专利名称：4℃呈液态37℃呈固态的生物材料及制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物医药材料。
背景技术：
现有的医药材料很多，但还没有一种能在人体可接受的温度范围内在液态和固态间变化的材料，因此很多场合的使用受到限制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料及制备方法和用途。本发明的技术解决方案是一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料，其特征是在4°C时呈液态，在37°C时呈固态；其制备方法为(1)将食药用菌在4- °C的低温条件下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4°C无菌条件下保存；(2)细胞培养将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40%重量百分比的上述食药用菌提取液，经 1-12周培养，将上清收集保存于4°C无菌环境备用；(3)酶解反应取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织；将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反应；反应后在4°C无菌环境下过滤，过滤精度范围0. 10 μ m-0. 22 μ m ；滤过液PH调整至7. 4，得到产品，保存于4°C无菌环境中。一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，其特征是包括下列步骤(1)将食药用菌在4- °C的低温条件下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4°C无菌条件下保存；(2)细胞培养将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40%重量百分比的上述食药用菌提取液，经 1-12周培养，将上清收集保存于4°C无菌环境备用；(3)酶解反应取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织；将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反应；反应后在4°C无菌环境下过滤，过滤精度范围0. 10 μ m-0. 22 μ m ；滤过液PH调整至7. 4，得到产品，保存于4°C无菌环境中。所述食药用菌为鸡油菌、干巴菌、牛肝菌、鸡纵菌、羊肚菌、金福菇、黄伞、榛蘑、青蘑、猴头菇、红蘑、灰树花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶树菇、滑子蘑、珊瑚菇、长根菇、榆黄蘑、 真姬菇、阿魏蘑、杏鲍菇、鲍鱼菇中的一种或数种，但不仅限于此。步骤(1)的酶解处理时，使用的酶为果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一种或数种；料液重量比1 1-19 ；酶解反应时间1-190 小时；PH值3-9 ；酶浓度与食药用菌重量比为酶0.01-5 食药用菌100 ；步骤⑴中的过滤精度为0. 10 μ m-0. 22 μ m。步骤(3)中的酶解条件为PH值3-5. 4;酶解反应温度4-9摄氏度；料液重量比1 1-19 ；酶解反应时间72-480小时；酶的种类金属蛋白酶、巯基蛋白酶、丝氨酸羧肽酶、组织蛋白酶、内肽酶、无花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一种或数种，但不仅限于此；酶浓度与原料重量比为酶0. 01-5 原料100。一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料在制备一过性或永久性阻塞、半阻塞体中的应用。是作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过性或永久性阻塞、半阻塞材料。本发明制作方法简便，原料易得，操作方便，制得的产品在摄氏4度时呈液态，37 度时呈固态，可用于具有治疗目的的一过性或永久性阻塞、半阻塞体内管腔(如鼻泪管、肿瘤血管、输精管等等)，可作为药物、基因、疫苗的缓释平台以及靶向给药载体。下面结合实施例对本发明作进一步说明。
具体实施例方式一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，包括下列步骤(1)将食药用菌在(例4°C、15°C、29°C )的低温条件下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4°C无菌条件下保存；(2)细胞培养将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40% (例1^^20^^40%)重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12周(例1周、7周、12周)培养，将上清收集保存于4°C无菌环境备用；(3)酶解反应取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织；将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12 1(例1 1、6 1、12 1)重量比加入4°C的酶解液中反应；反应后在4°C无菌环境下过滤，过滤精度范围0. 10 μ m-0. 22ym(M0. ΙΟμπκΟ. 18 μ m、 0. 22 μ m)；滤过液PH调整至7. 4，得到产品，保存于4°C无菌环境中。所述食药用菌为鸡油菌、干巴菌、牛肝菌、鸡纵菌、羊肚菌、金福菇、黄伞、榛蘑、青蘑、猴头菇、红蘑、灰树花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶树菇、滑子蘑、珊瑚菇、长根菇、榆黄蘑、 真姬菇、阿魏蘑、杏鲍菇、鲍鱼菇中的一种或数种，但不仅限于此。步骤(1)的酶解处理时，使用的酶为果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、α-淀粉酶、 葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一种或数种；料液重量比1 1-19(例1 1、1 10、 1 19)；酶解反应时间1-190小时(例1小时、100小时、190小时)；PH值3_9 (例3、6、 9)；酶浓度与食药用菌重量比为酶0.01-5 食药用菌100(例0.01 100,3 100、 5 100)；步骤(1)中的过滤精度为 0. 