本发明属于医药技术领域，具体涉及一种灯银脑通药物组合物的新用途。
背景技术：
高原反应，又称急性高原反应（AcuteMountainSickness，AMS）或高原病，是指常驻平原地区的人员未经特殊训练即进入高原地区，由于大气压中氧分压降低，机体对低氧环境耐受性降低，难以适应而造成缺氧、疲劳、血压升高、头痛头昏、胸闷气短、恶心呕吐等一系列病理性反应。高原反应是人体对高原缺氧环境的一种急性的应激性反应，轻者会影响人们的生活、工作和学习，重者则会引发高原脑水肿（HACE）和高原肺水肿（HAPE），甚至危及生命。目前，人们对高原疾病的发病机制、病理生理、临床表现及防治疗原则已日趋明了。一般认为，在高原缺氧启动因子的作用下，机体出现一系列生理失调为发生高原反应（AMS）的病理生理基础，诱发高原反应的关键是高原缺氧引起的肺血管收缩（HPV），肺动脉压增高和缺氧使大脑皮层对皮下中枢的调节功能减弱,引起小动脉收缩。目前防治高原反应的最佳方案仍为药物治疗。常用的药物包括化学药如苯丙胺、乙酰唑胺、硝苯地平、氨茶碱、盐酸苄达明、地塞米松等，中草药或中成药如人参、红景天、枸杞、刺五加、复方丹参滴丸等。现有的这些药物中，化学药毒副作用大，不能长期服用，而人参、红景天等中药又存在防治效果不佳或经济成本过高等问题，难于满足临床需要。因此，研究与开发高效、经济及适用性强的抗高原反应药物具有十分重要的现实意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种灯银脑通药物组合物的新用途。本发明的目的是这样实现的，所述的灯银脑通药物组合物在制备降血压、抗疲劳和/或抗高原反应药物中的用途。“灯银脑通”全方由灯盏细辛、满山香、银杏叶、三七四味中药组成，原名“脑瘫灵”，最早流传于云南省昆明、玉溪等地区，民间用于治疗中风、偏瘫具有良好的效果。在该方基础上开发出的现有品种灯银脑通胶囊，收载于国家药品标准WS-10843（ZD-0843）-2002中，具有行气活血，散瘀通络的功效，主要用于治疗中风、偏瘫、动脉硬化等疾病，并对老年痴呆症具有一定的防治效果。相关文献如：1）李特,等.灯银脑通胶囊对衰老小鼠的促智作用究[J].云南中医中药杂志2009,30（3）:51-52；2）王冰.灯银脑通胶囊治疗脑梗死后遗症疗效观察[J].中国实用神经疾病杂志，2008，22（8）:70-71;3）王宏.灯银脑通胶囊治疗缺血性中风后遗症30例[J].中医药导报,2013,19（6）:109-110；)本发明人对灯银脑通进行了长期的多年研究，通过系统的药理和临床研究，发现灯银脑通除具有治疗中风、偏瘫、动脉硬化、老年痴呆的效果外，还具有降血压、抗缺氧、抗疲劳、抗高原反应等方面的新的药理作用和用途，用于降血压、抗缺氧、抗疲劳和/或抗高原反应具有良好的效果。在本发明实施例中，发明人利用灯银脑通中药组合物进行了降血压的药理实验，结果表明，灯银脑通中药组合物具有明显的降血压作用，可以用于制备防治高血压的药物。在本发明实施例中，发明人利用灯银脑通中药组合物进行了抗缺氧、抗疲劳的药理实验，结果表明，灯银脑通中药组合物具有明显的抗缺氧、抗疲劳作用，可以用于制备抗缺氧、抗疲劳的药物。在本发明实施例中，发明人还进行了灯银脑通中药组合物治疗急性高原反应临床实验研究，结果表明，灯银脑通中药组合物对急性高原反应具有良好的治疗效果，因此，其可以用于制备抗高原反应的药物。本发明制备的灯银脑通中药组合物具有降血压、抗缺氧、抗疲劳和/或抗高原反应的良好效果，在临床上有广阔的应用前景。本发明提供的灯银脑通中药组合物具有药材基源明确，制备方法科学合理、操作简单，产品质量稳定可控等优点，适合于产业化大规模生产。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。本发明所述的灯银脑通药物组合物的新用途为所述的灯银脑通药物组合物在制备降血压、抗疲劳和/或抗高原反应药物中的用途。所述的灯银脑通药物组合物是以原料重量份的灯盏细辛30~60份、满山香30~60份、银杏叶30~60份和三七10~30份经以下步骤制备得到，具体为：A、前处理：按配方配比称取原料灯盏细辛、满山香、银杏和三七，灯盏细辛和银杏叶碎断至1~3cm，满山香和三七粉碎过10目筛备用；B、提取：将前处理后的各原料置于提取罐中，加入重量比10~15倍的体积浓度50~70%的乙醇溶液，于10~30℃下浸润0.5~1.5h，然后于60~80℃回流提取2~4次，每次1.5~2.5h，合并提取液，过滤，收集滤液；C、后处理：将B步骤得到的滤液于60~80℃真空喷雾干燥得到目标物灯银脑通药物组合物。