疫苗施用方法、新猫杯状病毒、及抗猫细小病毒和猫疱疹病毒的动物免疫方法
【专利摘要】本发明涉及用于免疫猫以抵抗猫病毒的疫苗。本发明还涉及编码分离的猫杯状病毒的衣壳蛋白的核酸克隆。本发明还涉及含有分离的猫杯状病毒的活或死疫苗、含有分离的猫杯状病毒的衣壳蛋白的亚单位疫苗、含有分离的猫杯状病毒的核酸克隆的核酸疫苗、和包含编码分离的猫杯状病毒的衣壳蛋白的核酸的重组病毒载体疫苗。本发明也涉及鉴定可用于疫苗组合物的制备以及诊断感染猫杯状病毒的猫的试验中的猫杯状病毒的方法。本发明还公开免疫动物，特别是猫以抵抗疾病，尤其是，猫杯状病毒(FCV)的方法。
【专利说明】疫苗施用方法、新猫杯状病毒、及抗猫细小病毒和猫疱疹病毒的动物免疫方法
[0001]本申请是申请日为2006年7月17日、申请号为200680035988.9的发明专利申请
的分案申请。
【技术领域】
[0002]本发明涉及提供新的向各种动物施用各种疫苗的方式。本发明公开几种分离的猫杯状病毒(feline caliciviruses, FCV)。还公开将FCV疫苗呈递给猫的新方法。本发明还涉及编码猫杯状病毒的核酸克隆。涉及FCV衣壳蛋白、活的或死的疫苗、包含衣壳蛋白的亚单位疫苗、核酸疫苗、和包含编码分离的猫杯状病毒的衣壳蛋白的核酸的重组病毒载体疫苗。本发明也涉及鉴定可在疫苗组合物的制备中及在诊断感染猫杯状病毒的猫的试验中使用的猫杯状病毒的方法。本发明也提供将新的和老的FCV疫苗施用给猫的新方式。
【背景技术】
[0003]杯状病毒据报道是猫的一种重要的致病因素。可以观察到多种症状，例如发烧、鼻炎、打喷嚏、轻微的结膜炎、眼屎、在外鼻孔、口腔粘膜中或在舌上出现疱囊、肺炎、气管支气管炎、腹泻、肌肉疼痛、离子通道闸门僵直(stiff gate)以及感觉过敏。机会细菌感染常常伴随FCV感染，这使得治疗和痊愈变得复杂化。严重的FCV感染可以导致死亡，尤其是在幼猫中。应当注意，这些征候，尽管据报道在天然情况下是常见的，但是在实验性感染中并不总是显著的。似乎不同的猫杯状病毒(FCV)野外毒株在其致病潜力上是不同的，或者与其它病因的共同感染将影响疾病症状。
[0004]抗猫杯状病毒疫苗已经存在有二十年以上。尽管存在大量的FCV血清型，但是发现某些毒株，例如F9，可以诱导针对广谱FCV毒株的抗体。见，J.L.Bittle和W.J.Rubic，Am.J.Vet.Res.37:275-78(1976)。因此，最早的抗猫杯状病毒疫苗使用的是FCV-F9毒株的修饰的或减毒的形式。见J.L.Bittle和ff.J.Rubic的美国专利号3，937，812，在此将其完整地并入作为参考。
[0005]尽管来自FCV-F9的疫苗和其它商业可获得的疫苗可以提供对抗许多野外分离株的保护作用，但是事实上这些疫苗并不能阻止所有毒株的感染。而且，由于FCV—直在不断进化，基于FCV-F9的疫苗防卫越来越少的野外分离株(Lauritzen等，1997, VetMicrobiology, 56:55-63)。此外，兽医从业者也对基于单种血清型的疫苗的效力表现出担心。实际上，野外研究提示，来源于FCV-F9毒株的疫苗对许多猫杯状病毒株不能提供充分的免疫力。见例如，N.C.Pederson 等,Feline Pract.13 (I):26-35(1983) ;S.Dawson 等，Vet.Rec.132:346-50 (1993)。从业者也对在某些情况下可能在原本健康的动物中引起疾病的修饰活病毒的施用产生了担心。研究者已经报道，因疏忽将皮下施用的FCV疫苗通过口服途径给药导致了急性疾病。BR- C.Povey, Feline Pract.7 (5): 12-16 (1977)。因此，对于单独地或者与其它疫苗组合可以在接种猫后提供期望保护作用的疫苗，一直存在研发兴趣。我们在此描述几种从猫上分离的分离株，并提供一种在免疫的猫中实现广泛保护作用的手段。
[0006]资料公开
[0007]美国专利文献
[0008]3937812 1976 年 2 月 BUtle 等，3944469 1976 年 3 月 BUtle 等
[0009]4486530 1984 年 12 月 David 等，4786589 1988 年 11 月 Rounds 等
[0010]5169789 I"2 年 I2 月 Bernstein 等，5229293 I"3 年 7 月 Matsuura 等
