一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明提供了一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物及其制备方法和用途。该中药组合物是由下述重量份配比的原料药制成：大黄、黄芪、红花=3-45:9-85:3-65。按照一定的提取纯化工艺，制备成注射剂、冻干粉针或其他口服制剂。动物实验证实，该中药组合物可显著改善慢性肾小球肾炎大鼠血液流变学指标，降低血清IL-6、IL-8和TNF-α水平；显著降低高血压肾病大鼠血肌酐和尿素氮等指标；显著减少慢性肾功能衰竭大鼠血清尿素氮、血肌酐含量，增加血清白蛋白含量；还可改善慢性肾功能衰竭大鼠血液流变学各指标水平，病理结果表明本发明可以改善和抑制慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭对肾脏的损伤。
【专利说明】一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种中药组合物，尤其涉及一种治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的药物及其制备方法。具体地说属于医药领域。
【背景技术】
[0002]慢性肾脏疾病(Chronic Kidney Disease, CKD)临床上包括慢性肾小球肾炎、肾病综合征、膜性肾病、糖尿病肾病、高血压肾病以及各种继发性肾病等,具有发病率高、患发心血管病患病率高、病死率高的特点，另外社会对慢性肾脏疾病的知晓率不高，防治率低，患发心血管病的知晓率低，目前已经成为全球公开健康问题。主要从两个方面诊断是否患有CKD:(1)肾脏损伤(表现出肾脏结构和功能异常)≥3个月，可以有或无肾小球滤过率(GRF)下降；(2)肾小球滤过率(6?10<601111/1^11/1.73m2，时间≥3个月，有或无损伤依据。
[0003]慢性肾脏疾病发展到中后期，就有可能发展成为慢性肾功能衰竭，甚至尿毒症，从而严重危害患者的健康。
[0004]国内外早有关于大黄应用于治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的报道，其主要含有蒽醌和鞣酸类等多种成分，治疗作用主要表现在:(I)明显改善氮质血症。大量实验证明大黄可降低慢性肾功能衰竭患者血清肌酐和尿素氮；(2)活血化瘀作用，能改善肾脏疾病人血液的高凝、高黏状态；(3)抑制系膜细胞及肾小管上皮细胞增生；(4)减轻肾脏受损后的代偿性肥大，抑制残余肾的高代谢状态。(5)对自由基的清除作用，以及对机体的氧化与抗氧化起到平衡的作用。
[0005]中药黄芪含有黄芪多糖、黄酮类、黄芪皂苷、大豆皂苷等多种成分，具有显著的免疫调节活性和抗氧化作用，可有效提高肾小球滤过率，减轻肾脏疾病理损伤，保护和改善残余肾单位。
[0006]红花含有红花苷、红花黄色素、儿茶酚等成分，中医认为红花味辛，是活血通经、散瘀止痛之良药。现代研究结果表明它可抑制血栓形成、降低纤维蛋白原和凝血酶作用，减轻凝血酶对内皮细胞的损伤及刺激作用、改善肾脏的血液循环，降低血管阻力、降低红细胞刚性指数，增强红细胞的变形能力及携氧能力。
[0007]现有技术虽然公开了大黄、黄芪配伍使用治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭，但它们的制备工艺多存在工序复杂，成本高，有效成分提取率偏低等问题。经过本发明组方与肾康注射液和大黄、黄芪配伍组药效学比较证实，本发明组方治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的效果明显优于大黄、黄芪配伍组，和肾康注射液的治疗效果相当。因此，本发明较现有技术制备工艺更加得当，不仅大大减少了能源消耗和节省了提取时间，而且应用本发明工艺制成的中药制剂有较高的药物稳定性、生物利用度和好的治疗效果，组方也更加精当。另外迄今为止，本发明人尚未见到任何报道记载本发明所述药物的具体原料配比关系，也未见有人公开本发明所述的原料配比按照本发明制备工艺制成中药制剂用于治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭。所以本发明是发明人创造性研制成功的一种治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的中药制剂。
【发明内容】
[0008]本发明人公开了一种治疗慢性肾脏疾病的中药组方制剂，该药物由大黄、黄芪和红花制成，全方起到通腑降浊，健脾益气，活血化瘀的功效，可有效治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭。
[0009]本发明是由发明人经过多年的实验研究总结确定的，是符合中医理论新的治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的药物。
[0010]中医理论认为大黄苦寒，性重浊，主沉降，力猛善行，为泻火攻积的要药，又具有降逆泄浊，祛瘀排毒的功能，故可用于治疗慢性肾脏疾病及慢性肾功能衰竭，但因药力较猛，故需减量，配以大量甘温益气之黄芪缓和其药性，大量的黄芪，既可补脾肺之气，又可利小便，通血脉，合用可祛邪而不伤正，又佐以红花活血养血，增强大黄祛瘀之功，并可改善肾脏的血液循环，降低血管阻力、降低红细胞刚性指数，增强红细胞的变形能力及携氧能力。三味药物合用，相得益彰，标本兼治，可有效治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭。
[0011]经动物实验验证，结果表明本发明用于治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭疗效确切、可有效降低血肌酐、尿素氮，改善血流变指标。
[0012] 本发明是由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=3-45:9-85:3-65。
[0013]本发明优选下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=6-35:20-75:10-45。
[0014]本发明更优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=15-20:35-60:25-40 ο
[0015]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄苗、红花=20:60:20。
