本发明的目的为式(i)的化合物，其在不再以具有抗微生物性质的剂量使用，其作为试剂用于使与它们共同施用的抗微生物活性成分增效的用途。特别地，“增效剂+抗微生物剂”组合的目的为预防和/或治疗人或动物中的细菌感染和真菌感染。
本发明涉及一种用于使抗微生物剂增效的方法，其中将一种或多种式(i)的化合物与所述抗微生物剂共同施用。在这种方法中，以一定剂量使用式(i)的化合物，其单独地在此剂量是无活性的。
背景技术：
本发明的目的
背景
本发明涉及提供与在抗微生物剂的商业和医疗使用期间其活性降低或丧失有关的问题的解决方案。因此，本发明为适用于目前的抗微生物剂的解决方案，并且其将被应用于未来的抗微生物剂。
随着在1940年代抗微生物剂的出现，很快发现微生物(细菌和真菌)有能力适应所使用的抗微生物剂。其功效随着时间并在其整个使用中下降。存在2种对抗耐受的策略，一方面是发现新的抗微生物分子，另一方面是与选择性阻断耐受机制的分子组合。
大约二十年来，已经观察到进入市场的新抗微生物分子数量的减少，这导致了耐受性微生物全球流行的大幅增加。因此，对于具有较难治疗的微生物感染的患者，存在复杂的情况。
技术实现要素：
描述
本发明描述了式(i)的化合物使抗微生物剂增效的用途。出人意料地，这些化合物已经证明，其能够在低剂量(从0.01至100mg/l)使抗微生物剂的作用增效，所述剂量远低于它们单独可以具有抗微生物性质的那些剂量。因此，由于增效，与式(i)的化合物共同施用的抗微生物剂具有比通常观察到的活性更高的活性。
本发明旨在使可用于人或动物中的“抗微生物剂”增效，而不是所有具有“抗微生物性质”的化合物，其反过来往往不能向人或动物施用，因为毒性太高，或抗菌活性阈值太高而需要与健康不相容的剂量。
重要的是想到，从绝对上来讲任何分子都具有抗微生物性质。因此，需要用抑制细菌的最小浓度评估分子的抗微生物性质。
本发明基于令人惊讶的发现，即，在非常高的剂量(与药物在该目的使用不相容的水平)具有抗微生物性质，且具有高于5000mg/l，有利地高于10000mg/l的最小抑制浓度(cmi)的化合物，在低剂量(0.01至100mg/l)具有增效作用。在这些剂量，在人或动物中使用化合物(i)变得是可以考虑的。
仍然令人惊讶地，已经观察到，在低剂量的化合物(i)中增效作用更好，并且当离开化合物(i)单独地具有抗微生物性质的剂量时，作用(对于在非常高的剂量具有抗微生物性质的化合物)增加。
例如，已经出人意料地注意到，在大约1g/l的浓度(cmi高于10000mg/l，即高于1％，取决于菌株)具有抗微生物性质的乙酸肉桂酯或苯甲酸苄酯，在接近于cmi的这些浓度(1至3倍稀释)对抗生素具有增效作用。
当其浓度降低至低于cmi时，苯甲酸苄酯不再使抗生素增效(参见实施例1-10)。然后，非常令人惊讶地，已经注意到，通过进一步显著地降低苯甲酸苄酯的浓度，比cmi低10至50倍，苯甲酸苄酯再次在非常大量的菌株中对非常大量的抗生素具有增效作用，这一次是在与医药用途相容的剂量。
非常有利的是，以远低于其功效阈值的剂量使用的化合物(i)是最经常用在人或动物中而没有毒性要求，因为不存在毒性或处于可接受的毒性水平。如果期望以具有抗微生物性质的高剂量使用它们，或甚至以接近于其cmi的剂量(在此剂量，它们可以使抗微生物剂增效)使用它们，则将不是这样。
仍然令人惊讶地，用根据本发明的化合物观察到的增效作用不是特异性的针对特定的耐受机制，而是在多种菌株上观察到，不管它们是否产生一种或多种不同的耐受机制。
现有技术
现有技术在许多出版物中描述了一些化合物(i)的抗微生物性质。这些出版物没有预期化合物(i)在远低于其功效阈值的剂量的增效作用。
对于化合物(i)的现有技术是大量的，因为它们属于在许多领域中被很好地研究的化学物质类别。本发明范围内的化合物(i)具有以下特征，所述特征能够将它们与现有技术相分离，并且所述特征能够考虑它们作为施用至人和动物的抗微生物剂的增效剂的用途：
a/它们以低剂量(0.01至100mg/l)使用，所述剂量远低于它们的抗微生物性质阈值，它们的增效作用不是特异性的针对特定作用或耐受机制。
b/它们已经通过适合于它们的物理化学特征的筛选方法来验证。
c/在它们增效的剂量，它们具有允许在人或动物中安全使用的作用/毒性比例。
d/它们组成一个或多个分离的化学实体，其特征在于可以持续不断地再生产，因为用于获得它们的方法(合成、半合成、提取)允许这点。
e/它们没有特别的毒性，所述毒性即使在低剂量时也将阻止它们的使用(基因毒性、心脏毒性...)。
a/关于现有技术中测量的活性水平
在现有技术中，用于观察抗微生物活性的浓度与在人或动物中(特别是用于全身应用)的未来使用是不相容的。在大多数科学出版物中，考虑了医药用途，而测量的有效浓度(大约几mg/ml)与这种用途是不相容的。测量的抗微生物作用经常被测量为精油或其活性成分的含量，大约几mg/ml。但是，这样的浓度不适合在人类或动物中的未来使用(特别是全身地)。1mg/ml对应于1g/l或1g/kg或甚至0.1％。如果cmi为1mg/ml，取决于药代动力学参数，应当施用至少1g/kg/d体重。例如，对于牛，有效剂量应当为至少500g/d，而对于人，有效剂量应当为至少60g/d(这对应于最小剂量，因为这里假设产品被完全吸收并分布在生物体中)。这些过高的剂量不能被考虑用于在治疗中的安全使用。
b/关于现有技术中描述的方法的不适当性
根据不同的方法(单独的活性成分、天然产物...)工作的作者对包含化合物(i)的化学物质家族通常使用标准的抗菌作用测量方法，而没有使它们适应于萜类和苯丙素类的疏水挥发性。
