用于防脱发或促进毛发生长的组合物的制造方法与工艺

本发明涉及含有玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上的麸曲发酵物的毛发及头皮改善用组合物。

背景技术：
脱发根据生长周期，分为静止期脱发和生长期脱发，静止期脱发有雄性激素引起的男性脱发、女性产后脱发、内分泌疾病引起的脱发；生长期脱发有圆形脱发、瘢痕性脱发及头癣引起的脱发等（Kuag,2001）。此外，已知局部感染（Mulleretal.,1980）、内分泌障碍（Bergfeld,1978）、遗传因子（Selman,wilzetal.,1974）及自我免疫（Friedman,1981）等也能导致脱发的发生。目前，代表性的防脱发剂有美国FDA承认的非那雄胺和长压定等。这种药物虽然在临床上显示明确的效果，但是具有性功能障碍及皮肤刺激等副作用，因此禁止或限制女性使用。近来，人们正在积极对能够补足这些药物缺点的新的生发剂和不受性别限制使用的天然物原料进行开发。韩国注册专利10-0581316中公开了含有充乙子（）、甘松香、甘菊、桃仁、山茱萸、菟丝子、五味子、白术、松针和当归数种韩药材的混合提取物的防脱发及促进生发的组合物；韩国注册专利10-0609210号公开了含有当归根和牛蒡根的乙醇提取物，通过当归根中的睾酮素成分的-α还原酶抑制效果和牛蒡根的菊粉成分的血流改善效果而具有防脱发效果的防脱发洗发水组合物。但是上述实例中很多都无法明确定义临床上显示的防脱发效果的作用机制，还未见报道本发明的利用7种药参提取物的麸曲发酵提取物具有小乳头状突起细胞的增殖、血液循环促进效果及头皮抗氧化效果。

技术实现要素：
发明目的本发明的发明人为了开发出一种利用和洗发水一样从日常生活层面方便无副作用安全地提供具有防脱发效果的天然物原料的组合物而努力，结果发现将选自玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上进行麸曲发酵，能够对小乳头状突起显示细胞赋予增殖、血液循环促进、抗氧化效果，从而完成了本发明。技术方案为了达到上述目的，本发明提供含有选自玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上的麸曲发酵物的用于毛发及头皮状态改善的组合物。以下详细说明本发明。根据本发明实施例的组合物使用的玄参（Scrophulariabuergeriana）是玄参科的多年生草本植物，又称为重台、玄台、鬼藏、逐马。韩方中将其根称为玄参，作为解热剂用于咽喉炎、疔疮、淋巴腺炎。根据本发明实施例的组合物使用的人参是五加科（）人参（PanaxginsengC.A.Meyer）的根，是指将细根和木栓层去除的根。特别地，在韩国将人参区分为白参（生人参）、红参（蒸的人参）和尾参（细跟）而记载，但是在民间野生参也分为长脑参和山参。在中国是指人参的根和根茎，区分为园参（养参）、红参、山参（野生参）。人参是因为其根的形状与人形相似而得名，因为具有神奇的效果，还被称为神草，属于高级的药草而又被称为人衔，还因为厌阳喜阴而被称为鬼盖。该药具有特殊的气味，味微甘，性质微温。人参补元气，用于体弱、倦怠、疲劳、食欲不振、呕吐、腹泻，帮助肺功能益肺生津，能安神，并提高肾功能。被报道的药理作用有大脑皮质的兴奋和抑制、平衡、抗疲劳、抗老化、免疫增强、心脏收缩、性腺促进、高血糖抑制、蛋白质合成促进、动态平衡维持、抗癌、解毒作用等。外观是细长的圆柱形或纺锤形，具有2-5根侧根，外层呈黄褐色，具有横皱纹和根痕。根头部具有茎痕芦碗。根据本发明实施例的组合物使用的丹参是丹参（SalviamiltiorrhizaBunge）的根制造的药材（韩国、中国），在日本不使用。五种参-人参、苦参、丹参、玄参、沙参-呈五色，分属五脏，丹参入心经，又被称为赤参。此外，丹参还因为治疗风病，消除下肢无力，能使人追上一匹马而得名奔马草。该药具有略微特殊的香气，药性为苦涩，微寒。帮助血液循环，除淤血，缓解四肢关节疼痛。治疗妇女的生理不顺、生理痛、产后腹痛、淤血性心腹疼痛、跌打损伤等。还治疗高热引起的精神昏朦、说胡话、烦躁、不眠症、皮肤发疹、心悸等。被报道的药理作用有冠状动脉扩张、降胆固醇、降血压、肝功能活化、镇静抗炎、抗癌、抗菌作用。根据本发明实施例的组合物使用的黄芪是豆科的多年生草本植物，又称为皇耆。