所述的灯盏细辛系菊科飞蓬属植物短葶飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant.）Hand—Mazz．的干燥全草。所述的满山香系五味子科五味子属植物满山香Schisandrapropinquo(Wall.)Hook.f.etThoms的干燥茎藤。所述的三七系五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根茎。所述的灯银脑通药物组合物中野黄芩苷含量大于或等于0.5%，萜类内酯含量大于或等于1.0%，三七总皂苷含量大于或等于2.0%。所述的灯银脑通药物组合物可加入药学上可接受的辅料制备为口服制剂或外用制剂。所述的口服制剂为片剂、胶囊剂、口服液或酒剂。所述的外用制剂为贴剂、膏剂、巴布剂、搽剂、喷雾剂、气雾剂、滴剂或酊剂。下面以实施例对本发明做进一步说明：实施例1灯银脑通中药组合物1的制备1、药材基源与产地灯盏细辛：本实验所用的中药灯盏细辛系菊科飞蓬属植物短葶飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant.）Hand—Mazz．的干燥全草，产地为云南红河州，由红河千山生物制药有限公司提供。满山香：本实验所用的中药满山香系五味子科五味子属植物满山香Schisandrapropinquo(Wall.)Hook.f.etThoms的干燥茎藤，产地为云南玉溪，由云南省一心堂中草药有限公司提供。三七：本实验所用的中药三七系五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根茎，产地为云南文山，由云南省一心堂中草药有限公司提供。银杏叶：本实验所用的中药银杏叶系银杏科植物银杏GinkgobilobaL.的干燥叶，产地为云南昆明，由云南省一心堂中草药有限公司提供。2、处方灯盏细辛60kg，满山香60kg，银杏叶30kg，三七10kg。灯盏细辛与满山香、银杏叶、三七重量比为60:60:30:10。3、制备方法：1）称取灯盏细辛60kg，满山香60kg，银杏叶30kg，三七10kg，灯盏细辛、银杏叶适当碎断至1-3cm，满山香和三七粉碎过10目筛，置于蒸气夹套提取器中，加入2400kg浓度为50%的乙醇室温浸泡1小时，然后开启夹套加热，于60-70℃下回流提取三次，每次2小时；2）合并上述提取液，用型号为2815的丙纶单丝滤布过滤，收集滤液，于70-80℃真空喷雾干燥，得粉末状提取物12.6kg，即得。提取物得率7.9%（按原药材投量计）。实施例2灯银脑通中药组合物2的制备1、药材基源与产地同实施例1。2、处方灯盏细辛30kg，满山香30kg，银杏叶60kg，三七30kg。灯盏细辛与满山香、银杏叶、三七重量比为30:30:60:30。3、制备方法：1）称取灯盏细辛30kg，满山香30kg，银杏叶60kg，三七30kg，灯盏细辛、银杏叶适当碎断至1-3cm，满山香和三七粉碎过10目筛，置于蒸气夹套中药提取器中，加入1500kg浓度为70%的乙醇室温浸泡1小时，然后开启夹套加热，于70-80℃下回流提取三次，每次2小时；2）合并上述提取液，用型号为2815的丙纶单丝滤布过滤，收集滤液，于60-70℃真空喷雾干燥，,得粉末状提取物12.7kg，即得。提取物得率8.5%（按原药材投量计）。实施例3灯银脑通中药组合物3的制备1、药材基源与产地同实施例1。2、处方灯盏细辛50kg，满山香50kg，银杏叶50kg，三七20kg。灯盏细辛与满山香、银杏叶、三七的重量比为50:50:50:20。3、制备方法1）称取灯盏细辛50kg，满山香50kg，银杏叶50kg，三七20kg，灯盏细辛、银杏叶适当碎断至1-3cm，满山香和三七粉碎过10目筛，置于蒸气夹套中药提取器中，加入2000kg浓度为60%的乙醇室温浸泡1小时，然后开启夹套加热，于65-75℃下回流提取三次，每次2小时；2）合并上述提取液，用型号为2815的丙纶单丝滤布过滤，收集滤液，于65-75℃真空喷雾干燥，得粉末状提取物13.9kg，即得。