溶剂等的种类和温度不同，优选以接近溶剂的环流温度的温度提取5 M小时。通过上述方法获取的火绒草酸显示出皱纹改善效果，可以制作成皮肤外用软膏或涂剂等的皮肤化妆料而作为涂覆于人体皮肤上的无副作用，安全且效果优异的皮肤皱纹改善剂使用。如上所述制造的火绒草酸以整个组合物的总重量为基准含有0.0001 10重量％，优选含有0. 0005 5. 0重量％是妥当的。因为在0. 0001重量％以下的浓度下没有明显的效果，而在10.0重量％以上的浓度下却没有显示出其效果根据含有量增加而得到明显的提升。
在本发明中纳米脂质体表示具有脂质体形态的平均粒子直径为10-500nm的脂质体。根据本发明的优选实现例，纳米脂质体的平均粒子直径是50-300nm。在纳米脂质体的平均粒子直径超过300nm时，在本发明所要实现的技术效果中皮肤渗透的改善及剂型稳定性的改善非常微弱。根据本发明的一个实施例而用于使火绒草酸提取物稳定化的纳米脂质体通过包含多元醇(polyols)、油性成分、界面活性剂、磷脂质、脂肪酸及水的混合物而制造。用于本发明的一个实施例的纳米脂质体的多元醇不受特别限制，优选地从丙二醇、二丙二醇、1，3_ 丁二醇、甘油、甲基丙二醇、异丙二醇、戊二醇、赤藓糖醇、木糖醇、山梨醇及其混合物构成群中选择。其使用量对纳米脂质体总重量是10-80重量％，优选30-70重量％。用于制造本发明的一个实施例的纳米脂质体的油性(oil)成分可以使用业界熟知的多种油，优选如十六烷及石蜡油等的碳氢油，酯类的合成油，如二甲硅油及环甲硅油的硅油，如瓜子油、玉米油、豆油、鳄梨油、芝麻油及鱼油的动植物油，如乙氧基化烷基醚类油， 丙氧基烷基醚类油，植物鞘氨醇，鞘氨醇及二氢鞘氨醇的鞘氨醇脂质，脑苷胆固醇、谷甾醇硫酸盐胆固醇、谷留醇硫酸盐，C10-40脂肪醇及其混合物。其使用量对纳米脂质体总重量是1. 0-30. 0重量％，优选3. 0-20. 0重量％。用于制造本发明的一个实施例的纳米脂质体的界面活性剂可以使用业界熟知的任意一种。例如，可以使用负离子性界面活性剂，正离子性界面活性剂，阳性界面活性剂及非离子性界面活性剂。优选负离子性界面活性剂及非离子性界面活性剂。负离子性界面活性剂的具体例子包括烷基酰基谷氨酸、烷基磷酸酯、烷基酰乳酸钠、二烷基磷酸盐及三烷基磷酸酯。非离子性界面活性剂的具体例子包括烷氧基烷基醚、烷氧基烷基酯、烷基糖苷、聚甘油酯及糖酯。尤其优选的界面活性剂是属于非离子性界面活性剂的聚山梨酯类。其使用量纳米脂质体对总重量是0. 1-10重量％，优选0. 5-5. 0重量％。作为用于本发明的一个实施例的纳米脂质体的制造的另一个成分磷脂质利用两亲脂性脂类，包括天然磷脂质(例如，蛋黄卵磷脂或者大豆卵磷脂、鞘磷脂)及合成磷脂质 (例如，二棕榈酸磷脂酰胆碱或者氢化卵磷脂)，其中优选卵磷脂。特别是，优选从大豆或者蛋黄提取的天然的不饱和卵磷脂或者饱和卵磷脂。通常地天然的卵磷脂的磷脂酰胆碱的量为23-95%，还有磷脂酰乙醇胺的量为20%以下。在本发明的纳米脂质体的制造中，在纳米脂质体总重量中卵磷脂的使用量为0. 5-20. 0重量％，优选2. 0-8. 0重量％。用于本发明的一个实施例的纳米脂质体制造的脂肪酸为高级脂肪酸，优选C12-22 烷基链的饱和或者不饱和脂肪酸，例如包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸及亚油酸。其使用量在纳米脂质体总重量中占0. 05-3. 0重量％，优选0. 1-1. 0重量％。用于本发明的一个实施例的纳米脂质体的制造的水一般是脱离子的蒸馏水，其使用量在纳米脂质体总重量中占5. 0-40重量％。可以通过业界熟知的多种方法纳米脂质体的制造，但是最优选通过将包含上述成分的混合物适用于高压均质器而制造。通过高压均质器而制造纳米脂质体可以根据所要的粒子大小而以多种条件(例如压力、次数等)实施，优选地，在600-1200毫巴的压力下通过 1-5次高压均质器而制造纳米脂质体。通过根据本发明的一个实施例的纳米脂质体而稳定化的火绒草酸具有提高剂型耐稳定性及溶解度及硬皮吸收率的效果。根据本发明的组合物含有在化妆品学及皮肤科学上可允许的媒介及/或者基剂。 这可以提供为适于局部适用的所有剂型，例如以溶液、胶水、固体或者揉和无水生成物，在水上分散油状而获取的乳液、悬浮液、微乳液、微胶囊、微粒或者离子型(脂质体)及/或者非离子型的嗉囊分散剂的形态，或者爽肤水、霜、乳液、散、软膏、喷雾或者遮瑕棒的形态提供。这些组合物可以通过相关领域的通常方法而制造。并且根据本发明的组合物可以以泡沫形态或者还包括压缩的推进剂的气雾剂组合物的形态使用。本发明的组合物可以含有如脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂及胶化剂、软化剂，抗氧化剂，悬浮剂、稳定化剂、发泡剂、芳香剂、界面活性剂、水、离子型或者非离子型柔化齐 、填充剂、金属离子封锁剂及螯合剂、保存剂、维生素、阻断剂、湿润剂、精油、染料、颜料、亲水性或者亲油性活性剂、脂类嗉囊或者通常在化妆品中使用的如任意的其它成分的化妆品学或皮肤科学领域中通常使用的辅助剂。这些辅助剂以在化妆品学或者皮肤科学领域里一般使用的量投入。