例如，wo99/66796(wisconsinalumniresearchfoundation)描述了一种使微生物细胞对抗菌化合物敏感的方法，其包括使抗菌化合物与倍半萜烯接触的步骤，以改善抗菌化合物的作用。
在本申请中，已经用圆盘扩散法确定了cmi，所述方法对于化合物(i)和相关家族的挥发性和疏水性是不合适的。该方法在于将用已知量的待测试化合物浸透的纸盘放置在接种有待研究的细菌的琼脂介质上。化合物的浓度梯度出现在每个盘周围的琼脂介质上；18小时后，测量抑制晕直径。然而，对于干扰琼脂介质中浓度梯度的形成的疏水化合物(由于在亲水表面上的非常不同的表面张力和接触角)，该方法是不可靠的。在一些区域，待测化合物的浓度远高于理论浓度。因此，测试不能是定量的，而它们可以是定性的。进一步地，在乙醇中注意到待测疏水性化合物的稀释，但不改变结果，而乙醇为一种抗菌的和挥发性的化合物。
应当注意，本申请教导了用不同于倍半萜烯的萜烯不会获得任何作用。
c/关于现有技术的化合物的毒性
关于天然化合物和组合物，天然来源和不存在毒性之间有一些混乱。精油(及其衍生物)通常被描述为低毒性的，这在食品应用或香料中通常是正确的，但在治疗施用的范围内是错误的。
对于分离的化合物，也存在混乱，并且涉及化合物的天然来源(提取)。
例如，wo2006/120567(advancedscientificdevelopments)描述了药物组合物，其包含至少一种被描述为无毒性的活性治疗物质，所述物质选自香苇醇、百里香酚、丁香酚、莰醇、香芹酚、α-紫罗酮、β-紫罗酮和其异构体、衍生物和混合物，并且包含作为第二活性治疗物质的抗生素。单独使用的香苇醇、百里香酚、丁香酚、莰醇、香芹酚、α-紫罗酮和β-紫罗酮具有抗菌活性，然而它们中的一些也引起毒性问题，这在该申请中被忽略。
例如，香芹酚具有以下毒性数据：dl50(小鼠，经静脉)为80mg/kg，而在两种哺乳动物物种(猫和大鼠)中的口服最低致死剂量为100mg/kg。将这些数据与在文献中考虑的(envisagés)0.3mg/ml(即300mg/kg)剂量作比较。
d/关于现有技术中描述的化合物的化学可变性
在质量和可再生产性方面，精油在工业规模上的使用是一个问题，因为精油的组成因批次而异。
例如，de19631037(boehringer)描述了茶树精油使抗生素对金黄色葡萄球菌菌株的作用增效的用途。主要组分茶树精油为萜品烯-1-醇。
考虑到在人或动物中的应用，这种可变性尤其具有三个后果，其限制了工业化：
‐难以确保治疗作用的一致性，
‐难以确保产品的低毒性，
‐与材料的供应和质量和可再生产性管理相关的成本是重要的。
下表列出了这些现有技术的教导：
表1
与在低剂量(远低于具有抗微生物活性的剂量)的化合物(i)相关的工作是新的，并且具我们所知，现有技术并未考虑到这种用途。
定义
“微生物(micro-organisme)”是指因为其小尺寸而肉眼不可见的任何活的生物体。
“生物体”是指能够出生，生长和正常繁殖的任何动物或植物生物实体(生物)。
在本专利中，微生物(microbe)定义占据了微生物定义，限于本发明所涉及的医药领域。因此，“微生物”是潜在致病的活的微生物(细菌、真菌、酵母和分枝杆菌)。因此，该术语不包括病毒和朊病毒等惰性病原体。
“抗微生物剂”是指用于施用至人或动物的、能够杀死或抑制微生物生长的任何化合物。这些抗微生物剂的药学上可接受的盐也包括在该定义内。其包括例如普鲁卡因、二苄胺、乙二胺、乙醇胺、甲基葡糖胺牛磺酸等的钠盐、钾盐、钙盐等和氨基盐(selsaminés)，以及酸加成盐如盐酸盐和碱性氨基酸。因此，该术语集合了用于全身或局部使用的抗生素(其与耐受机制抑制剂的组合)、抗真菌剂。
“抗微生物性质”是指能够破坏或抑制微生物生长的任何物质的性质。具有抗微生物性质的产品特别地包括抗微生物剂和杀生物剂。
与集合了用于被施用的抗菌剂、抗真菌剂的术语“抗微生物剂”相比，术语“杀生物剂”集合了用于被应用至惰性系统(病毒和朊病毒)的、具有抗微生物性质的产品。
“抗细菌性质”和“抗真菌性质”不仅是指杀细菌性质和杀真菌性质(其特征在于破坏细菌和真菌(和酵母、分枝杆菌))，还指抑制细菌性质和抑制真菌性质(其特征在于所述细菌和真菌(和酵母、分枝杆菌)的生长抑制)。具有抗细菌性质或抗真菌性质的产品特别地包括抗微生物剂。
在本发明的目的中，抗生素“耐受细菌”是指耐受至少一种、特别地至少两种、特别地至少三种、或甚至至少四种常规使用的抗生素或抗生素家族的细菌。
在本发明的目的中，“多重耐受细菌”是指耐受几种抗生素(特别地，菌株对其应当是敏感的或先验敏感的)的细菌，更特别地是指具有至少两种非天然耐受的细菌。
“天然耐受”和“获得性耐受”是有区别的。一些抗生素在无毒剂量对一些细菌菌株或物种从未有效过。这是天然的耐受。当对细菌通常有效的抗生素变得不有效或不那么有效时，则这种细菌已经发展出获得性耐受。
在本发明的目的中，“微生物感染”是指由一种或多种微生物菌株引起的感染，并且包括从宿主定植到病理期的阶段。因此，短语“微生物感染”涵盖了在微生物定植后出现在人或动物中的任何不利作用、临床体征、症状或任何疾病。
根据本发明，“萜类”是指包含接近于萜烯的骨架的任何化合物。“萜烯”是指以生物方式通过c5单元的缩合获得的异戊二烯衍生物，得到例如单萜、倍半萜烯。“接近于”是指骨架类似于萜烯，或者其不同在于通常存在的至少一个烷基取代基可以不存在，或被另一个原子携带。骨架可以进一步被不同的基团取代，如饱和的或不饱和的、直链或环状的脂族基团(烷基、烯基、亚烷基)、氧基、醛、酯、醇、醚，和其硫或氮等价物。萜类可以有利地为天然来源的。
