一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法

专利名称：一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法
专利说明本发明涉及一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法。
背景技术：
骨质疏松症(Osteoporosis，OP)是一种代谢性骨病，它是以骨量减少和骨的微观 结构退化为特征，导致骨的脆性增加以致于易发生骨折的一种全身性骨骼疾病。目前，雌激素替代疗法(HRT) —直是绝经后骨质疏松症的首选方法，但它在诱发 生殖系统的癌症、引起深静脉血栓等方面的副作用，使HRT的应用有了广泛争议。急需一种 能够替代雌激素疗法的药物。中药，是我国的一大资源宝库，许多疑难杂症都能够从中药中找到治疗药方，因 此，从中药中寻找治疗骨质疏松症的药方是一种行之有效的方法。淫羊藿——味性辛、甘，温。归经归肝、肾经。主治补肾阳，强筋骨，祛风湿。 应用(1)用于肾虚阳痿、遗精早泄、腰膝痿软、肢冷畏寒。治阳痿遗泄，可配仙茅、山萸肉、 肉苁蓉等品；治腰膝痿软，可配杜仲，巴戟天、狗脊等品。(2)用于寒湿痹痛或四肢拘挛麻 木。治风湿痹痛偏于寒湿者，以及四肢麻木不仁或筋骨拘挛等，可与威灵仙、巴戟天、肉桂、 当归、川芎等配伍。葛藤——蔷薇目、豆科、葛属的多年生草质藤本植物，又名野葛，块根肥厚，富含淀 粉，全株有黄色长硬毛。茎长10余米，常铺于地面或缠于它物而向上生长。总状花序腋生， 长20厘米；花蓝紫色或紫色；花萼钟状，荚果条形，扁平；种子长椭圆形，红褐色。饲用价值 对多数牲畜的适口性中等，以马较为喜吃；舍饲时，用葛叶与其它粗料混合，有增进食欲之 效。四川盆地山区，广泛叶晒干，作为冬季饲料，猪很喜吃。福建曾推荐葛叶作为兔的饲料。 分布于东南亚和澳大利亚，生境为山地疏、密林中。异黄酮类化合物又称为“植物源雌激 素”，具有与雌激素相类似的作用，发明人推测葛根异黄酮可能有改善骨质疏松症的生物学 活性。现有技术中，没有利用淫羊藿提取物和葛藤提取物治疗骨质疏松的相关报道。

发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种抗骨质疏松的中药制剂，并提供了其制备 方法。本发明是通过以下技术方案实现的一种抗骨质疏松的中药制剂，是由以下重量份的原料药制成的淫羊藿提取物 1 2份，葛藤提取物1 2份。所述抗骨质疏松的中药制剂，还包括常规的药用辅料，原料药经处理后，加入药用 辅料，制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。所述抗骨质疏松的中药制剂的制备方法，包括以下步骤(1)取淫羊藿，加5 6倍量的(按重量倍数计，下同)50 70%乙醇(按体积百分浓度，下同)，回流提取两次，每次2 3小时，滤过，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱上，先用水快速冲洗，然后用50 70%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷雾干燥，即得淫羊藿提取物；或洗脱 液回收乙醇后，浓缩成稠膏，真空减压干燥，粉碎，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6 7倍量的60 70%乙醇，加热回流提取2 3次，每 次2 3小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好 的大孔吸附树脂柱上，先用水快速冲洗，然后用50 70%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回 收乙醇，进行喷雾干燥，即得葛藤提取物；或洗脱液回收乙醇后，浓缩成稠膏，真空减压干 燥，粉碎，即得葛藤提取物；(3)将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨质疏松的中药制剂；或将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，加入适量的常规药用辅料，制成颗粒剂、 片剂或胶囊剂。所述步骤(1)中，大孔吸附树脂柱的填充剂为DM130、HPD100或D312，预处理方法
及使用方法为常规方法，在此不再赘述。所述步骤(2)中，大孔吸附树脂柱的填充剂为DM130、HPD100或D312，预处理方法
及使用方法为常规方法，在此不再赘述。所述常规药用辅料为淀粉环糊精等。本发明的中药制剂，经动物试验(以去卵巢大鼠模型来模拟绝经后0P，观察制剂 对由雌激素缺乏引起OP的作用)证明，对骨质疏松症具有治疗作用。