实施例下面，通过实施例、实验例及制造例而进一步具体说明本发明。但是下述的实施例、实验例及制造例仅以为了有助于对本发明的理解的目的而提供，本发明的范畴及范围并不限于此。[实施例1]火绒草酸的制造收集利用甲醇每隔一星期重复三次冷浸提取室温下在阴凉处干燥的高山火绒草 (2kg)的提取液而减压浓缩而获取160. 5g甲醇提取物。甲醇提取物蒸馏水悬浮并以己烷分划2g)，而后以乙酸乙酯重新分划剩余的水层而获取乙腈分划物4g)，而后以丁醇重新分划剩余的水层而获取丁醇提取物(20. 6g)并最终获取水分划40. 6g。然后，利用甲醇溶解含有地表物质的上述水分划40. 6g后利用填充硅胶的玻璃柱
(cp5x70cm, 7734，Merck公司)及水、乙腈、甲醇的混合溶剂而溶出活性物质而获取10小
分划。其中以含有地表物质的小分划7(1. 153g)为对象实施副空心柱色层分析。将ODS填
充到玻璃柱(cpl.6xl00cm)内并利用HPLC用泵从10%乙腈水溶液到30%乙腈水溶液按步
骤使用而实施色层分析并在其中获取含有地表物质的小分划(1.79g)。将以上所获取的含有地表物质的小分划重新在填充葡聚糖凝胶(S印hadexLH-20，PharmaciaBiOtech公司)的
玻璃柱(cpl.0x50cm)中以甲醇溶出而最终获取地表物质火绒草酸(70mg)。[实施例2]制造稳定成纳米脂质体的火绒草酸为了将上述火绒草酸稳定成纳米脂质体混合甘油580g、辛酸癸酸三酸甘油酯 200g、磷脂质50g、胆固醇20g而利用搅拌机搅拌并加温到75°C而混合溶解后，添加从上述实施例1获取的火绒草酸固形粉50g而将其完全溶解。在此缓慢地添加纯净水IOOg而混合后在50°C、1000毫巴压力的调节下使其通过三次高压柔化装置(MicrOfluidiZerM210EH， Microfluidics, USA) 3而制造火绒草酸的纳米脂质体。该脂质体的粒子大小是约70nm。[实验例1]检测胶原蛋白生物合成的促进效果与一只可促进胶原蛋白生物合成的生育酚及EGCG进行比较而检测上述实施例1的胶原蛋白生物合成促进效果。首先，在24孔(well)中每孔播种(seeding) IO5个人成纤维细胞(fibroblast) (PromoCell, Germany)而将其培养到90%。然后将其以无血清DMEM培养基培养M小时后，将融化在无血清培养基中的实施例1，生育酚及EGCG分别以10-4摩尔浓度进行处理并在CO2培养机中培养M小时。打捞这些液体的上层液体并利用前胶原蛋白型(I)酶联免疫吸附法(ELISA)工具(procollagentype (I))而检查前胶原蛋白(procollagen)的增减与否。其结果表示在下述表1中，在此合成能力是以非处理群为100而进行对照的。表1
权利要求
1.一种改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，作为有效成分含有火绒草酸。
2.根据权利要求1所述的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，所述火绒草酸以整个组合物的总重量为基准含有0. 0001重量％至10重量％。
3.根据权利要求1所述的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，所述组合物抑制胶原酶表达或促进胶原蛋白生物合成。
4.根据权利要求1所述的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，所述火绒草酸收集在纳米脂质体中。
5.根据权利要求4所述的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，其特征在于，收集在所述纳米脂质体中的火绒草酸在组合物总重量中含有0. 001至50重量％。
全文摘要
本发明公开一种将火绒草酸(leontopodic acid)作为有效成分含有的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，显示提高的胶原酶(Collagenase)表达抑制效果，胶原蛋白(Collagen)生物合成促进效果及皱纹改善效果的皮肤化妆料组合物。并且还公开作为含有稳定成纳米脂质体(nano liposome)的火绒草酸的改善皱纹用皮肤化妆料组合物，具有优异的剂型稳定性及硬皮吸收能力的皮肤化妆料组合物。
文档编号A61K8/35GK102238935SQ200980148755
公开日2011年11月9日 申请日期2009年12月7日 优先权日2008年12月5日
发明者安顺爱, 金德姬, 金汉坤, 金汉星, 金真雄 申请人:株式会社爱茉莉太平洋