根据本发明，“苯丙素”是指包含接近于苯丙烷的骨架的任何化合物。“苯丙烷”是指由苯丙烷生物合成获得的衍生物，并且得到c6(芳香烃)-c3(脂肪烃)或c6(芳香烃)-c1(脂肪烃)衍生物和相应的内酯。“接近于”是指骨架类似于苯丙烷，特别是包括苯基单元，或者其不同在于，通常存在的至少一个烷基取代基可以不存在，或被另一个原子携带。骨架可以进一步被不同的基团取代，如饱和的或不饱和的、直链或环状的脂族基团(烷基、烯基、亚烷基)、氧基、醛、酯、醇、醚，和其硫或氮等价物。苯丙素可以有利地为天然来源的。
在本申请中使用的术语“预防”或“预防感染”是指临床体征或感染症状发作的任何延迟程度，以及临床体征或感染症状的严重性的任何抑制程度，包括但不限于所述感染的全面预防。这要求将抗微生物剂和根据本发明的化合物共同施用至人或动物用于预防目的，所述人或动物可能被微生物菌株定殖，例如在手术、医疗装置的植入或侵入性医疗行为之后。为了预防、改善和/或降低任何随后的感染的严重性，可以在可能导致感染(特别是医院感染)的行为之前、期间或之后进行这种预防性施用。
为了本发明的目的，术语“治疗”意味着在定殖时，或在被可能引起感染(如医院感染)的微生物菌株污染或疑似污染后，将抗微生物剂和根据本发明的化合物共同施用至受试者(人或动物)。因此，术语“治疗”或“治疗感染”包括：
‐借助于抗微生物剂+根据本发明的化合物共同施用实现的任何治疗作用(生长抑制或微生物破坏)，以及观察到的临床体征或症状的改善，以及受试者状况的改善；
‐减缓、中断以及阻止感染的进展。事实上，抗微生物剂-根据本发明的化合物的共同施用还能够减缓微生物的进展和/或完全或部分地防止微生物感染延伸到周围组织和其他组织；
‐抑制、减弱或预防感染的有害后果，如由在感染的或相邻的组织上的一些微生物产生的毒素引起的细胞损伤或生理损伤。
术语“共同施用”是指将抗微生物剂(或抗微生物剂混合物)和根据本发明的化合物(或根据本发明的化合物混合物)以组合的或并列的形式施用至受试者(人或动物)。组合包括任何药物组合、任何药物组合物、任何药物试剂盒和任何药物，其包含(i)至少一种抗微生物剂，和(ii)至少一种根据本发明的化合物。化合物(i)和(ii)可以以混合物的形式，或以不同的制剂或组合物的形式存在于所述组合中。组合还可以包含几种抗微生物剂，例如2种、3种、4种或更多种抗微生物剂，和/或几种根据本发明的化合物，特别是2种、3种或更多种根据本发明的化合物。由于常见的指征(其为抗微生物治疗的实施)，这些组分形成功能单元。这种组合治疗更具体地旨在预防和/或治疗微生物来源的感染和疾病，特别是医院感染。
共同施用可以为同时的或随时间延续。
术语“同时的”是指将抗微生物剂(或抗微生物剂混合物)和根据本发明的化合物(或根据本发明的化合物混合物)同时一齐施用至受试者(人或动物)。可以以混合物的形式施用这些化合物，或者同时但分别以不同组合物的形式施用这些化合物。
短语“顺序施用”是指将抗微生物剂(或抗微生物剂混合物)和根据本发明的化合物(或根据本发明的化合物混合物)不是同时地施用，而是一个接一个地分别施用。
术语使抗微生物剂“增效”是指根据本发明的化合物的使用能够实现比单独使用所述抗微生物剂所达到的预防或治疗作用更高的预防或治疗作用。这可以以不同的替代方案或累积方式表达：抗微生物作用的增加、在抗微生物作用不变下抗微生物剂剂量的下降、cmi的降低。进一步地，增效能够减少或甚至抵消耐受的出现。
术语“增强抗微生物作用”是指：在抗微生物剂剂量不变下，抗微生物剂活性的微生物谱的扩大、抗微生物作用速率的增加、治愈率的改善或抗微生物治愈率的时间的改善。
短语“降低所使用的抗微生物剂的量”是指根据本发明的化合物的使用使得能够使用更低的抗微生物剂的量，所述更低的抗微生物剂的量低于当单独施用抗微生物剂时，实现指定的治疗或预防作用所通常必需的抗微生物剂的量。所使用的抗微生物剂的量的降低可以或多或少地高；相对于实现指定的治疗或预防作用所通常必需的量，优选降低至少10％，并且更优选降低至少20％，进一步优选降低至少40％，甚至降低50％或更多。
“cmi”是指“最低抑制浓度”，其为物质的最低浓度，在此浓度，在有利于微生物生长的条件下，在18至24h的接触后不再观察到微生物的生长。
根据有效的国际标准(clsim7-a9jan12标准)，在固体琼脂介质中进行抑制最小浓度测量测试：将待测试化合物分散在马-欣二氏(muellerhinton)琼脂糖中。然而，与化合物和组合物的疏水性有关的适应性对将它们分散在介质中是必需的：将化合物在溶剂中稀释。可以预先在一种或多种溶剂(用水稀释的
cmi50和cmi90分别表示抑制50％和90％相同属的菌株数量的浓度。
为了本发明的目的，“烷基”是指直链或支链不饱和脂族烃基，其包含1个至6个碳原子(c1-c6)或1个至4个碳原子(c1-c4)。作为包含1个至4个碳原子的烷基的示例，可以提及甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、1-甲基-乙基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基。作为包含1个至6个碳原子的烷基的示例，可以进一步提及戊基、己基、1-甲基-丁基、1-甲基-戊基、2-甲基-戊基、3-甲基-戊基、3-甲基-丁基、3-甲基-戊基、4-甲基-戊基或1-乙基-丙基、1-乙基-丁基、2-乙基-丁基。
为了本发明的目的，“烯基”是指饱和的、直链或支链脂族烃链，其包含至少一个双键c＝c，例如乙烯基、烯丙基等，其包含2个至6个碳原子或2个至4个碳原子。
为了本发明的目的，“烷氧基”是指o-烷基(其中烷基如前面所定义)，例如甲氧基或乙氧基。
“烷基”、“烯基”、“烷氧基”可以进一步被取代。
由同一个骨架携带的两个“烷基”和/或“烯基”和/或“烷氧基”可以一起形成环或杂环(特别是内酯)。术语“亚烷基”是指当两个“烷基”和/或“烯基”彼此连接时形成的烃链。
