包含片球菌属的药物组合物和减轻胃肠综合征的症状的方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于在有此需要的哺乳动物中改良或减轻肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的症状、征象和标记物以及治疗所述疾病的方法和组合物，所述方法包括给予有效量的含有片球菌属的至少一种益生菌微生物菌株的可药用组合物，持续足以改良、减轻或治疗肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的至少一种症状、征象或标记物的时间。
【专利说明】包含片球菌属的药物组合物和减轻胃肠综合征的症状的方
法
【技术领域】
[0001]本发明广义上涉及新的益生菌微生物及其治疗用途。更具体地，本发明还涉及其对胃酸和胆盐的耐受性。并且，本发明涉及包含所述微生物的预防和治疗组合物，用于以许多益生菌方式有助于宿主的一般健康并预防和治疗与胃肠疾病相关的疾病和病症。
【背景技术】
[0002]涉及胃肠道功能异常的紊乱折磨着大量的世界人群。最流行的无结构异常的功能紊乱是肠易激综合征(IBS)。最常见的炎性肠胃疾病是炎性肠病(IBD，包括克罗恩病、溃疡性结肠炎和不确定性结肠炎)和胃炎。这些病症深深地影响患病者的生活质量并导致巨大的经济花费(Engel&Neurath, 2010;Loftus et al, 2000;Longstreth etal, 2006;Madden&Hunter; Salonen et al, 2010)。据估计，IBS 影响五百万美国人。IBS 特征为在无结构异常情况下复发的腹痛、胃气胀和肠功能改变的症状。IBD影响百分之二至百分之六的美国人。IBD特征为频繁和进行性的腹痛、腹泻、直肠出血和体重减轻症状。据估计，胃炎影响 美国450万人。胃炎包括胃的慢性炎症，其引起上腹痛和恶心。胃炎还是获得性胃酸屏障失效的主要原因，所述获得性胃酸屏障失效导致感染幽门螺旋杆菌(H.pylori)的患者患上十二指肠和胃溃疡以及胃癌。
[0003]目前有证据表明，这些复杂紊乱有一些共性:保护性的和有害的胃肠生物之间的不平衡(生态失调)，即使未鉴定到具体病原体(Blaser，1998;Bullock et al, 2004;Collinset al, 2009;Corthesy et al，2007;Lin，2004;Ott et al, 2004;Pimental etal, 2011; Salonen, et al，2010)。生态失调在这些疾病中的作用提供了使用试剂例如抗生素的理论依据，所述试剂改变胃肠道的微生物组成。然而，抗生素的使用与严重的副作用、并发症和细菌抵抗力相关(Engel&Neurath, 2010;Grundmann et al.，2010)。此外，与用于其他普通感染性疾病的抗微生物疗法相比，抗微生物疗法提供了较差的效果(Camilleri&Tack, 2010;Rimbara et al，2011)。
[0004]IBS被分类为功能紊乱，因为当检查小肠和结肠时没有病征。IBS特征为在无结构异常情况下复发的腹痛、胃气胀和肠功能改变症状(见Brandt et al., 2009; Chang&TalIey,2010;Grundman et al.，2010)。根据罗马II (Rome II)标准，可基于粪便形式、粪便频率和排便症状可以将IBS患病者划分成3种症状亚型:腹泻型(IBS-D)、便秘型(IBS-C)以及腹泻和便秘交替发作的混合亚型(IBS-Μ)。最近，已经发行了罗马III (Rome III)标准，其相对于排便频率更注重粪便形式(Longstreth等，2006)。IBS中最重要的生理失常包括内脏超敏感性、异常肠运动性和自主神经系统功能障碍，认为其相互作用使肠功能对许多外源性和内源性因素例如胃肠微生物丛、饮食和心理社会因素敏感。
[0005]还已经在IBS患者的胃肠粘膜观察到低水平的炎症的存在。若干研究已经检查了 IBS患者的粪便菌丛,发现与健康志愿者相比,大肠杆菌(Escherichia coli)、乳酸杆菌(Iactobacilli )和双歧杆菌(bifidobacteria)减少，需氧微生物增加(Jonkers&Stockbriigger, 2007;Madden&Hunter, 2002;Salonen et al.，2010)。
[0006]炎性肠病(IBD)是一种慢性炎性病症，其包括克罗恩病和溃疡性结肠炎(Longstreth 等,2006;Engel&Neurath, 2010; Loftus 等,2000)。IBD 的病因未知，但一种主导理论认为，某种因子，可能是病毒或细菌，改变了身体的免疫应答，触发了肠壁中的炎性反应。克罗恩病最普遍地影响小肠和/或结肠，而溃疡性结肠炎影响大肠，主要是大肠的乙状结肠/直肠区域。提议通过腹痛、直肠出血和腹泻诊断IBD。最终诊断取决于病史、内窥镜结果、组织学特征和对传染因子的阴性粪便研究的结合(Silverberg等，2005)。既不能诊断为溃疡性结肠炎又不能诊断为克罗恩病的病例被称为不确定性结肠炎。还没有具体的微生物被描述为可能的IBD的致病因素。但是，已经观察到粪便和粘膜微生物丛的细菌组成的变化(Ott等，2004)。
