用于治疗哮喘和其他肺病患的组合物和方法

用于治疗哮喘和其他肺病患的组合物和方法
【专利摘要】本发明提供通过施用包含如本文所公开的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的电动产生的流体)的治疗组合物在需要其的受治疗者中治疗或预防特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症、或它们的症状(例如，哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎(鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相关病症(例如，支气管炎、肺气肿、哮喘)、肺气肿、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(百日咳)以及类似病症)的组合物和方法，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节，其中从而提供了治疗肺病患或其症状。其他方面涉及治疗组合物和组合治疗方法，所述方法包括施用至少一种电动产生的流体与至少一种另外的治疗剂的组合。
【专利说明】用于治疗哮喘和其他肺病患的组合物和方法
[0001]本申请是国际申请号PCT / US2008 / 081386，国际申请日2008年10月27日，进入中国国家阶段日期为2010年6月25日，中国申请号200880122809.4，发明名称为“用于治疗哮喘和其他肺病患的组合物和方法”的分案申请。
发明领域
[0002]本文所公开的某些实施方式涉及通过施用包含如本文所公开的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的(例如富含氧的)电动产生的流体)的治疗组合物在需要其的受治疗者中治疗或预防特征为气流阻塞或限制的至少一种肺或呼吸病患或病症、或所述肺或呼吸病患或病症的症状的领域，所述病患或病症或其症状包括但不限于哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相关病症(例如，支气管炎、肺气肿、哮喘)、肺气肿、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(whoopingcough)(百日咳(pertussis))以及类似病症。其他方面涉及治疗组合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所公开的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的电动产生的流体)与至少一种另外的治疗剂(例如，支气管扩张剂、β2-激动剂(短效的和长效的)、皮质类固醇(吸入的和其他方式的)、抗胆碱能药、茶碱、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特罗、肾上腺素、Hl拮抗剂、解充血药和异丙托溴铵等)或治疗的组合；或与其他组合(例如，抗胆碱能药和β2-激动剂(短效的和长效的)的组合。
[0003]相关申请的交叉引用
[0004]本申请要求2007年10月25日提交的美国临时专利申请系列第60 / 982，719号、2007年10月25日提交的第60 / 982，720号、2008年4月28日提交的第61 / 048, 332号、2008年4月28日提交的第61 / 048, 340号、2008年4月28日提交的第61 / 048, 347号、2008年4月28日提交 的61 / 048, 404号和2008年4月28日提交的第61 / 048, 416号的优先权益，通过引用将这些临时专利申请系列整体并入本文。
[0005]发明背景
[0006]包括哮喘和COPD的慢性肺病患影响着世界上数百万的人们。需要慢性肺病患的有效治疗。
[0007]哮喘。哮喘是与人和其他哺乳动物相关的涉及呼吸系统的慢性病症，其中气道通常对如下的一种或多种触发因素反应而有时阻塞，变得发炎并积聚过量粘液:暴露于环境刺激物(例如，过敏原)、冷空气、暖空气、香料、湿空气、运动或劳累、情感压力等。在儿童中，病毒性疾病(例如，普通感冒)是常见的触发因素。下列症状的一种或多种可能存在于哮喘中:气道变窄、呼吸困难(呼吸急促，S0B)、哮鸣(wheezing)、喘鸣(stridor)、胸部紧迫感、咳嗽和不能从事强体力活动。然而，具有重度SOB和肺紧迫(tightening of the lungs)的一些哮喘患者既不哮鸣也不喘鸣，并且它们的症状可能与C0PD型疾病混淆。哮喘性气道狭窄通常对支气管扩张剂反应。在发作之间，大部分患者感觉良好，但是可能具有轻度症状并且它们在较长时间的运动后可能保持比未受感染的个体急促的呼吸。哮喘症状的范围从轻度到威胁生命，但是通常可以用药物与环境变化的组合控制。然而，对哮喘的关注在日益增加，尤其在发达国家，因为其流行性迅速增加，影响着多达四分之一的城市儿童。
[0008]在一些情况下，医师可以基于包括过敏的存在或过敏历史或哮喘家族史在内的受治疗者的临床历史和检查来诊断哮喘。此外，医师可以使用最大流量计来测定肺功能的量。在紧急条件下，医师可以使用二氧化碳分析仪(capnographer)来测量呼出的二氧化碳水平和/或使用测定血液中溶解的氧水平的脉搏血氧定量法(puls oximetry)。
[0009]诸如气道狭窄和粘液产生的几种哮喘症状可能是支气管气道中免疫反应(如炎症反应)的结果。(Maddox 和 Schwartz, Ann.Rev.Med.,53; 477-98 ；2002)。在哮喘性肺的情况下，某些触发因素或刺激物会引起支气管收缩。接下来发生炎症，它会进一步导致气道变窄和过量的粘液产生。这一系列的事件导致了咳嗽和胸部紧迫。
[0010]外源性或过敏性哮喘比内源性(非过敏性)哮喘更常见(所有情况中的90%)并且通常在儿童中发展(约80%的具有哮喘的儿童还具有记录的过敏并且通常还存在其他过敏病症，如鼻过敏或湿疹)。过敏性哮喘通常在成年早期消退。然而，75%的情况下，哮喘会在后来再发。内源性哮喘代表所有情况的约10%，其通常在30岁后发展，并且通常不与过敏相关。女性更常被涉及并且许多病例似乎是在呼吸道感染之后发生的。该病症可以是难以治疗并且症状通常是慢性的并且持续全年的。运动诱导的哮喘是由运动或强体力活动触发的一类哮喘。许多具有哮喘的人经历某种程度的运动症状，但是许多没有哮喘的人仅在运动时才会发生症状。在称为咳嗽变异性哮喘的哮喘类型中，哮喘时重度咳嗽是主要症状。咳嗽变异性哮喘的哮喘触发因素通常为呼吸道感染和运动。
[0011]某些实施方式涉及通过减轻哮喘的至少一种症状来预防和/或治疗哮喘。有一百余种基因与哮喘相关，它们中的一些还参与了其他炎症反应。(Ober, Hoffjan, GenesImmunol.7(2):95-100 ；2006)。这些基因中的一些为:GSTM1、IL10、CTLA4、SPINK5、LTC4S、LTA、GRPA, N0D1、CC16、GSTPl、STAT6、N0S1、CCL5、TBXA2R、TGFBl、IL4、IL13、CD14、ADRB2 ( β -2 肾上腺素能受体)、HLA-DRB1、HLA-DQB1、TNF、FCER1B、IL4R、ADAM33 以及其他基因。
[0012]之前，哮喘的最有效治疗是鉴定刺激物并限制或消除向它们的暴露。其他特异性治疗包括使用以例如吸入器或雾`化器形式施用的支气管扩张剂。还可以施用吸入的皮质类固醇、糖皮质激素(即，环索奈德、倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙等)、口服白三烯调节剂(modifier)(即，孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特、齐留通等)、肥大细胞稳定剂(色甘酸盐、奈多罗米等)、β-2激动剂(即，沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、比托特罗、氟替卡松、沙美特罗、布地奈德、福莫特罗等)、肾上腺素、麻黄碱或甲基黄嘌呤(即，茶碱、氨茶碱等)。在重度哮喘中，在重度发作期间可以将口服糖皮质激素加入这些治疗中。此外，可以施用抗胆碱能药物(即，异丙托溴铵、氧托铵(oxitropium)、噻托铵(tiotropium)等)。抗组胺剂或IgE阻断剂(如奥马珠单抗)也可能有益于经受“过敏诱导的”哮喘的哮喘患者，在“过敏诱导的”哮喘中受治疗者的哮喘是由对特定过敏原的免疫反应触发的。
[0013]因此，本领域内存在对用于治疗哮喘的新组合物和方法的显著需要。
[0014]C0PD.慢性阻塞性肺疾病(COPD) —般描述特征为气流阻塞或限制的一组呼吸道疾病。与COPD相关的疾病包括支气管炎、肺气肿、哮喘和肺癌。在美国主要疾病中COPD是死亡的第四大起因，并且是重大残疾的第二大起因。预计到2020年COPD会变为死亡的第三大起因。在美国每年由于COPD而发生120，000余例死亡，这使得COPD成为前五大死亡因素中仅有的死亡率不断增加的疾病(从1965年至2002年死亡率增加了 183% )。美国医护经济面临着不断增加的COPD费用。每年有多于300亿的美元花费在医疗费用、住院、医师门诊和其他间接费用(例如，工作日的损失和过早的死亡)上并且由于COPD的流行性继续升高，这些费用还在继续逐步上升。
[0015]慢性支气管炎。慢性支气管炎是一种炎症，并且之后支气管衬层形成疤痕。支气管炎症导致收缩和气流减少。通常，慢性支气管炎还包括咳嗽时大量粘液的产生。一旦刺激支气管一段时间，则衬层便会增厚，气流可能甚至进一步受阻，导致疤痕形成。疤痕形成容许具有微生物的繁殖场所。
[0016]肺气肿。肺气肿是由于肺中气囊(肺泡)的破坏引起的。肺泡的损坏是不可逆的，并且由于气囊受损，较少的氧被转移到血流，从而引起呼吸急促。随后，肺丧失其弹性，并且受治疗者可能经历呼气困难和持续咳嗽。