提取物得率8.2%（按原药材投量计）。实施例4灯银脑通中药组合物的质量检测1、供试样品灯银脑通中药组合物1：简称“组合物1”，按本发明实施例1制备；灯银脑通中药组合物2：简称“组合物2”，按本发明实施例2制备；灯银脑通中药组合物3：简称“组合物3”，按本发明实施例3制备；2、实验仪器与试剂Agilent1200高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；B204-N型电子天平（瑞士Mettler公司）。野黄芩苷对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、三七皂苷R1对照品、白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品，由中国生物制品检验所提供；其他试剂均为分析纯，水为去离子水。3、实验方法3.1野黄芩苷含量的测定色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液（40:60）为流动相；流速为每分钟1.0ml;柱温40℃；检测波长335nm。理论板数按野黄芩苷峰计算应不低5000。对照品溶液的制备：取野黄芩苷对照品10mg,精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml,超声处理45分钟，取出，放置室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备：取供试样品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml,超声处理45分钟，取出，放置室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5µl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。3.2三七总皂苷含量的测定色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为203nm；理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.4mg、人参皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取供试样品0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过液，置80℃水浴上加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10µl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本品三七皂苷总量以人参皂苷Rg1（C42H72O14）、人参皂苷Rb1（C54H92O23）和三七皂苷R1（C47H80O118）的总量计。3.3萜类内酯的含量测定色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丙醇-四氢呋喃-水（1:15：84)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低2500。对照品溶液的制备：分别取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml各含2mg、lmg、lmg、lmg的混合液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备：取供试样品约0.15g，精密称定，加水10ml,置水浴中温热使溶散，加2%盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次（15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5%醋酸钠溶液20ml洗涤，分取醋酸钠液，用乙酸乙酯10ml洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗涤液，用水洗涤2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液10µl、15µl及供试品溶液10µl，注入高效液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、和银杏内酯C的含量，即得。