[0016]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=20:30:60。
[0017]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=32:26:16。
[0018]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄苗、红花=40:40:40。
[0019]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄苗、红花=45:70:65。
[0020]本发明还优选由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄苗、红花=25:75:50。
[0021]以上重量份配比是以生药计算的，如优选的重量份配比大黄:黄芪:红花=900份:1400份:1300份，其中份表示重量份，每份若以克为单位，以上组成可制成药物制剂1000剂，所述1000剂是指制成的成品药物制剂，如制成注射剂1000毫升，胶囊剂1000粒，片剂1000片，颗粒剂1000克，滴丸1000丸，口服液1000ml等。以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于不同病情，不同体质的病人，可以相应调整组成量的配比。
[0022]本发明的目的在于提供一种治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的中药组合物。
[0023]本发明可以制成任何临床常用制剂，包括注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、滴丸、口服液等剂型。为了更好的发挥各原料药的药效，本发明技术方案中优选的制备方法如下:
(I)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加5-15倍量水浸泡10-30分钟，第一次加热超声提取10-30分钟，过滤；第二次加热超声提取10-20分钟，过滤，合并两次水提液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，加入2%-5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%-80%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%-85%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到大黄、红花提取液，备用;
(2)取黄芪切成薄片，加入5-10倍量水，第一次加热超声提取10-20分钟，过滤；第二次加热超声提取5-15分钟，过滤，合并两次水提液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0024]本发明技术方案中更优选的制备方法如下:
(1)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加10倍量水浸泡20分钟，第一次加热超声提取20分钟，过滤；第二次加热超声提取10分钟，过滤，合并两次水提液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，加入5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调PH值7.4-7.7，得到大黄、红花提取液，备用；
(2)取黄芪切成薄片，加入7倍量水，第一次加热超声提取15分钟，过滤；第二次加热超声提取10分钟，过滤，合并两次水提液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0025]本发明技术方案中还优选的制备方法如下:
(O取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加5-10倍量水，煎煮，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；先用水洗脱，收集洗脱液，然后用40%-80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，加入2%-5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为70%-80%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为75%-85%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到大黄、红花提取液，备用;
(2)取黄芪切成薄片，加8-12倍水，煎煮，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；然后用60%-80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调PH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0026]本发明技术方案中更优选的制备方法如下:
(O取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加6倍量水煎煮，合并提取液,过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；先用水洗脱，收集洗脱液，然后用50%-60%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，加入5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到大黄、红花提取液，备用；
(2)取黄芪切成薄片，加入10倍量水，煎煮3次，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；然后用70%-75%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min,过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0027]本发明技术方案中还优选的制备方法如下:
