专利名称：用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂和/或预防剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及诸如角膜上皮病变和/或结膜上皮病变等眼病的治疗和预防，所述角膜上皮病变和/或结膜上皮病变是由下列因素引起的:由于干眼、隐形眼镜和眼睑内倒长睫毛产生的刺激、结膜结石、病毒性结膜炎和过敏性结膜炎。
背景技术：
随着个人电脑、手机等的普及，患眼疲劳或感觉眼睛有某种不适的人数正在增加。特别是，对于隐形眼镜的使用者，因凝视屏幕而造成不适(如眼干和砂砾感)的主诉病例越来越多。眼干(也就是干眼病)作为所述症状的原因引起了人们的关注。干眼病是由于泪液减少或性质改变而在眼睛表面上产生病变的疾病，因此由于泪量的降低而造成·眼睛发干并容易损伤，并且使得隐形眼镜使用困难。根据2006年干眼病协会(Dry Eye Society)对于干眼病的诊断标准，当确认存在如下全部三项症状时，则诊断为干眼病:自觉症状(通过VAS测试对疼痛和干燥进行评价)；泪液异常(通过泪液膜破坏时间或Schirmer试验进行评价)；以及角膜和结膜病变(通过荧光素染色或孟加拉玫瑰红染色进行评价)，当确认存在其中两项症状时，则怀疑为干眼病。生理盐水滴眼液和粘性滴眼液(例如硫酸软骨素)被用作干眼病的对症治疗。此夕卜，一种治疗涉及到封闭泪液排出口，以便让泪液尽可能长时间地留在眼睛表面上。除了干眼病之外，由于隐形眼镜和眼睑内倒长睫毛产生的刺激、结膜结石、病毒性结膜炎、过敏性结膜炎等还可能会导致在角膜上皮和/或结膜上皮上产生细小的伤痕。专利文献I中描述了用于干眼病的营养补充剂，其包括合并使用富含GLA的亚麻籽油、二十碳五烯酸(以下称为EPA)和/或二十二碳六烯酸(以下称为DHA)。非专利文献I描述了必需脂肪酸对于干眼病的效果。
背景技术：
文献专利文献专利文献1:日本未审查专利申请公开(PCT申请的翻译)N0.2005-535733非专利文献非专利文献I 干眼病治疗中的必需脂肪酸(Essential Fatty Acids in theTreatment of Dry Eye)”，The Ocular Surface, 8 (I), 18-28 页，2010。
发明内容
本发明要解决的问题干眼病即使在不严重时也会损害日常生活的舒适度。本发明的目标是研究导致干眼病的原因并提供一种安全的治疗方法，而不用担心不是对症治疗的副作用。解决问题的手段在对n-3脂肪酸缺乏小鼠的深入研究中，本发明的发明人发现n-3脂肪酸缺乏小鼠的眼泪量减少，推测n-3脂肪酸与眼泪量有关。此外，本发明的发明人还发现，通过给n-3脂肪酸缺乏小鼠施用具有高含量EPA和DHA (其为n-3脂肪酸)的精制鱼油，可以使眼泪量恢复到正常水平，从而完成了本发明。本发明概括为(I)至(7)所述的用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂和/或预防剂以及(8)至(13)所述的眼泪量恢复剂。(I) 一种用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂和/或预防剂，包含EPA和/或DHA或其酯作为活性成分。(2) (I)所述的治疗剂和/或预防剂，其中所述角膜上皮病变和/或结膜上皮病变是由以下因素构成的组中的任意一者所引起的病变:由于干眼病、隐形眼镜和眼睑内倒长睫毛产生的刺激、结膜结石、病毒性结膜炎和过敏性结膜炎。(3) (I)或(2)所述的治疗剂和/或预防剂，其中以甘油酯、低级醇酯、磷酸酯或精制鱼油的形式包含EPA和/或DHA的酯。(4)⑴至(3)中的任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计至少约50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(5)⑴至(3) 中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计至少约30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(6)⑴至(3)中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计至少约1，OOOmg至2，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(7) (I)至(6)中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，还包含生育酚作为抗氧化剂。(8) 一种眼泪量恢复剂，包含EPA和/或DHA或其酯作为活性成分。(9)⑶所述的眼泪量恢复剂，其中以甘油酯、低级醇酯、磷酸酯或精制鱼油的形式包含EPA和/或DHA的酯。