具体实施例方式下面结合实施例和实验对本发明作进一步的说明。实施例1制备一种抗骨质疏松症的中药制剂制备方法如下(1)取淫羊藿，加5倍量的60%乙醇，回流提取两次，每次2小时，滤过，合并提 取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 (DM130)上，先用水快速冲洗，然后用60%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷 雾干燥，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6倍量的70 %乙醇，加热回流提取3次，每次2小时，合并 提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 (DM130)上，先用水快速冲洗，然后用70%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷 雾干燥，即得葛藤提取物；(3)将等量的淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，加入适量的常规药用辅料，制成片 剂。实施例2制备一种抗骨质疏松症的中药制剂制备方法如下(1)取淫羊藿，加6倍量的50%乙醇，回流提取两次，每次3小时，滤过，合并提 取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 (HPD100)上，先用水快速冲洗，然后用50%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，浓缩成稠膏，真空减压干燥，粉碎，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加7倍量的60 %乙醇，加热回流提取2次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 (HPD100)上，先用水快速冲洗，然后用50%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，浓缩 成稠膏，真空减压干燥，粉碎，即得葛藤提取物；(3)将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合(二者质量比为1 2)，加入适量的常规 药用辅料，制成颗粒剂。实施例3制备一种抗骨质疏松症的中药制剂制备方法如下(1)取淫羊藿，加5倍量的70%乙醇，回流提取两次，每次2小时，滤过，合并提取 液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱(D312) 上，先用水快速冲洗，然后用70%乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷雾干燥， 即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6倍量的70 %乙醇，加热回流提取3次，每次3小时，合并 提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 (D312)上，先用水快速冲洗，然后用60 %乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷 雾干燥，即得葛藤提取物；(3)将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合(二者质量比为2 1)，加入适量的常规 药用辅料，制成胶囊剂。动物试验1 材料1. 1 药物受试品为片剂(实施例1制备，葛藤提取物和淫羊藿提取物的比例为1 1)含 总黄酮> 60%，批号:090411o 三个剂量组分别定为200mg/kg、100mg/k g、50mg/kg，使用前分别配制成2 %、1 %、
0. 5%的水溶液，以10ml/kg灌胃给药，每日一次。对照品尼尔雌醇片2mg/片，上海医药集团有限公司华联制药厂产品，批号 060901。以1. 5mg/kg剂量给药，给药前配制成0. 015 %的水溶液以10ml/kg灌胃，每周两次 (每周一、四)。1. 2 动物Wistar雌性大鼠，280_300g，山东大学实验动物中心提供，动物合格证号 SCXK (鲁)20030004，合格证编号0001387。1.3环境、饲料环境山东省中医药研究院药理实验中心，许可证号SYXK(鲁)20050052。饲料全价营养鼠饲料，山东省实验动物管理中心提供，合格证号 SCXK (鲁)20040014。1. 4仪器梅特勒-托利多GB-303电子天平，梅特勒中国公司；DDL-5低速冷冻离 心机，上海安亭科学仪器厂；KNOE PRO型全自动生化分析仪，芬兰康艺仪器公司；YB-6LF生 物组织石蜡包埋机、YT-7F型生物组织摊烤片机、ZT-12P生物组织自动脱水机，湖北孝感亚光医用电子技术有限公司；LEICA-RM2135切片机、LEICA-DM/LS显微镜，德国LEICA公司； SX-5-12箱式电阻炉、KSW电炉温度控制器，北京永光明医疗仪器厂；PV-9100X射线能谱仪， 日本飞利浦；S-520扫描电镜，日本日立；GMJ型全自动放射免疫γ计数器，江苏医疗电子 研究所；YLS-7A足趾容积测量仪、YLS-16A小动物骨骼强度测定仪，山东省医学科学院设备
站广品。
1. 5试剂碘[1251]骨钙素放射免疫分析药盒北京市普尔伟业生物科技有限公司 产品，批号20070804，20070824;碘[1251]雌二醇放射免疫分析药盒，北京科美东雅生物 技术有限公司，批号20070925。碱性磷酸酶(ALP)试剂盒，批号070251，磷(P)试剂盒，批 号070061，钙(Ca)试剂盒，批号070113，北京中生北控生物技术股份有限公司产品。2 方法2. 1造模雌性wistar大鼠，80只，10%硫化钠水溶液下腹部正中脱毛约1. 5cm2左 右，40mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉后仰位固定，分层剥离，暴露两侧卵巢，结扎后完整切除两 侧卵巢，止血后分层缝合。假手术组(10只)做相同的手术操作，但不切除卵巢。术后连续 3天硫酸庆大霉素抗感染，自由饮水、摄食。2. 