为了本发明的目的，术语“环烷基”是指任何3-7元饱和的或不饱和但非芳香的烃环，特别是具有5个或6个成员，如环戊基或环己基。
为了本发明的目的，术语“环杂烷基”是指任何5-7元饱和的或不饱和但非芳香的烃环，其含有一个或多个杂原子，例如硫原子或氧原子。
为了本发明的目的，“氧基(oxy)”是指酮官能团，并且“cho”是指醛官能团。
p的log，“logp”为非离子化合物在不混溶的溶剂(水和正辛醇)的两个相中的平衡浓度比。
发明的描述
本发明的目的为一种用于治疗微生物感染的用途的增效的抗微生物剂，其特征在于式(i)的化合物与抗微生物剂组合使用：
其中
虚线代表可以不存在或存在的键，条件是两个双键不相邻，
n为0或1，
r1为h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，
r2为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2为h，
r3为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、o-(c2-c4烯基)，有利地r3为h，
r2和r3可以一起形成相应的内酯，
·当n为0时，
οz为co-r5基团，其中r5为oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地为o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，
·当n为1时，
οz为co-r5或ch2-o-co-(c1-c6烷基)或chmr7或c4-c10烷基或c4-c10烯基基团，所述c4-c10烷基或c4-c10烯基可以为直链或支链的，任选被oh取代；有利地这些基团不被取代，
ο其中r5为oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-(c2-c4烯基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地为o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，
ο或者其中r5为h，条件是r4为c2-c6烷基，或条件是r2为c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，
ο其中m为1或2；如果c1和c2之间的键为双键，则m为2，
ο其中r7为h或c1-c6烷基，
ο其中r4为h或c1-c6烷基，
式(i)的化合物：抗微生物剂的质量比为8:1至1:10，并且其中抗微生物剂不为萜类或苯丙素。
抗微生物剂有利地为西方常规药物的活性成分，将如下面所描述。特别地，抗微生物剂不是萜类或苯丙素，例如精油提取物或精油组分。
式(i)的化合物：抗微生物剂的质量比更特别地为4:1至1:10，更有利地为1:1至1:10，进一步有利地为1:1至1:5。
这意味着式(i)的化合物的施用剂量与抗微生物剂的施用剂量处于相同数量级。
质量比对应于施用至人或动物的化合物和抗微生物剂的剂量比(以mg/kg计)。
令人惊讶地，已注意到当根据本发明的化合物(或根据本发明的化合物混合物)的剂量增加时，增效作用降低。这种增效作用可以在单独的化合物的cmi处重新出现，但是这不是本发明的目的。
在本发明的范围内，在体外，观察到增效作用的非活性化合物的浓度与观察到抗微生物性质时的抗微生物性质的阈值(cmi)相距甚远。相距甚远是指体外浓度比cmi低至少10倍，有利地至少20倍，更有利地至少50倍，或进一步有利地至少100倍。
对于引起特别考虑的微生物感染的病原菌株a，化合物(i)的浓度满足以下方程式：
[c]<[cmi]/x
其中[c]为在菌株a中使用的根据本发明的化合物(i)的浓度，
[cmi]为在该菌株a中测定的单独的化合物(i)的cmi，
x高于或等于100，有利地高于或等于1000，更有利地x为2000至10000，或甚至高于50000。
在体外，化合物(i)的剂量低于100mg/l，有利地低于64mg/l，更有利地为0.01至25mg/l，更有利地为1至16mg/l。
在施用的组合物中，式(i)的化合物的每单位剂量每千克的浓度有利地低于100mg，更有利地低于64mg。
可以以低浓度(体外浓度为约1μg/ml)使用化合物(i)，使抗微生物剂增效，其与在人或动物中的未来应用非常相容(特别是如果旨在全身施用)。
这使得能够考虑在人或动物中的剂量为低于64mg/kg，有利地为0.01至64mg/kg，更有利地为0.5至40mg/kg，进一步有利地为5至30mg/kg。
有利地以一定的浓度施用根据本发明的增效剂化合物，在此浓度在施用后其最大血清浓度低于250mg/l，有利地低于150mg/l，更有利地为10至150mg/l。
当然，可以将化合物以这些浓度施用至人和动物，包括全身施用，并且没有较大的副作用，特别是致癌性或遗传毒性。
根据本发明的化合物(或根据本发明的化合物混合物)：抗微生物剂的质量比每次都依赖于所使用的抗微生物剂，并且将使其适应于每种情况。
例如，对于通常以每次施用1000mg剂量施用的情况下的阿莫西林，式(i)的化合物的剂量可以为每次施用300至850mg，或更小。然而，对于通常通过肺部途径以1mui剂量施用的粘菌素，式(i)的化合物的剂量可以为0.1至0.8mui，或甚至更小。
用别的方法说，本发明的一个目的为一种与耐受机制无关的用于使抗微生物剂的抗微生物活性增效的方法，其包括以下步骤：