(10)(8)或(9)所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计至少约50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(11)(8)或(9)所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计至少约30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(12)⑶或(9)所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计至少约l，000mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(13)⑶至(12)中任一项所述的眼泪量恢复剂，还包含生育酚作为抗氧化剂。本发明的优点可以通过施用EPA和DHA (其为n_3脂肪酸)来治疗或预防由下列因素引起的角膜上皮病变和/或结膜上皮病变:由于干眼、隐形眼镜和眼睑内倒长睫毛产生的刺激、结膜结石、病毒性结膜炎和过敏性结膜炎。EPA和DHA能够增加眼泪量，从而缓解所述症状。因此，可以提供能够减轻上述症状(如干眼病)的、为精制鱼油形式的药剂、补充剂等，这种精制鱼油形式的药剂、增补剂等食用历史长并且不用担心其副作用。附图简要说明
图1示出了利用VAS测试评价的眼睛疼痛的自觉评估的结果。在该图中，根据Mann-Whitney U检验，*P〈0.05、#P<0.1表明存在显著差异。图2为示出了利用VAS测试评价眼睛干燥的结果的图。
图3为示出了测量泪液膜破坏时间的结果的图。n=24或30。在该图中，根据Mann-Whitney U检验，*P〈0.05、#P<0.1表明存在显著差异。图4为示出了利用荧光素染色评价眼睛伤痕的结果的图。n=24或30。图5为示出了图4的变化量的图。图6为示出了利用孟加拉玫瑰红染色评价眼睛伤痕的结果的图。n=24或30。图7为示出了图6的变化量的图。在该图中，根据Mann-Whitney U检验，*P〈0.05表明存在显著差异。在该图中，根据双因素ANOVA，**P〈0.05表明存在显著差异。图8为示出了利用Schirmer试验评价眼泪量的结果的图。n=24或30。本发明的实施方式本发明涉及用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的预防剂和/或治疗剂，包含EPA和/或DHA或其酯作为活性成分。虽然有几项报告中将亚麻籽油等n-6型脂肪酸用作干眼病的治疗，但是单独摄入n-3脂肪酸(尤其是EPA和DHA)会如何影响角膜上皮病变和/或结膜上皮病变仍是未知的。本发明的发明人发现，缺乏n-3脂肪酸会使眼泪量显著减少，并证实通过摄入包含EPA和DHA的精制鱼油会使所述的眼泪量恢复。用于本发明中的EPA和/或DHA优选为与甘油的酯，即甘油三酯、甘油二酯、单甘油酯；或磷脂，即磷脂酰胆碱、磷脂 酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、心磷月旨、磷脂酸(全部包含溶菌酶体);或与低级醇(碳数:1至5)的酯，即甲酯、乙酯，等等。优选以诸如EPA和DHA等n-3脂肪酸为主要成分并且基本上不含n_6型脂肪酸。特别是，n_6型脂肪酸的总量优选为10重量％以下，更优选为5重量％以下。具体而言，可将精制鱼油、浓缩油(通过酶反应或化学反应将精制鱼油中的EPA和DHA浓缩的油)等用作甘油三酯。此外，可将磷虾油等用作磷脂。包含EPA和DHA的n-3多不饱和脂肪酸的来源包括:鱼或贝类提取物、动物提取物、蛋黄提取物、植物提取物、菌类提取物等等，优选磷虾油、鱼油、鱼提取物、鱿鱼提取物、鲣鱼卵巢提取物、基因修饰植物提取物、网黏菌类(Iabyrinthulea)提取物等等。磷奸油、鱿鱼提取物和鲣鱼卵巢提取物是具有高磷脂含量的物质。利用包括浓缩、提取和/或精制、混合等技术领域中常规已知的技术，可以根据需要调节所述物质的磷脂浓度和纯度。已知EPA和/或DHA对于高脂血症和过敏症状是有效的，很多的药剂和各种补充剂已是可商购的。可将与这些药剂和补充剂类似的胶囊形式用于本发明的目的。另外，可通过将其添加到各种饮料和食品中来进行摄取。具体而言，通常使用的是由油脂加工得到的胶囊，其中精制鱼油中添加有抗氧化剂。精制鱼油可以是来自于任何鱼的鱼油，只要所述鱼油包含EPA和DHA即可。EPA含量高的鱼油的例子包括沙丁鱼油、鳕鱼肝油等，而DHA含量高的鱼油的例子包括金枪鱼油、鲣鱼油等。浓缩EPA/DHA油是指这样的脂肪或油，其中通过使用脂肪酶等，由于位置选择性和脂肪酸选择性使得精制鱼油的甘油三酯中EPA/DHA的浓度增加(参见日本审查的专利申请公开 N0.H4-16519)。对患有干眼病症状的患者经口施用本发明的治疗剂和/或预防剂，其中EPA和/或DHA或其酯的每日总剂量为大约50mg至5，OOOmg、优选为300mg至3，OOOmg、更优选为大约900mg至2，lOOmg、并且最优选为1，100至1，900mg，所述剂量一次或分次服用。连续施