[0007]胃炎包括胃和十二指肠的慢性炎症，其一般与幽门螺旋杆菌感染有关。上腹痛和恶心是最常见的症状；其他症状是消化不良、腹部气胀、恶心和呕吐。胃炎可能与恶性贫血相关。胃炎的主要急性原因是过度饮酒或长时间使用非固醇类抗炎药物(也称为NSAID)例如阿司匹林或布洛芬。在大手术、外伤性损伤、烧伤、严重感染、涉及消化道的绑扎或重建的减重手术、慢性胆汁返流、应激和某些自身免疫性病状后可患胃炎。胃镜检查、验血、尿素呼吸试验和/或验粪可用于诊断胃炎(Sepulveda&Patil, 2010)。
[0008]胃炎的标准治疗是一周的“三重疗法”，其由质子泵抑制剂以及抗生素克拉霉素和阿莫西林组成，但抗药性的出现已危害这种方案的使用(Camilleri&Tack, 2010; Rimbara等，2011)。抗生素环丙沙星和甲硝唑已经被用于治疗胃炎，但这些抗生素的副作用限制了其使用(Engel&Neurath, 2010;Grundman等，2010)。一种更新的抗生素利福昔明可比以前的药物更有效(Pimental等，2010)，但目前其只被批准用于治疗旅行性腹泻。通常使用免疫抑制剂治疗IBD。经常需要外科手术。IBS的治疗定位于缓解症状，并往往是不成功的。
[0009]因为研究表明生态失调在这些病症的病因中是重要的，一直致力于鉴定能够改良IBS、IBD和胃炎的症状并且改善对常规治疗的响应的益生菌组合物。
[0010]另外，已知益生菌被描述为“活的微生物，当其被以适量给予时对宿主有健康益处，，(the United Nations Food and AgriculturalOrganization and the World HealthOrganization, Alternative Medicine2001报道)。益生菌被广泛用作动物和人的营养补剂。例如，酵母被用作家畜的营养补剂，含有乳酸细菌乳酸杆菌和/或双歧杆菌的酸乳常被用于预防和治疗腹泻相关的胃肠(GI)感染性疾病。益生菌的多个独特的性质，例如抗感染性质、免疫调节效应、增强的屏障作用、代谢效应和肠运动性或功能的改变使益生菌成为有效类型的动物和人的替代药物。
[0011]虽然益生菌产物如短链脂肪酸(SCFA)、细胞壁肽聚糖和包含CpG序列的短链DNA片段可具有有益的益生效应，但将活的微生物给予动物或人仍是益生菌研究的核心应用及焦点。为了使益生菌对动物和人有最大的效果，必须给予活细菌以到达胃肠道进行增殖。乳酸杆菌属和双歧杆菌属是两个在科学文献和商业产品中描述最常见益生菌属。乳酸杆菌属和双歧杆菌属是兼性或严格厌氧细菌。乳酸杆菌和双歧杆菌的大多数种(或株)对暴露于氧气和高温敏感。在室温下，在连贯的开放和关闭操作下很难维持乳酸杆菌和双歧杆菌的生存力。因此，变化的结果经常被描述，特别是需要在各种温度下长期保存和运输的可市售产品。[0012]总之，IBS、IBD和胃炎对当前医学疗法有高频率的不完全响应或没有响应。因此，尚未满足对改良与所述疾病相关的一种或多种症状的改进方法、组合物等的需要。对这些病症的有效的饮食和/或药物干预可能有大的公共健康影响。本发明的系统和方法等提供了这些优势和/或其他优势。
[0013]本发明的目的
[0014]因此，本发明的目的是提供用于治疗胃肠医学病症的益生菌组合物。
[0015]本发明的另一目的是提供使用益生菌疗法治疗胃肠病症的方法。
[0016]本发明的又一目的是使用益生菌如片球菌属(pedioccocuc)治疗过敏性肠综合征。
[0017]从下文的描述和实例中，本发明的这些目的和其他目的将更容易显现。
【发明内容】
[0018]本发明提供了一种在有此需要的哺乳动物中改良、减轻肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的症状以及治疗所述疾病的方法，所述方法包括给予有效量的含有片球菌属的至少一种菌株的可药用组合物，持续足以改良、减轻或治疗肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的至少一种症状的时间。
[0019]本发明还提供了一种可药用组合物，其包含足以在有此需要的哺乳动物中改良肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的至少一种症状的量的片球菌属的至少一种菌株。
【具体实施方式】
[0020]诊断和病理牛理学
[0021]在一个方面，本文的组合物、方法、系统等目的是提供能够在有此需要的个体中减轻IBS、IBD和胃炎的一种或多种征象或症状的益生菌组合物。
[0022]可被本发明的方法、组合物等减轻的胃炎的征象或症状包括:可随着进食变坏或变好的上腹部的持续疼痛或灼热疼痛(消化不良)；恶心；呕吐；食欲不振；嗳气或胃气胀；进食后上腹部发胀的感觉；体重减轻；胃溃疡；十二指肠溃疡；胃粘膜炎症；粪便中尿素酶试验阳性；尿素呼吸试验阳性。
[0023]可被本发明的方法、组合物等减轻的IBS的征象和症状包括:腹部疼痛或痉挛；发胀的感觉；胀气(气胀)；腹泻或便秘；肠运动频率改变；肠运动表现改变；不能控制的紧急肠运动的感觉；以及粪便中有粘液。
[0024]可被本发明的方法、组合物等减轻的IBD (克罗恩病、溃疡性结肠炎和不确定性结肠炎)的征象和症状包括:腹痛；发烧；食欲不振；排便疼痛；腹泻；非故意的体重减轻；便秘；直肠出血；血便；肠道炎症、脓肿和瘘；回肠隐窝的炎症(隐窝炎)。
[0025]为了从本文的组合物、方法、系统等受益，个体不一定被诊断有微生物感染。
[0026]所述组合物、制剂、方法等可按照需要被用作膳食补充剂或食品添加剂或药剂或以其他方式使用以减轻IBS、IBD和胃炎的症状。本文的方法包括目的在于为所述组合物加标签、销售所述组合物以及将所述组合物提供给健康护理专业人员和/或消费者的方法、试剂盒、标签、系统等，用于减轻IBS、IBD和胃炎的症状。
