一种雪菊提取物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种雪菊提取物及其在制备治疗高脂血症和抗氧化药物中的应用。该雪菊提取物的制备方法为取雪菊药材，用12～25倍30～75％乙醇回流提取2～3次，合并提取液，浓缩，得到提取浓缩液，将该提取浓缩液加水稀释，经AB-8大孔树脂精制，依次用水、10％乙醇、50～75％乙醇、95％乙醇梯度洗脱，收集50～75％乙醇洗脱部位，浓缩，干燥，即得。该雪菊提取物中的主要成份包括10种黄酮类，其中马里苷和黄诺玛苷的总含量大于10％。动物体内试验表明该雪菊提取物具有一定调节血脂作用；体外抗自由基清除实验表明该雪菊提取物具有一定抗氧化作用，其中黄诺马苷、马里苷等是其主要抗氧化成分。
【专利说明】一种雪菊提取物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种雪菊提取物及其应用，更具体的说是，涉及一种雪菊提取物及其在制备治疗高脂血症和抗氧化药物中的应用，属药品和保健食品领域。
【背景技术】
[0002]雪菊为菊科植物两色金鸡菊(Coreopsis tinctoria Nutt.)的花,该植物原产北美，在新疆和田地区昆仑山脉有分布，因而俗称为“雪菊”，又名血菊、高山寒菊、金鸡菊，维语称其为“古里恰依”。在1990年代，该地区民间将雪菊作为一种特色花茶饮用，认为具有降压、降糖及降脂的功效。随着人们对该药材功效的认识和普及，雪菊被誉为与天山雪莲齐名的新疆特产，并已进行规模化种植和推广应用。
[0003]关于雪菊的相关研究文献主要集中于我国。近年研究报道证明雪菊具有明确的降血糖、降压、降血脂、抗氧化损伤等多种功效[潘英等，金鸡菊属植物化学成分和药理活性研究进展，现代药物与临床，2012，27 (5):521]。梁淑红等采用高脂血症小鼠模型，研究金鸡菊总提物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物(剂量均为1.2g/kg)的调脂作用，结果显示各组均有不同程度降低总胆固醇(TC)、总甘油酯(TG)或升高高密度脂蛋白(HDL-C)的作用[梁淑红等，金鸡菊提取物降血脂作用的研究。中国实验方剂学杂志，2010，31(8):495]，提示金鸡菊提取物有较好的降血脂作用。张媛和屠鹏飞等报道[B1chemicalSystematics and Ecology, 2006, 34 (10):766 ;中国中药杂志 2012，37 (23): 3581]，雪菊中存在大量的黄酮、有机酸类等成分。
[0004]高脂血症是由于脂肪代谢或运转异常使血浆一种或多种脂质高于正常的代谢性疾病。大量的研究资料表明高脂血症是脑卒中、冠心病、心脏猝死的独立危险因素，有效控制高脂血症是防治心脑血管疾病的重要途径。随着人们生活水平的提高、饮食结构的改变，加之运动减少，导致高脂血症的发病率有明显增高趋势,高脂血症已经成为危害人类健康的公共卫生问题之一。治疗高脂血症药物主要有西药和中药,与西药相比，中药因其绿色天然、多靶点起效、安全性高而更适于长期服用以调节血脂。现有研究资料表明，雪菊具有较为确切的降血糖、降脂、降压等功效，这与雪菊的民间应用经验相符。目前的研究报道主要侧重对雪菊药理活性方面的研究和验证，一般采用雪菊提取物进行，缺乏对提取物中有效成分的分析和鉴定，因而难以保证雪菊提取物药理功效的稳定性和有效性，有待进一步深入研究。
【发明内容】
[0005]本发明目的是提供一种雪菊提取物及其应用，即在制备治疗高脂血症和抗氧化药物中的应用。同时提供了雪菊提取物的制备方法，通过该方法制备的雪菊提取物与现有技术相比，提取物化学组成稳定，药理有效成分纯度高、功效稳定，药物使用剂量小。
[0006]本发明的技术方案是:一种雪菊提取物，该提取物中马里苷和黄诺玛苷的总含量大于10%，其采用以下方法制备得到:
[0007](I)选取雪菊药材，用12?25倍量的30?75%乙醇回流提取，每次0.5?1.5h，重复提取2?3次，合并提取液，浓缩，得到提取浓缩液；
[0008](2)将上述提取浓缩液加水稀释，上样至预处理好的大孔树脂柱，依次用水、10%乙醇、50?75%乙醇梯度洗脱，收集50?75%乙醇洗脱部位，浓缩，干燥，即得。
[0009]进一步，优选的，所述大孔树脂为弱极性或非极性树脂。
[0010]进一步，所述步骤⑴中用于回流提取的乙醇选定为30?40%乙醇，并且最后得到的所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷的比例为1:1?2，总含量大于20%。
[0011]进一步，步骤⑴中用于回流提取的乙醇选定为45?75%乙醇，并且最后得到的所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷的比例为1:0.4?1，总含量大于20%。
[0012]进一步，优选的，所述12?25倍量的30?75%乙醇选定为16_20倍量的30-35 %乙醇，所述回流提取时间每次为50-60min时，所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷含量大于 35 %。
[0013]上述一种雪菊提取物在制备治疗高脂血症药物及抗氧化药物中的应用。
[0014]本发明的优点是:本发明中的一种雪菊提取物可应用于制备治疗高脂血症和抗氧化药物。所述雪菊提取物与现有技术相比，提取物化学组成稳定，药理有效成分纯度高、功效稳定，药物使用剂量小。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述:
[0016]图1为雪菊提取物高效液相色谱图