[0017]肺感染.包括病毒感染、细菌感染或真菌感染在内的肺感染也可能导致肺、环绕肺的胸膜腔、肺泡和/或支气管通路的炎症和/或疤痕形成。具体地，肺炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(百日咳)全都可能由于肺中的炎症和疤痕形成而导致慢性肺问题。
[0018]鼻炎和过敏性鼻炎鼻炎是包括鼻内区域的刺激和炎症的病症。鼻炎的主要症状是流鼻水，它是由因病毒、细菌或刺激物所导致的鼻粘膜的慢性或急性炎症引起的。这种炎症导致过量的粘液产生、产生流鼻水、鼻充血和后鼻滴涕。目前有5千万多的美国人是受害者。除了影响鼻、喉和眼之外，鼻炎还与睡眠问题、耳部问题相关，并且甚至与学习问题有联系。鼻炎是典型地由空气传播的过敏原引起的组胺增加所引起的，它影响个体的鼻、喉或目艮，并引起这些区域内流体产生增加。过敏性鼻炎(花粉症)是在对特定季节性植物的花粉、空气散播的化学物质和尘粒敏感的人中由这些物质所引起的。过敏性鼻炎的症状包括喷嚏、流鼻水和眼部瘙痒、感染、炎症、粘液产生和/或分泌、灼热(burning)和瘙痒。
[0019]因此，本领域内存在对用于治疗C0PD、C0ro相关病症(例如，支气管炎、肺气肿、哮喘)、肺感染、鼻炎和过敏性鼻炎的新组合物和方法的显著需要。
[0020]胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)。胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是触发树突细胞介导的Th2型炎症反应的IL-7样细胞因子并且它被认为是过敏性炎症的主要开关。TSLP是B细胞和T细胞二者的发育和成熟的必需生长因子(integral growth factor)。具体地，鼠TSLP支持B淋巴细胞生成并且是B细胞增殖所需的。鼠TSLP在控制T细胞受体Y (TCR.Y.)基因座的重排中起关键作用并且对胸腺细胞和成熟T细胞具有明显的刺激作用 ο 参见，例如，Friend 等人，Exp.Hematol.，22:321-328,1994 ；Ray 等人，Eur.J.1mmunol.，26: 10-16,1996 ;Candeias 等人，Immunology Letters, 57:9-14,1997。
[0021] TSLP具有类似于IL-7的细胞因子活性。例如，在刺激B细胞增殖反应中TSLP可以代替IL-7 (Friend等人，如上)。尽管TSLP和IL-7介导对靶细胞类似的作用，但是它们似乎具有不同的信号传导途径并且它们的生物学反应可能不同。例如，尽管TSLP调节STAT5的活性，但是它不能激活任何Janus家族酪氨酸激酶成员(Levin等人，J.1mmunol., 162:677-683, 1999)。
[0022]TSLP对树突细胞和TNF生成的作用。在2001年克隆了人TSLP和人TSLP受体之后，发现人TSLP有效地激活不成熟的⑶Ilc+髓样树突细胞(mDC)(参见，例如，Reche等人，J.Tmmunol.，167:336-343, 2001 和 Soumelis 等人，Nat.Tmmunol.，3:673-680, 2002)。Th2细胞在免疫学课本和文献中一般被定义为产生IL-4、IL-5、IL-13和IL-1O的⑶4+T细胞。并且诸如⑶4+T细胞的Thl细胞产生IFN- Y并且有时产生TNF。当TSLP-DC用于体外刺激首次实验的同种异型CD4+T细胞时，诱导了独特类型的Th2细胞，该独特类型的Th2细胞产生经典的Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13以及大量的TNF，但是极少或没有IL-1O或干扰素-Y (Reche 等人,如上)(还参见，例如，Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680,2002)。TNF通常不被认为是Th2细胞因子。然而，TNF在哮喘性气道(asthmatic airway)中是突出的并且与TNF分泌增加相关的基因型伴随有哮喘风险的增加。参见Shah等人，(Clin.Exp.Allergy.,25:1038-1044,1995 jPMoffatt，M.F.和 Cookson，ff.0.，Hum.Mo 1.Genet.,6:551-554,1997。
[0023]TSLP诱导人mDC在mRNA和蛋白两种水平表达TNF超家族蛋白0X40L (Ito等人，J.Exp.Med.,202:1213-1223)。TSLP-DC的0X40L表达对于炎性Th2细胞的形成很重要。因此，TSLP激活的DC通过上调0X40L而不诱导Thl-极化细胞因子(Thl-polarizingcytokine)产生而产生Th2许可性(Th2_permissive)微环境。出处同上。
[0024]TSLP表达、过敏原特异性反应和哮喘。早期研究已显示人原代皮肤角质形成细胞、支气管上皮细胞、平滑肌细胞和肺成纤维细胞高度表达TSLP mRNA(Soumelis等人，Nat.1mmunol.，3:673_680，2002)。由于TSLP主要在表皮的顶层的角质形成细胞中表达，所以这表明TSLP产生是完全分化的角质形成细胞的特征。在具有特应性皮炎的患者中TSLP的表达与朗格汉斯细胞迁移和原位激活有关，这表明TSLP可以直接促进这些细胞的激活，这些激活的细胞随后可以迁移到引流淋巴结并引发过敏原特异性反应。出处同上。在最近的研究中，通过原位杂交显示TSLP表达在哮喘性气道中增加并且其与Th2吸引性趋化因子表达和疾病严重程度两者都相关，这提供了 TSLP和哮喘之间的联系(Ying等人，J.1mmunol.，174:8183-8190,2005)。
[0025]TSLP受体(TSLPR)和过敏反应、哮喘。TSLP受体(TSLPR)是大约50kDa的蛋白并且与共同Y-链具有显著的类似性。TSLPR是新的I型细胞因子受体，它与IL-7Ra (⑶127)结合构成TSLP受体复合体，如在例如Pandey等人,Nat.1mmunol., 1:59-64, 2000中所描述的。TSLPR在其羧基末端附近具有可以与磷酸化的STAT5缔合并且在与TSLP结合时介导多种生物学功能的酪氨酸残基(Isaksen等人，J.1mmunol.，168 =3288-3294,2002)。
[0026]人TSLPR是由单核细胞和⑶I Ic+树突细胞表达的，并且TSLP结合诱导TH2细胞吸引性趋化因子CCL17和CCL22的表达。此外，如上文所述的，TSLPR诱导的树突细胞的激活间接导致了 Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加，TH2细胞因子IL_4、IL-5和IL-13的分泌增加可能是调节⑶4+T细胞内环境稳定所必需的。在小鼠中，TSLPR的缺乏对淋巴细胞数目没有影响。然而，TSLPR和共同Y-链的缺乏导致了与只缺乏共同Y-链的小鼠相比较少的淋巴细胞。参见，Reche等人,J.1mmunol.，167:336-343, 2001和Soumelis等人，Nat.1mmunol.,3:673-680, 2002。
[0027]研究已发现TSLP和TSLPR在小鼠中过敏性疾病的引发中起关键作用。在一个研究中，显示被改造为在皮肤中过表达TSLP的小鼠发展了特应性皮炎，该特应性皮炎的特征为含有炎性渗液的湿疹性皮肤损伤、循环的Th2细胞显著增加和血清IgE增加(Yoo等人，J.Exp.Med.,202:541-549`, 2005)。该研究表明在小鼠中TSLP可直接激活DC。在Li等人进行的另一研究中，研究组证实了在皮肤中过表达TSLP的转基因小鼠发展了特应性皮炎，这加固了 TSLP与特应性皮炎发展之间的联系。
[0028]另一组研究显示TSLP是在小鼠中体内引发过敏性气道炎症所需要的。在一个研究中，Zhou等人显示TSLP转基因的午餐特异性(lunch specific)表达诱导过敏性气道炎症(哮喘)，该过敏性气道炎症的特征为白细胞(包括Th2细胞)的大量浸润、杯形细胞超常增生和表皮下纤维化以及血清IgE水平增加(Zhou等人，Nat.1mmunol.，6:1047-1053，2005)。然而，相反的是，缺乏TSLPR的小鼠没有对吸入的抗原反应而发展哮喘(Zhou等人，如上和 Al-Shami 等人，J.Exp.Med.，202:829-839, 2005)。因此，这些研究一起表明 TSLP是在小鼠中引发过敏性气道炎症所需要的。
[0029]此外，在Yong-Jun等人进行的研究中，显示表皮细胞来源的TSLP在人中触发DC介导的炎性Th2反应，这表明TSLP代表了表皮细胞-DC界面处过敏性炎症的主要开关(Yong-Jun 等人，J.Exp.Med.，203 =269-273, 2006)。
[0030]在最近的研究中，显示通过抑制TSLPR调节DC功能降低了小鼠中的严重程度(Liyun Shi 等人，Clin.1mmunol.，129:202-210, 2008)。在另一组研究中，显示 TSLPR 不仅在DC中表达，还在巨噬细胞、肥大细胞和⑶4+T细胞中表达(Rochman等人，J.1mmunol.,178:6720-6724,2007 ^Omori Μ.和 Ziegler S.，J.1mmunol.，178:1396-1404，2007)。为了查明TSLPR中和对CD4+T细胞或过敏性炎症中的其他效应细胞的直接作用，Liyun Shi等人进行了其中在过继转移到首次实验的小鼠的气道之前用抗TSLPR体外处理加入OVA的DC的实验。先前已发现OVA-DC触发强的嗜酸性气道炎症并伴随着诸如IL-4和IL-5的Th2细胞因子的大量产生(Sung 等人,J.1mmunol.，166:1261-1271 和 Lambrecht 等人,J.Clin.1nvest.,106:551_559，2000)。然而，用抗TSLPR预处理0VA-DC导致嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润以及IL-4和IL-5水平显著降低，这进一步说明了 TSLPR在DC引发的过敏性疾病中所起的作用。这种结果还支持阻断DC上的TSLPR将有助于控制气道的炎症(Liyun Shi等人，如上)。