[0027]在所述组合物中包含片球菌属的至少一种菌株对本发明是必要的。[0028]在一个实施方案中，所述组合物由包含片球菌属的至少一种菌株的第一微生物和对人有有益的健康效应的至少一种第二微生物的混合物组成，其中所述第二微生物是至少一种细菌或真菌。通常，至少一种另外的微生物选自乳酸杆菌属、双歧杆菌属、链球菌属(Streptococcus)或酵母菌属(Saccharomyces)。
[0029]在另一个实施方案中，所述组合物以胶囊或其他适合的给药形式提供，并且单个胶囊提供一足份。在一个实例中，每个胶囊包含至少约100万至最高达1500亿菌落形成单位(CFU)的片球菌属/I胶囊份以及至少约100万CFU的所述另外的微生物/I胶囊份。在另一个实施方案中，产率是约1500亿CFU/克材料。也可根据需要使用其他产率。
[0030]在另一个实施方案中，所述片球菌属菌株是一种或多种乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、有害片球菌(Pediococcusdamnosus)、糊精片球菌(Pediococcusdextrinicus)、啤酒片球菌(Pediococcuscerevisiae)或小片球菌(Pediococcus parvulus)。
[0031]在一个优选实施方案中，使用乳酸片球菌。
[0032]在另一个实施方案中，将选择的片球菌属的种类与一种或多种其他益生菌结合。其他益生菌可以是对人具有有利健康效应的任何微生物。通常，所述其他益生菌是以下的一种或多种:嗜酸乳杆菌(LactobaciIlusacidophiIus)、短乳杆菌(L.brevis)、保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)、干酪乳杆菌(L.casei )、卷曲乳杆菌(L.crispatus)、弯曲乳杆菌(L.curvatus)、发酵乳杆菌(L.fermentum)、加氏乳杆菌(L.gasseri)、瑞士乳杆菌(L.helveticus)、约氏乳杆菌(L.johnsonii)、副干酪乳杆菌(L.paracasei)、类植物乳杆菌(L.paraplantarum)、戊糖乳杆菌(L.pentosus)、植物乳杆菌(L.plantarum)、罗伊乳杆菌(L.reuteri)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、唾液乳杆菌(L.salivarius)、米酒乳杆菌(L.sakei )、乳乳球菌(Lactococcus lactis)、乳明串珠菌(Leuconostoclactis)、假肠膜明串珠菌(Ln.pseudomesen`teroides)λ肠系膜明串珠菌(Ln.mesenteroides)、青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、动物双歧杆菌(B.animal is)、两岐双岐杆菌(B.bifidum)、短双歧杆菌(B.breve)、乳双歧杆菌(B.lactis)、长双歧杆菌(B.1ongum)、婴儿双岐杆菌(B.1nfantis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)、酉良酒酵母(Saccharomycescereviseae)、枯草杆菌(Bacillussubtilis)、凝固芽胞杆菌(B.coagulans)(常常被错认为乳酸芽孢杆菌(Lactobacillussporogenes))、地衣形芽孢杆菌(B.licheniformis)、錯样芽孢杆菌(B.cereus)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、大肠杆菌 Nesslel917(Escherichia coli Nesslel917)、丙酸丙酸杆菌(Proprionibacterium acidipropionici )、费氏丙酸杆菌(P.freudenreichii )、詹氏丙酸杆菌(P.jensenii)和特恩丙酸杆菌(P.thoenii)。
[0033]在另一个实施方案中，所述组合物中没有一种益生菌生物已经或正在在含有酪蛋白或麸质的培养基中繁殖或生长。
[0034]在另一个实施方案中，所述组合物例如膳食补充剂是干燥的粉剂、片剂或明胶胶囊。益生菌胶囊化的示例性方法可在例如美国专利申请2007/0122397和科学文献中找到。
[0035]在另一个实施方案中，所述组合物与可消化的支持材料一起提供用于供人消费。示例性的可消化的支持材料包括基于谷类作物的产品、米糕、大豆糕、食物棒产品、冷成型食物棒产品、软冻、布丁、明胶、米浆、豆浆、酸乳、酸乳酒、果浆产品、糖果、糖果棒和苹果沙司。很多种用于配制含有益生菌的可消化的支持材料的方法在文献中已知。
[0036]在另一个实施方案中，所述产品可以是试剂盒或系统，其中本文的组合物、胶囊等包含在可药用容器中，以及解释所述产品可以减少IBS、IBD或胃炎的一种或多种症状，和/或所述产品不含酪蛋白和麸质和/或是低变应原的书面说明书、小册子、信息页、目录或标签。另外，所述产品可以与所述解释所述产品可以减少IBS、IBD或胃炎/胃溃疡的一种或多种症状和/或所述产品不含酪蛋白和麸质的书面说明书、小册子、信息页、目录或标签一起销售。在另一个实施方案中，可将所述产品与解释所述产品是低变应原的书面说明书、小册子、信息页、目录或者标签一起销售。
