专利名称：一种复方艾夫他滨药物组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种复方艾夫他滨药物组合物及其制备方法和用途，尤其涉及一种可用于治疗乙肝病毒的稳定的复方艾夫他滨药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的，在我国约有I. 2亿人是乙肝病毒携带者，现患乙肝2800万，有较大一部分人会演变成慢性肝炎、肝硬化或肝癌，严重危害着人类健康的疾病，因此开发抗乙肝病毒的药物具有极其重大的意义。目前临床上治疗乙肝的主要核苷类抗病毒药物有拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦酯、恩替卡韦等等，其中恩替卡韦 是目前最强的药物。但是对于慢性乙肝患者而言，根治乙肝是非常困难的，其难点在于肝细胞核内的cccDNA(乙肝病毒共价闭环DNA)的清除非常困难，患者体内的乙肝病毒绝大部分分布在肝脏，但在血液(特别是外周单核细胞)和其他组织如脾、肾、胰腺、淋巴、精子等等也有一定的分布。外周血液白细胞(特别是单核细胞)中能够检测到cccDNA是比较肯定的，虽然目前的报道对于乙肝病毒能否在其细胞内复制有不少争议，但其游走性能够增加其他组织感染的危险性是存在的。因此，在乙肝的早期急性发作期及时防止其慢性转化具有十分重要的意义。对于普通的慢性乙肝病人，由于肝细胞是病毒的主要复制和残留场所，其他组织的乙肝病毒的残留通常可以忽略不计。因此，目前的慢性乙肝患者治疗方案采用口服制剂是非常合理的。艾夫他滨是核苷类抗病毒药物。对体外及实验性感染动物体内的乙型肝炎病毒(HBV)有较强的抑制作用。艾夫他滨可在HBV感染细胞和正常细胞内代谢生成活性代谢产物艾夫他滨三磷酸盐，艾夫他滨三磷酸盐掺入到病毒DNA链中、阻断病毒DNA的合成。对大多数乙型肝炎患者的血清HBVDNA检测结果表明，艾夫他滨能迅速抑制HBV复制，其抑制作用持续于整个治疗过程，同时使血清氨基转移酶降至正常。长期应用可显著改善肝脏坏死炎症性改变，并减轻或阻止肝脏纤维化的进展。恩替卡韦为鸟嘌呤核苷类似物，对乙肝病毒(HBV)多聚酶具有抑制作用。它能够通过磷酸化成为具有活性的三磷酸盐，三磷酸盐在细胞内的半衰期为15小时。通过与HBV多聚酶的天然底物三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争，恩替卡韦三磷酸盐能抑制病毒多聚酶(逆转录酶)的所有三种活性=(I)HBV多聚酶的启动；(2)前基因组mRNA逆转录负链的形成；
(3)HBV DNA正链的合成。现代研究表明，单独将艾夫他滨或恩替卡韦用于抗乙肝病毒均可获得较为显著的效果。但是在临床表现中，单一治疗药剂在作用一定时间后往往会出现作用降低甚至耐药性，这会对后续用药造成很大阻碍，从而影响整体治疗效果。对此，一般可采取合并用药的方法，即联合使用艾夫他滨和恩替卡韦，增加耐药所需的基因位点数，降低发生耐药性的概率。此外，由于艾夫他滨与恩替卡韦对病毒具有相似的作用机制，可以推断两种药物组合具有协同作用。文献报道恩替卡韦与拉米夫定、阿德福韦和特诺福韦的相互作用时，发现恩替卡韦和与其相互作用药物的稳态药代动力学均没有改变。由此可推断艾夫他滨与恩替卡韦相互作用时同样不改变药代动力学稳态。本发明人在细胞学实验中证实，艾夫他滨联合恩替卡韦可以提高抗病毒活性，减少耐药性，延长有效作用时间，具有较好的抗病毒效果。但在动物实验中，发现艾夫他滨在胃酸中表现出极不稳定的特性，使得动物体内艾夫他滨的有效含量大为减少，疗效也随之降低
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种复方艾夫他滨药物组合物及其制备方法和用途。本发明人在研究过程中发现艾夫他滨的稳定性较差。尤其是耐酸性不好，且酸性条件下艾夫他滨会产生5-氟胞嘧啶的杂质。试验结果表明艾夫他滨最稳定的pH范围为
5.5 7. 5。恩替卡韦在整个pH条件下相对比较稳定,最稳定的pH范围为小于4. 5和大于