`[0031]有不断增加的大量实验表明了 TSLP / TSLPR在各种生理过程和病理过程中的作用。TSLP的生理作用包括调节免疫系统，尤其是刺激B细胞和T细胞增殖、发育和成熟。TSLP在过敏性哮喘的病理生物学中起关键作用，并且局部抗体介导的TSLP受体阻断发挥了减轻过敏性疾病的功能。因此据信TSLP和TSLP受体之间的相互作用在如下的许多生理疾病过程中是重要的:过敏性炎症、具有特应性皮炎或特应性湿疹的患者的皮肤损害以及哮喘。
[0032]金属蛋白酶金属蛋白酶是在例如N.M.Hooper FEBS Letters354:1-6，1994中所述被分类为家族和亚家族的蛋白酶(酶)超家族。金属蛋白酶的实例包括基质金属蛋白酶(MMP)，如胶原酶(MMP1、MMP8、MMP13)、明胶酶(MMP2、MMP9)、溶基质蛋白酶(MMP3、MMP10、MMP II)、基质溶解因子(MMP7)、金属弹性蛋白酶(MMP12)、釉质溶解因子(enamelysin) (MMP19)、MT-MMP (MMP14, MMP15、MMP16、MMP17) ；reprolysin 或蛇毒金属蛋白酶(adamalysin)或MDC家族，MDC家族包括分泌酶和脱落酶(sheddase)，如TNF转化酶(ADAM10和TACE);虾红素家族，它包括诸如前胶原加工蛋白酶(PCP)的酶；以及其他金属蛋白酶，如聚集蛋白聚糖酶、内皮素转化酶家族和血管紧张素转化酶家族。
[0033]总之，已知金属蛋白酶裂解大范围的基质底物，如13父原、蛋白聚糖和纤连蛋白。金属蛋白酶参与了生物学上重要的细胞介质如肿瘤坏死因子(TNF)的加工或分泌；和生物学上重要的膜蛋白如低亲和力IgE受体CD23的翻译后蛋白水解加工或脱落(参见，例如N.M.Hooper 等人，Biochem.J.321 =265-279,1997)。
[0034]因此，不奇怪的是，据信金属蛋白酶在涉及组织重塑(例如，胚胎发育、骨形成、月经期间子宫重塑、等)的多种生理疾病过程中很重要。此外，一种或多种金属蛋白酶活性的抑制在如下的这些疾病或病症中可能很有益，例如:各种炎性疾病和过敏性疾病，如关节炎症(尤其是类风湿性关节炎、骨关节炎和痛风)、胃肠道炎症(尤其炎性肠病、溃疡性结肠炎和胃炎)、皮肤炎症(尤其牛皮癣、湿疹、皮炎)；肿瘤转移或侵袭；与胞外基质不受控降解相关的疾病，如骨关节炎；骨吸收疾病(如骨质疏松和佩吉特(Paget)病)；与异常血管发生相关的疾病；与糖尿病、牙周病(如龈炎)、角膜溃疡、皮肤溃疡、手术后病症(如结肠吻合)和皮肤创伤愈合相关的胶原重塑增强；中枢神经系统和外周神经系统的脱髓鞘疾病(如多发性硬化)；阿尔茨海默病；在诸如再狭窄和动脉粥样硬化的心血管疾病中观察到的胞外基质重塑；哮喘；鼻炎；和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
[0035]MMP12还被称为巨噬细胞弹性蛋白酶或金属弹性蛋白酶，它最初是在小鼠中克隆的(Shapiro 等人，Journal of Biological Chemistry267:4664,1992)并且在 1995年相同的小组还在人中克隆了 MMP12。MMP12优选在活化的巨噬细胞中表达，并且已显示其由吸烟者的肺泡巨卩遼细胞分泌(Shapiro等人，1993, Journal of BiologicalChemistry, 268:23824)并且还由动脉粥样硬化病变中的泡沫细胞分泌(Matsumoto等人，Am.J.Pathol.153:109，1998)。COPD的小鼠模型基于用吸香烟激发小鼠6个月，每天两只香烟，一周六天。在这种处理之后，野生型小鼠发展了肺气肿。当在这个模型中测试MMPl2敲除 小鼠时，它们不发展显著的肺气肿，这有力地表明了 MMP12是COPD发病中的关键酶。MMP诸如MMP12在COPD (肺气肿和支气管炎)中的的作用在Anderson和Shinagawa，1999,Current Opinion in Ant1-1nflammatory and Immunomodulatory InvestigationalDrugs (抗炎和免疫调节考察药物的现有观点)I (I):29-38中有所讨论。最近发现抽烟增加了人颈动脉斑块中的巨噬细胞浸润和巨噬细胞来源的MMP12的表达(Matetzky S，FishbeinM C 等人，Circulationl02:(18)，36-39 增刊 S，Oct.31,2000)。
[0036]MMP9-(明胶酶B ;92kDa_IV型胶原酶；92kDa明胶酶)是一种分泌蛋白，它在1989年首次被纯化，然后被克隆并测序(S.MWilhelm等人，J.Biol.Chem.264(29):17213-17221,1989 ；在 J.Biol.Chem.265 (36):22570,1990 中发表的勘误表)(对于此蛋白酶的详细信息和参考的综述参见T.H.Vu&Z.Werb (1998)(于:MatrixMetalloproteinases, 1998,由 W.C.Parks&R.P.Mecham编辑，pp.115-148,Academic Press.1SBN0-12-545090-7)。
[0037]MMP9的表达通常限制在少数的细胞类型，这些细胞类型包括滋养层细胞、破骨细胞、中性粒细胞和巨噬细胞(Vu&Werb，如上)。然而，其表达可以在这些细胞和其他细胞类型中被几种介质诱导，所述介质包括将细胞暴露于生长因子或细胞因子。这些是与常参与启动炎症反应的介质相同的介质。正如其他分泌MMP —样，MMP9是以无活性的酶原释放的，酶原随后被裂解形成具有酶活性的酶。体内这种活化所需的蛋白酶是未知的。活性MMP9与无活性酶的平衡在体内进一步由与天然存在的蛋白TIMP-1 (组织金属蛋白酶-1的抑制剂)的相互作用来调控。--ΜΡ-1与MMP-9的C末端区结合，导致MMP9的催化结构域的抑制。前MMP9 (ProMMP9)的诱导表达的平衡、前MMP9至活性MMP9的裂解与--ΜΡ-1的存在组合决定了局部位置存在的催化活性的MMP9的量。蛋白水解活性的MMP9攻击包括下列的底物:明胶、弹性蛋白、天然的IV型胶原和V型胶原；它对天然的I型胶原、蛋白聚糖或层粘连蛋白没有活性。
[0038]不断增加的数据表明了 MMP9在多种生理和病理过程中的作用。生理作用包括胚胎移植早期胚胎滋养层细胞穿过子宫上皮的侵袭；在骨生长和发育中的一些作用；和炎性细胞从脉管系统向组织中的迁移。
[0039]使用酶联免疫测定测得在未治疗的哮喘患者中的流体和AM上清液中的MMP9释放与其他群体的流体和AM上清液中的MMP9释放相比显著增强。(Am.J.Resp.Cell&Mol.Biol.，5:583-591,1997)。而且，在某些其他的病理状态下观察到了 MMP9表达增加，从而表明在如下的疾病过程中的MMP9导致了诸如心肌梗塞的急性冠状动脉病症:C0PD、关节炎、肿瘤转移、阿尔茨海默病、多发性硬化和动脉粥样硬化中的斑块破裂(还参见W007087637A3，通过引用并入本文)。
[0040]最近，已经证明与健康的对照受治疗者相比，MMP-9水平在具有稳定的哮喘的患者中显著增加，并且在具有急性哮喘的患者中甚至更高。MMP-9在气道炎症细胞浸润和气道高反应性诱导中起关键作用，这表明MMP-9可能在诱导和维持哮喘中具有重要作用(Vignola等人，Sputum metalloproteinase-9 / tissue inhibitor of metalloproteinase-lratiocorrelates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis (疲金属蛋白酶-9 /金属蛋白酶-1组织抑制剂的比率与哮喘和慢性支气管炎中的气流阻塞相关)，Am J Respir Crit Care Medl58: 1945-1950,1998 ；Hoshino 等人，Inhaledcorticosteroids decrease subepithelial collagen deposition by modulationof the balance between matrix metalloproteinase-9and tissue inhibitor ofmetal loprote inase-1 express ion in asthma (吸入的皮质类固醇通过调节哮喘中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶 -1组织抑制剂表达之间的平衡来降低上皮下的胶原沉积)，J Allergy Clin Immunol 104:356-363,1999 ;Simpson 等人，Differential proteolyticenzyme activity in eosinophilic and neutrophilic asthma(在嗜酸性哮喘和嗜中性哮喘中的差异性蛋白水解酶活性)，Am J Respir Crit Care Medl72 =559-565, 2005 ；Lee等人，A murine model of toluene diisocyanate-1nduced asthma can be treatedwith matrix metalloproteinase inhibitor(二异氰酸甲苯酯诱导的哮喘的鼠科模型可以用基质金属蛋白酶抑制剂来治疗)，J Allergy Clin Immunoll08:1021-1026,2001 ；和 Lee 等人，Matrix metalloproteinase inhibitor regulates inflammatory cellmigration by reducing ICAM-1and VCAM-1expression in a murine model of toluenedi isocyanate-1nduced asthma (基质金属蛋白酶抑制剂通过降低二异氰酸甲苯酯诱导的哮喘的鼠科模型中的ICAM-1和VCAM-1表达来调控炎性细胞迁移)，J Allergy ClinImmunol2003;111:1278-1284)。