a)选择式(i)的化合物，其在考虑的剂量单独无治疗活性(用于抗感染目的)，
b)制备组合物，其包含步骤a)中选择的化合物和抗微生物剂。
本发明的另一个目的还为一种用于在受试者中治疗和/或预防微生物感染的方法，其包括将抗微生物剂和式(i)的化合物共同施用至具有所述微生物感染的受试者。
使化合物和抗微生物剂适用于向人或动物同时、分别或随时间延续施用。
抗微生物剂优选为抗生素。其也可以为抗真菌剂。
令人惊讶地，已经注意到，以这种低浓度使用的式(i)的化合物能够使抗微生物剂的活性增效。因此，这些增效剂的使用有利地使得所述抗微生物剂能够以较低浓度使用和/或以通常的浓度使用，同时比在相同剂量单独的抗微生物剂具有更高的活性(增加作用强度或作用动力学)。
具体地，本发明特别地能够：
a/剂量降低而作用不变：降低用于抑制/破坏通常敏感的微生物的抗微生物剂的必需量，
b/作用增强而剂量不变：增强抗微生物剂抑制/破坏敏感细菌的能力(改善作用动力学、作用强度，并将抗微生物剂的活性谱扩大到对抗微生物剂不稳定敏感或耐受的细菌)。
降低抗微生物剂的施用剂量(a/)不仅从人或动物中的微生物感染的治疗角度看(特别是减少副作用)是有意义的，而且从环境的角度看(降低抗微生物剂耐受的发生)也是不可忽视的。以较低的剂量使用已知的抗微生物剂可以有助于对抗新的耐受机制的发生。特别地，可以以降低的剂量使用抗微生物剂，在此抗微生物剂的施用剂量对应于抗微生物剂的必需剂量的1/50至3/4，所述必需剂量为没有共同施用根据本发明的化合物时用于施用至受试者(人，动物)以治疗微生物感染所需的剂量。抗微生物剂的剂量降低而作用不变使得所述抗微生物剂的毒性受到限制。在商品动物的应用中，这能够降低屠宰之前的延迟时间。
剂量的降低也使得能够考虑重新使用一些抗微生物剂，所述抗微生物剂因为在其有效剂量具有重要的副作用而迄今不能再被施用，并且所述抗微生物剂可以再次被有效地施用至人或动物而具有小的副作用。
增强抗微生物剂的作用而剂量不变(b/)具有一定的临床意义，无论是从定量的角度改善抗微生物作用的动力学，还是从定性的角度使得能够用抗微生物剂治疗具有微生物感染的患者(人或动物)，在没有增效时菌株对所述抗微生物剂是敏感的或不稳定敏感的。抗微生物效率的提高能够减少患者或动物在“感染”状态下所花费的时间，从而减少疾病流行病学以及耐受的出现和扩散。
由于根据本发明的化合物的存在，能够在不变的抗微生物剂的剂量下提高抗微生物剂的杀菌率。因此，增效的抗微生物剂的作用速率可以提高。对于浓度依赖性抗微生物剂尤其如此。
由于根据本发明的化合物的存在，抗微生物剂的谱可以被扩大，特别是在不变的抗微生物剂的剂量下。因此，可以在菌株中使用被根据本发明的化合物增效的抗微生物剂，在没有增效时所述菌株对所述抗微生物剂不再敏感(特别是因为耐受的发生)。
在一个实施方案中，式(i)的化合物足以使抗微生物剂增效，结果是单个的式(i)的化合物的使用足以使抗微生物剂增效。然而，在一些情况下，可以考虑无活性化合物的组合使用。当想要广谱活性时尤其如此。特别地，为了使抗生素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌增效，共同施用特别地为革兰氏阳性菌增效剂的根据本发明的化合物和特别地为革兰氏阴性菌增效剂的根据本发明的化合物会是有用的。
苯丙烷类包含被至少一个脂族取代的c6芳基骨架：
在c1和c2之间或在c2和c3之间的双键c＝cc6芳基骨架可以包含一个或多个取代基。
根据本发明的化合物有利地具有10个至18个，更有利地10个至15个的碳原子。
根据本发明的化合物有利地具有低于350g/mol，有利地低于300g/mol，更有利地120g/mol至280g/mol的分子量。
最有利的化合物为纯烃(仅碳原子和氢原子)，或者当它们包含氧原子时，所述氧优选为酯或醚的形式。
化合物有利地具有高于2，更有利地2至5的logp值。
化合物有利地具有低的水溶性。特别地，水溶性有利地低于500mg/l，更有利地为0.001mg/l至50mg/l，进一步有利地为0.001至20mg/l。
根据本发明的化合物可以有利地形成0个至1个氢键，更有利地形成0个氢键。
在第一替代方案中，化合物具有下式(ia)：
其中
n为0或1，
r1为h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，
r2为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2为h，
r3为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)，有利地r3为h，
r2和r3可以一起形成相应的内酯，
·当n为0时，
οr5为oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地为o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，
·当n为1时，
οr4为h或c1-c6烷基，
οr5为o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-(c2-c4烯基)-苯基、c1-c6烷基，
οr5为h，条件是r4为c2-c6烷基，或条件是r2为c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，
οr5为oh，条件是r2为c1-c6烷基，
有利地，r5为o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、c1-c6烷基。
更有利地，
n为0或1，