[0037]益生菌成分和组合物
[0038]本发明上下文中的“益生菌”的使用与其通常意义一致，例如当选择时，有活力的微生物膳食补充剂在以足够量被引入时，经其对胃肠道的效应有益地影响人体(Holzapfel等，2001; Ho lzapf el&Schi 11 inger, 2002 )。FA0/WH0采用的益生菌的定义为“当以适当量给予时赋予宿主健康益处的活微生物”(FA0/WH0 guidelines, 2002)。这些有益的细菌可在例如乳或乳处理工厂、活植物或腐烂植物以及人和动物的肠道中发现。
[0039]目前，研究的最为透彻的益生菌是乳酸菌，特别是乳杆菌属和双歧杆菌属。乳杆菌是革兰氏阳性兼性厌氧细菌的属。乳杆菌属目前包括100多个种，涵盖各种各样的生物。它们是常见的并且通常无害的。在人中，它们存在于阴道和胃肠道中，在这里它们是共生的，并且组成消化道菌群的一小部分(Tannock，1999)。已经完成了对人中的嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌、约氏乳杆菌、干酪乳杆菌、乳乳球菌、罗伊乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、加氏乳杆菌及其他种和亚种的研究。乳杆菌种类在人中的用途研究已经在科学文献包括本文提供的参考文献 中被广泛综述。
[0040]双歧杆菌是革兰氏阳性厌氧细菌的属，目前包括31个已表征的种，其中11个已经在人粪便中检测到(Tannock，1999)。双歧杆菌是革兰氏阳性的不规则的或分枝的杆状细菌，其常常在人和大多数动物和昆虫的肠内发现。婴儿双岐杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌是婴儿肠内最大的细菌群，而双歧杆菌据说在成人中仅是第三或第四大群(并且仅构成成人粪便菌丛的3_6%)。双歧杆菌抑制白念珠菌(Candida albicans)、大肠杆菌和其他病原菌的生长。已经表明，婴儿双歧杆菌可大大减轻肠易激综合征(IBS)的症状(Whorwell等，2006)。
[0041]已经检查了乳杆菌和双歧杆菌在预防和治疗不同谱的胃肠病症中的有效性。除了其他益处，认为这些生物可恢复并维持免疫系统功能和胃肠屏障功能并减轻炎症(Corthesy 等,2007;Parvez 等,2006))。
[0042]在人中乳杆菌属和双歧杆菌属的效应已经被综述(Jonkers&Stockbruegger, 2007;Lesbros-Pantoflickova;Moayyedi 等，2010;Gareau 等，2010;Parvez等，2006; Lesbros-Pantof I ickova D 等，2007)。Midolo 等(1995)报道，嗜酸乳杆菌的六个菌株和干酪乳杆菌鼠李糖亚种(L.casei subsp.Rhamnosus)的一个菌株在体外抑制幽门螺旋杆菌的生长。给予乳杆菌属和双歧杆菌属可改善胃炎；其效果是统计学显
著的，但是微弱的(Lesbros-Pantoflickova D等，2007)。已经表明，一个产品-称为
VSL#3——可减轻溃疡性结肠炎和隐窝炎的症状(回肠隐窝的炎症；由Corthesy等，2007综述)。称为Synbiotic2000的益生菌/益生元混合物对克罗恩病的术后复发没有效果(Chermesh, 2007)。
[0043]布拉酵母菌是一种暂时性酵母益生菌，被长期应用于治疗多种类型的腹泻。其是不受抗生素影响的坚强、耐酸、温度耐受的微生物。已经报道，布拉酵母菌在患克罗恩病、IBS和胃炎的患者中具有有益的效应(Guslandi等，2000; Choi等，2011; Szajewska等，2010)。
[0044]片球菌属可被描述为“仅有的嗜酸的、同型发酵的乳酸细菌，其可选择地在两个垂直方向分裂形成四联球菌”(Simpson and Taguchi, 1995)。种系发生上,片球菌属和乳杆菌属形成可被分成2个亚簇的超簇(super-cluster)。片球菌属的所有种都在干酪乳杆菌_片球菌属亚簇中。形态学上，片球菌(球菌；直径为0.6-1.0mm)和乳杆菌(杆菌)是不同的。目前有五个种属于片球菌属:乳酸片球菌、有害片球菌、糊精片球菌、小片球菌和戊糖片球菌。 [0045]戊糖片球菌被用作香肠发酵、黄瓜和绿豆发酵、豆浆发酵和青贮饲料中的产酸起子培养物，并且是大多数乳酪种类熟化过程中的微生物群的典型组分。片球菌属的种已经在家畜和宠物产业中被用作益生菌(美国专利申请20060008511和20070020328)，并且通常被认为对人消费是安全的(GRAS) (Ishibashi&Yamazaki, 2001)。乳酸片球菌的一种菌株(LMG P-21927)已被从人粪便中分离(Speelmans等；美国专利申请2006/0165661;TO2004/110466)。
[0046]已确定了片球菌属对食物传播的病原体例如李斯特菌(Listeria)的抗微生物效果。片球菌属的抗菌特性归因于被称为片球菌素的杀菌肽，有很大兴趣将其作为食物的生物防腐剂。已经做了一些研究以检查片球菌素对幽门螺旋杆菌的作用。Kim等(2003)报道了纯化的片球菌素P02有抗幽门螺旋杆菌的微弱活性，而Midolo和其同事(1995)发现了活的片球菌属对幽门螺旋杆菌没有作用。所述研究都没有考虑使用活的片球菌属治疗人胃炎、IBS 或 IBD0
