本发明属于日用化工领域，涉及一种改善皮肤健康状况的天然组合物。
背景技术：
皮肤松垂、瘙痒、粗糙、色斑、皱纹、痤疮等是常见的皮肤问题。造成这些问题的原因很多，如环境污染、紫外线辐射、细菌感染、肌肤敏感等。目前一般的护肤产品功效比较单一,要么针对于肌肤本身，如降低敏感性、改善细胞代谢等，要么针对于外部防护，如防紫外线辐射、防细菌感染等。少有能够内外结合的产品，难以全面保证皮肤的健康，且配方中会使用多种化工合成的成分，对肌肤反而有伤害。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供一种来源于天然植物的改善皮肤健康状况的天然组合物。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是：
一种改善皮肤健康状况的天然组合物，包括以下重量份的原料：石榴皮提取物3-8份、积雪草提取物3-8份、苦参提取物1-5份、山竹提取物1-5份、灰树花提取物8-15份。
进一步，包括以下重量份的原料：石榴皮提取物5－6份、积雪草提取物6－7份、苦参提取物2－3份、山竹提取物3－4份、灰树花提取物11－12份。
其中，所述石榴皮提取物中鞣花酸含量≥40wt%。积雪草提取物中积雪草总甙含量≥10wt%。苦参提取物中苦参碱、氧化苦参碱总含量≥20wt%。山竹提取物中倒捻子素含量≥5wt%。灰树花提取物中多糖含量≥20wt%。
本发明之改善皮肤健康状况的天然组合物，将各原料混合后，以质量百分比≥0.04％（优选0.1%-0.2%）添加到护肤品中。
本发明采用石榴皮提取物，其中有效成分鞣花酸能有效抑制弹性蛋白酶活性，清除多种自由基，从而延缓皮肤衰老，增强皮肤弹性。积雪草提取物可以预防由皮肤衰老引起的免疫失调，预防因外因刺激引起的皮肤衰老，防治皮肤或粘膜病变，如皮肤萎缩、松垂、瘙痒、粗糙等。苦参提取物对皮肤过敏性疾病临床疗效好，在中医治疗中具有除湿去痒的功效，且无副作用。山竹提取物中活性成分倒捻子素具有较强的抗炎、抗组胺及抗皮肤过敏的作用，对紫外线辐射防护效果好。灰树花提取物能够促进皮肤细胞新陈代谢，增强皮肤防御机能，预防和减缓因紫外线辐射引起的皮肤衰老或皮肤污染引起的炎症，以及细菌或激素引起的痤疮等皮肤病，促进伤口愈合。
与现有产品比较，本发明具有以下优点：
（1）所有成分均来源于天然植物，产品使用安全。
（2）功效广泛，具有防辐射，抗衰老，降低肌肤敏感度、阻止内外炎症因子对肌肤的损害，修复创伤，止痒等多重功效，有效改善皮肤健康状况。
(3)所有原料经提取后，营养成分、功效成分得到富集，能大大降低添加剂量。
本发明以植物来源的天然成分为组分，配比合理，得到具有抗菌、抗过敏、抗氧化、抗辐射四方面作用的产品，由内到外改善肌肤的健康状况。将本发明产品添加到护肤品中，使用安全、功能广泛，能防辐射，抗衰老，降低肌肤敏感度、阻止内外炎症因子对肌肤的损害，修复创伤，止痒等，能有效改善皮肤健康状况，是安全有效的护肤产品。
具体实施方式
以下根据具体实例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于以下实施例。
实施例1
本实施例之组合物，包括以下原料：
石榴皮提取物3kg、积雪草提取物8kg、苦参提取物2kg、山竹提取物5kg、 灰树花提取物10kg。
其中，所述石榴皮提取物中鞣花酸含量≥40wt%。积雪草提取物中积雪草总甙含量≥10wt%。苦参提取物中苦参碱、氧化苦参碱总含量≥20wt%。山竹提取物中倒捻子素含量≥5wt%。灰树花提取物中多糖含量≥20wt%。