[0011]5266313 1993 年 11 月 Esposito 等，5338683 1994 年 8 月 Paoletti 等
[0012]5494807 1996 年 2 月 Paoletti 等，5559041 1996 年 9 月 Kang 等
[0013]5561064 1996 年 10 月 Marquet 等，5580859 1996 年 12 月 Feigner
[0014]5585100 1996 年 12 月 Mond 等，5589384 1996 年 12 月 Liscombe
[0015]5589466 I"6 年 I2 月 Feigner，5620别5 I"7 年 4 月 Gould 等
[0016]5656448 1997 年 8 月 Kang 等，5693761 1997 年 12 月 Queen 等
[0017]5693762 1997 年 12 月 Queen 等，5695928 1997 年 12 月 Stewart 等
[0018]5703055 I"7 年 I2 月 Feigner，57I6784 I998 年 2 月 DiCesare
[0019]5716822 1998 年 2 月 Wardley，5718901 1998 年 2 月 Wardley
[0020]5725863 1998 年 3 月 Daniels 等，5728587 1998 年 3 月 Kang 等
[0021]5800821 1998 年 9 月 Acheson 等，59773221999 年 11 月 Marks 等
[0022]6010703 2000 年 I 月 Maes 等，63552462002 年 3 月 Kruger 等
[0023]6，534，066B1 2003 年 3 月 Poulet 等
[0024]外国专利文献
[0025]0484382 1995 年 3 月 EP，W02004/083390
[0026]其它出版物
[0027]Burroughs, J.N 和 Brown, F.，J.Gen.Virol.，22, pp.281-285 (1974).[0028]Clarke 和 Lambden in J.Gen.Virol.78:291-301 (1997).[0029]Griest, N.R.,1979, Diagnostic methods in clinical virology(第 3 版)，pp.84-85,
[0030]Blackwell J.L.Bittle&ff.J.Rubic, Am.J.Vet.Res.37:275-78 (1976).[0031]Lauritzen 等，Vet Microbiology56:55-63(1997).[0032]Maky, Brian ff.J.和 Kangro，Hillar 0.1996，Virology methods manual,pp.35-37, Academic Press, New York.[0033]Motin 等，Infect.Tmmun.64:4313-4318 (1996).[0034]N.C.Pederson 等，Feline Pract.13 (I):26-35 (1983).[0035]Oglesby, A.S.,等，Virology 44, pp.329- 341 (1971).[0036]Poulet 等，Veterinary Microbiology 106:17-31 (2005).[0037]Poulet 等，Archives of Virology 145:243-261 (2000).[0038]R.C.Povey, Feline Pract.7 (5):12-16 (1977).[0039]S.Dawson 等，Vet.Rec.132:346-50 (1993).[0040]Scientific Publishers, Oxford, UK.[0041]Soergel, Μ.E.,等,Intervirology, 5, pp239~244 (1975).[0042] Yokoyama, N.，等，Vaccine, vol.14，N0.17/18，pp.1657-1663 (1996).[0043]发明概述