(1)取红花和粉碎成细颗粒的大黄置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为30-50L/h，萃取压力为10-50MPa，萃取温度为35_60°C，萃取时间为1.5-2.5h，从萃取釜流出的大黄和红花高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为8Mpa,分离温度I为30°C ;分离压力II为6 Mpa,分离温度II为25°C，收集大黄和红花的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到大黄和红花提取液，备用；
(2)取黄芪粉碎成细颗粒，和85%-95%的乙醇混合，置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为20-40L/h，萃取压力为10-30MPa，萃取温度为35_45°C，萃取时间为1.5-2.5h，从萃取釜流出的黄芪高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为6Mpa，分离温度I为30°C ;分离压力II为4Mpa，分离温度II为25°C，收集黄芪的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0028]本发明技术方案中更优选的制备方法如下:
(1)取红花和粉碎成细颗粒的大黄置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为40L/h，萃取压力为25MPa，萃取温度为45°C，萃取时间为2.5h，从萃取釜流出的大黄和红花高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为8 Mpa，分离温度I为30°C;分离压力II为6 Mpa,分离温度II为25°C，收集大黄和红花的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到大黄和红花提取液，备用；
(2)取黄芪粉碎成细颗粒，和80%的乙醇混合，置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为30L/h，萃取压力为20MPa，萃取温度为30°C，萃取时间为2h，从萃取釜流出的黄芪高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为6Mpa，分离温度I为30°C ;分离压力II为4Mpa，分离温度II为25°C，收集黄芪的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪的提取液，备用；
将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
[0029]本发明还可按常规方法制备成口服制剂，包括片剂、颗粒剂或胶囊剂。
[0030]( 1)取红花和大黄粗颗粒，经过两次超声处理和两次乙醇沉淀后，过滤，浓缩成浸膏，干燥，备用；取黄芪切片，经两次超声处理后，合并提取液，浓缩成浸膏，干燥。合并浸膏，加入适当的辅料，常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊剂等。
[0031](2)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄、黄芪，经过煎煮后，加入大孔树脂中吸附分离，收集流出液，现用水洗脱，再用乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，合并流出液和洗脱液，适当浓缩，加入适当的辅料，常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊剂等。
[0032](3)取红花和大黄、黄芪细颗粒置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，得到的萃取液适当浓缩，加入适当的辅料，常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊剂等。
[0033]本发明技术方案具有创造性的有益效果有:
一、组方药物的提取工艺
本发明组方由大黄、黄芪和红花组成，其组方精简得当，用于治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭作用显著。在确定制备工艺过程中，发明人综合考虑了药材物理性质、有效成分特性和生产成本等诸多要素，具体的改进有:
(1)将大黄、红花和黄芪进行超声提取，保证有效成分的提取率明显高于常规的水煎煮提取方法，因为超声提取是通过超声波的空化作用、机械作用和热作用，这些独特的作用特点可促使药材细胞组织破裂或变形，从而加速有效成分的释放和溶出，提取的更充分，并可大大缩短提取时间和降低能耗、保护环境，有利于产品产业化和推广使用。
[0034](2)大黄、红花和黄芪采用水提后，进入大孔树脂柱分离纯化，较之普通的水提醇沉工艺能更好的分离有效成分。并可增加产品的稳定性，缩减了生产周期。
[0035](3)大黄、红花和黄芪采用CO2超临界萃取，操作简便，且可以大大减少有机溶剂的使用，节省资源。
[0036]二、本发明用于治疗慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的效果
为证实本发明的创造性，发明人将本发明组方制剂对慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭的治疗作用，与已授权发明专利96117626.1的肾康注射液和按照本发明提取纯化工艺制成的大黄、黄芪注射液进行比较，在进行对比实验研究中，以相同的给药剂量观察比较三组药物对慢性肾小球肾炎和慢性肾功能衰竭大鼠的治疗效果，以阐明本发明产品的显著疗效，说明本发明有显著的有益技术效果。本发明对慢性肾脏疾病和慢性肾功能衰竭大鼠的治疗作用实验资料如下:
实验例I本发明对慢性肾小球肾炎大鼠的治疗作用
1.实验动物SD大鼠70只，雌雄各半，体重180-220g，购自第四军医大学实验动物中心。新西兰白兔6只，购自西安市迪乐普生物资源开发有限公司。
[0037]2.实验药物本发明药物注射液，肾康注射液和大黄、黄芪组注射液，其中本发明和大黄、黄芪组注射液每毫升均相当于原生药3.6g，以上药物均由西安世纪盛康药业有限公司提供。
[0038]3.实验方法