实施例2
本实施例之组合物，包括以下原料：
石榴皮提取物5kg、积雪草提取物 6kg、苦参提取物 2kg、山竹提取物 3kg、灰树花提取物 12kg。
其中，所述石榴皮提取物中鞣花酸含量≥40wt%。积雪草提取物中积雪草总甙含量≥10wt%。苦参提取物中苦参碱、氧化苦参碱总含量≥20wt%。山竹提取物中倒捻子素含量≥5wt%。灰树花提取物中多糖含量≥20wt%。
实施例3
本实施例之组合物，包括以下原料：
石榴皮提取物8 kg、积雪草提取物 3 kg、苦参提取物 5 kg、山竹提取物 1 kg、灰树花提取物 15 kg。
其中，所述石榴皮提取物中鞣花酸含量≥40wt%。积雪草提取物中积雪草总甙含量≥10wt%。苦参提取物中苦参碱、氧化苦参碱总含量≥20wt%。山竹提取物中倒捻子素含量≥5wt%。灰树花提取物中多糖含量≥20wt%。
实施例4
本实施例之组合物，包括以下原料：
石榴皮提取物8 kg、积雪草提取物 5 kg、苦参提取物 1 kg、山竹提取物 3 kg、灰树花提取物 8 kg。
其中，所述石榴皮提取物中鞣花酸含量≥40wt%。积雪草提取物中积雪草总甙含量≥10wt%。苦参提取物中苦参碱、氧化苦参碱总含量≥20wt%。山竹提取物中倒捻子素含量≥5wt%。灰树花提取物中多糖含量≥20wt%。
应用实施例
以下通过动物实验和理化实验说明本发明在抗紫外线辐射、抗衰老、抗皮肤过敏方面的有益效果。
1. 抗紫外线辐射实验
1.1材料
化妆品用纳米级二氧化钛（TiO2）。芦丁，质量百分含量≥98%。本发明实施例1、2、3、4组合物产品。
1.2实验方法
1.2.1供试液制备：分别取本发明实施例1、2、3、4产品和芦丁、二氧化钛，用质量浓度为10%的DMSO溶液溶解，分别配制成实施例1、2、3、4产品和芦丁、二氧化钛质量浓度为0.05、0.20、0.40、0.60、0.80和1.00 mg/mL浓度的供试液。
1.2.2透光率测定：使用UV-5100型紫外/可见光分光光度计依次在紫外UVA区400、380、360、340和320 nm，UVB区320、300和280 nm，UVC区280、260、246、240、220和200 nm，测定各供试液的透光率，平行测定3次，计算平均吸收率：A%=100%-T%。结果如表1、2、3所示。
1.2.3 吸光度的测定： UV-2450紫外可见分光光度计测定各供试液在200-400 nm的全波长吸收曲线。平行测定3次（n=3），计算平均吸收率：A%=S1/S2*100%,(S1为200-400nm扫描样品曲线下面积；S2为200-400 nm区域间总面积)。结果如表4所示。
1.3 实验结果
如表1、2、3所示，在浓度为0.05 mg/mL时，在UVA和UVB区只有本发明实施例1、2、3、4产品的紫外光吸收率＞85%。在浓度为0.4 mg/mL时，在UVC区只有本发明实施例1、2、3、4的紫外光吸收率＞90%。在浓度大于0.6 mg/mL时，在UVA、UVB和UVC区，所有供试液对紫外光的吸收率增加不明显，且不再呈剂量依赖性关系。说明，本发明产品在浓度为0.4 mg/mL时，具有较好的抗紫外线作用，且优于芦丁和TiO2。
如表4所示，在浓度为0.2 mg/mL时，本发明实施例产品的吸收率就已经＞80%，在浓度为0.4 mg/mL时，本发明实施例产品的吸收率＞90%，远远高于芦丁和TiO2。说明本发明产品抗紫外线作用较好。
2.抗衰老性能
2.1 材料
二苯代苦味酰基自由基、刚果红-弹性蛋白、猪胰弹性蛋白酶、维生素C等。