[0047]发明人之前公开了用于人的包含片球菌属的组合物和方法(美国公开申请N0.2011/0091431，所述申请的内容通过引用的方式纳入本文)。本发明说明了这些组合物和方法用于在有此需要的人中减轻胃炎、IBS和IBD的征象和/或症状的用途。
[0048]虽然不需要理解本文的组合物、方法等，但发明人的组合物在减轻IBS、IBD和胃炎的症状中的有益作用可产生自片球菌属作为免疫调节剂的作用，其减轻炎症并增强宿主抵抗疾病的反应。片球菌属的剂量对在胃肠道的成功定居也是重要的。不受理论束缚，这些特性可使得本文的片球菌属组合物能够赋予患有IBS、IBD和胃炎的个体更正常的神经胃肠道和免疫功能或使其恢复。因此，已被诊断患有IBS、IBD或胃炎的个体可受益于所述新组合物。
[0049]本文论述的组合物可例如作为膳食补充剂、食物和饮料添加剂、食物和饮料成分以及药剂被给予。可以使用任何合适的给药途径，通常是饮食/ 口服。
[0050]本文论述的组合物可包括含有消化酶的组合物或与含有消化酶的组合物结合使用。例如，所述组合物可与称为EnzymAid? (KirkmanLabs, Oregon)的消化酶配制结合物以及各种各样的其他制剂结合使用。通常，所述消化性酶会作为单独的片剂或胶囊或粉剂给予。如果需要，可以给予患者消化性酶制剂，持续处方时间，然后开始治疗，例如持续1-3天至1-4周，然后开始用本文所述组合物治疗。适用于本发明的消化性酶制剂的实例包括但不限于来源于 ProThera Inc.和 Klaire Labslnc.(Reno, Nevada)的产品，称为 VitalZymes?Complete; VitalZymes?Forte; VitalZymes?Chewables;和 SerenAid ㊣，以及其中任何成分。
[0051]本文中描述的组合物可在使用抗生素或抗真菌剂的治疗后使用，或与这些治疗同时使用。
[0052]本文论述的组合物可与无麸质和无酪蛋白的饮食结合使用。因此，本发明的方法和组合物可与Houston (US6，447，772)和/或Wilkinson (US6, 251，391)中的任意方法和组合物包括ProThera Inc.的SerenAid ?品牌的酶产品结合使用。
[0053]本文的组合物优选包含以下成分(％相对CFU含量):
[0054]乳酸片球菌1%至99%
[0055]戊糖片球菌1%至99%
[0056]有害片球菌1%至99%
[0057]糊精片球菌1%至99%
[0058]小片球菌1%至99%
[0059]乳双歧杆菌1%至99%
[0060]动物双歧杆菌0%至99%
[0061 ]青春双岐杆菌0%至98%
[0062]两岐双岐杆菌0%至9`8%
[0063]短双歧杆菌0%至98%
[0064]婴J L双岐杆菌0%至98%
[0065]长双歧杆菌0%至98%
[0066]嗜酸乳杆菌0%至98%
[0067]短乳杆菌0%至98%
[0068]保加利亚乳杆菌0%至98%
[0069]干酪乳杆菌0%至98%
[0070]卷曲乳杆菌0%至98%
[0071 ]弯曲乳杆菌0%至98%
[0072]发酵乳杆菌0%至98%
[0073]加氏乳杆菌0%至98%
[0074]瑞士乳杆菌0%至98%
[0075]约氏乳杆菌0%至98%
[0076]副干酪乳杆菌0%至98%
[0077]类植物乳杆菌0%至98%
[0078]戊糖乳杆菌0%至98%
[0079]植物乳杆菌0%至98%
[0080]罗伊乳杆菌0%至98%
[0081 ]鼠李糖乳杆菌0%至98%
[0082]米酒乳杆菌0%至98%
[0083]唾液乳杆菌0%至98%
[0084]乳乳球菌0%至98%[0085]乳明串珠菌0%至98%
[0086]假肠膜明串珠菌0%至98%
[0087]肠系膜明串珠菌0%至98%
[0088]布拉酵母菌0%至98%
[0089]酿酒酵母0%至98%
[0090]嗜热链球菌0%至98%
[0091 ]枯草杆菌0%至98%
[0092]凝固芽胞杆菌0%至98%
[0093]地衣形芽孢杆菌0%至98%
[0094]蜡样芽孢杆菌0%至98%
[0095]屎肠球菌0%至98%
[0096]大肠杆菌Nesslel9170% 至 98%
[0097]丙酸丙酸杆菌0 %至98%
[0098]费氏丙酸杆菌0%至98%
[0099]詹氏丙酸杆菌0%至98%
[0100]特恩丙酸杆菌0%至98%
[0101]屎肠球菌0%至98%
[0102]上述成分还可以以例如多于10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或少于90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10% 的范围存在。
[0103]在一个实施方案中,所述组合物每I胶囊份容量含有以下量的成分,其中CFU表示菌落形成单位:
[0104]乳酸片球菌15亿CFU (6.0%)
[0105]短双歧杆菌5亿CFU (2.0%)
[0106]婴儿双岐杆菌5亿CFU (2.0%)
[0107]副干酪乳杆菌5亿CFU (2.0%)
[0108]唾液乳杆菌5亿CFU (2.0%)
[0109]乳双歧杆菌10亿CFU (4.0%)
[0110]长双歧杆菌10亿CFU (4.0%)
[0111]嗜热链球菌10亿CFU (4.0%)
[0112]保加利亚乳杆菌10亿CFU (4.0%)
[0113]干酪乳杆菌25亿CFU (10.0%)