[0041]发明概述
[0042]具体方面提供通过施用包含如本文所公开的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的电动产生的流体)的治疗组合物在需要其的受治疗者中治疗或预防至少一种肺病患或其症状的组合物和方法，所述肺病患或其症状包括但不限于哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相关病症(例如，支气管炎、肺气肿、哮喘)、肺气肿、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸿鹤咳(whooping cough)(百日咳(pertussis))以及类似病症。其他方面涉及治疗组合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所述的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的电动产生的流体)与至少一种另外的治疗剂(例如，支气管扩张剂、β2-激动剂(短效的和长效的)、皮质类固醇(吸入的或其他方式的)、抗胆碱能药、茶碱、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特罗、肾上腺素、Hl拮抗剂、解充血药和异丙托溴铵等)或治疗的组合；或与其他组合(例如，抗胆碱能药和β2-激动剂(短效的和长效的))的组合。
[0043]具体方面提供用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的方法，所述方法包括施用治疗有效量的电动改变的含水流体给需要其的受治疗者，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中从而提供了治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状。在某些方面，电动改变的含水流体的改变包括将该流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应。在【具体实施方式】中，暴露于局部化的电动效应包括暴露于电压脉冲和电流脉冲的至少一个。在某些方面，将流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应包括将流体暴露于用来产生该流体的装置的诱导电动效应的结构部件。
[0044]在该方法的某些方面中，肺或呼吸病患或病症或其症状包括选自由以下组成的组的至少一种:哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和coro相关病症、肺气肿、肺感染、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(百日咳)。在该方法的某些方面，特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或它们的症状包括选自由以下组成的组的至少一种:肺癌、由充血性心力衰竭引起的肺水肿、肺创伤和肺挫伤、和由任何原因引起的肺纤维化。在【具体实施方式】中，肺或呼吸病患或病症包括哮喘。在某些实施方式中，哮喘包括下列的至少一种:过敏性(外源性)哮喘、非过敏性(内源性)哮喘、运动诱导的哮喘和咳嗽变异性哮喘。在某些实施方式中，肺或呼吸病患或病症包括C0PD。在某些方面，施用是通过吸入进行的。
`[0045]在某些方面，电动改变的含水流体包括电动改变的富含氧的水。
[0046]所述方法的具体方面还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂施用给患者。在某些方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:由β2-激动剂和抗胆碱能药组成的支气管扩张剂，所述β2_激动剂包括沙丁胺醇(albuterol)、左旋沙丁胺醇、批布特罗、阿福特罗(artformoterol)、福莫特罗、沙美特罗、沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林、比托特罗、氟替卡松、布地奈德，所述抗胆碱能药包括异丙托铵和异丙托溴铵、氧托铵和噻托铵(tiotropium);皮质类固醇，糖皮质激素(包括口服的、系统性的和吸入的糖皮质激素)并且包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙(methyprednisolone)、泼尼松龙、泼尼松、环索奈德；白三烯调节剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特和齐留通；肥大细胞稳定剂，包括色甘酸钠(cromolyn)、色甘酸盐和奈多罗米；肾上腺素、麻黄碱、甲基黄嘌呤(包括茶碱、氨茶碱)；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；IgE阻断剂，包括奥马珠单抗；以及它们的组合。在具体实现方式中，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇、系统性的皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯调节剂、甲基黄嘌呤以及它们的组合。在某些实施方式中，所述至少一种另外的治疗剂选自由沙丁胺醇、布地奈德和它们的活性衍生物组成的组。在具体方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由TSLP拮抗剂、TSLPR拮抗剂和它们的组合组成的组。在某些实施方式中，拮抗剂选自由以下组成的组:对TSLP或TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子、TSLP受体融合蛋白、TSLPR-免疫球蛋白Fe分子以及它们的组合。
[0047]在该方法的具体方面，改变细胞膜的结构或功能包括改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性。在某些实施方式中，膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白和整联蛋白。在某些方面，跨膜受体包括G蛋白偶联受体(GPCR)，并且在具体方面，G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白的α亚基(例如，选自由以下组成的组的至少一种=GapGapGat^PGa12)相互作用。在【具体实施方式】中，所述至少一种G蛋白的α亚基是Ga q。 [0048]在该方法的具体方面，改变细胞膜的结构或功能包括改变膜的电导率或膜电位。在某些实施方式中，调节细胞膜电导率包括调节全细胞电导，并且在某些方面，调节全细胞电导包括调节全细胞电导的至少一种电压依赖性贡献(voltage-depedentcontribution)。
[0049]在该方法的具体方面，细胞内信号转导的调节包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节(例如，包括磷脂酶C活性的调节和/或包括腺苷酸环化酶(AC)活性的调节)。
[0050]在该方法的具体方面，调节细胞内信号转导包括调节与选自由以下组成的组的至少一种病症或症状相关的细胞内信号转导:炎症、哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相关病症、肺气肿、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病、鸬鹚咳(百日咳)、肺收缩、支气管收缩和肺泡收缩。
[0051]该方法的某些方面包括施用给细胞网络或细胞层，并且还包括其中细胞间连接的调节。在【具体实施方式】中，细胞间连接包括由以下组成的组的至少一种:紧密连接、间隙连接、黏着带(zona adherins)和桥粒(desmasomes)。在某些方面,细胞网络或细胞层包括选自由肺上皮细胞、支气管上皮细胞和肠上皮细胞所组成的组中的至少一种。
[0052]在该方法的具体方面，电动改变的含水流体是充氧的，并且其中在该流体中的氧的存在量为大气压下至少8ppm、至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
[0053]在具体方面，电动改变的含水流体包含溶剂化电子和电动改性的或带电的氧类(oxygen species)中的至少一种。在某些实施方式中，溶剂化电子或电动改性的或带电的氧类的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在【具体实施方式】中，电动改变的充氧的含水流体包含通过分子氧稳定的溶剂化电子。