本品萜类内酯以白果内酯（C15H18O8）、银杏内酯A（C20H24O9）、银杏内酯B（C20H24O10）和银杏内酯C（C20H24O11）的含量之和计。4．实验结果本发明灯银脑通中药组合物的质量检测结果见表1。表1本发明灯银脑通中药组合物的质量检测结果实施例5灯银脑通中药组合物的降压效果及作用机理研究1．供试样品灯银脑通中药组合物1：简称“组合物1”，按本发明实施例1制备；灯银脑通中药组合物2：简称“组合物2”，按本发明实施例2制备；灯银脑通中药组合物3：简称“组合物3”，按本发明实施例3制备；对照药物卡托普利:卡托普利片，国药准字H53021548，昆明贝克诺顿制药有限公司生产。2．实验仪器与试剂仪器ALC-NIBP无创血压测定分析系统(上海奥尔科特生物科技有限责任公司)；LEGENDMicro17ＲCentrifuge型低温离心机(ThermoScientificCorporation)；MK3酶标仪(ThermoElectronCorporation)；B204-N型电子天平（瑞士Mettler公司）。3.实验动物自发性高血压大鼠(SHR)40只，雄性，体重190-220g，昆明医科大学实验动物中心提供；雄性WKY大鼠10只，体重230-250g，昆明医科大学实验动物中心提供。4.实验方法将自发性高血压大鼠（SHR）40只，随机分为模型组、灯银脑通中药组合物1组(简称“组合物1组”，10mg/kg)、灯银脑通中药组合物2组(简称“组合物2组”，10mg/kg)、灯银脑通中药组合物3组(简称“组合物3组”，10mg/kg)和卡托普利组(10mg/kg)，每组10只。另取WKY大鼠10只为正常对照组。各药物组按规定剂量灌胃给药，模型组和正常对照组给予等量蒸馏水，每天1次，连续给药四周。血压测定：每周在大鼠清醒状态下用ALC-NIBP无创血压测量分析系统测量记录大鼠尾动脉血压。血液NO测定：大鼠末次给药测定血压后，腹腔麻醉，迅速取血，按照试剂盒说明书操作测定NO值。5.实验结果5.1灯银脑通中药组合物对高血压大鼠的降压作用灯银脑通中药组合物对高血压大鼠的降压作用见表2.表2.灯银脑通中药组合物对高血压大鼠的降压作用（x±s，n=10）由上表可见，灯银脑通中药组合物能够同时明显地降低高血压大鼠的收缩压与舒张压，表明其具有降血压作用，可以用于制备防治高血压的药物。上述实验还表明，组合物3的降压作用优于组合物2和组合物1。5.2灯银脑通中药组合物对高血压大鼠NO的影响灯银脑通中药组合物对高血压大鼠NO的影响见表3.表3.灯银脑通中药组合物对高血压大鼠NO的影响（x±s，n=10）由上表可见，灯银脑通中药组合物能够明显地提高高血压大鼠的血清NO含量。NO是一种血管内分泌物质，具有舒张血管作用，对比组合物1组、组合物2组和组合物3组的NO含量和降压作用可见，组合物对NO含量的提升作用越明显，其降压作用也就越显著，这提示灯银脑通中药组合物的降压作用可能是通过提高血液中的NO含量来实现的。实施例6灯银脑通中药组合物的抗缺氧和抗疲劳作用研究1.供试样品：灯银脑通中药组合物1：简称“组合物1”，按本发明实施例1制备；灯银脑通中药组合物2：简称“组合物2”，按本发明实施例2制备；灯银脑通中药组合物3：简称“组合物3”，按本发明实施例3制备；对照药物大株红景天：大株红景天胶囊，国药准字Z20040023，江苏康缘药业股份有限公司提供。2.实验动物昆明种小鼠，雄性，清洁级，体重18-22g，昆明医科大学实验动物中心提供。3、实验方法3.1抗缺氧实验：昆明种小鼠50只，随机分为5组：空白对照组、灯银脑通中药组合物1组(简称“组合物1组”)、灯银脑通中药组合物2组(简称“组合物2组”)、灯银脑通中药组合物3组(简称“组合物3组”)和对照药物大株红景天组，每组10只。各组灌胃给药，每天早晚各1次，连续给药14d。于末次灌胃2h后，将小鼠放入盛有10g钠石灰的1000mL磨口广口瓶中，涂适量凡士林密封瓶口，记录小鼠自放入广口瓶至呼吸停止时的时间为存活时间。