(I)制备兔抗大鼠胸腺细胞血清取无菌的SD大鼠，处死，小心摘取大鼠胸腺和肝脏。将肝脏用PBS缓冲液冲洗干净后制成肝粉待用；另将胸腺置于PBS缓冲液中，冲洗2-3次，小心分离、去除其表面的淋巴结和血管，置200目不锈钢网筛上，用解剖针轻轻划破胸腺游离出胸腺细胞，用PBS缓冲液冲洗，收集胸腺细胞悬液，离心10min，用PBS缓冲液重制2 X IO7/ ml的胸腺细胞悬液，按体积比1:2混合胸腺细胞悬液和弗氏完全佐剂，充分混匀，以混合后的悬液作为大鼠胸腺细胞免疫抗原液。将大鼠胸腺细胞免疫抗原液多点注射于6只新西兰白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常规饲养2周后，兔耳缘静脉注射2X IO7/ ml的胸腺细胞悬液，每只注射1.5ml。7d后心脏抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫扩散法测兔抗大鼠胸腺细胞血清效价为1:160-1:320。兔抗大鼠胸腺细胞血清于56°C、30 min灭活后，分别用同个体大鼠肝粉吸附以去除非特异性抗体，室温离心30min，弃去肝粉，收集兔抗大鼠胸腺细胞血清，_20°C保存备用。
[0039] (2)慢性肾小球肾炎大鼠模型的制备取健康SD大鼠60只，适应性喂养3天后，收集尿液，检测尿蛋白，结果均为阴性。随即分为正常对照组、模型组、本发明组、肾康注射液组和大黄、黄芪组，每组12只。除给予正常对照组大鼠尾静脉注射2ml生理盐水外，其余组大鼠一次性尾静脉注射兔抗大鼠胸腺细胞血清2ml。
[0040](3)给药方法及指标测定注射兔抗大鼠胸腺细胞血清6天后，本发明组、肾康注射液组和大黄、黄芪组大鼠尾静脉注射相应中药组合物8g生药/kg，正常对照组和模型组给予等体积生理盐水，每天给药一次，连续给药2周。末次给药24小时后，腹主动脉取血，分别测定血流变和分离血清测定IL-6、IL-8和TNF-α水平，解剖肾脏，进行病理学考察。
[0041]4.结果
(I)本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血液流变学的影响 表1本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血液流变学的影响(iii)
【权利要求】
1.一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于它是由下述重量份配比的原料药制成:大黄、黄芪、红花=3-45:9-85:3-65。
2.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=6-35:20-75:10-45。
3.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=15-20:35-60:25-40ο
4.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=20:60:20。
5.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=20:30:60。
6.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=32:26:16。
7.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=40:40:40。
8.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=45:70:65。
9.根据权利要求1所述的一种治疗慢性肾脏疾病的中药组合物，其特征在于各原料药的重量配比为:大黄、黄芪、红花=25:75:50。
10.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(I)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加5-15倍量水浸泡10-30分钟，第一次加热超声提取10-30分钟，过滤；第二次加热超声提取10-20分钟，过滤，合并两次水提液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，加入2%-5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%-80%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%-85%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到大黄、红花提取液，备用； (2)取黄芪切成薄片，加入5-10倍量水，第一次加热超声提取10-20分钟，过滤；第二次加热超声提取5-15分钟，过滤，合并两次水提液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
11.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(1)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加10倍量水浸泡20分钟，第一次加热超声提取20分钟，过滤；第二次加热超声提取10分钟，过滤，合并两次水提液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，加入5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调PH值7.4-7.7，得到大黄、红花提取液，备用；(2)取黄芪切成薄片，加入7倍量水，第一次加热超声提取15分钟，过滤；第二次加热超声提取10分钟，过滤，合并两次水提液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