[0054]在具体方面，改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力在封闭的气密容器中持续至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少6个月、至少12个月、至少24个月或更长的时间。[0055]其他方面提供配制适用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症、或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂的方法，所述方法包括:获得适用于治疗受治疗者的特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂；并将所述治疗剂与一定量的电动改变的含水流体混合，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中从而提供了配制适用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂。
[0056]其他方面提供药用组合物，所述药用组合物包含:治疗剂，所述治疗剂适用于治疗受治疗者的特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状；和一定量的电动改变的含水流体，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节。
[0057]其他方面提供通过本文所公开的方法制备的药用组合物。
[0058]附图简述
[0059]图1是现有技术混合装置的局部横截面、局部框图。
[0060]图2是混合装置的示例性实施方式的框图。
[0061]图3是将第一材料递送到图2的混合装置的示例性系统的图解。
[0062]图4是图2的混合装置顶端部分的不完全局部横截面视图。
[0063]图5是图2的混合装置第一侧面部分的不完全横截面视图。
[0064]图6是图2的混合装置第二侧面部分的不完全局部横截面视图。
[0065]图7是位于图5的第一侧面部分与图6的第二侧面部分之间的图2的混合装置的侧面部分的不完全横截面视图。
[0066]图8是图2的混合装置的转子和定子的透视图。
[0067]图9是图2的混合装置的第一室内部的透视图。
[0068]图10是包括泵410的替代实施方式的图2的混合装置的第一室内部的不完全横截面视图。
[0069]图11是图2的混合装置的第二室内部的透视图。
[0070]图12是混合装置的替代实施方式的侧面部分的不完全横截面视图。
[0071]图13是供混合装置的替代实施方式使用的壳体的中部替代实施方式的透视图。
[0072]图14是供混合装置的替代实施方式使用的轴承壳体的替代实施方式的不完全横截面视图。
[0073]图15是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的穿孔接近(但不对齐)定子的孔隙时由穴泡引起的旋转流类型。
[0074]图16是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的穿孔对齐定子的孔隙时由穴泡引起的旋转流类型。
[0075]图17是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当之前对齐定子的孔隙的转子的穿孔不再与其对齐时由穴泡引起的旋转流类型。
[0076]图18是转子的替代实施方式的侧视图。
[0077]图19通过垂直 于转子的旋转轴的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代构型。
[0078]图20通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的构型。
[0079]图21通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代偏移构型。
[0080]图22是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0081]图23是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0082]图24是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0083]图25是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0084]图26是在表面附近形成的双电层(“EDL”)的图解。
[0085]图27是混合室的内部的模型的透视图。
[0086]图28是图27的模型的横截面视图。
[0087]图29是实验装置的图解。
[0088]图30图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于各自在65度华氏温度封盖的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0089]图3 1图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于均在39度华氏温度制冷的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0090]图32图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml饮料流体的溶解氧保留。
[0091]图33图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml布劳恩(braun)平衡盐溶液的溶解氧保留。
[0092]图34图解了另外一个实验，其中通过用图2的混合装置中的氮气处理水，图2的混合装置被用来排除水中氧。
[0093]图35图解了在标准的温度和压力下通过图2的混合装置排除水中氧。
[0094]图36是示例性纳米笼(nanocage)的图解。
[0095]图37A和37B图解了富含氧的流体的瑞利散射效应；
[0096]图38图解了在富含气体的流体和去离子对照流体的存在下促有丝分裂测定的细胞因子概况。
[0097]图39图解了在各种溶解氧饱和率的假单胞菌属(Pseudomonas)细菌的生长速率的差异。
[0098]图40A和40B图解了使用富含氧的细胞培养基和非富含气体的培养基的创伤体外愈合。
[0099]图41A到41F示出真皮和表皮体内创伤愈合的组织学横切片。
[0100]图42图解了用来检测酸性粘多糖例如透明质酸的处理和对照的愈合创伤中Hale染色的表达；
[0101]图43图解了用来检测处理和对照的愈合创伤中血管发生的血管假性血友病因子(Willebrand's Factor)染色的表达；
[0102]图44图解了用来检测处理和对照的愈合创伤中弹性蛋白的Luna染色的检测；
[0103]图45图解了对于处理和对照的愈合创伤的每个视野的肥大细胞的数目。
[0104]图46图解了在使用本发明的富含气体的培养基和对照培养基的角膜成纤维细胞测定中在分开的时间点的死细胞的百分比。
[0105]图47图解了在聚合物袋中本发明的富含气体的流体的储存期限。
[0106]图48图解了在加压罐充氧的流体⑴、本发明的富含气体的流体⑵或对照去离子的流体(3)的存在下使脾细胞与MOG接触的结果。
[0107]图49-58示出细胞因子的全血样品评估结果。
[0108]图59-68示出支气管肺泡灌洗流体(BAL)样品评估的对应的细胞因子结果。
[0109]图69-75示出缓激肽B2膜受体被固定到氨丙基硅烷(aminopropylsilane) (APS)生物传感器上的研究。在图69中指明了样品板设置，并且根据如图71中所指明的样品设置对缓激肽与固定化受体的结合进行了评定。缓激肽结合的结果示于图72中。根据在图73中所指明的设置进一步滴定与受体结合的缓激肽。如图74所表明的，与B2受体结合的缓激肽是浓度依赖性的，并且在本发明公开的专利的富含气体的盐水流体中与生理盐水相比提高了结合亲和力。与B2受体结合的缓激肽的稳定示于图75中。
[0110]图76-83示出显示本文公开的【具体实施方式】影响调节性T细胞的能力的数据。该研究涉及辐射抗原呈递细胞并引入抗原和T细胞。
[0111]图84示出本发明的电动产生的流体减少了鲑鱼降钙素和动物模型的血清摄入。结果与紧密连接的增强是一致的。
[0112]图85-89示出在肺组织中的紧密连接相关蛋白的表达水平，所述肺组织是来自用于产生图84的数据的动物模型。
[0113]图90-94示出从暴露于RDC1676-01 (通过具有添加的额外的氧的本文公开的混合装置处理的无菌盐水；本发明公开的富含气体的电动产生的流体(Rev))的人包皮角质形成细胞获得的数据，显示出NOSl和N0S3、以及Nostrin、N0S3的上调。
[0114]图95和96示出支持局部化电动效应(电压/电流)的数据，所述电动效应发生在包括绝缘的转子和定子部件的混合装置中以允许在电动流体产生的过程中检测电压/电流效应。
[0115]图97A-C示出为进一步表征本发明的电动产生的流体的基本性质而进行的核磁共振(NMR)研究的结果。电动产生的流体增加了报道分子海藻糖溶质的13C-NMR线宽。
[0116]图98和99示出为进一步表征本发明的电动产生的流体的基本性质而进行的伏安研究(即方波伏安(图98)和溶出极谱(图99))的结果。在-0.14V、-0.47V、-1.02V和-1.36V观察到对电动产生的流体唯一的方波伏安峰差异(相比于对照)。对于电动产生的Revera和Solas流体在-0.9伏特看到明显的极谱峰,并且非电动产生的空白和盐水对照流体的波谱在-0.19和-0.3伏特示出特征峰，所述特征峰在电动产生的流体的波谱中是不存在的。
[0117]图100-106示出评定电动产生的流体的测试对上皮细胞膜极性和离子通道活性的影响的膜片钳技术的结果。结果表明本发明的电动产生的流体影响全细胞电导的电压依赖性贡献。
[0118]图107A-D和108A-D示出数据，所述数据表明本发明的电动产生的流体(例如RDC1676-00、RDC1676-01、RDC1676-02和RDC1676-03)当单独或作为硫酸沙丁胺醇的稀释剂在雄性豚鼠中施用时保护免受醋甲胆碱诱导的支气管收缩。也就是说醋甲胆碱结果表明在存在本发明的电动产生的流体的情况下，沙丁胺醇的支气管扩张延长时间多达至少26小时。