[0114]植物乳杆菌25亿CFU (10.0%)
[0115]嗜酸乳杆菌30亿CFU (12.0%)
[0116]两岐双岐杆菌35亿CFU (14.0%)
[0117]鼠李糖乳杆菌60亿CFU (24.0%)
[0118]应理解,乳杆菌属、双歧杆菌属、酵母菌属、乳球菌属和其他益生菌生物的多种不同混合物可与片球菌属以可产生有效结果的多种百分比组成和剂量结合；本发明不限于上述的精确配方。
[0119]细菌的配制和胶囊化的方法已经被报道，且这些方法可与本发明结合使用(例如美国专利申请2004/247580 )。
[0120]另外，本文的组合物、方法等可被配制、制造或使用以包括促进胃肠道中益生菌生物生长的益生元试剂。合适的益生元试剂包括但不限于果糖寡糖、半乳糖寡糖、乳果糖、β -葡聚糖、菊糖、果胶和抗性淀粉(例如见Paul等，US6, 241，983)。
[0121]本发明的益生菌组合物还与其他治疗试剂例如选自奥美拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑、泮托拉唑和艾美拉唑的质子泵抑制剂，以及选自西咪替丁、雷尼替丁、法莫替丁和尼扎替丁的H2-受体拮抗剂一起配制。
[0122]实施例1
[0123]患有严重腹胀的38岁男性患者每天用一粒含有2亿CFU的乳酸片球菌的胶囊治疗。每周评估所述患者，并且所述患者报告腹胀症状的改善。
[0124]实施例2
[0125]患有每天胀气、腹部绞痛(abdominal crap)和便秘的8岁男孩通过每天2次给药，每次2粒胶囊治疗，每粒胶囊含有益生菌制剂，其含有乳酸片球菌15亿菌落形成单位(CFU)、短双歧杆菌5亿CFU、婴儿双岐杆菌5亿CFU、副干酪乳杆菌5亿CFU、唾液乳杆菌5亿CFU、乳双歧杆菌10亿CFU、长双歧杆菌10亿CFU、嗜热链球菌10亿CFU、保加利亚乳杆菌10亿CFU、干酪乳杆菌25亿CFU、植物乳杆菌25亿CFU、嗜酸乳杆菌30亿CFU、两岐双岐杆菌35亿CFU和鼠李糖乳杆菌60亿CFU，并且三周后经历症状的完全消退。
[0126]上文引用的参考文献以及下文专利、已公开的申请(包括其所有外文等效物)和期刊出版物的全部内容(包括其中引用的参考文献)，为了所有目的将其全文通过引用的方式纳入本文，如同每个单独的专利、专利申请或出版物被单独指出一样。
[0127]
美国专利文件
美国专利Fl期发明人
5,705,152January, 1998Plummer
5,501,857March, 1996Zimmer
6.080,401June, 2000Reddy, et al.6,241,983June, 2001Pauletal.6,251,391June? 2001Wilkinson, et al.7,241,441July, 2007Choi5 et al,
[0128]
【权利要求】
1.一种在有此需要的哺乳动物中改良或减轻肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的症状以及治疗所述疾病的方法，所述方法包括给予有效量的含有片球菌属(Pediococcus)的至少一种益生菌微生物菌株的可药用组合物，持续足以改良、减轻或治疗肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的至少一种症状、征象或标记物的时间。
2.权利要求1的方法，其中所述被改良的症状选自:上腹部的持续疼痛或灼热疼痛；恶心、呕吐；食欲不振；嗳气或胃气胀；进食后上腹部发胀的感觉；体重减轻；胃溃疡；十二指肠溃疡；胃粘膜炎症；粪便中尿素酶试验阳性；呼吸中尿素试验阳性；胀气(胃气胀)；腹泻或便秘；肠运动频率改变；肠运动表现改变；不能控制的紧急肠运动的感觉；粪便中有粘液；排便痛苦；直肠出血；血便；肠道炎症；肠脓肿和/或瘘；以及隐窝炎。
3.权利要求1或2的方法,其中所述片球菌属菌株选自:乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、戍糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、有害片球菌(Pediococcusdamnosus)、糊精片球菌(Pediococcusdextrinicus)和小片球菌(Pediococcus parvulus)及其混合物。
4.权利要求3的方法，其中所述片球菌属的剂量或份含有约100万至约1500亿菌落形成单位(CFU)。
5.权利要求4的方法，其中所述剂量或份包含约1500亿CFU的所述片球菌属/克可药用组合物。
6.权利要求4或5的方法，其中所述组合物还含有至少一种第二益生菌微生物，其中所述第二益生菌微生物是至少一种细菌或真菌。
7.权利要求6的方 法,其中所述第二益生菌微生物选自乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)或酵母菌属(Saccharomyces)及其混合物。
