专利名称：异黑成熟颗粒的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种异黑成熟颗粒的质量控制方法，具体涉及一种主要由破布木果、 牛舌草、铁线蕨、刺糖等十味维吾尔药组成的异黑成熟颗粒的质量控制方法。
背景技术：
维吾尔医药是维吾尔民族在长期生活，生产和同疾病斗争中积累起来的经验和智 慧的结晶，是祖国医药的一个重要组成部分，无论在基础理论方面，还是在医疗方法和用药 规则方面都独树一帜，并已形成比较完备，独特的理论体系。异黑成熟颗粒是以破布木果、 牛舌草、铁线蕨、刺糖等十味药材按比例配制，进行浸泡、煎煮、过滤、浓缩、干燥、制粒等一 套工艺流程制备的维吾尔医复方制剂，主要用于肿瘤、糖尿病、高血压、冠心病、哮喘等由异 常黑胆质型体液所导致的疑难杂症的预防和治疗。异黑成熟颗粒处方组成独特，制备方法 体现现代技术，除本发明的申请人报道过有关该复方作用机理方面的文献外，尚未发现他 人对异黑成熟颗粒的质量控制方法发表相关文献。本发明的申请人先前获得的专利号为ZL 02130082. 8的发明专利“能够使异常黑 胆质型体液成熟和清除的药物及其制备方法”，仅仅对异常黑胆质成熟剂的处方组成、水煎 剂的制备方法及其防治疾病的部分作用机理进行了阐述；本发明的申请人先前申请的申请 号为201010127940.9的发明专利“异黑成熟颗粒的制备方法及其用途”，对异黑成熟颗粒 的现代制备工艺及其临床适应症进行阐述。以上两项专利并为对异黑成熟颗粒的质量控制 方法进行阐述。近年的医药研究表明，异黑成熟颗粒(异常黑胆质成熟剂)具有清除活性氧自由 基，提高机体抗氧化功能，保护淋巴细胞、线粒体及DNA氧化损伤，抗辐射损伤，抗血栓形 成，改善机体免疫功能，调节机体神经-内分泌-免疫网络功能，抑制人肝癌细胞(HepG2)、 人宫颈癌细胞(Hela)、T淋巴瘤细胞、乳腺癌细胞(Bcap-37)、人结肠癌细胞(Caco-2)、人早 幼粒白血病细胞(HL-60)等癌变细胞体外增值，抑制由1，2_ 二甲胼(DMH)诱导的大鼠结肠 异常隐窝病灶的形成，逆转人肝癌耐药细胞株多药耐药性等功能。目前，异黑成熟颗粒的研 究重点在于药学研究、药效学研究、毒理学研究等临床前研究工作。本发明在申请人以上两项发明专利的基础上，对异黑成熟颗粒的质量控制方法进 行全面阐述，以此解决异黑成熟颗粒定性和定量的含量测定及质量控制方法，为异黑成熟 颗粒的稳定性和质量检测提供现代化的技术方法，使其能够满足工业化生产的要求，并为 患者提供稳定、可控、安全的药物制剂。实践证明本方法提供的异黑成熟颗粒的质量控制方法简便，技术先进，重复性好，无环境污染，适用于工业化生产产品的含量测定和稳定性控制，至今未见国内外任何报道。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种异黑成熟颗粒的质量控制方法，该方法可用于异黑 成熟颗粒标志性成分的含量测定及制剂的稳定性测定。
本发明的技术解决方案是这样实现的首先，严格按照申请人先前申请的申请号 为201010127940. 9的发明专利“异黑成熟颗粒的制备方法及其用途”制备异黑成熟颗粒； 第二步，采用薄层色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中小茴香、薰衣草进行定性鉴别；第三 步，采用高效液相色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中甘草所含的甘草酸(C42H62O16)、香青兰 所含的田蓟苷(C15HltlO6)进行含量测定。上述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，异黑成熟颗粒供试品溶液色谱中，在与茴 香醛对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
上述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，异黑成熟颗粒供试品溶液色谱中，在与薰 衣草药材对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。上述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，异黑成熟颗粒每克含甘草以甘草酸 (C42H62O16)计，不得少于 1. 6329mg。上述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，异黑成熟颗粒每克含香青兰以田蓟苷 (C15H10O6)计，不得少于 0. 0786mg。本方法提供的异黑成熟颗粒的质量控制方法简便，技术先进，重复性好，无环境污 染，彰显技术进步，适用于工业化生产产品的含量测定和稳定性控制。本发明提供的质量控制方法具有以下特点(1)异黑成熟颗粒处方中小茴香的定性鉴别取异黑成熟颗粒10g，研细过四号筛，加乙醚50ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥 干，残渣加三氯甲烷0. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取茴香醛对照品lul，加乙醇制成每 Iml含Iul的溶液，作为对照品溶液；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液20ul，对照品溶 液lul，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯(17 2.5)为展开剂， 展开，取出，晾干。喷洒二硝基甲苯胼溶液显色。结果，供试品溶液色谱中，在与对照品溶液 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)异黑成熟颗粒处方中薰衣草的定性鉴别取异黑成熟颗粒10g，研细过四号筛，加乙醚50ml，冷浸24小时，滤过，滤液浓 缩至干，残渣加乙醚2ml使溶解，作为供试品溶液；另取薰衣草药材2g，加乙醚20ml，冷 浸24小时，滤过，滤液浓缩至干，残渣加乙醚2ml使溶解，作为对照品溶液；按照薄层色 谱法试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液10ul，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚 (60-90°C )_乙酸乙酯(17 3)为展开剂，展开，取出，晾干。喷洒香草醛硫酸溶液，力口 热至斑点显色清晰。结果，供试品溶液色谱中，在与药材对照品溶液色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。(3)异黑成熟颗粒处方中甘草的含量测定甘草酸的测定甘草中甘草酸的含量按照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版 一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验色谱柱=Diamonsil (250X4. 6mm, 5 μ m)；检测波长 250nm ；流动相以甲醇_0. 2mol/L醋酸铵-冰醋酸(67 33 1)；流速lml/min ；柱温 30°C。理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取甘草酸单铵盐对照品10mg，置50ml量瓶中，加流动 相制成每Iml含0. 2mg甘草酸单铵盐对照品溶液(折合甘草酸为0. 1959)，即得。