[0119]图109-114示出为评定本发明的电动产生的流体在Brown Norway大鼠卵白蛋白敏化模型中的气道抗炎特性而进行的布地奈德实验的结果。本发明的电动产生的流体降低了嗜酸性粒细胞计数，示出在降低嗜酸性粒细胞计数上与布地奈德的强协同效应，降低Penh值，提高潮气量，降低Eotaxin (嗜酸性粒细胞趋化因子)的血液水平，在用本发明的电动产生的流体(例如Rev60)单独或连同布地奈德一起处理所产生的激发后6小时显著增强两种主要的关键抗炎细胞因子ILlO和干扰素Y的血液水平，并且降低了 Rantes的系统水平。数据示出存在布地奈德750ug / kg与本发明的电动产生的流体(例如Rev60)的实质的协同效应。
[0120]图115示出本发明的电动产生的流体(例如Revera60和Solas)分别减少支气管上皮细胞(BEC)中的DEP诱导的TSLP受体表达大约90%和50%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0121]图116示出本发明的电动产生的流体(例如ReVera60和Solas)分别抑制支气管上皮细胞中的DEP诱导的细胞表面结合的MMP9水平大约80%和70%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0122]发明详述
[0123]本发明的具体方面提供通过施用包含如本文所公开的至少一种电动产生的流体(例如，富含气体的电动产生的流体)的治疗组合物在需要其的受治疗者中治疗或预防至少一种肺病患或其症状的组合物和方法，所述肺病患或其症状包括但不限于哮喘、过敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和coro相关病症(例如，支气管炎、肺气肿、哮喘、湿疹)、肺气肿、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(百日咳)以及类似症状。其他方面涉及治疗组合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所公开的至少一种电动产生的流体(例如，富含气体的电动产生的流体)与至少一种另外的治疗剂(例如，支气管扩张剂、β2-激动剂(短效的和长效的)、抗胆碱能药、茶碱、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特罗、肾上腺素、Hl拮抗剂、解充血药和异丙托溴铵等)或治疗的组
口 ο
[0124]电动产牛的流体:
[0125]如本文所用的“电动产生的流体”是指出于本文工作实施例的目的通过本文详细描述的示例性混合装置(还参见US200802190088和W02008 / 052143，通过引用将二者整体并入本文)而产生的 申请人:发明的电动产生的流体。如本文公开和呈现的资料所证明，电动流体表示相对于现有技术非电动流体(包括相对于现有技术充氧的非电动流体)(例如压力罐充氧的流体及类似物)的新颖的且从根本上不同的流体。如在本文各方面中所公开的那样，电动产生的流体具有独特且新颖的物理和生物特性，包括但不限于以下:
[0126]在具体的方面，电动产生的流体是指在流体动力诱导的、局部化(例如就全部流体体积而言是非均一的)的电动效应(例如电压/电流的脉冲)例如本文所述的装置部件-局部化效应的存在下产生的流体。在具体的方面，所述流体动力诱导的、局部化的电动效应与本文公开并讨论的表面相关的双层和/或流动电流效应联合。
[0127]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于调节其中溶解的报告溶质(例如海藻糖(Trehelose))的13C-NMR线宽。NMR线宽效应是在测量例如在具体工作实施例中如本文所述的测试流体中的溶质“翻滚”的间接方法中。
[0128]在具体的方面，电动改变的含水流体的特征为以下至少一种:在-0.14V、-0.47￥、-1.02￥和-1.36￥的任何一个的与众不同的方波伏安峰差异；在_0.9伏特的极谱峰；以及在-0.19和-0.3伏特不存在极谱峰，在-0.19和-0.3伏特的极谱峰是具体工作实施例中本文所公开的电动产生的流体所独有的。
[0129]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于改变细胞膜电导率(例如在本文公开的膜片钳研究中测量的全细胞电导的电压依赖性贡献)。
[0130]在具体的方面，电动改变的含水流体是充氧的，其中在该流体中的氧的存在量为大气压下至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具体的方面，电动改变的含水流体具有小于15ppm、小于IOppm的大气压下的溶解氧或大约环境氧水平。
[0131]在具体的方面，电动改变的含水流体是充氧的，其中在该流体中的氧的存在量在大约8ppm与大约15ppm之间，并且在这种情况中有时在本文称作“Solas”。
[0132]在具体的方面，电动改变的含水流体包括溶剂化电子(例如，通过分子氧稳定)和电动改性和/或带电的氧类的至少一种，并且其中在某些实施方式中所述溶剂化电子和/或电动改性或带电的氧类的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0133]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能(例如改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性)至足以提供对细胞内信号转导的调节，其中在具体的方面，所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体(例如G蛋白偶联受体(GPCR) ,TSLP受体、β 2肾上腺素能受体、缓激肽受体等)、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白和整联蛋白。在某些方面，发挥效应的G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白的α亚基(例如G a s、G a 1、G a (j和G α 12)相互作用。
[0134]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于调节细胞内信号转导，包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节(例如磷脂酶C活性的调节或腺苷酸环化酶(AC)活性的调节)O
[0135]在具体的方面，电动改变的含水流体的特征为在本文工作实施例和其他地方中描述的各种生物活性(例如细胞因子、受体、酶和其他蛋白质和细胞内信号传导途径的调控)。
[0136]在具体的方面，电动改变的含水流体显示出与沙丁胺醇和布地奈德的协同效应，如在本文工作实施例中所示。
[0137]在具体的方面，电动改变的含水流体减少在支气管上皮细胞(BEC)中DEP诱导的TSLP受体的表达,如本文工作实施例中所示。
[0138]在具体的方面，电动改变的含水流体抑制在支气管上皮细胞(BEC)中DEP诱导的细胞表面结合的ΜΜΡ9水平，如本文工作实施例中所示。
[0139]在具体的方面，电动改变的含水流体的生物效应被白喉毒素抑制，表明β阻断、GPCR阻断和钙通道阻断影响电动改变的含水流体的活性(例如关于调节性T细胞的功能)，如在本文工作实施例中所示。
[0140]在具体的方面，电动改变的含水流体的物理和生物效应(例如改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力)在一个封闭的容器(例如，封闭的气密容器)中持续了至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月或更长时间。
[0141]因此，其他方面提供所述电动产生的溶液和制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括:在相对运动的两个间隔的表面间提供流体材料流，并且在所述两个间隔的表面间界定混合体积，其中流动的流体材料在混合体积内和穿过混合体积的单次通过的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒；和在适于将至少20ppm、至少25ppm、至少
30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并电动改变流体或溶液的条件下将氧引入混合体积内的流动的流体材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将氧注入材料中。在【具体实施方式】中，表面积与体积比为至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0142]其他方面提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括:在两个间隔的表面间提供流体材料流，所述两个间隔的表面在其间界定了混合体积；在适于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧扩散到材料中的条件下将氧引入在混合体积中的流动的材料中。在某些方面，在混合体积内的所述流动的材料的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒。在【具体实施方式】中，表面积与体积比为至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0143]另外的实施方式提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:第一室，其被构造为接纳来自第一材料来源的第一材料；定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被构造为环绕其中的旋转轴旋转，所述转子和定子的至少一个具有多个穿孔；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室与第一室流体联通并且被构造为接纳来自第一室的第一材料，并且所述第二材料经由转子和定子中的一个中所形成的多个穿孔供给混合室；第二室，其与混合室流体联通并且被构造为接纳来自混合室的输出材料；以及安装在第一室内的第一内部泵，所述第一内部泵被构造为将第一材料从第一室抽吸到混合室中。在某些方面，第一内部`泵被构造为在第一材料进入混合室之前赋予第一材料圆周速度。