高丽时期的二斗香茗中称为数板麻，朝鲜初期称为甘板麻，进入1600年代之后变为苦参不讳到1700年代开始被称为黄芪。这是因为与苦参味道相似而被赋予的名字。学名为AstragalusmembranaceusBUNGE。生在在山地，根用作药材，有效成分是叶酸（folicacid）、胆碱（choline）等。动物实验中对中枢神经系统的兴奋作用和利尿作用显著，给予白鼠大量粉末时能够抑制肾炎的发生，延迟蛋白尿和高脂血症的发生，还具有降血压的作用。该药药性温和微甘。对乏力、语音低沉、脉搏弱、多汗等患者具有显著的效果，自古多代替人参使用。另外也广泛用于子宫下垂、胃下垂、脱肛、子宫出血，增强体力，提高全身肌肉的紧张度。但是发热严重时不能使用。民间相传和鸡一起煲汤服用就会治疗虚汗，增强体力而广泛使用。代表性的处方有多用于没有气力、失去食欲的人的补中益气汤。根据本发明实施例的组合物使用的蔓参是双子叶植物，桔梗目桔梗科的藤蔓性多年生草本党参（CodonopsispilosulaNannfeldt）的根，又称为党参或参，用作祛痰剂或食用。蔓参代替人参用于对人参有副作用的人，是与人参具有相同的效果的名药。该药具有特殊的芳香，味微甜，性平和而不偏。党参对脾虚而产生的身体疲劳、消化吸收不良、咳嗽、口渴、气虚、血虚有效果。被报道的药理作用有强壮作用、抗疲劳及免疫功能亢进作用、红血球数增加作用、消化性溃疡、降血压及心脏、脑、下肢、内脏血流量增加作用。根据本发明实施例的组合物使用的苦参是苦参（SophoraflavescensAiton）去除周皮后的根。苦参的名字是因为味苦使用苦字，其效果与人参类似而使用参字。由于根部的形状而具有小偷拐杖的植物名。该药具有特殊的气味，具有残留性，味苦性寒。用于下焦湿热引起的痢疾、带下、阴部瘙痒、皮肤瘙痒等，还用于膀胱热引起的小便不顺并有痛症时。被报道的药理效果有白血球减少症治疗及抗辐射作用、冠状动脉血流量增加、心脏肌肉强化、降血糖作用、抗肿瘤、抗菌、免疫功能抑制作用。根据本发明实施例的组合物使用的沙参是百合科的日本轮叶沙参（Adenophoratriphyllavar.japonicaHara）或其同属植物的根做的药材（韩国），在日本用细叶沙参（Adenophoratriphylla（Thunb.）A.DC.），在中国用北沙参（AdenophorastrictaMiq）和轮叶沙参（Adenophoratetraphylla（THUNB.）FISCH）制造。所述沙参同人参、玄参、丹参、苦参一同被称为五参，这是因为形态虽然都不一样但是功效相似。沙参的名字是因为白色且生长在沙地而起的名字。由于根富含白色汁液而被俚人称为羊婆奶。该药具有特殊的芳香，咀嚼有粘液性，味微甜、性微寒。沙参生津润肺、降热、祛痰，用于咽喉干燥、干咳、痰、咳嗽、哮喘等。用于胃阴不足引起的口干、喉干、大便干燥的便秘症状等。被报道的药理作用有祛痰作用、抗菌作用、溶血作用、强心作用等。本发明中，上述7种药参是从东医宝鉴及韩国本草图鉴中筛选出的具有血行（人参、丹参、黄芪）、营养（玄参、蔓参）、保护（苦参、沙参）作用的药材。本发明中所使用的组合物通过如下方法制造。首先，玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上用麸曲进行发酵从而制造根据本发明实施例的组合物。还有，获得玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上的提取物之后，将上述提取物进行麸曲发酵而制造根据本发明实施例的组合物。此处所使用的麸曲是代表性的天然熟成发酵剂，最早在中国春秋时期发明，而在韩国是三国时代之前。麸曲是将具有酿酒的酶的麸曲霉和酵母在谷类大麦中繁殖的，已知麸曲霉有约50多种。其中，代表性的有Aspergullusoryzae（黄曲霉）和Aspergillusniger（黑曲霉），它们具有将大米淀粉糖化的强力的酶，因此能够进行将淀粉分解为二糖类及单糖类，最终进行转化为乙醇的酶转换反应。除了酒发酵之外，这些酶可以将异丙醇和多酚的配糖体转化为增加生理活性形态的非配醣体。对在制造大酱或酿酒的工厂工作的作业者的手变白的事实进行研究的结果，发现了麸曲霉的成分曲酸。酵母不仅用来酿酒，还含有与生命现象有深层次关系的多种酶和维生素B复合体、蛋白质、无机质等。