7.5，因此，二者联合后能够保证在整个肠道均有吸收。因此，本发明提供了一种复方艾夫他滨药物组合物，其中，所述药物组合物包含艾夫他滨或其可药用盐、恩替卡韦或其可药用盐以及抗酸稳定剂。本发明所述的术语“艾夫他滨或其可药用盐”包括4-氨基-5-氟-1_((2R，5S)-5-(羟甲基)-2，5-二氢呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮)或其可药用盐，可以是晶体形式或非晶体形式，或者各种多晶型的溶剂化物，例如水合物。作为具体化合物的艾夫他滨，其化学结构式如下
HH2
Jj
H艾夫他滨的可药用盐的实例包括其碱性残基与无机酸或有机酸形成的盐，以及上述各种盐的组合。所述的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；所述的有机酸包括乙酸、三氟乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、苯甲酸、苯乙酸、氨基酸、水杨酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸；所述氨基酸的实例包括但不限于精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等。从疗效角度考虑，可以优选为4-氨基-5-氟-I- ((2R，5S) _5_ (羟甲基)_2，5 二氢呋喃-2-基)嘧啶-2 (IH)-酮，并且其光学上的立体异构体、或其外消旋混合物、互变异构体同样适用。本发明人分别对艾夫他滨、恩替卡韦及两者混合物的甲醇溶液进行紫外吸收光谱表征，参见图I 3。图I显示艾夫他滨在甲醇溶液中最大紫外吸收峰分别为282. Onm和240. 5nm，有两个特征峰。图2显示恩替卡韦在甲醇溶液中最大紫外吸收峰为255. 5nm，有一个特征峰。图3表示艾夫他滨与恩替卡韦(I I)混合物在甲醇溶液中最大紫外吸收峰分别为278. Onm和246. Onm,有两个特征峰，说明两种成分复配后特征峰发生了变化，并且在246. Onm处为两种成分混合物的最大吸收峰位。基于此，本发明人考察了艾夫他滨和恩替卡韦之间的相互影响，主要方法是通过HPLC法在246nm条件下检测两种成分的分离度，色谱图参见图4，结果表明两种成分在同一色谱条件下可以很好的分离。根据本发明的药物组合物，其中，所述抗酸稳定剂可选自硅酸镁铝、碳酸钙、精氨酸或葡甲胺中的一种或多种；更优选为葡甲胺或精氨酸中的一种或两种。根据本发明的药物组合物，其中，所述艾夫他滨与恩替卡韦的重量比可以为2. 5 80 1，优选为5 40 1，更优选为5 20 I ;所述艾夫他滨与抗酸稳定剂的重量比可以为I : O. I 10，优选为I : O. 5 8，更优选为I : I 5。根据本发明的药物组合物，其中，所述药物组合物还可以包含药用辅料；作为优选，所述药用辅料选自稀释剂、崩解剂、粘合剂、抗粘剂、润滑剂或肠溶包衣材料中的一种或多种；所述稀释剂优选自乳糖、甘露醇、磷酸氢钙、淀粉或预胶化淀粉的一种或多种，更优选自乳糖、预胶化淀粉或淀粉中的一种或多种；所述崩解剂优选自羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或低取代羟丙基纤维素的一种或多种，更优选自羧甲基淀粉钠或交联聚维酮中的一种或两种；所述粘合剂优选自羟丙甲纤维素、聚维酮、甲基纤维素、微晶纤维素或预胶化淀粉中的一种或多种；所述抗粘剂优选自微粉硅胶或滑石粉中的一种或两种；所述润滑剂优选为硬脂酸镁；所述肠溶包衣材料优选自丙烯酸树脂L100-55、丙烯酸树脂L30D-55水分散体、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯HP-55或HP-50中的一种或多种。根据本发明的药物组合物，其中，所述艾夫他滨和恩替卡韦的总重量与所述药用辅料的重量比可以为I : O. 5 100，优选为I : I 60。 上述优选实施方案将艾夫他滨、恩替卡韦、抗酸稳定剂以及药用辅料的配比控制在所述范围内，以使本发明的复方艾夫他滨药物组合物及其制剂经口服后在胃液中具有很好的抗酸能力，同时在肠液中具有较好的崩解释放特性，同时使恩替卡韦在整个生理环境均有较好的吸收，还保证了其良好的存储稳定性。根据本发明的药物组合物，其中，所述药物组合物可以优选为口服片剂或胶囊制剂；作为优选，在该药物组合物中，艾夫他滨为肠溶型。本发明还提供了上述药物组合物的制备方法，该制备方法包括以下步骤(I)将艾夫他滨或其可药用盐与抗酸稳定剂混合，然后与一种或多种粘合剂混合，将所得混合物附着于空白载体上制成含药载体；(2)将步骤(I)所得的含药载体与恩替卡韦或其可药用盐以及一种或多种药用辅料混合。本发明还提供了上述药物组合物的另一种制备方法，该制备方法包括以下步骤