[0144]其他实施方式提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被构造为环绕其中的旋转轴旋转；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室具有:开放的第一末端，第一材料通过该开放的第一末端进入混合室；和开放的第二末端，输出材料通过该开放的第二末端出混合室，第二材料通过转子和定子的至少一个进入混合室；第一室，其与所述混合室的开放的第一末端的至少大部分联通；以及第二室，其与所述混合室的开放的第二末端联通。
[0145]其他方面提供根据上述方法的任何一种制备的电动改变的充氧的含水流体或溶液。
[0146]非电动产生的流体:
[0147]如本文所用的“非电动产生的流体”是指未被电动处理的流体(例如，含水流体，包括水、盐水、标准盐水等)；也即是说，未暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应(例如暴露于适于产生电动改变的流体的装置的诱导电动效应的结构部件)的流体。例如，未暴露于适于将流体暴露于电压脉冲与电流脉冲的至少一种来产生电动改变的流体的装置的诱导电动效应的结构部件的流体。
[0148]如本文所用的“非电动产生的超级充氧(superoxygenated)的流体”是指另外被超级充氧的如上文所定义的非电动改变的流体。例如，现有技术“压力罐”充氧的流体(例如，水、盐水、标准盐水等)是在压力下被暴露于氧气以提供超级充氧的流体的非电动产生的流体。[0149]如在本文所公开的，在各种工作实施例中，包括本发明的电动产生的超级充氧的流体在内的本发明的电动产生的流体与任何现有技术的非电动产生的流体相比(包括与非电动产生的超级充氧的流体相比)具有不同的且独特的物理特性和生物特性以及活性。
[0150]肺相关的病患和病症
[0151]具体方面提供用于治疗或预防哮喘的组合物和方法。
[0152]本文所述的某些实施方式涉及通过减轻COPD的至少一种症状来预防和/或治疗COPD0 coro的一些症状包括但不限于:咳嗽、痰(粘液)产生、呼吸急促(尤其是运动时)、哮鸣、和胸部紧迫感。
[0153]本文所述的某些实施方式涉及通过减轻慢性支气管炎的至少一种症状来预防和/或治疗慢性支气管炎。慢性气管炎的一些症状包括但不限于连续两年每年至少三个月中每月的大部分时间都有胸痛(soreness of the chest)、咳嗽、哮鸣和粘液产生。
[0154]本文所述的某些实施方式涉及通过减轻肺气肿的至少一种症状来预防和/或治疗肺气肿。肺气肿的一些症状包括但不限于呼吸困难、咳嗽、哮鸣、粘液产生和皮肤颜色发蓝。
[0155]本文所述的某些实施方式涉及预防和/或治疗肺感染，包括病毒感染、细菌感染或真菌感染。肺感染的一些症状包括但不限于:干咳或排痰性咳、胸痛、咽喉痛、恶心或呕吐、头疼、发热、寒战、出汗过多、淋巴结肿胀、肌痛、耳痛或眼痛、呼吸急促和呼吸速率快(rapid respiratory rate)。
[0156]本文所述的某些实施方式涉及预防和/或治疗过敏性鼻炎和/或过敏性鼻炎，包括感染、炎症、粘液产生和/或分泌、灼热、瘙痒和喷嚏。
[0157]组合治疗:
[0158]其他方面提供的本文所公开的本发明方法还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂(即，除电动产生的流体之外)施用给患者。在某些方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由下列组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇、系统性的皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯调节剂、甲基黄嘌呤以及它们的组合。在【具体实施方式】中，所述至少一种另外的治疗剂选自由下列组成的组:由β2_激动剂和抗胆碱能药组成的支气管扩张剂，β2_激动剂包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙美特罗；所述抗胆碱能药例如异丙托铵和噻托铵；皮质类固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松；白三烯调节剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特和齐留通；肥大细胞稳定剂，包括色甘酸钠和奈多罗米；甲基黄嘌呤，包括茶碱；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；以及它们的组合。
[0159]在某些方面，还可以施用选自由以下组成的组的至少一种另外的治疗剂:吸入的皮质类固醇、糖皮质激素(即，环索奈德、倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙等)、口服白三烯调节剂(即，孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特、齐留通等)、肥大细胞稳定剂(色甘酸盐、奈多罗米等)、β_2激动剂(即，沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、比托特罗、氟替卡松、沙美特罗、布地奈德、福莫特罗等)、肾上腺素、麻黄碱或甲基黄嘌呤(即，茶碱、氨茶碱等)。在重度哮喘中，在重度发作期间可以将口服糖皮质激素加入这些治疗中。此外，可以施用抗胆碱能药物(即，异丙托溴铵、氧托铵、噻托铵等)。抗组胺剂或IgE阻断剂(如奥马珠单抗)也可能有益于经受“过敏诱导的”哮喘的哮喘患者，在“过敏诱导的”哮喘中受治疗者的哮喘是由对特定过敏原的免疫反应触发的。
[0160]其他方面提供的本文所公开的本发明方法，还包括与下列的组合治疗:TSLP和/或TSLPR拮抗剂(例如，对TSLP和TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子和TSLP受体融合蛋白，如TSLPR免疫球蛋白Fe分子或编码多于一种受体链的组分从而模拟生理受体异源二聚体或更高级的寡聚物的多肽。如果受体包含多于一种的多肽链，则可以采用单链融合体)。
[0161]本发明的富含气体的流体和溶液
[0162]一种流体用另一种流体扩散或富集可产生这两种流体的溶液或悬浮液。具体而言，用气体(例如氧)富集液体可能对包括治疗性处理的某些应用是有益的。如本文所用“流体” 一般地可指对于任何具体公开的实施方式的液体、气体、蒸汽、液体和/或气体的混合物或者它们的任何组合。此外，在某些实施方式中“液体” 一般地可指纯的液体或者可指凝胶、溶胶、乳液、 流体、胶体、分散体或混合物以及它们的任何组合；以上任何一种粘度可不同。
[0163]在本文所公开的【具体实施方式】中，溶解的气体包括环境空气。在一个优选的实施方式中，溶解的气体包括氧。在另一个实施方式中，溶解的气体包括氮氧化物。
[0164]存在几种领域认可的气体富集液体(例如氧富集水)的方法。例如，涡轮机充气系统可在叶轮的一组旋转叶片附近释放空气，叶轮将空气或氧与水混合，或者水可被喷洒到空气中以提高其氧含量。另外，市场上的其他系统将空气或氧注入到水中并且使水/气体经历大规模涡旋。水中氧的自然存在水平通常是不超过10ppm(百万分率)，这被认为是100%的溶解氧的水平。在某些装置上的测试已示出在理想条件下，所述装置能够向上达到大约20ppm或水的自然氧水平的两倍。在某些实施方式中，氧水平可能甚至更高。
[0165]本文提供的【具体实施方式】涉及如本文所定义的扩散器处理的治疗性流体，所述流体包括:流体主材料；扩散到该主材料中的输注材料；和任选地在该主材料中分散的至少一种治疗剂，其中该输注材料包括在该主流体中的氧微泡，其中大多数的微泡在尺寸上小于0.2微米或者优选地小于0.1微米。在某些实施方式中，在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于约30ppm持续至少13小时。在其他具体的实施方式中，在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于40ppm持续至少3小时。
[0166]在另外的实施方式中，输注的流体主材料还包括盐水溶液。在其他的实施方式中，输注的流体主材料在大气压下于密封容器内保持至少约20ppm到约40ppm的溶解氧水平持续至少100天、优选至少365天的时间。在某些实施方式中，输注的流体主材料可具有大气压下至少50ppm的溶解氧水平。
[0167]在某些实施方式中，输注的流体主材料在氧已扩散到其中之后对通过它的激光束发光表现出瑞利散射持续选择的时间段。
[0168]表A说明了在用富含氧的盐水溶液处理的愈合创伤和在本发明的富含气体的富含氧的盐水溶液的样品中进行的各种分压测量。
[0169]表A
[0170]
【权利要求】