r1为h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，
r2为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2为h，
r3为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)，有利地r3为h，
r2和r3可以一起形成相应的内酯，
·当n为0时，
οr5为oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地为o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，
·当n为1时，
οr4为h或c3-c6烷基，
οr5为o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基，
οr5为h，条件是r4为c3-c6烷基，或条件是r2为c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，
οr5为oh，条件是r2为c3-c6烷基，
有利地，r5为c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基。
在一个替代方案中，n为0。在该替代方案中，r5有利地为oh、o-c1-c3烷基、o-(c1-c2烷基)-苯基。r1有利地为h或c1-c4烷基或c2-c4烯基。r2有利地为h或oh、o-(c1-c4烷基)。r3有利地为h。
在该替代方案中，根据本发明的优选的化合物为苯甲酸、水杨酸甲酯、苯甲酸苄酯。
在第二替代方案中，化合物具有下式(ib)：
其中
r1为h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，
r2为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2为h，
r3为h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、o-(c2-c4烯基)，有利地r3为h，
r2和r3可以一起形成相应的内酯，
z为ch2-o-co-(c1-c6烷基)。
在该替代方案中，r1有利地为h。r2有利地为h。r3有利地为h。z有利地为ch2-o-co-(c1-c4烷基)。
在该替代方案中，根据本发明的优选的化合物为乙酸肉桂酯和丙酸反式肉桂酯。
在本发明的范围内，微生物感染有利地为由选自以下潜在病原属的病原体诱导的感染：醋菌属(acetobacter)、醋酸杆菌属(acetobacterium)、不动杆菌属(acinetobacter)、柠檬酸杆菌属(citrobacter)、肠杆菌属(enterobacter)、肠球菌属(enterococcus)、埃希氏杆菌属(escherichia)、幽门螺杆菌属(helicobacter)、克雷伯氏菌属(klebsiella)、变形杆菌属(proteus)、普罗维登斯菌属(providencia)、假单胞菌属(pseudomonas)、沙门氏菌属(salmonella)、沙雷氏菌属(serratia)、葡萄球菌属(staphylococcus)、链球菌属(streptococcus)、放线杆菌属(actinobacillus)、奈瑟氏菌属(neisseria)、曼海玛氏属(mannheima)、巴氏杆菌属(pasteurella)、念珠菌属(candida)、曲霉属(aspergillus)、隐球菌属(cryptococcus)、毛孢子菌属(trichosporon)、马拉色氏霉菌属(malassezia)和分支杆菌属(mycobacterium)。
细菌菌株或物种有利地选自：醋菌属、醋酸杆菌属、不动杆菌属、放线杆菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、肠球菌属、埃希氏杆菌属、幽门螺杆菌属、克雷伯氏菌属、曼海玛氏属、巴氏杆菌属、变形杆菌属、普罗维登斯菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、沙雷氏菌属、葡萄球菌属和链球菌属。更特别地，细菌菌株或物种有利地选自柠檬酸杆菌(citrobacterfreundii)、产气肠杆菌(enterobacteraerogenes)、阴沟肠杆菌(enterobactercloacae)、大肠杆菌(escherichiacoli)、产酸克雷伯氏菌(klebsiellaoxytoca)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)、奇异变形杆菌(proteusmirabilis)、斯氏普罗威登斯菌(providenciastuartii)、沙门氏菌属物种(salmonellasp)、粘质沙雷氏菌(serratiamarcescens)、鲍曼不动杆菌(acinetobacterbaumannii)、洋葱伯克霍尔德氏菌(burkholderiacepacia)、铜绿假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)、葡萄球菌科(staphylococcaceae)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、屎肠球菌(enterococcusfaecium)和肠球菌属物种(enterococcussp.)。因此，细菌可以无差异地为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。