存活时间延长率(%)=（药物组存活时间-空白对照组存活时间）/空白对照组存活时间×100%。3.2抗疲劳实验按照中药及保健食品抗疲劳实验规范（陈奇.中药药理实验方法学［M］．第2版，北京:人民卫生出版社,2006:759-761）,昆明种小鼠50只，随机分为5组：空白对照组、灯银脑通中药组合物1组(简称“组合物1组”)、灯银脑通中药组合物2组(简称“组合物2组”)、灯银脑通中药组合物3组(简称“组合物3组”)和对照药物大株红景天组，每组10只。各组灌胃给药，每天早晚各1次，连续给药14d。于末次灌胃2h后，将尾部负荷5%体重的小鼠置于游泳箱中游泳，水深30cm，水温为25±2℃。记录小鼠自落水开始游泳至沉入水面下力竭而死的时间，即为小鼠负重游泳的存活时间。以小鼠头部不能浮出水面10s为计时终点。存活时间延长率(%)=（药物组存活时间-空白对照组存活时间）/空白对照组存活时间×100%。4.实验结果4.1银脑通中药组合物抗缺氧作用实验结果银脑通中药组合物抗缺氧作用实验结果见表4.表4银脑通中药组合物抗缺氧实验结果（x±s，n=10）由上表可见，灯银脑通中药组合物能够显著延长缺氧小鼠的存活时间，表明其具有明显的抗缺氧作用，可以用于抗缺氧药物的制备。上述实验还表明，组合物3的抗缺氧作用优于组合物2和组合物1。4.2灯银脑通中药组合物抗疲劳作用实验结果表5灯银脑通中药组合物抗疲劳实验结果（x±s，n=10）由上表可见，灯银脑通中药组合物能够显著延长负重游泳小鼠的存活时间，表明其具有明显的抗疲劳作用，可以用于抗疲劳药物的制备。上述实验还表明，组合物3的抗疲劳作用优于组合物2和组合物1。实施例7灯银脑通中药组合物的治疗高原反应的临床实验研究1.供试样品：灯银脑通中药组合物1：按本发明实施例1制备；灯银脑通中药组合物2：按本发明实施例2制备；灯银脑通中药组合物3：按本发明实施例3制备；对照药物氨茶碱：氨茶碱片，0.2g/片，国药准字H23021194，哈药集团制药总厂提供。2.临床病例及诊断标准入选病例均为2011年10月至2014年10月期间，由平原到高原地区人员，经按照2010年中国医学会制定的诊断标准,诊断为急性高原反应(HAAR)，有缺氧、疲劳、血压升高、头痛头昏、胸闷气短、恶心呕吐等一系列病理性反应或临床症状。总病例120例，其中,男56例,女64例,年龄20～55岁。随机分为4组，每组30例，各组间在性别、年龄、病情方面无统计学差异(P<0.05)。3．治疗方法总病例120例，随机分为如下4组：灯银脑通中药组合物1组(简称“组合物1组”)、灯银脑通中药组合物2组(简称“组合物2组”)、灯银脑通中药组合物3组(简称“组合物3组”)和对照药物氨茶碱组，每组30例。灯银脑通中药组合物:口服给药,每天早、中、晚各1次，0.2g/次，连续服用7d为一疗程。氨茶碱：口服给药氨茶碱片,每天早、中、晚各1次，1片/次，连续服用7d为一疗程。4.疗效判定标准治愈:缺氧、疲劳、血压升高、头痛头昏、胸闷气短、恶心呕吐等急性高原反应症状、体征完全消失，工作、学习和生活完全恢复正常;显效:上述急性高原反应症状、体征大部分消失，工作、学习和生活基本恢复正常;有效：上述急性高原反应症状、体征部分消失，工作、学习和生活情况有所改善；无效:上述急性高原反应症状、体征无明显改善，工作、学习和生活仍然受到影响。有效率（%）=（治愈+显效+有效）/总病例×100%。5.治疗效果：灯银脑通中药组合物治疗急性高原反应临床疗效见表6。表6灯银脑通中药组合物治疗急性高原反应临床疗效由上可见，灯银脑通中药组合物对急性高原反应具有良好的临床治疗效果，其中，组合物3的临床疗效优于组合物2和组合物1。实施例8灯银脑通片灯银脑通中药组合物15%淀粉62%羧甲基淀粉钠23%将上述灯银脑通中药组合物、淀粉、羧甲基淀粉钠混合后于压片机上压片，即得。实施例9灯银脑通胶囊灯银脑通中药组合物25%淀粉47%微晶纤维素18%硬脂酸镁10%将上述灯银脑通中药组合物、淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁，混合后填充入硬明胶胶囊中，即得。实施例10灯银脑通口服液灯银脑通中药组合物3%蔗糖6%95%乙醇5%蒸馏水86%将上述灯银脑通中药组合物3、蔗糖、95%乙醇、蒸馏水称量后，置于配液罐中，室温搅拌溶解后，过滤，按10mL/支灌封，即得。