(I)将艾夫他滨或其可药用盐与抗酸稳定剂混合，然后与一种或多种粘合剂和一种或多种用于药物制粒的药用辅料混合，将所得混合物制备成含药颗粒；(2)将步骤(I)所得含药颗粒与恩替卡韦或其可药用盐以及一种或多种药用辅料混合。根据本发明药物组合物的制备方法，其中，在所述步骤⑴之后和步骤(2)之前还可以包括以下步骤中的一个或两个
(Ia)将恩替卡韦或其可药用盐制备成颗粒；和(Ib)将肠溶衣材料附着于步骤⑴所制备的颗粒或含药载体上。根据本发明药物组合物的制备方法，其中，所述步骤(I)中的粘合剂可以包括
O.5 5wt%轻丙甲纤维素溶液或3 IOwt %聚维酮溶液。根据本发明药物组合物的制备方法，其中，所述步骤(I)中用于药物制粒的药用辅料包括乳糖、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、滑石粉中的一种或多种。以下是本发明提供的制备方法的两种优选实施方案在一种实施方案中，本发明的制备方法包括将艾夫他滨与抗酸稳定剂混合均匀， 溶于含有O. 5 5重量％羟丙甲纤维素或3 10重量％聚维酮的水溶液中，将得到的混合液喷涂于直径为O. I 1_的圆形空白微丸上，干燥后得到含药微丸。将含药微丸置于流化床(或包衣锅)中，使微丸的温度控制在25 35°C，将常规的肠溶衣水分散体混悬液或溶液喷涂在含药微丸上，制得艾夫他滨肠溶微丸。最后将艾夫他滨肠溶微丸与一种或多种其它辅料以及恩替卡韦混合均匀，直接装胃溶胶囊或压片。在另一种实施方案中，本发明的制备方法包括将艾夫他滨与抗酸稳定剂混合均匀，再加入一种或多种其它辅料(如乳糖、微晶纤维素、羧甲淀粉钠、滑石粉等)混合均匀，将得到的混合物加入含有O. 5 5重量％羟丙甲纤维素或3 10重量％聚维酮的水溶液中，制软材后置于挤压造粒机中，压成直径O. I Imm的小条，置于离心造粒机中切割研磨成含药圆形微丸，干燥后制得艾夫他滨含药微丸。将含药微丸置于流化床(或包衣锅)中，使微丸的温度控制在25 35°C，将常规的肠溶衣水分散体混悬液或溶液喷涂在含药微丸上，制得艾夫他滨肠溶微丸。最后与一种或多种其它辅料以及恩替卡韦混合均匀，直接装胃溶胶囊或压片。本发明还提供了本发明药物组合物或者按照本发明方法制得的药物组合物用于制备治疗乙肝病毒药物的用途。根据本发明提供的用途，其中，所述药物的每单位制剂中可以含有艾夫他滨I 50mg,优选为I 25mg,更优选为5 20mg ;可以含有恩替卡韦O. I IOmg,优选为O. I 5mg,更优选为O. I 2mg。本发明具有以下有益效果I、本发明中的复方艾夫他滨药物组合物具有较好的稳定性，能有效避免艾夫他滨产生5-氟胞嘧啶杂质，适合于长期储藏。2、本发明的药物组合物能够防止艾夫他滨受到胃酸的破坏，并能在肠液中快速完全的释放药物，充分发挥活性成分艾夫他滨的治疗作用，同时恩替卡韦在整个生理环境中均能保持治疗作用，因此二者结合的药物组合物具有加和的治疗作用。2、本发明中制备所述药物组合物的方法能够保证物料的流动性，适合工业化大生产。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图I示出了艾夫他滨在甲醇溶液中的紫外吸收光谱图2示出了恩替卡韦在甲醇溶液中的紫外吸收光谱图；图3示出了艾夫他滨与恩替卡韦(I I)的混合物在甲醇溶液中的紫外吸收光谱图；图4示出了本发明的复方艾夫他滨药物组合物的含量测定HPLC色谱图；图5示出了本发明实施例1、3、5、7中的复方艾夫他滨药物组合物的艾夫他滨释放度测定曲线；图6示出了本发明实施例1、3、5、7中的复方艾夫他滨药物组合物的恩替卡韦释放度测定曲线；图7示出了本发明实施例2、4、6、8中的复方艾夫他滨药物组合物的艾夫他滨释放度测定曲线；