HH-S2数显恒温水浴锅、TU-1901紫外分光光度计、Cary Eclipse荧光光度计、SHZ-82水浴恒温振荡器。
2.2 实验方法
2.2.1对DPPH自由基的清除作用：用甲醇分别配制浓度为1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 μg/mL的本发明实施例1、2、3、4产品，以甲醇配制浓度为0.04 mg/mL的 DPPH溶液。分别移取各浓度下实施例1、2、3、4的产品1 mL及3mL DPPH溶液于具塞试管中，充分混匀后，室温下避光静置30 min 后于517 nm 下测定吸光度值A1。以1 mL甲醇代替各实施例产品溶液作空白测定吸光度A0，以3 mL甲醇代替DPPH溶液测定样品溶液的吸光度A2。以维生素C为对照品。按照下式计算DPPH自由基的清除率：
DPPH自由基的清除率=（1-（A1 -A2）/A0）×100 %。
结果如表7所示。
2.2.2 对羟基自由基的清除作用：用甲醇分别配制浓度为0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mg/mL的本发明实施例1、2、3、4产品溶液，按照表5，于各试管中依次加入磷酸缓冲液（PBS）、邻二氮菲、FeSO4、样品溶液（各实施例产品溶液）、蒸馏水和H2O2（标为“—”表示不添加）。将上述试管同时置于恒温水浴槽中并在37℃下保温60min，于510 nm 处测定各组吸光度值，平行测定3次，取平均值。以维生素C 为对照品，按照下式计算羟基自由基的清除率：
羟基自由基的清除率=（A样品-（A损伤-A空白））/（A未损-A损伤）×100%。
结果如表8所示。
2.2.3 对弹性蛋白酶抑制率的测定：以pH 8.8硼酸盐缓冲溶液分别配制浓度为1、2、3、4、5mg/mL的本发明实施例1、2、3、4产品溶液。
按照表6所示量，于具塞三角烧瓶中依次加入刚果红-弹性蛋白、pH8.8硼酸缓冲溶液，置于37 ℃水浴中预热10 min，然后加入不同浓度的样品溶液（即本发明实施例1、2、3、4产品溶液）和/或0.2 mg/mL弹性蛋白酶溶液（每个浓度设4个不同的实验，表中所示“—”表示不添加）。将上述反应体系置于37 ℃恒温水浴振荡器中振摇20 min，立即加入5.0mL pH 6.0磷酸缓冲溶液混合终止反应，于5 000 r/min 下离心15 min。准确吸取上清液2.0 mL，加入pH 8.8硼酸缓冲液和pH 6.0磷酸缓冲液等量混合液2.0 mL，充分摇匀并于495 nm测定其吸光度，抑制率计算公式如下：
抑制率=（1-（A1 -A2）/（B1 -B2））×100%。
结果如表9所示。
2.3 实验结果
如表7、8、9所示，在浓度为9μg/mL时，本发明实施例1、2、3、4产品对DPPH自由基的抑制率均＞90%，显著高于同浓度下维生素C的抑制率（52%）。在浓度为0.2 mg/mL时，本发明实施例1、2、3、4产品对羟基自由基的抑制率均＞90%，显著高于同浓度下维生素C的抑制率（3.8%）。在浓度为0.25 mg/mL时，羟基自由基清除率接近100％，故未测定。说明本发明产品抗自由基活性优于维生素C，具有较强的抗衰老作用。表9数据表明，在浓度为4 mg/mL时，本发明实施例1、2、3、4产品对弹性蛋白酶的抑制率均＞90%，进一步证明了本发明产品的抗皮肤衰老作用。
3.抗皮肤过敏试验
3.1实验材料