8.权利要求7的方法，其中所述第二益生菌微生物选自:嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳杆菌(Lactobacilluscurvatus)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、类植物乳杆菌(Lactobacillus paraplantarum)、戍糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri )、鼠李糖乳杆菌(LactobaciIIusrhamnosus)> 唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、米酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animal is )> 两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)、婴儿双岐杆菌(Bifidobacterium infantis)、布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)和酿酒酵母(Saccharomyces cereviseae)及其混合物。
9.权利要求7的方法，其中所述第二益生菌微生物选自:乳乳球菌(Lactococcuslactis)、乳明串珠菌(Leuconostoc lactis)、假肠膜明串珠菌(Leuconostocpseudomesenteroides)、肠系膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、凝固芽胞杆菌(Bacillus coagulans)、地衣形芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)、腊样芽抱杆菌(Bacillus cereus)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、大肠杆菌Nesslel917 (Escherichia coliNesslel917)、丙酸丙酸杆菌(Proprionibacteriumacidipropionici)、费氏丙酸杆菌(Proprionibacterium freudenreichii)、詹氏丙酸杆菌(Proprionibacterium jensenii)和特恩氏丙酸杆菌(Proprionibacteriumthoenii)及其混合物。
10.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述组合物中没有一种益生菌微生物在含有酪蛋白的培养基中繁殖或生长。
11.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述组合物中没有一种益生菌微生物在含有麸质的培养基中繁殖或生长。
12.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述可药用组合物被配置和标记为膳食补充剂。
13.权利要求12的方法，其中所述可药用组合物被配制为干粉剂、片剂、硬明胶胶囊或软明胶胶囊。
14.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述微生物在一份胶囊中经口服递送。
15.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述可药用组合物在给予消化性酶制剂之后被给予。
16.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述可药用组合物在适于人消费的载体材料中提供。
17.权利要求16的方法，其中所述载体材料选自:基于谷类作物的产品、米糕、大豆糕、食物棒产品、冷成型食物棒产品、软冻、布丁、明胶、米浆、豆浆、酸乳、酸乳酒、果浆产品、糖果、糖果棒和苹果沙司。
18.权利要求1、7、8或9的方法，其中包含药学上有效量的所述试剂的所述可药用组合物在给予患者抗生素剂或抗真菌剂后被给予。
19.权利要求1、7、8或9的方法，其中包含药学上有效量的所述试剂的所述可药用组合物与给予患者抗生素剂或抗真菌剂伴随给药。
20.权利要求18或19的方法，其中所述抗生素剂或抗真菌剂选自:利福昔明、克拉霉素、阿奇霉素、阿莫西林、氨苄西林、环丙沙星、甲硝唑、万古霉素、制霉菌素、伊曲康唑、氟康唑或磺胺。
21.权利要求1的方法，其中所述可药用组合物与无麸质和无酪蛋白的饮食结合给予。
22.权利要求1、7、8或9的方法，其中所述可药用组合物每份或剂量包含约以下量的成分，其中CFU表示菌落形成单位: 乳酸片球菌15亿CFU 短双歧杆菌5亿CFU 婴儿双岐杆菌5亿CFU 副干酪乳杆菌5亿CFU 唾液乳杆菌5亿CFU 乳双歧杆菌10亿CFU 长双歧杆菌10亿CFU嗜热链球菌10亿CFU 保加利亚乳杆菌10亿CFU 干酪乳杆菌25亿CFU 植物乳杆菌25亿CFU 嗜酸乳杆菌30亿CFU 两岐双岐杆菌35亿CFU 鼠李糖乳杆菌60亿CFU。
23.权利要求22的方法，其中所述可药用组合物还包含至少一种促进益生菌微生物在胃肠道内生长的益生元试剂。
24.权利要求23的方法，其中所述益生元试剂包含至少一种果糖寡糖、半乳糖寡糖、乳果糖、葡聚糖、菊糖、果胶和抗性淀粉。
25.—种可药用组合物，所述组合物以足以在有此需要的哺乳动物中改良肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的至少一种症状的量包含至少一种包含片球菌属的益生菌微生物菌株。
26.权利要求25的组合物，其中所述片球菌属菌株选自乳酸片球菌、戊糖片球菌、有害片球菌、糊精片球菌和小片球菌及其混合物。
27.权利要求25或26的组合物，其中所述药剂的剂量或份包含约100万至约1500亿菌落形成单位(CFU)的所述片 球菌属。