·
图8示出了本发明实施例2、4、6、8中的复方艾夫他滨药物组合物的恩替卡韦释放度测定曲线。
具体实施例方式下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。本部分对本发明试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在上下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。以下实施例中，如无特别说明，所述肠溶衣混悬液或溶液是通过以下步骤制备的将处方量的肠溶型材料丙烯酸树脂(如L30D-55)水分散体加入水中，再加适量的增塑剂、滑石粉等配制成水性混悬液包衣。这里也可以采用本领域技术人员公知的其他制备方法，例如将丙烯酸树脂(如L100-55)或邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯分别溶于80 90%乙醇中充分搅拌溶解，加入增塑剂及滑石粉等混合均匀。以下实施例中，如无特别说明，所述比例、份数均为重量比、重量份数。为了描述方便，原料采用克数，也可以采用重量份替换。首先，本发明人通过测定艾夫他滨和恩替卡韦原料在不同pH值溶液条件下其含量随时间变化的情况，验证了艾夫他滨和恩替卡韦在不同PH条件下的稳定性，具体详述如下参照中国药典2010年版二部附录根据药物特性分别配置pH I. 2溶液、pH 3. 6缓冲溶液、PH 4. 5缓冲溶液、pH 5. 5缓冲溶液、pH 6. 5缓冲溶液、pH7. O缓冲溶液、pH 7. 5缓冲溶液、PH 8. O缓冲溶液、pH 9. O缓冲溶液。(I)精密称取艾夫他滨和恩替卡韦原料各10. Omg分别置于两个25mL量瓶中，加入PH I. 2溶液至刻度，使原料溶解并摇匀，然后分别于不同时间等量量取上述溶液lmL，加水稀释一倍，并调节PH约为7. O。按照下述HPLC含量测定条件，进样20 μ L，记录色谱图。其中，为尽量保证实验的准确性，应在5分钟内将量瓶内的溶液配好，并在配好后立即取液并按步骤进行测定，且以该次测定时间记为O ;作为对照，假设IOmg艾夫他滨或恩替卡韦稳定存在，以其在相同浓度的ImL检测溶液中的计算含量值为对比值，并记为100%。下同。
(2)精密称取艾夫他滨和恩替卡韦原料各10. Omg分别置于两个25mL量瓶中，重复做8次，然后分别加pH 3. 6、4. 5、5. 5、6. 5、7. O、7. 5、8. O、9. O缓冲溶液并稀释至刻度，摇匀，将全部量瓶放置在37°C水浴中，分别于不同时间点等量量取上述溶液lmL，加水稀释一倍，按照下述HPLC含量测定条件，进样20 μ L，记录色谱图。(3) HPLC法的检测条件艾夫他滨的HPLC条件流动相乙腈:水=92 8 ;流速lmL/min ;波长240nm ；柱温30 35°C ;色谱柱手性分离柱250mmX4. 6mm, 5 μ m。恩替卡韦的HPLC条件流动相乙腈水=10 90 ;流速lmL/min ;波长254nm ;柱温30 35°C ;色谱柱KromasilC 184. 6mmX 250mm, 5 μ m。检测结果见表I和表2。表I艾夫他滨在不同pH值溶液中的稳定性
权利要求
1.一种复方艾夫他滨药物组合物，所述药物组合物包含艾夫他滨或其可药用盐、恩替卡韦或其可药用盐以及抗酸稳定剂。
2.根据权利要求I所述的药物组合物，其中，所述抗酸稳定剂选自硅酸镁铝、碳酸钙、精氨酸或葡甲胺中的一种或多种；更优选为葡甲胺和精氨酸中的一种或两种。
3.根据权利要求I或2所述的药物组合物，其中，所述艾夫他滨与恩替卡韦的重量比为2.5 80 1，优选为5 40 1，更优选为5 20 I ;所述艾夫他滨与抗酸稳定剂的重量比为I : O. I 10，优选为I : O. 5 8，更优选为I : I 5。