实验动物：昆明小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g；阳性对照药：复方醋酸地塞米松乳膏(皮炎平)； 二甲苯，4-氨基吡啶，组胺试剂盒等。实验仪器：Heidolph×900匀浆机；离心沉淀机(Beckmal1．Auegra mR)；酶标仪(Bio-RadModel 680)；分析天平。
3.2 实验方法
3.2.1 小鼠耳肿胀实验：健康昆明种小鼠140只，雌雄各半，体重18g-22g，随机分为本发明实施例1、2、3、4产品高（0.1g/mL）、中（0.05g/mL）、低（0.01 g/mL）剂量组，模型对照组，复方醋酸地塞米松乳膏(皮炎平)阳性对照组，每组10只。各组小鼠分别在右耳前后两面涂二甲苯致炎(O.02 mL/只)，致炎后在右耳分别用相同剂量的药物在第0.5、1、2 h涂擦试药，模型对照组涂等量蒸馏水。4h后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下双耳，用8mm打孔器在左右耳相同部位打下圆耳片，在分析天平称重，以两耳片重量差为炎症肿胀度，并计算肿胀抑制率。结果如表10所示。
3.2.2 止痒实验：健康昆明种小鼠150只，雌雄各半，体重18g-22g。随机分为本发明实施例1、2、3、4产品高（0.1g/mL）、中（0.05g/mL）、低（0.01 g/mL）剂量组，模型对照组、空白对照组、复方醋酸地塞米松乳膏(皮炎平)阳性对照组，每组10只。用8％ 硫化钠酒精溶液在背部脱毛(2cm×3cm)，将受试药（即各实施例不同浓度的产品及对照产品）涂布于脱毛区皮肤上，每天1次，连续给药7d，模型对照组和正常对照组（空白对照组）涂布等量蒸馏水。
末次给药40min后于颈背部涂药部位的皮下注射4-AP(以生理盐水为溶剂配成 0.02％的质量浓度)溶液0.01 mL/g（根据小鼠的体重来决定注射量），空白对照组注射生理盐水。记录各组在10min内的舔体次数(以连续舔体至出现短暂停顿，作舔体1次计算)。结果如表11所示。
3.2.3 皮肤组胺浓度测定：将止痒实验完成的小鼠立刻颈椎脱臼处死，剪下相同部位等面积(1.5cm×2cm)的致敏皮肤，制成组织匀浆；用试管法测定组织总蛋白浓度，采用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒测定组织匀浆组胺浓度。
3.2.4 统计学处理：计量资料用 x±s表示。用SPSS13.0统计软件进行统计学处理，组间比较用t检验。结果如表12所示。
3.3 实验结果
如表10所示，各给药组小鼠耳肿胀度与模型对照组比较，肿胀程度较轻，差异均有显著性意义(P＜0．01)；高、中剂量试药组与阳性对照组比较，差异无显著性意义(P>0.05)，低剂量试药组与阳性对照组比较，差异有显著性意义(P＜0.05)。说明本发明实施例1、2、3、4产品在高、中、低剂量均具有减轻肿胀的作用，且高、中剂量作用明显优于低剂量。
如表11所示，模型组与空白对照组比较，舔体次数明显增多，差异有显著性意义(P<O.01)；本发明实施例1、2、3、4产品高、中、低剂量组均能明显减少4-AP诱导的皮肤瘙痒模型的舔体反应次数，与模型对照组比较，差异均有显著性意义(P<0．01)；高剂量组与阳性对照组比较差异没有显著性意义(P>0.05)。
如表12所示，模型组的皮肤匀浆组胺浓度明显高于空白组，差异有显著性意义(P<0.01)；阳性对照组和本发明实施例1、2、3、4产品高、中、低组的皮肤匀浆组胺浓度明显低于模型组(P<0.01)，本发明实施例1、2、3、4产品各剂量组与阳性对照组之间比较无明显差异(P>0.05)
实验结果表明，本发明实施例产品具有较强的抗皮肤过敏作用。