[0044]本发明提供新的猫杯状病毒株并涉及几种分离的猫杯状病毒(FCV)。本发明还公开将疫苗呈递给动物，尤其是，将FCV呈递给猫的新方法。本发明也涉及编码猫杯状病毒的核酸克隆。涉及FCV衣壳蛋白、活的或杀死的疫苗、包含衣壳蛋白的亚单位疫苗、核酸疫苗、和包含编码该分离的猫杯状病毒的衣壳蛋白的核酸的重组病毒载体疫苗。本发明也涉及鉴定可在疫苗组合物的生产中以及在诊断感染了猫杯状病毒的猫的试验中使用的猫杯状病毒的方法。本发明也提供将新的和旧的FCV疫苗施用给猫的新方式。在此还描述使用疫苗治疗和免疫动物，尤其是猫，以抵抗FPV或猫细小病毒(也称作全白细胞减少症或FPL)以及另一种疾病，FHV或猫疱疫病毒(也称作猫鼻气管炎病毒)的方法和材料。以下描述新的疫苗组合，该组合当以本文所述方式呈递给猫时可以实现FPV和/或FHV疫苗的有效口服/ 口服以及皮下(subq)/ 口服递送。
[0045]具体地，本发明公开以下用于免疫猫以抵抗猫杯状病毒的疫苗。FCV-21衣壳蛋白或分离的FCV-21衣壳蛋白，(SEQ ID NO:13)及具有至少大约91.2%、95%和99%同一性的序列。包含编码FCV-21衣壳蛋白或分离的FCV-21衣壳蛋白的核酸序列的DNA疫苗，其中所述DNA包括序列(SEQ ID NO:12)和具有至少大约78.7%或79.2%序列同一性和允许保护替代的序列。
[0046]包含FCV-49衣壳蛋白或分离的FCV-49衣壳蛋白的疫苗，其中所述衣壳蛋白包含来自FCV-49株的蛋白质序列(SEQ ID NO:15)或具有至少大约92.7%、95%和99%同一性的序列；其中所述衣壳蛋白以有效的量提供。包含编码FCV-49衣壳蛋白或分离的FCV-49衣壳蛋白的核酸序列的DNA疫苗，其中所述DNA包括序列(SEQ ID NO: 14)和具有至少大约78.9%，即79.4% (78.9+0.5)，序列同一性和允许保护替代的序列。
[0047]包含FCV-26391-4衣壳蛋白或分离的FCV-26391-4衣壳蛋白的疫苗，其中所述衣壳蛋白包含来自FCV-26391-4株的蛋白质序列。包含FCV-26391-4衣壳蛋白的疫苗，其中所述衣壳蛋白包括蛋白质序列(SEQ ID NO: 17)和具有至少大约91.8%、95%和99%同一性的序列。包含编码FCV-26391-4衣壳蛋白或分离的FCV-26391-4衣壳蛋白的核酸序列的DNA疫苗，其中所述DNA包括序列(SEQ ID NO:16)和具有至少大约78.4%，即78.9%(78.4+0.5)，序列同一性的序列。
[0048]疫苗，其中所述多核苷酸选自基本上由SEQ ID NO: 12、14和16组成的组。该疫苗可以是以下单独的或者任何组合的形式:其中该疫苗含有佐剂，其中该FCV成分是活的，其中该FCV成分是减毒的，其中该FCV成分是灭活的，其中该疫苗可以包括至少一种选自FCV-F9、FCV-LLK, FCV-M8、FCV-255 和 FCV-2280 的其它猫杯状病毒株。
[0049]用于免疫猫以抵抗猫杯状病毒的疫苗，其包含有效产生免疫应答的量的FCV衣壳蛋白核苷酸序列和药学上可接受的载体，其中所述FCV衣壳蛋白选自与SEQ ID NO:13,15或17有93%或更大同一性的多肽，其中该FCV分离株不是213-95株，并且其中该核酸序列与异源启动子序列可操作连接。用于免疫猫以抵抗猫杯状病毒的疫苗，其包含选自基本上由SEQ ID NO:12、14和16组成的组的FCV衣壳蛋白的核苷酸序列。疫苗，其中所述核苷酸序列为以下任一种形式:质粒、重组病毒载体或任何其它核苷酸载体。
[0050]疫苗，其中重组病毒载体选自猫疱疹病毒、浣熊痘病毒、金丝雀痘病毒、腺病毒、Semliki森林病毒、Sindbis病毒和痕苗病毒。
[0051]本发明还描述免疫原性组合物，其包含兽医学上可接受的赋形剂运载体和分离的FCV株，其中所述FCV株可以与选自本文描述为23、26、41、44和56的单克隆抗体的单克隆抗体结合。在本发明一些形式中，该免疫原性组合物包含兽医学上可接受的赋形剂运载体和分离的FCV株，其中该FCV株选择性地与选自本文描述为23、26、41、44和56的单克隆抗体的单克隆抗体结合。这些免疫原性组合物包括其中所述FCV株是灭活的、其中所述FCV株是疫苗、以及其中该组合物包含佐剂的那些组合物。