用至少4周后观察到效果。EPA和/或DHA在其他施用方法中使用历史悠久，因此相信没有安全性问题。可将已经确定为对恢复眼疲劳有利的花青素、叶黄素、小米草、毛果槭、维生素等添加至本发明的用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂和/或预防剂或眼泪量恢复剂中。现在利用实施例对本发明更详细地说明，但是本发明决不局限于这些实施例。实施例1产生n-3脂肪酸缺乏动物实验动物用饲料一般包含具有适当DHA含量的n-3脂肪酸；因此，为了产生n_3月旨肪酸缺乏动物，必须使用不包含n-3脂肪酸的特殊饲料。此外，正常饲养的动物从出生之前到断奶期会从胎盘和母兽乳汁中接受到充分的DHA摄入，因此仅在一代之内便产生目标n-3脂肪酸缺乏动物并不是容易的。考虑到这些事实，以AIN93G(美国营养研究所(AmericanInstitute of Nutrition)发表的用于小鼠和大鼠营养研究的标准精制饲料组成)作为基础饲料来制备包含7%的脂肪和油的n-3脂肪酸缺乏饲料(n-3Def，亚麻酸:14.4% ; α -亚麻酸:0.1%)。将含有α -亚麻酸(18:3，n-3)的n-3脂肪酸(n_3Adq，亚麻酸:14.3% ； α -亚麻酸:2.6%)用作正常饲料。雌性小鼠断奶之后(3周龄)立即喂食这些饲料，然后饲养；接下来，使所述小鼠在成熟之后进行交配，得到第二代小鼠，所述第二代雄性小鼠长到11月龄时用于实验。另外，为了在实验进行时避免来自母兽的任何影响，这样设定试验，使得各组中的样本均具有不同的母兽。制各测I试药将鱼油(日本水产株式会社生产的精制鱼油EPA_28(含有28%以上的EPA和12%以上的DHA))用作测试药，并且调节剂量，使得DHA含量为5mg/头，EPA含量为Ilmg/头。对照组中使用棕榈油，这样制备所述棕榈油，使得其脂肪酸含量与鱼油组相当。鱼油的主要脂肪酸组成显示在表I中(18:2的n-6型脂肪酸含量为1.1%, 20:4的n_6型脂肪酸含量为
1.3%)ο表I
权利要求
1.一种用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂和/或预防剂，包含下列物质作为活性成分:二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作为组成脂肪酸的甘油酯或磷脂、或所述脂肪酸的低级醇酯。
2.根据权利要求1所述的治疗剂和/或预防剂，其中所述角膜上皮病变和/或结膜上皮病变是由以下因素构成的组中的任意一者所引起的病变:由于干眼病、隐形眼镜和眼睑内倒长睫毛产生的刺激；结膜结石；病毒性结膜炎；和过敏性结膜炎。
3.根据权利要求1或2所述的治疗剂和/或预防剂，其中以精制鱼油或精制磷虾油的形式包含所述的含有所述脂肪酸作为组成脂肪酸的甘油酯或磷脂甘油酯或磷脂。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计约50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计约30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，其目的为每日摄取总计约900mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的治疗剂和/或预防剂，还包含生育酚作为抗氧化剂。
8.一种眼泪量恢复剂，包含如下物质作为活性成分:二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作为组成脂肪酸的甘油酯或磷脂、或所述脂肪酸的低级醇酯。
9.根据权利要求8所述的眼泪量恢复剂，其中以精制鱼油或精制磷虾油的形式包含所述的含有所述脂肪酸作为组成脂肪酸的甘油酯或磷脂。
10.根据权利要求8或9所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计约50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
11.根据权利要求8或9所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计约30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
12.根据权利要求8或9所述的眼泪量恢复剂，其目的为每日摄取总计约900mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
13.根据权利要求8至1 2中任一项所述的眼泪量恢复剂，还包含生育酚作为抗氧化剂。
全文摘要
本发明提供了对角膜上皮病变和/或结膜上皮病变有效且安全的预防和治疗药品或补充剂。具体而言，本发明提供了一种用于角膜上皮病变和/或结膜上皮病变的治疗剂或预防剂，其特征在于包含如下物质作为活性成分二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作为组成脂肪酸的甘油酯或磷脂，或所述脂肪酸的低级醇酯。优选的是，治疗剂或预防剂以精制鱼油或精制磷虾油的形式包含EPA和/或DHA。当以EPA和/或DHA或其酯的总量计，每日摄取约50mg至5,000mg剂量的所述治疗剂或预防剂时，可减轻角膜上皮病变和/或结膜上皮病变，或者可以恢复眼泪量。
文档编号A61K35/60GK103221041SQ20118005577
公开日2013年7月24日 申请日期2011年11月18日 优先权日2010年11月19日
发明者原马明子, 川端二功, 守口徹, 川北哲也, 坪田一男 申请人:日本水产株式会社, 学校法人麻布兽医学园, 学校法人庆应义塾