供试品溶液的制备取重量差异项下的本品内容物，研细过四号筛，精密称取lg， 置50ml量瓶中，加45ml流动相，超声处理15min，放冷，用流动相稀释至刻度，摇勻，0. 45 μ m 微孔滤膜滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入高效液相色谱仪 中测定，即得。本品每袋含甘草以甘草酸(C42H62O16)计，不得少于1. 6329mg。
(4)异黑成熟颗粒处方中香青兰的含量测定田蓟苷的测定香青兰中田蓟苷的含量按照高效液相色谱法(《中国药典》2005年 版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验色谱柱Diamonsil C18 (5 μ m，250 X 4. 6mm)；检测 波长:324nm ；流动相以乙腈-0. 5%甲酸溶液(27 73)；流速1. Oml/min ；柱温35°C。理 论板数按田蓟苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取田蓟苷对照品5. 7mg，置50ml量瓶中，加70%乙醇溶 解并稀释至刻度，摇勻，即得浓度为114yg/ml的田蓟苷对照品溶液。供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研细过四号筛，取Ig精密称 定，置25ml量瓶中，加20ml 70%乙醇，超声处理15min，放冷，用70%乙醇稀释至刻度，摇 勻，0. 45 μ m微孔滤膜过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入高效液相色谱仪中 测定，即得。本品每袋含香青兰以田蓟苷(C15HltlO6)计，不得少于0. 0786mg。
具体实施例方式本发明以实施例作进一步说明。实施例1取生产批号为081119的异黑成熟颗粒10g，研细过四号筛，按照处方中小茴香、薰 衣草的定性鉴别项下方法，制备供试品溶液和对照品溶液，分别对异黑成熟颗粒供试品溶 液中小茴香和薰衣草进行定性鉴别。按照处方中甘草、香青兰的含量测定项下方法，制备 供试品溶液和对照品溶液，分别对异黑成熟颗粒供试品溶液中甘草酸和田蓟苷进行含量测定。结果，在异黑成熟颗粒供试品溶液色谱中，在与茴香醛对照品溶液色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点；在与薰衣草药材对照品溶液色谱相应的位置上，也显相同颜色的 斑点；异黑成熟颗粒每克含甘草酸为1. 9729mg ；异黑成熟颗粒每克含田蓟苷为0. 1529mg。实施例2 取生产批号为081120的异黑成熟颗粒5g，研细过四号筛，按照处方中小茴香、薰 衣草的定性鉴别项下方法，制备供试品溶液和对照品溶液，分别对异黑成熟颗粒供试品溶 液中小茴香和薰衣草进行定性鉴别。按照处方中甘草、香青兰的含量测定项下方法，制备 供试品溶液和对照品溶液，分别对异黑成熟颗粒供试品溶液中甘草酸和田蓟苷进行含量测定。结果，在异黑成熟颗粒供试品溶液色谱中，在与茴香醛对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与薰衣草药材对照品溶液色谱相应的位置上，也显相同颜色的斑点；异黑成熟颗粒每克含甘草酸为1. 9857mg ；异黑成熟颗粒每克含田蓟苷为0. 1557mg。
权利要求
异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于首先，严格按照申请人先前申请的申请号为201010127940.9的发明专利“异黑成熟颗粒的制备方法及其用途”制备异黑成熟颗粒；第二步，采用薄层色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中小茴香、薰衣草进行定性鉴别；第三步，采用高效液相色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中甘草所含的甘草酸含量、香青兰所含的田蓟苷含量进行定量测定。
2.根据权利要求1所述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于异黑成熟颗粒 供试品溶液薄层色谱中，在与茴香醛对照品溶液薄层色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点o
3.根据权利要求1所述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于异黑成熟颗粒 供试品溶液薄层色谱中，在与薰衣草药材对照品溶液薄层色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。
4.根据权利要求1所述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于异黑成熟颗粒 每克含甘草以甘草酸(C42H62016)计，不得少于1.6329mg。
5.根据权利要求1所述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于异黑成熟颗粒 每克含香青兰以田蓟苷(C15H1Q06)计，不得少于0.0786mg。
6.根据权利要求1所述的异黑成熟颗粒的质量控制方法，其特征在于方法简便，技术 先进，重复性好，无环境污染，适用于工业化生产产品的含量测定和稳定性控制。
全文摘要
本发明提供一种异黑成熟颗粒的质量控制方法，其主要为首先，按照发明专利“异黑成熟颗粒的制备方法及其用途”，制备异黑成熟颗粒；第二步，采用薄层色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中小茴香、薰衣草进行定性鉴别在供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，可显相同颜色的斑点；第三步，采用高效液相色谱法分别对异黑成熟颗粒处方中甘草、香青兰进行含量测定异黑成熟颗粒每克含甘草以甘草酸计，不得少于1.6329mg；异黑成熟颗粒每克含香青兰以田蓟苷计，不得少于0.0786mg。
文档编号A61P9/00GK101829205SQ20101015990
公开日2010年9月15日 申请日期2010年4月29日 优先权日2010年4月29日
发明者哈木拉提·吾甫尔, 阿不都热依木·玉苏甫 申请人:新疆医科大学