对上述制造方法进一步详细说明如下，例如，将玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参、沙参中的一种以上用麻布包起来，埋入混合有麸曲和米饭的缸中。在35℃下发酵2-3天后，进行热提取得到组合物，但并不限于此。另外一种制造方法可以是，例如，玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参、沙参中的一种以上通过通常的天然物获得方法得到提取物后，将此埋入混合有麸曲和米饭的缸中。在35℃下发酵2-3天后，进行热提取得到组合物，但并不限于此。进一步详细说明获得药参提取物的方法如下，例如，将玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参、沙参中的一种以上进行洗涤、干燥后，将此进行溶剂提取，提取后进行过滤而得到。所述溶剂可以选自水、有机溶剂及水和有机溶剂的混合物组成的组中的一种以上。在此，水包括蒸馏水或纯化水，所述有机溶剂是C1-C5的低级醇，例如包括选自醇、丙酮、醚、乙酸乙酯、乙醚、甲基乙基酮及氯仿组成的组中的一种以上，但并不限于此。本发明中玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参中的一种以上的药参的麸曲发酵物相对于组合物的总重量优选为0.01-10重量%，在上述范围内在没有头皮刺激剂过敏的情况下，具有优异的毛发及头皮状态改善效果。有益效果本发明的含有玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参提取物中的一种以上的麸曲发酵提取物的头皮及毛发化妆品组合物，显示出小乳头状突起细胞增殖、血液循环促进及抗氧化效果，从而能够提供防止脱发现象、促进毛发生长的效果。附图说明图1是表示根据本发明的组合物对毛囊小乳头状突起细胞增殖促进效果的图谱。图2是表示根据本发明的组合物对与血液循环促进效果有关联的钙离子通道活性增加效果的图谱。图3是表示根据本发明的组合物的抗氧化效果的图谱。具体实施方式以下通过实施例及实验例对本发明进行具体说明，但本发明的保护范围并不由这些限定。制造例1药参提取物的制造本发明的玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参及沙参7种药参的提取物通过如下方法制造。将上述药参分别用流水洗涤后，用250目（mesh）过滤器过滤，在50℃下干燥24小时。在干燥的各药参50g中添加1L的70%乙醇、在7种干燥药参混合物350g（各50g）中添加10L的70%乙醇，在4℃的温度条件下进行48小时的回流提取。之后用250目过滤器过滤，进行沉降，再次用0.5μm过滤器过滤，得到各药参提取物及混合提取物。制造例2麸曲发酵提取物的制造本发明中所使用的组合物含有所述药参的麸曲发酵提取物或它们的混合提取物作为有效成分，通过如下方法制造。将7种药参（玄参、人参、丹参、黄芪、蔓参、苦参、沙参）用流水清洗后，用250目过滤器过滤，在50℃下干燥24小时。用麻布分别包裹上述干燥的药参各50g和7种干燥药参混合物350g（各50g），埋入麸曲和米饭1:1混合的缸中。在35℃下发酵3天后将麻布取出。加入发酵药参重量的20倍的纯化水，在80℃下进行24小时的热提取，获得麸曲发酵提取物。参考例1比较例1-9及实施例1-8的制造按照下表1的组成，使用制造例1的提取物制造了比较例1-9，使用制造例2的麸曲发酵提取物制造了实施例1-8。表1实验例1毛囊小乳头状突起细胞增殖效果试验构成毛发的角蛋白由毛根部的角蛋白形成细胞（keratinocyte）生成，该角蛋白形成细胞从小乳头状突起细胞分化。为了评价根据本发明的组合物的小乳头状突起细胞活性，在本发明中使用了DP6（小鼠永生化的真皮乳头细胞（ratimmortalizeddermalpapillacell））细胞株（WendyFilsell,JournalofCellScience107,1761-1772(1994)）。该小乳头状突起细胞株是从雄性PVG小鼠的胡须毛根中利用显微解剖（microdissection）方法分离培养的细胞株，在含有10%胎牛血清（Fetalbovineserum）（FBS）的达尔伯克改良伊格尔培养基（Dulbecco'smodifiedEagle'smedium）（DMEM;GibcoBRL,Gaithersburg,MD,USA）中，在维持5%CO2、37℃的恒温箱（incubator）中培养24小时。