专利名称：从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及从动物骨提取有效部位后制成的注射剂中分离的骨多肽化合物，具体讲，涉及从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物、以及其制备方法和应用。
背景技术：
骨肽注射剂是以健康猪或胎牛的四肢骨为原料，经提取、去蛋白、提纯及超滤等工艺制得的注射剂，内含多种成分，具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成以及调节钙磷代谢、增加骨钙沉淀等药理作用，临床用于促进骨折愈合，也可用于治疗增生性骨关节疾病及风湿、类风湿关节炎等。目前关于动物骨中提取多肽的研究很多，市场上也出现了很多相关产品。但目前针对动物骨提取物的产品还都是混合物，其组成成分不确切，随着其临床应用的不断推广，有关其不良反应的报道时有所见。其中包括变态反应、关节痛、血眼血尿、 高血钙等。这是由于动物骨提取物的动物来源、工艺条件的细小变化均有可能导致物质基础的变化，而物质基础变化可能会引起不可预测的临床不良反应，因此为保证药品质量稳定，提高临床用药安全性，分离分析动物骨提取物的内在成分非常必要。因而，发明人对由动物骨提取物制得的骨肽注射剂做了进一步的研究，分离其有效成分，为骨肽注射剂的安全用药奠定了基础。
发明内容
本发明的首要发明目的在于提供从骨肽注射剂中分离出来的骨多肽化合物。本发明的第二发明目的在于提供从骨肽注射剂中分离出来的骨多肽化合物的分离方法。本发明的第三发明目的在于提供从骨肽注射剂中分离出来的骨多肽化合物的应用。本发明的第四发明目的在于提供含有从骨肽注射剂中分离出来的骨多肽化合物的注射剂。为了实现本发明的目的，采用的技术方案为本发明涉及一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物A，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :1，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。本发明涉及一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物B，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :2，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。本发明涉及一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物C，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :3，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。本发明涉及一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物D，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :4，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。本发明涉及一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物E，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :5，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。其中SEQ ID NO :1 的氨基酸序列为Arg-Glu-Asp-Arg-Val-Ala-Tyr-Phe-Phe-Glu-Pro -Arg ；SEQ ID NO :2 的氨基酸序列为Thr-Pro-Leu-Val-Gly-Lys-Thr-Thr-Trp-Pro-Leu -Lys ；SEQ ID NO 3的氨基酸序列为Gly-Pro-Ser-Gly-Pro-LyS-Gly-Pro-Ser-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Gly-Leu ；SEQ ID NO 4的氨基酸序列为Lys-Leu-Leu-Gly-Val-Ala-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Gly-Gly-Ala-Gly-Pro-Arg ；SEQ ID NO 5 的氨基酸序列为Arg-Gln-Gly-Pro-Leu-Gly-Gln-Pro-Pro_Arg。本发明所述的骨多肽化合物A、骨多肽化合物B、骨多肽化合物C、骨多肽化合物D 和骨多肽化合物E是由骨肽注射剂经过高效液相色谱分离得到，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液，是由健康猪和/或胎牛的四肢骨经提取、去蛋白、提纯及超滤等工艺制得的骨肽提取物制备而成的制剂。本发明中采用的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。其中，本发明可采用专利申请 200610150890. X中所制备的注射用骨肽及专利申请200610150891. 4中所制备的骨肽氯化
钠注射液。其中，在分离骨多肽化合物中，高效液相色谱分离的条件为C18色谱柱， 250mmX50. Omm，5u ；流动相A 含0. 05%甲酸的水溶液；流动相B :MeCN(乙腈)；流速:1ml/ min ；柱温:40°C ；梯度洗脱
权利要求
1.一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物A，其特征在于，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :1，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。
2.一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物B，其特征在于，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :2，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。
3.一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物C，其特征在于，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :3，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。
4.一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物D，其特征在于，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :4，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。
5.一种从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物E，其特征在于，所述的骨多肽化合物的氨基酸序列为SEQ ID NO :5，所述的骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。
6.根据权利要求1 5所述的骨多肽化合物，其特征在于，所述的骨多肽化合物是由骨肽注射剂通过高效液相色谱分离得到。
7.根据权利要求6所述的骨多肽化合物，其特征在于，所述的骨肽注射剂是由健康猪和/或胎牛的四肢骨经提取、去蛋白、提纯及超滤等工艺制得的骨肽提取物制备而成的制剂。
8.根据权利要求6所述的骨多肽化合物，其特征在于，所述的高效液相色谱分离的条件为C18色谱柱，250mmX50. 0mm, 5u ；流动相A 含0. 05%甲酸的水溶液；流动相B :乙腈； 流速:lml/min ；柱温:40°C ；梯度洗脱timeB%00100405060100700洗脱时间依次为化合物A 13 14分钟，化合物B 15. 5 16. 5分钟，化合物C 18 19分钟，化合物D观 四分钟，化合物E 36 37分钟。
9.权利要求1所述的骨多肽化合物A、权利要求2所述的骨多肽化合物B、权利要求3 所述的骨多肽化合物C、权利要求4所述的骨多肽化合物D、权利要求5所述的骨多肽化合物E在制备抗炎，镇痛，促进骨折愈合药物中的应用。
10.含有权利要求1所述的骨多肽化合物A、权利要求2所述的骨多肽化合物B、权利要求3所述的骨多肽化合物C、权利要求4所述的骨多肽化合物D、权利要求5所述的骨多肽化合物E中至少一种的注射剂，其特征在于，所述的注射剂包括水针、粉针、输液。
11.根据权利要求10所述的含有骨多肽化合物的注射剂，其特征在于，所述的注射剂中还含有赋形剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂中的至少一种。
全文摘要
本发明涉及从动物骨提取有效部位后制成的注射剂中分离的骨多肽化合物，具体讲，涉及从骨肽注射剂中分离的骨多肽化合物、以及其制备方法和应用。其中，骨肽注射剂包括粉针、水针和输液。骨多肽化合物A、B、C、D、E的氨基酸序列分别为SEQ ID NO1、SEQ IDNO2、SEQ ID NO3、SEQ ID NO4、SEQ ID NO5。本发明还涉及含有骨多肽化合物的制剂。本发明还涉及所述的骨多肽化合物在制备抗炎、镇痛、促进骨折愈合药物中的应用。经过动物实验及临床试验证实，本发明的骨多肽化合物具有良好的效果。
文档编号A61K9/08GK102212109SQ20111011051
公开日2011年10月12日 申请日期2011年4月29日 优先权日2011年4月29日
发明者丛艳, 俞嘉林, 吴晶晶, 权晓丹 申请人:俞嘉林