[0017]其中色谱峰1-3依次为黄诺马苷(I)、马里苷(2)和奥卡宁(3)。
[0018]图2为实施例7中雪菊提取物(XJE)、黄诺马苷(XJOl)、马里苷(XJ03)、3，4’，5，6，7- 二氢槲皮素-O-己糖苷(XJ02)以及对照药芦丁(Rutin)抗DPPH自由基量效关系图。
[0019]图3为实施例7中雪菊提取物(XJE)、黄诺马苷(XJOl)、马里苷(XJ03)、3，4’，5，6，7- 二氢槲皮素-O-己糖苷(XJ02)以及对照药芦丁(Rutin)抗ABTS自由基量效关系图。
【具体实施方式】
[0020]以下结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
[0021]实施例1:雪菊提取物的制备
[0022]干燥的雪菊(Coreopsis tinctoria,产地:新疆达坂城，批次130501)花1.0kg,经20L30%乙醇水溶液回流提取2次，每次lh，合并两次的提取液，滤过，减压浓缩回收乙醇，加适量水稀释到3.0L ;选用AB-8树脂柱(10cmX 1cm 1.d.，柱体积2.0L/BV)，上样后依次用水6BV，10 %乙醇3BV，75 %乙醇4BV，95 %乙醇2BV洗脱，流速1.5?2BV/h ；收集75 %乙醇洗脱部位，浓缩，干燥，获得精制雪菊总黄酮提取物(XJE) 115g。经HPLC检测，其具体实验条件同实施例5XJE中黄酮定性定量分析部分，XJE提取物中马里苷、黄诺玛苷的含量分别为 17.1%,26.4%0
[0023]实施例2:雪菊提取物的制备
[0024]干燥的雪菊花1.0kg，经20倍50%乙醇水溶液回流提取2次，其余提取和精制方法同实施例1，获得精制雪菊总黄酮提取物(XJE) 104g。经HPLC检测，其具体实验条件同实施例5XJE中黄酮定性定量分析部分，XJE提取物中马里苷、黄诺玛苷的含量分别为24.3%,
18.7%。
[0025]实施例3:雪菊提取物的制备
[0026]干燥的雪菊花1.0kg，经20倍75%乙醇水溶液回流提取2次，其余提取和精制方法同实施例1，获得精制雪菊总黄酮提取物(XJE) 104g。经HPLC检测，其具体实验条件同实施例5XJE中黄酮定性定量分析部分，XJE提取物中马里苷、黄诺玛苷的含量分别为26.1 %、
11.5%。
[0027]实施例4:雪菊提取物的提取工艺参数优化
[0028](I)单因素实验:称取1.0Og雪菊粉末，置于50mL圆底烧瓶中，以料液比1:20加入提取溶剂，回流提取2次，采用HPLC法测定提取液中指标成分马里苷和黄诺玛苷含量。固定其他条件，分别考察提取溶剂(水、30%、50%、75%、95%乙醇)、提取时间(30、50、60、70、90min)、料液比(1:8、1:12、1:16、1:20、1:25)的影响，分析总结最佳提取因素范围。研究结果表明，主要黄酮类成分在提取溶剂30%~75%乙醇之间提取率较高，在此范围外的溶剂提取率低。料液比在1:16和1:25之间提取率较高、成本较经济。提取时间(50~90min)的影响相对较小。
[0029](2)星点设计实验:上述单因素实验研究结果表明，主要黄酮类成分在提取溶剂30% -75%乙醇之间提取率较高，本实验进一步应用响应面分析法，采用3因素5水平的旋转组合设计(见表1)，以黄酮类化合物马里苷(Rl)和黄诺玛苷(R2)含量(按mg/g药材干重计)为响应值，用来测定雪菊提取物的最佳工艺参数(见表2)。
[0030]表1响应面分析法试验因素水平及编码
[0031]
【权利要求】
1.一种雪菊提取物，其特征在于，所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷的总含量大于10%，其采用以下方法制备得到: (1)选取雪菊药材，用12?25倍量的30?75%乙醇回流提取，每次0.5?1.5h，重复提取2?3次，合并提取液，浓缩，得到提取浓缩液； (2)将上述提取浓缩液加水稀释，上样至预处理好的大孔树脂柱，依次用水、10%乙醇、50?75%乙醇梯度洗脱，收集50?75%乙醇洗脱部位，浓缩，干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的一种雪菊提取物，其特征在于，所述大孔树脂为弱极性或非极性树脂。
3.根据权利要求1所述的一种雪菊提取物，其特征在于，步骤(I)中用于回流提取的乙醇选定为30?40%乙醇，并且最后得到的所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷的比例为1:1?2,总含量大于20% ο
4.根据权利要求1所述的一种雪菊提取物，其特征在于，步骤(I)中用于回流提取的乙醇选定为45?75%乙醇，并且最后得到的所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷的比例为1:0.4?I,总含量大于20% ο
5.根据权利要求1所述的一种雪菊提取物，其特征在于，所述12?25倍量的30?75%乙醇选定为16-20倍量的30-35%乙醇，所述回流提取时间每次为50-60min，所述雪菊提取物中马里苷和黄诺玛苷含量大于35%。
6.如权利要求1?5任意一项所述的一种雪菊提取物在制备治疗高脂血症药物中的应用。
7.如权利要求1?5任意一项所述的一种雪菊提取物在制备抗氧化药物中的应用。
【文档编号】A61P3/06GK104173400SQ201410312945
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年7月2日 优先权日:2014年7月2日
【发明者】刘江云, 李雅丽, 谢辉, 高飞, 谢梅林, 木胡牙提·乌拉斯汉, 杨世林 申请人:苏州大学