细菌更有利地选自铜绿假单胞菌、大肠杆菌、粪肠球菌(enterococcusfaecalis)、肺炎克雷伯氏菌和金黄色葡萄球菌。
真菌有利地选自：念珠菌属、曲霉属、隐球菌属、毛孢子菌属。真菌更有利地为白色念珠菌(candidaalbicans)。
分枝杆菌有利地为结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis)。
抗微生物剂可以为抗生素和/或抗真菌剂。在一个优选的替代方案中，式(i)的化合物和抗微生物剂不属于相同的化合物家族。因此，由于式(i)的化合物为萜类衍生物，因此抗微生物剂不为萜类，或甚至不为精油提取物或苯丙素。
可以在本发明中使用的抗生素有利地选自：
1.作用于细胞膜的抗生素，特别是β-丙氨酸类、青霉素类、头孢菌素类、糖肽类、磷霉素类、多粘菌素类、杆菌肽、环丝氨酸；
2.蛋白质合成抑制抗生素，特别是氨基糖苷类、四环素类、梭链孢酸、氯霉素及其衍生物、大环内酯类、林可酰胺类、链阳霉素类、协同菌素类和噁唑烷酮类；
3.核酸合成抑制抗生素，特别是喹诺酮类、硝基呋喃类、安沙霉素类和夫西地酸；
4.叶酸合成抑制抗生素，特别是磺酰胺类和磺酰胺组合；
5.霉菌酸合成抑制抗生素，特别是异烟肼、丙硫异烟胺、乙硫异烟酰胺、吡嗪酰胺；
6.任何其药学上可接受的盐，和
7.任何其组合。
优选地，抗生素选自：肽聚糖合成抑制抗生素、核酸合成抑制抗生素、叶酸合成抑制抗生素、霉菌酸合成抑制抗生素、任何其药学上可接受的盐、和任何其组合。特别有利的抗生素种类为肽聚糖合成抑制抗生素的种类。
特别地，抗生素选自：阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南、万古霉素、红霉素、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星、粘菌素、克林霉素、环丙沙星、替加环素。
在本发明的一个替代方案中，微生物感染为由球菌或革兰氏阳性杆菌型的细菌菌株诱导的细菌感染，并且抗微生物剂为阿莫西林。
在本发明的一个替代方案中，阿莫西林的剂量为1000mg/施用，桉树脑的剂量为1000mg/施用，有利地500mg/施用，更优选地250mg/施用。
在本发明的另一个替代方案中，微生物感染为由耐甲氧西林的大肠杆菌(e.coli)或金黄色葡萄球菌(s.aureus)型菌株诱导的细菌感染，并且抗微生物剂为阿莫西林/克拉维酸混合物。
在本发明的另一个替代方案中，阿莫西林/克拉维酸混合物：桉树脑比例为10:1、1:1或甚至1:5。
在本发明的另一个替代方案中，微生物感染为由肠杆菌型菌株假单胞菌属或金黄色葡萄球菌诱导的细菌感染，并且抗微生物剂为环丙沙星。
可以在本发明中使用的抗真菌剂有利地选自：
1.作用于细胞膜的抗真菌剂，特别是多烯类、唑类、烯丙胺类和硫代氨基甲酸酯类、棘白菌素类；
2.作用于核酸合成的抗真菌剂，特别是灰黄霉素、氟胞嘧啶；
3.作用于微管的抗真菌剂，特别是灰黄霉素。
抗真菌剂有利地选自多烯类、唑类类、烯丙胺类、硫代氨基甲酸酯类、棘白菌素类、灰黄霉素和氟胞嘧啶。
在本发明的另一个替代方案中，微生物感染为阴道霉菌病，并且抗生素为塞曲唑。
根据本发明的化合物有利地被全身施用。
可以在任何配制的药物组合物中使用根据本发明的化合物，从而有助于其施用。药物组合物可以包含通常使用的所有药学上可接受的赋形剂，如载体或稀释剂。
可以通过口服、肠内、肠外(静脉内、肌内或皮下、腹膜内)、经皮(transcutanée)(或透皮(tansdermique)或由皮(percutanée))、皮肤、粘膜(特别是经口腔、鼻、眼、耳、阴道、直肠粘膜)途径，或甚至胃内、心内、腹膜内、肺内或气管内途径施用药物组合物。
药物组合物可以为干燥形式(所述干燥形式在使用时被重新配制(粉末、冻干物等))，固体形式(特别是扁囊剂、粉末、胶囊、丸剂、颗粒、栓剂、片剂，更准确地说是加速释放片剂、肠溶包衣片剂或持续释放片剂)，糊状形式(特别是凝胶、软膏、霜剂或胚珠)，液体形式(特别是糖浆，可注射的、不熔的或可饮用的(酏剂)溶液或洗眼剂)，气雾剂形式(喷雾、蒸汽或气体)，贴剂形式，可注射形式(为水性、非水性或等渗溶液)。
另一方面，药物组合物可以被包装，用于以单次剂量(单剂量)或多次剂量(多剂量)的形式的施用。
可以在同一个药物组合物中或不同的药物组合物中，同时、依次或随时间延续施用抗微生物剂和根据本发明的化合物。在分别施用的情况下，药物组合物的形式可以是相似的或不同的；施用途径可以是相同的或不同的。
将由临床医生根据情况调整施用计划。施用途径和剂量随各种的参数而变化，例如随患者状况、感染类型和待治疗的感染的严重程度，或所使用的抗微生物剂而变化。
动物优选为哺乳动物，特别是人、宠物或商业动物。
具体实施方式
下面的实施例阐明了本发明。
cmi测量：根据前面定义的方案，根据有效的国际标准(clsi标准)，在琼脂固体介质中进行最小抑制浓度测量测试。可以预先在一种或多种溶剂(用水稀释的
与单独的抗生素的cmi相比较的增强剂(booster)的贡献以(cmiatb)/(cmiatb+增强剂)比例表示。从而，将增益(gain)定义为：
cmi50增益＝(单独的抗生素的cmi50)/(cmi50(抗生素+增强剂))
cmi90增益＝(单独的抗生素的cmi90)/(cmi90(抗生素+增强剂))
增强剂为上位术语，以指代式(i)的本发明的增效剂化合物。
除非另有说明，在表中所示的比例为质量比。
测试方案/测试菌株的描述。
-细菌菌株
测试的菌株从各种人样本(血液、尿液、肺部抽出物等)中分离。在以下实施例中研究的菌株选自下表的菌株：