用表1组成的比较例1-9及实施例1-8处理上述培养的DP6，置于96孔板（96-wellplate）中，在37℃的恒温箱培养24小时。比较例1是没有用提取物处理的非处理组。药物处理24小时后，使用WST-1试剂盒（WST-1kit）（Roche）测定细胞增殖能力，并在图1中示出。从图1的结果可以看出，相比药参提取物本身比较例2-9，用麸曲发酵提取物处理的实施例1-8的小乳头状突起细胞增殖效果显著；和1种提取物相同浓度的混合提取物处理的实施例8，相比只用1种提取物的实施例1-7效果显著，因此确认混合使用时具有更好的效果。实验例2钙离子通道活性增加效果评价脱发治疗剂长压定已知为潜在的线粒体KATP通道开放剂（钙离子通道开放剂），是雄性激素性脱发的治疗中使用的代表性药物。为了评价这种长压定的机制，用堵塞构成头皮真皮的成纤维细胞的KATP通道的甲苯磺丁脲（Tolbutamide、SIGMAAlDRICH、T0891）处理来抑制细胞增殖，再打开钙离子通道恢复细胞增殖的实验法。为了评价本发明的组合物作为KATP通道开放剂的功能，本发明中使用了成纤维细胞株NIH3T3（老鼠胚胎成纤维细胞株（Mouseembryonicfibroblastcellline））细胞株。该细胞株是从NIH瑞士老鼠胚胎（NIHSwissmouseembryo）中分离的用3T3协议（3T3protocol）进行自然无限增殖的细胞株。所述细胞株在含有10%胎牛血清（FBS）的达尔伯克改良伊格尔培养基（DMEM;GibcoBRL,Gaithersburg,MD,USA）中，在维持5%CO2、37℃的恒温箱中培养24小时。将NIH3T3置于96孔板，在37℃的恒温箱中培养24小时后，用2.5mM甲苯磺丁脲处理，10分钟后按照表2及表3的组成分别用阳性对照组长压定10μM和制造例1的药参提取物及制造例2的麸曲发酵提取物进行处理，经过药物处理48小时后，使用WST-1试剂盒（Roche）测定细胞增殖功能，并将结果在表2中示出。表2表3从图2的结果可以确认，用实施例9-16处理时，成纤维细胞的增殖向用长压定处理的比较例12的水平恢复，相比于使用药参提取物本身的比较例13-20，用麸曲发酵提取物处理的实施例9-16的钙离子通道活性增加效果更加优异，用与1种提取物相同浓度的混合提取物处理的实施例16，相比只用1种提取物的实施例9-15的效果更显著，由此确认混合使用时具有更好的效果。参考例2比较例21-31及实施例17-24的制造按照下表4和5的组成，使用上述制造例1的药参提取物制造了比较例21-31；使用上述制造例2的麸曲发酵提取物制造了实施例17-24。表4表5实验例3抗氧化效果评价为了评价本发明的抗氧化效果，使用了DPPH抗氧化评价方法。体内发生的氧化反应主要是由自由基而引起，这种作用可以导致细胞老化及癌症。从而，体内的自由基生成抑制最终能够和体内抗氧化、抗老化关联起来，这种抗氧化效果难用体内的自由基为对象进行实验，因此普遍使用DPPH（2,2-联苯-1-硝基偕腙肼（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl））自由基。DPPH自由基呈深紫色，与抗氧化效能物质接触变为深黄色，在517nm波长测定吸光度来评价抗氧化能。抗氧化能力越高的物质黄色越浅、吸光度越低。本实验中在96孔板中加入0.1mM的DPPH溶液后，将所述参考例2的比较例21-31及实施例17-24分别在37℃培养器中反应30分钟，在517nm测定吸光度，并将结果在图3中示出。比较例21是无处理组，比较例22-23作为阳性对照组，分别用维生素C（SIGMA,(+)-SodiumL-ascorbate）50μg/ml、100μg/ml处理。从图3中可以看出，用本发明的麸曲发酵提取物处理的实施例17-24相比对照组抗氧化效果显著，相比使用药参提取物本身的比较例24-31，用麸曲发酵提取物处理的实施例17-24的抗氧化效果显著。此外，用与1种提取物相同浓度的混合提取物处理的实施例24，相比只用1种提取物的实施例17-23效果显著，由此可以确认在抗氧化效果上混合使用时具有更好的效果。