10 μ m-0. 22 μ m(例 0. ΙΟμπκΟ. 18 μ m、0. 22 μ m)。步骤(3)中的酶解条件为PH值3-5.4(例3、4、幻；酶解反应温度4_9摄氏度 (例4°C、6°C、9°C )；料液重量比1 1-19(例1 Ul IOU 19)；酶解反应时间 72-480小时(例72小时、200小时、480小时)；酶的种类金属蛋白酶、巯基蛋白酶、丝氨酸羧肽酶、组织蛋白酶、内肽酶、无花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一种或数种，但不仅限于此；酶浓度与原料(即组织和上清)重量比为酶0.01-5 原料100(例0.01 100,3 100、 5 100)。 上述4°C呈液态37°C呈固态的生物材料在制备一过性或永久性阻塞、半阻塞体中的应用，是作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过性或永久性阻塞、半阻塞材料。
权利要求
1.一种4°C呈液态37°C呈固态的生物材料，其特征是在4°C时呈液态，在37°C时呈固态；其制备方法为(1)将食药用菌在4HTC的低温条件下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4°C无菌条件下保存；(2)细胞培养将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40%重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12周培养，将上清收集保存于4°C无菌环境备用；(3)酶解反应取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织；将上述组织和步骤(2) 得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反应；反应后在4°C无菌环境下过滤， 过滤精度范围0. 10 μ m-0. 22 μ m ；滤过液PH调整至7. 4，得到产品，保存于4°C无菌环境中。
2.—种权利要求1所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，其特征是 包括下列步骤(1)将食药用菌在4- °C的低温条件下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4°C无菌条件下保存；(2)细胞培养将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40%重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12周培养，将上清收集保存于4°C无菌环境备用；(3)酶解反应取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织；将上述组织和步骤(2) 得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反应；反应后在4°C无菌环境下过滤， 过滤精度范围0. 10 μ m-0. 22 μ m ；滤过液PH调整至7. 4，得到产品，保存于4°C无菌环境中。
3.根据权利要求2所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，其特征是 所述食药用菌为鸡油菌、干巴菌、牛肝菌、鸡纵菌、羊肚菌、金福菇、黄伞、榛蘑、青蘑、猴头菇、红蘑、灰树花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶树菇、滑子蘑、珊瑚菇、长根菇、榆黄蘑、真姬菇、 阿魏蘑、杏鲍菇、鲍鱼菇中的一种或数种。
4.根据权利要求2所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，其特征是 步骤(1)的酶解处理时，使用的酶为果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一种或数种；料液重量比1 1-19 ；酶解反应时间1-190小时；PH 值3-9 ；酶浓度与食药用菌重量比为酶0.01-5 食药用菌100 ；步骤(1)中的过滤精度为 0. 10 μ m-o. 22μ 0
5.根据权利要求2、3或4所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料的制备方法，其特征是步骤(3)中的酶解条件为PH值3-5. 4 ；酶解反应温度4-9摄氏度；料液重量比 1 1-19;酶解反应时间72-480小时；酶的种类金属蛋白酶、巯基蛋白酶、丝氨酸羧肽酶、组织蛋白酶、内肽酶、无花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一种或数种；酶浓度与原料重量比为酶0.01-5 原料100。
6.一种权利要求1所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料在制备一过性或永久性阻塞、半阻塞体中的应用。
7.根据权利要求6所述的4°C呈液态37°C呈固态的生物材料在制备一过性或永久性阻塞、半阻塞体中的应用，其特征是是作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过性或永久性阻塞、半阻塞材料。
全文摘要
本发明公开了一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料及制备方法和用途，产品经食药用菌的酶解、细胞培养、组织酶解等步骤制得。可作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过性或永久性阻塞、半阻塞材料。本发明制作方法简便，原料易得，操作方便，制得的产品在摄氏4度时呈液态，37度时呈固态，可用于具有治疗目的的一过性或永久性阻塞、半阻塞体内管腔(如鼻泪管、肿瘤血管、输精管等等)，可作为药物、基因、疫苗的缓释平台以及靶向给药载体。
文档编号A61L31/14GK102552987SQ20121000781
公开日2012年7月11日 申请日期2012年1月12日 优先权日2012年1月12日
发明者福原理加 申请人:福原理加