1.一种用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的方法，所述方法包括施用治疗有效量的电动改变的含水流体给需要其的受治疗者，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中从而提供了治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体的改变包括将所述流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应。
3.如权利要求2所述的方法，其中暴露于所述局部化的电动效应包括暴露于电压脉冲和电流脉冲的至少一种。
4.如权利要求2所述的方法，其中将所述流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应包括将所述流体暴露于用来产生所述流体的装置的诱导电动效应的结构部件。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述肺或呼吸病患或病症或它们的症状包括选自由以下组成的组的至少一种:哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和CCffD相关病症、肺气肿、肺炎、支气管炎、肺感染、流行性感冒、SARS、结核病和鸬鹚咳(百日咳)。
6.如权利要求5所述的方法，其中所述肺或呼吸病患或病症包括哮喘。
7.如权利要求6所述的方法，其中所述哮喘包括下列的至少一种:过敏性(外源性)哮喘、非过敏性(内源性)哮喘、运动诱导的哮喘和咳嗽变异性哮喘。
8.如权利要求5所述 的方法，其中所述肺或呼吸病患或病症包括C0PD。
9.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体包括电动改变的富含氧的水。
10.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂施用给患者。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:由β2-激动剂和抗胆碱能药组成的支气管扩张剂，所述β2-激动剂包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙美特罗、沙丁胺醇、特布他林、比托特罗、氟替卡松、布地奈德，所述抗胆碱能药包括异丙托铵、异丙托溴铵、氧托铵和噻托铵；皮质类固醇，糖皮质激素，包括口服的、系统性的和吸入的糖皮质激素并且包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松、环索奈德；白三烯调节剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特和齐留通；肥大细胞稳定剂，包括色甘酸钠、色甘酸盐和奈多罗米；肾上腺素、麻黄碱、甲基黄嘌呤，包括茶碱、氨茶碱；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；IgE阻断剂，包括奥马珠单抗；以及它们的组合。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇(吸入的或其他方式的)、系统性的皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯调节剂、甲基黄嘌呤以及它们的组合。
13.如权利要求10所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂选自由沙丁胺醇、布地奈德和它们的活性衍生物组成的组。
14.如权利要求10所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂选自由TSLP拮抗剂、TSLPR拮抗剂以及它们的组合组成的组。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述拮抗剂选自由以下组成的组:对TSLP或TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子、TSLP受体融合蛋白、TSLPR-免疫球蛋白Fe分子以及它们的组合。
16.如权利要求1所述的方法，其中改变细胞膜的结构或功能包括改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组中的至少一种:受体、跨膜受体、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白和整联蛋白。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述跨膜受体包括G蛋白偶联受体(GPCR)。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白α亚基相互作用。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述G蛋白α亚基包括选自由Ga3、6^、6%和Ga12K组成组的至少一种。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述至少一种G蛋白a亚基是Gaq。
22.如权利要求1所述的方法，其中改变细胞膜的结构或功能包括改变膜电导率或膜电位。
23.如权利要求22所述的方法，其中调节细胞膜电导率包括调节全细胞电导。
24.如权利要求23所述的方法，其中调节全细胞电导包括调节所述全细胞电导的至少一种电压依赖性贡献。
25.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节。
26.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括磷脂酶C活性的调节。
27.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括腺苷酸环化酶(AC)活性的调节。
28.如权利要求1所述的方法，其中调节细胞内信号转导包括调节与选自由以下组成的组的至少一种病症或症状相关的细胞内信号转导:炎症、哮喘、鼻炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COro相关病症、肺气肿、肺感染、肺炎、支气管炎、流行性感冒、SARS、结核病、鸬鹚咳(百日咳)、肺收缩、支气管收缩和肺泡收缩。
29.如权利要求1所述的方法，所述方法包括施用给细胞网络或细胞层，并且还包括其中的细胞间连接的调节。
30.如权利要求29所述的方法，其中所述细胞间连接包括选自由紧密连接、间隙连接、黏着带和桥粒所组成的组中的至少一种。
31.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞网络或细胞层包括选自由肺上皮、支气管上皮和肠上皮所组成的组中的至少一种。
32.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体是充氧的，并且其中在所述流体中氧的存在量为大气压下至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
33.如权利要求1到32中任一项所述的方法，其中所述电动改变的含水流体包括溶剂化电子和电动改性或带电的氧类中的至少一种。
34.如权利要求33所述方法，其中所述溶剂化电子或者电动改性或带电的氧类以至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。
35.如权利要求33所述方法，其中所述电动改变的充氧的含水流体包括通过分子氧稳定的溶剂化电子。
36.如权利要求1所述方法，其中改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力在封闭的气密容器中持续至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月、至少十二个月、至少二十四个月或更长的时间。
37.一种配制适用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症、或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂的方法，所述方法包括: 获得适用于治疗受治疗者的特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂；以及 将所述治疗剂与一定量的电动改变的含水流体混合，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中从而提供了配制适用于治疗特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂。
38.一种药用组合物，其包含:适用于治疗受治疗者的特征为气流阻塞或限制的肺或呼吸疾患或病症或所述肺或呼吸病患或病症的症状的治疗剂；和一定量的电动改变的含水流体，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节。
39.一种由权利要求37所述的方法制备的药用组合物。
40.如权利要求1所述的方法`，其中施用是通过吸入进行。
【文档编号】A61K45/00GK103721258SQ201310717654
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2008年10月27日 优先权日:2007年10月25日
【发明者】理查德·L·华森, 安东尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸宾 申请人:利发利希奥公司