4.根据权利要求I至3中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包含药用辅料；作为优选，所述药用辅料选自稀释剂、崩解剂、粘合剂、抗粘剂、润滑剂或肠溶包衣材料中的一种或多种；所述稀释剂优选自乳糖、甘露醇、磷酸氢钙、淀粉和预胶化淀粉的一种或多种，更优选自乳糖、预胶化淀粉和淀粉中的一种或多种；所述崩解剂优选自羧甲基淀粉钠、交联聚维酮和低取代羟丙基纤维素的一种或多种，更优选自羧甲基淀粉钠和交联聚维酮中的一种或两种；所述粘合剂优选自羟丙甲纤维素、聚维酮、甲基纤维素、微晶纤维素和预胶化淀粉中的一种或多种；所述抗粘剂优选自微粉硅胶和滑石粉中的一种或两种；所述润滑剂优选为硬脂酸镁；所述肠溶包衣材料优选自丙烯酸树脂L100-55、丙烯酸树脂L30D-55水分散体、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯HP-55和HP-50中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中，所述艾夫他滨和恩替卡韦的总重量与所述药用辅料的重量比为I : O. 5 100，优选为I : I 60。
6.根据权利要求I至4中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物为口服片剂 或胶囊制剂；优选地，在所述药物组合物中，艾夫他滨为肠溶型。
7.权利要求I至6中任一项所述药物组合物的制备方法，该制备方法包括以下步骤 (1)将艾夫他滨或其可药用盐与抗酸稳定剂混合，然后与一种或多种粘合剂混合，将所得混合物附着于空白载体上制成含药载体； (2)将步骤(I)所得的含药载体与恩替卡韦或其可药用盐以及一种或多种药用辅料混口 ο
8.权利要求I至6中任一项所述药物组合物的制备方法，该制备方法包括以下步骤 (1)将艾夫他滨或其可药用盐与抗酸稳定剂混合，然后与一种或多种粘合剂和一种或多种用于药物制粒的药用辅料混合，将所得混合物制备成含药颗粒； (2)将步骤(I)所得含药颗粒与恩替卡韦或其可药用盐以及一种或多种药用辅料混口 ο
9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其中，在所述步骤(I)之后和步骤(2)之前还包括以下步骤中的一个或两个 (Ia)将恩替卡韦或其可药用盐制备成颗粒；和 (Ib)将肠溶衣材料附着于步骤(I)所制备的颗粒或含药载体上。
10.根据权利要求7或8所述的制备方法，其中，所述步骤(I)中的粘合剂包括O.5 5wt%羟丙甲纤维素溶液和3 IOwt%聚维酮溶液中的一种或两种。
11.根据权利要求8所述的制备方法，其中，所述步骤(I)中用于药物制粒的药用辅料包括乳糖、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、滑石粉中的一种或多种。
12.权利要求I至6中任一项所述的药物组合物，或者按照权利要求7至11中任一项所述的制备方法制得的药物组合物用于制备治疗乙肝病毒药物的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其中，所述药物的每单位制剂中含有艾夫他滨I 50mg,优选为I 25mg,更优选为5 20mg ;含有恩替卡韦O. I IOmg,优选为O. I 5mg,更优选为O. I 2mg。
全文摘要
本发明提供了一种复方艾夫他滨药物组合物，所述药物组合物包含艾夫他滨或其可药用盐、恩替卡韦或其可药用盐以及抗酸稳定剂。本发明还提供了制备上述药物组合物的方法，该方法包括(1)将艾夫他滨或其可药用盐与抗酸稳定剂混合，然后与一种或多种粘合剂混合，将所得混合物附着于空白载体上制成含药载体；(2)将步骤(1)所得的含药载体与恩替卡韦或其可药用盐以及一种或多种药用辅料混合。本发明还提供了上述复方艾夫他滨药物组合物用于制备治疗乙肝病毒药物的用途。
文档编号A61P31/20GK102949406SQ20111025486
公开日2013年3月6日 申请日期2011年8月31日 优先权日2011年8月31日
发明者任晓文, 徐为人, 邹美香, 汤立达, 李洪起, 王博, 连潇嫣 申请人:天津药物研究院