[0052]本文描述的疫苗可以包括至少一种选自猫疱疹病毒、猫白血病病毒、猫免疫缺陷病毒、鹦鹉热衣原体(Chlamydia pssittaci)和猫细小病毒、狂犬病毒和支气管败血性鲍特菌(Bordetella bronchiseptica)的其它猫病原体。该疫苗也可以另外地包含佐剂或者与佐剂一起施用。
[0053]发明详述
[0054]本发明提供可以显著地降低与猫杯状病毒(FCV)相关的死亡率以及增加FCV疫苗的安全谱的免疫接种方案。此外，本发明的免疫接种方案诱导比现有FCV-F9疫苗方案更宽的血清交叉中和谱，由此应提供更好的跨不同猫杯状病毒株的免疫力。
[0055]本发明一方面提供使用疫苗免疫动物，尤其是猫，以抵抗猫杯状病毒的方法。本文还描述了另外两种猫疾病，FPV和FHV，的新疗法。所述方法包括将治疗有效量的第一疫苗、第二疫苗施用给猫，并且任选地还可以在如上的120天内或者更经常的是在大约I年后作为每年一次的加强剂给予第三疫苗施用。第一疫苗通过胃肠外途径(例如，皮下、肌内等)施用。第二疫苗通过口服或口鼻途径在第一疫苗施用后大约N天施用，而第三疫苗通过胃肠外途径、口服、或口鼻途径在第一或第二疫苗施用后大约M天施用。在此，N和M独立地是3至120 (包括3和120在内)的 整数。也优选N为大约3周以及大约2-4周。此外，在本发明一方面中，某些所述疫苗可以以两个口服剂量的形式施用而无需第一次胃肠外施用。也建议使用每年一次的加强剂。
[0056]序列表简述
[0057]
【权利要求】
1.用于免疫猫以抵抗猫杯状病毒的疫苗，其包含FCV-26391-4衣壳蛋白和药学上可接受的载体，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白选自
(a)SEQ ID NO:17 ;和 (b)与SEQID NO:17具有至少95%序列同一性的多肽，其中该多肽在接触个体后将诱导特异于该多肽的免疫应答；和 (c)美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏号PTA-7348的FCV株的衣壳蛋白。
2.权利要求1的疫苗,进一步包含佐剂。
3.权利要求1的疫苗，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白在所述疫苗中是以活FCV-26391-4病毒、减毒FCV-26391-4病毒、或灭活FCV-26391-4病毒提供的。
4.权利要求1的疫苗，进一步包含活的、减毒的或灭活的、选自FCV-F9、FCV-LLK、FCV-M8、FCV-255 和 FCV-2280 的 FCV，或其组成成分。
5.权利要求1的疫苗，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白与SEQID N0:17具有至少99%序列同一性，且所述FCV-26391-4衣壳蛋白在接触个体后将诱导特异于该FCV-26391-4衣壳蛋白的免疫应答。
6.权利要求1的疫苗，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白是与SEQID N0:17具有至少95%序列同一性的多肽，其中该多肽在接触个体后将诱导特异于该多肽的免疫应答，且所述FCV-26391-4衣壳蛋白与SEQ ID NO: 17的区别是保守替代。
7.权利要求5的疫苗，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白与SEQID NO:17的区别是保守替代。
8.权利要求1的疫苗，其中所述FCV-26391-4衣壳蛋白的氨基酸序列是SEQID N0:17。
9.权利要求1-8之任何一项中定义的FCV-26391-4衣壳蛋白在制备用于免疫猫以抵抗猫杯状病毒的疫苗中的用途。
【文档编号】A61P31/14GK103550767SQ201310024430
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2006年7月17日 优先权日:2005年7月28日
【发明者】D·E·洛沃里, 容欣, P·M·吉蒙德, P·M·克莱尔, C·M·塔克尔, T·J·纽比 申请人:辉瑞产品公司