2分组与给药手术3日后剔除状态较差大鼠，按照体重随机分为6组假手术 组，去卵巢模型组，阳性对照组，制剂200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg组。分组后各给药组给 与相应药物，假手术组和模型组给以同体积凉开水，尼尔雌醇组每周给药两次(1. 5mg/kg, 周一、四给药)，连续灌胃6个月。每周称取体重，并按新体重调整灌胃剂量。各组大鼠自由 饮水、摄食。2. 3测定指标血生化指标给药6个月后，仰卧位固定大鼠，颈外静脉采血，3000r/min离心 15min，分离血清，分别测定血清钙、磷、碱性磷酸酶含量及血清雌二醇、骨钙素、降钙素含量。骨骼标本采血后脱颈处死大鼠，完整分离大鼠的左右两侧股骨，剔除所有附着的 肌肉和结缔组织，一只以10%甲醛溶液固定，行病理学检查；一只用生理盐水浸泡的湿纱 布包裹，密封-20°c保存，分别测定股骨的湿重、体积，生物力学性能。力学测定后收集残骨 200°C烘干8h，称取干重，马氟炉800°C灰化后称取灰重，灰化后标本测定骨中钙、磷、氯的
百分含量。脏器标本充分暴露并剥离取出子宫，电子天平称重，计算子宫的脏器指数。脏器指数=(子宫+体重)X 100%2. 4数据分析所有实验数据以平均数士标准差表示，用SPSS 11. 0进行t检验分 析。3 结果3. 1对去卵巢大鼠体重及脏器系数的影响连续给药六个月后，分别观察各组大鼠体重，结果提示本发明的中药制剂(以下 简称制剂)对造模引起的大鼠体重增加具有明显的降低作用，其中高剂量组与模型组比较 具有非常显著的统计学差异，中、低剂量作用也较明显；对子宫系数的影响三个剂量均具有 明显的统计学查异，其中高剂量组影响最为明显，三个剂量呈现较好的量效关系趋势，但作 用总体而言较尼尔雌醇组较差，如表1所示。
表1制剂对去卵巢大鼠体重及脏器系数的影响(X 土S，η=10)
权利要求
一种抗骨质疏松的中药制剂，其特征在于，是由以下重量份的原料药制成的淫羊藿提取物1～2份，葛藤提取物1～2份。
2.根据权利要求1所述的一种抗骨质疏松的中药制剂，其特征在于还包括常规的药 用辅料，原料药经处理后，加入药用辅料，制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。
3.权利要求1或2所述的一种抗骨质疏松的中药制剂的制备方法，其特征在于，包括以 下步骤(1)制备淫羊藿提取物取淫羊藿，加5 6倍量的50 70%乙醇，回流提取两次，每 次2 3小时，滤过，合并提取液，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树脂柱 上，先用水快速冲洗，然后用50 70 %乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行喷雾 干燥，即得淫羊藿提取物；或洗脱液回收乙醇后，浓缩成稠膏，真空减压干燥，粉碎，即得 淫羊藿提取物；(2)制备葛藤提取物取葛藤，切厚片，加6 7倍量的60 70%乙醇，加热回流提取 2 3次，每次2 3小时，合并提取液，离心，取上清液加于已事先预处理好的大孔吸附树 脂柱上，先用水快速冲洗，然后用50 70 %乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，进行 喷雾干燥，即得葛藤提取物；或洗脱液回收乙醇后，浓缩成稠膏，真空减压干燥，粉碎，即 得葛藤提取物；(3)将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨质疏松的中药制剂；或将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，加入常规药用辅料，制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中，大孔吸附树脂柱的 填充剂为 DM130、HPD100 或 D312。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，大孔吸附树脂柱的 填充剂为 DM130、HPD100 或 D312。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中，所述常规药用辅料 为淀粉或环糊精。
全文摘要
本发明公开了一种抗骨质疏松的中药制剂，是由以下重量份的原料药制成的淫羊藿提取物1～2份，葛藤提取物1～2份。制备方法为(1)取淫羊藿，加乙醇回流提取两次，合并提取液，回收乙醇并浓缩，离心，取上清液上大孔吸附树脂柱上，用乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，喷雾干燥，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加乙醇加热回流提取2～3次，合并提取液，回收乙醇并浓缩，离心，取上清液上大孔吸附树脂柱上，用乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥，即得葛藤提取物；(3)将淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨质疏松的中药制剂。本发明的中药制剂，经动物试验证明，对骨质疏松症具有治疗作用。
文档编号A61K9/20GK101953881SQ201010509858
公开日2011年1月26日 申请日期2010年10月18日 优先权日2010年10月18日
发明者孙付军, 李贵海, 陆永辉 申请人:山东省中医药研究院