表2
测试的酵母菌株(n＝33)属于白色念珠菌、热带念珠菌(candidatropicalis)、克氏念珠菌(candidakrusei)、近平滑念珠菌(candidaparapsilosis)、光滑念珠菌(candidaglabrata)物种。
在下面的实施例中，使用了以下缩写：
ac乙酸肉桂酯
bb苯甲酸苄酯
amox阿莫西林
amc
staph葡萄球菌
coli大肠杆菌
pyo铜绿假单胞菌
cip环丙沙星
实施例1：最小抑制浓度测量
所使用的质量比
-64/500对应于约1至8(记为1至8)
-64/100对应于约1至1.5(记为1至1.5)
-64/50对应于约1至0.75(记为1至0.75)
-64/10对应于约1至0.15(记为1至0.15)
已经测试了苯甲酸苄酯和乙酸肉桂酯对抗生素的增效作用。在表中所示的比例为质量比。
1-1/单独的增效剂产品的cmi(任何溶剂)
表2
以1％至0.00375％的连续稀释测试产品。>1％的值表示在所测试的浓度没有观察到细菌抑制。
等于1.00％的值对应于10000mg/l(即10g/l)。
测试显示，产品在大多数测试的溶剂中无活性(cmi>10000mg/l)。
1-2/稀释测试：阿莫西林
表3
测试显示，在葡萄球菌中，增效剂在低剂量使阿莫西林增效(单独的amox的cmi为0.25至32mg/l)。
1-3/稀释测试：阿莫西林，有氧对比于无氧(溶剂t/e)
表4
该测试显示，菌株所使用的代谢途径对阿莫西林的增效有影响。
1-4/稀释测试：奥格门汀，无氧(溶剂：t/e)
表5
该测试显示，菌株所使用的代谢途径对奥格门汀的增效有影响。
1-5/稀释：环丙沙星和比例影响(溶剂＝dmso)
表6
该测试显示，所使用的比例对增效有影响。其还证明了增效剂降低环丙沙星的cmi的能力。
1-6/稀释：环丙沙星，无氧(溶剂＝dmso)
表7
该测试显示，菌株所使用的代谢途径对环丙沙星的增效有影响。
1-7/稀释：庆大霉素(溶剂＝水)
表8
测试显示，增效剂在低剂量使环丙沙星增效(单独的庆大霉素的cmi为0.125至8mg/l)。
1_8/稀释：阿莫西林/克拉维酸
表9
该测试显示，所使用的比例对奥格门汀的增效有影响。
1-9/稀释：四环素(溶剂＝dmso)
表10
测试显示，增效剂使四环素增效。
1-10/稀释：舍他康唑(溶剂＝dmso)
表11
测试显示，增效剂使舍他康唑增效，而在念珠菌属中增效剂的cmi50和cmi90等于1％。在低剂量下，这种增效干扰(单独的舍他康唑的cmi为0.06至16mg/l)。该测试还令人惊讶地显示，在高的增效剂剂量的舍他康唑不被增效，而在低的增效剂剂量其被增效。
实施例2：e测试(etest)
基于通常的cmi测试进行相应的测试：将
在不同溶剂(
对照对应于无桉树脑时进行的测试。在所测试的每种溶剂中进行对照：蒸馏水、吐温/水和dmso。
ed对照＝在蒸馏水中的单独的抗生素
dmso对照＝在dmso中的单独的抗生素
指示“>64”是指cmi不能测量，因为其高于64mg/l，指示“<”是指在e-测试中没有可见的培养物。
表12-假单胞菌属
表13-大肠杆菌
表14-葡萄球菌属
所有这些e-测试的结果清楚地显示，增效剂能够在许多种菌株中使许多种抗生素增效。
实施例3：耐受
将待研究的菌株的100μlhintonmueller肉汤培养物(重接种体>1010ufc/ml)铺展在muellerhinton培养皿上，所述培养皿含有等于4倍待测试产品的cmi的油浓度。孵育48h后，观察到可能是耐受突变的菌落的存在或不存在。
已经注意到，苯甲酸苄酯或乙酸肉桂酯的使用还使得耐受细菌的发生降低。当单独使用时，在这些菌株中，苯甲酸苄酯或乙酸肉桂酯具有高于10000mg/l的cmi。
结果报告在下表中，其中：
ed对照或dmso＝仅加入蒸馏水或dmso
环丙沙星dmso：在dmso中加入环丙沙星
表15-菌株09003
在甲氧西林耐受的金黄色葡萄球菌(mrsa)中的单独的环丙沙星引起许多突变的发生，而将乙酸肉桂酯或苯甲酸苄酯加入至环丙沙星不再引起突变的发生。
表16-菌株10168
在甲氧西林耐受的金黄色葡萄球菌(mrsa)中的单独的环丙沙星引起许多突变的发生，而将乙酸肉桂酯或苯甲酸苄酯加入至环丙沙星不再引起突变的发生。
实施例4：生长测试
1在菌株10168sarm中的生长测试
在液体介质中进行生长测试，在此之前将在合适的溶剂中的抗生素的增强剂分散于所述液体介质中。
在
99/1表示64/100质量比。
4xcmi是指抗生素的浓度是其cmi的4倍高，当在被考虑的菌株中单独使用所述抗生素时测量所述cmi。
奥格门汀64/100ac4xcmi是指
对照＝单独的细菌
结果报告在下表中。
表17
应注意，以非常低的剂量存在的乙酸肉桂酯或苯甲酸苄酯，使得
实施例5：血浆抗菌功效
向balb/c小鼠注射(sc.)抗微生物产品或抗微生物剂+增强剂混合物。施用的剂量如下：
组1：30mg/kg
组2：30mg/kg
在不同的注射后时间，将小鼠安乐死，并将血液采样，肝素化并离心，以提取其血浆。
进行血浆的一系列连续稀释(1/3)，并将这些不同血浆浓度的液滴沉积到接种的bairdparker介质上(mrsa10168用于组amc)。在孵育24h后测量抗菌作用。连续稀释使得抗微生物作用被确定，并与cmi作比较。因此，确定有效浓度/cmi比例。
结果报告在下表中：
表18
时间>cmi：超过cmi所花费的时间
auc：曲线下面积
通过血浆的连续稀释获得血浆浓度与cmi的比例。虽然这种方法是半定量的，但是其能够显示当存在苯甲酸苄酯时作用更强烈(更高的auc)。此外，明确地，苯甲酸苄酯的加入使得超过cmi所花费的时间延长。