一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用，在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。藻蓝蛋白与酞菁的复合物作为具有双功能基和作用光谱的光敏剂用于制备光动力治疗药物时，具有生物相容性高、光动力抗癌活性高等优势。
【专利说明】一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于功能材料以及药物领域，具体涉及一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]藻蓝蛋白(phycocyanin)是一种卟啉类色素蛋白，具有很好的水溶性；是来源于螺旋藻中的一种天然蛋白。由α和β亚基等摩尔组成，α和β亚基通过分子间的各种相互作用力先形成单体(α β)，单体之间借助连接多肽的作用再聚合成三聚体(α 0)3和六聚体(α β )6。
[0003]藻蓝蛋白仅含有一种发色团，即藻蓝素(phycocyanobilin, PCB)。每种亚基是由脱辅基蛋白和开链四吡咯结构的发色团组成，发色团通过硫醚键与脱辅基蛋白的半胱氨酸残基交联。α亚基上含有一个发色团，而β亚基上含有两个发色团，其(αβ)单体分子则共含有3个发色团。
[0004]藻蓝蛋白的提取原料来自于红藻和蓝藻，不同藻类中藻蓝蛋白的种类、含量也不同。目前，以螺旋藻、多管藻为提取原料的居多，因螺旋藻中藻胆蛋白的含量非常丰富，可达细胞干重的20%以上，较其他蓝藻较高。因此，本研究过程中选择钝顶螺旋藻为藻蓝蛋白的提取原料。
[0005]藻蓝蛋白是藻胆蛋白的主要成分，其用途极其广泛，既可作为天然色素广泛用于食品、染料、化妆品等工业，又可制成荧光试剂，用于临床诊断和免疫化学及生物工程等研究领域中；并且藻蓝蛋白还是一种重要的生理活性物质，具有抗炎、抗癌、促进细胞再生等功效，可制备成康复药品和营养食品，用于配合治疗癌症患者和白血病患者等。藻蓝蛋白还是一种性能优良的光动力治疗药物，促进动物血细胞再生，抑制某些癌细胞等作用。
[0006]酞菁是一种具有18个电子的大共轭体系的化合物，因其在科技领域的广泛应用而变得越来越重要。酞菁作为第二代光敏剂，具有以下优点:(1)结构明确，性质稳定；(2)暗毒性和皮肤光毒性小；(3)在光疗窗口(670nnT750nm)有强吸收；(4)光敏化能力很强。但是酞菁也存在一些缺点如酞菁锌在生理溶液中易聚集、水溶性差以及生物活性有待进一步提高。因此，为了提高酞菁的水溶性和靶向性，制备得到酞菁与藻蓝蛋白的水溶性复合物，通过酞菁与藻蓝蛋白的协同作用提高光敏剂的抗癌活性。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于针对上述问题，提供了一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用。本发明提供的复合物具有生物相容性高、光动力抗癌活性高的优势。
[0008]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，形成组成比确定的藻蓝蛋白与酞菁的复合物，通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。 [0009]所述的酞菁优选:酞菁锌和1，8(11)，15(18)，22(25)_四(3_羧基苯氧基)酞菁锌，它们的结构分别如式I和式2所示。
【权利要求】
1.一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于:在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。
2.根据权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于:所述的酞菁为酞菁锌或1，8(11)，15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌。
3.根据权利要求1或2所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于:所述的复合物为摩尔比为1-12:1的酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物或摩尔比为1-10:1的1，8(11)，15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物。
4.一种制备如权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)配制酞菁配合物溶液和水溶性藻蓝蛋白溶液； (2)将酞菁配合物溶液逐滴滴加到水溶性藻蓝蛋白溶液中，形成混合溶液； (3)将混合溶液置于25-37°C下振荡或搅拌2-12小时； (4)通过凝胶渗透色谱分离步骤(3)的混合溶液，脱除多余的酞菁配合物； (5)将含复合物的洗脱组分，再经过凝胶渗透色谱，以水为流动相，脱除其中的盐； (6)将除盐后的复合物水溶液，通过真空冷冻干燥，除去水分，制得所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物。
5.根据权利要求4所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的制备方法，其特征在于:步骤(4),(5)通过膜透析法来进行。
6.一种如权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的应用，其特征在于:所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物用于制备光敏剂或光动力药物或光敏药剂。
【文档编号】A61P27/02GK103861104SQ201410108987
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2014年3月24日 优先权日:2014年3月24日
【发明者】黄剑东, 段继英, 万东华, 郑碧远, 郑永权 申请人:福州大学