12.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(I)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加5-10倍量水，煎煮，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；先用水洗脱，收集洗脱液，然后用40%-80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，加入2%-5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为70%-80%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.19-1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为75%-85%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到大黄、红花提取液，备用； (2)取黄芪切成薄片，加8-12倍水，煎煮，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；然后用60%-80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调PH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
13.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(I)取红花和粉碎成粗颗粒的大黄，加6倍量水煎煮，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；先用水洗脱，收集洗脱液，然后用50%-60%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，加入5%明胶溶液去除鞣质，过滤，加入乙醇使含醇量为75%，静置，过滤，取滤液减压浓缩至相对密度在60°C时1.21，回收乙醇，继续加入乙醇使含醇量为80%，静置，过滤，回收乙醇，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到大黄、红花提取液，备用； (2)取黄芪切成薄片，加入10倍量水，煎煮3次，合并提取液，过滤，收集滤液，浓缩，进入大孔树脂柱进行吸附分离，收集首次流出液；然后用70%-75%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇至无醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min,过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
14.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(I)取红花和粉碎成细颗粒的大黄置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为30-50L/h，萃取压力为10-50MPa，萃取温度为35_60°C，萃取时间为1.5-2.5h，从萃取釜流出的大黄和红花高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为8 Mpa,分离温度I为30°C ;分离压力II为6 Mpa,分离温度II为25°C，收集大黄和红花的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调PH值6.7-8.2，得到大黄和红花提取液，备用； (2)取黄芪粉碎成细颗粒，和85%-95%的乙醇混合，置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为20-40L/h，萃取压力为10-30MPa，萃取温度为35_45°C，萃取时间为1.5-2.5h，从萃取釜流出的黄芪高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为6Mpa，分离温度I为30°C ;分离压力II为4Mpa，分离温度II为25°C，收集黄芪的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，过滤，调pH值6.7-8.2，得到黄芪提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值6.7-8.2，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
15.权利要求1-9任一所述治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤::(I)取红花和粉碎成细颗粒的大黄置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为40L/h，萃取压力为25MPa，萃取温度为45°C，萃取时间为2.5h，从萃取釜流出的大黄和红花高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为8 Mpa，分离温度I为30°C ;分离压力II为6 Mpa,分离温度II为25°C，收集大黄和红花的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到大黄和红花提取液，备用； (2)取黄芪粉碎成细颗粒，和80%的乙醇混合，置于萃取釜中进行CO2超临界萃取，进入萃取釜的超临界流体的流速为30L/h，萃取压力为20MPa，萃取温度为30°C，萃取时间为2h，从萃取釜流出的黄芪高压流体，进入分离釜进行分离，分离压力I为6Mpa，分离温度I为30°C ;分离压力II为4Mpa，分离温度II为25°C，收集黄芪的萃取物，加入注射用水至药液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，过滤，调pH值7.4-7.7，得到黄芪的提取液，备用； 将上述得到大黄和红花提取液以及黄芪提取液合并，超滤，调PH值7.4-7.7，药液经装有微孔滤膜的过滤器过滤后灌封，经灭菌，制成小容量注射剂、大输液，或再经过冷冻干燥，制成冻干粉针制剂。
16.根据权利要求1-9任一所述的治疗慢性肾脏疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于按常规制剂方法制成临床常用的所有剂型。
17.权利要求1所述的中药组合物在制备治疗慢性肾脏疾病及继发性肾病的药物中的应用。
18.权利要求1所述的中药组合物在制备治疗慢性肾功能衰竭的药物中的应用。
【文档编号】A61K9/19GK103893281SQ201210579625
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月28日 优先权日:2012年12月28日
【发明者】曹凤君, 吕延英, 詹芳, 王光建, 赵兴, 王俊平 申请人:西安世纪盛康药业有限公司