28.权利要求25或26的组合物，其中剂量或份包含约1500亿CFU的所述片球菌属/克可药用组合物。
29.权利要求25或26的组合物，其中所述组合物还含有至少一种第二益生菌微生物，其中所述第二益生菌微生物选自:细菌、真菌或其混合物。
30.权利要求29的组合物，其中所述第二益生菌微生物选自乳杆菌属、双歧杆菌属或酵母菌属。
31.权利要求30的组合物，其中所述第二益生菌微生物选自:嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、弯曲乳杆菌、发酵乳杆菌、加氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、类植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌、米酒乳杆菌、青春双岐杆菌、动物双歧杆菌、两岐双岐杆菌、短双歧杆菌、乳双歧杆菌、长双歧杆菌、婴儿双岐杆菌、布拉酵母菌和酿酒酵母及其混合物。
32.权利要求29的组合物，其中所述第二益生菌微生物选自:乳乳球菌、乳明串珠菌、假肠膜明串珠菌、肠系膜明串珠菌、嗜热链球菌、枯草杆菌、凝固芽胞杆菌、地衣形芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、屎肠球菌、大肠杆菌NeSSlel917、丙酸丙酸杆菌、费氏丙酸杆菌、詹氏丙酸杆菌和特恩氏丙酸杆菌及其混合物。
33.权利要求25、26、30、31或32的组合物，其中所述组合物中没有一种益生菌微生物在含有酪蛋白的培养基中繁殖或生长。
34.权利要求25、26、30、31或32的组合物，其中所述组合物中没有一种益生菌微生物在含有麸质的培养基中繁殖或生长。
35.权利要求25、26、30、31或32的组合物，其中所述可药用组合物被标记为膳食补充剂。
36.权利要求25、26、30、31或32的组合物，其中所述可药用组合物为干粉剂、片剂、硬明胶胶囊或软明胶胶囊的形式。
37.权利要求25、26、30、31或32的组合物，其中所述可药用组合物在适于人消费的载体材料中提供。
38.权利要求37的组合物，其中所述载体材料选自:基于谷类作物的产品、米糕、大豆糕、食物棒产品、冷成型食物棒产品、软冻、布丁、明胶、米浆、豆浆、酸乳、酸乳酒、果浆产品、糖果、糖果棒和苹果沙司。
39.权利要求25、26、30、31、32或38的组合物，其中所述组合物还包含至少一种抗生素剂或抗真菌剂。
40.权利要求25、26、30、31、32或38的组合物，其中所述组合物还包含抗生素剂和抗真菌剂。
41.权利要求40的组合物，其中所述抗生素剂或抗真菌剂选自:利福昔明、克拉霉素、阿奇霉素、阿莫西林、氨苄西林、环丙沙星、万古霉素、甲硝唑、制霉菌素、伊曲康唑、氟康唑或磺胺类药物及其混合物。
42.权利要求25、26、30、31、32、38或41的组合物，其中所述可药用组合物每份或剂量包含约以下量的成分，其中CFU表示菌落形成单位: 乳酸片球菌15亿CFU 短双歧杆菌5亿CFU 婴儿双岐杆菌5亿CFU 副干酪乳杆菌5亿CFU 唾液乳杆菌5亿CFU 乳双歧杆菌10亿CFU 长双歧杆菌10亿CFU 嗜热链球菌10亿CFU 保加利亚乳杆菌10亿CFU 干酪乳杆菌25亿CFU 植物乳杆菌25亿CFU 嗜酸乳杆菌30亿CFU 两岐双岐杆菌35亿CFU 鼠李糖乳杆菌60亿CFU。
43.权利要求25、26、30、31、32、38或41的组合物，其中所述可药用组合物还包含至少一种促进益生菌微生物在胃肠道内生长的益生元试剂。
44.权利要求43的组合物，其中所述益生元试剂包含至少一种果糖寡糖、半乳糖寡糖、乳果糖、葡聚糖、菊糖、果胶和抗性淀粉。
45.权利要求25、26、30、31、32、38、41或44的组合物，用作活性治疗物质。
46.权利要求25、26、30、31、32、38、41或44的分离和纯化的组合物，用于制造用于抑制、预防或治疗人患者中的肠易激综合征、炎性肠病或胃炎的药物。
47.一种制造 能够改良与人患者中的肠易激综合征、炎性肠病或胃炎相关的一种或多种症状的药物的方法，所述方法包括:结合(a)药学上有效量的权利要求25、26、30、31、32、.38、41或44的组合物与(b)可药用的佐剂、赋形剂、缓冲剂或稀释剂。
48.一种包括容器的试剂盒，所述容器含有:(a)权利要求25、26、30、31、32、38、41或44任一项的组合物jP(b)包含对所述组合物改良肠易激综合征或炎性肠病或胃炎的一种或多种症状的药物用途进行说明的标签。
49.权利要求48的试剂盒，其中所述标 签包括所有经FDA批准的用途。
50.权利要求25的药用组合物，还包含选自质子泵抑制剂(PPI)和H2-受体拮抗剂的另一种有益治疗剂。
51.权利要求50的组合物，其中所述质子泵抑制剂选自奥美拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑、泮托拉唑和艾美拉唑。
52.权利要求50的组合物，其中所述H2-受体拮抗剂选自西咪替丁、雷尼替丁、法莫替丁和尼扎替丁。
【文档编号】A61K35/66GK103764154SQ201280028559
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2012年6月8日 优先权日:2011年6月10日
【发明者】S·F·奥姆斯特德 申请人:普洛特拉有限公司