一种美白保湿爽肤水及其制备方法与流程

文档序号:15484557发布日期:2018-09-21 19:41阅读:503来源:国知局

本发明属于化妆品技术领域,具体涉及一种美白保湿爽肤水及其制备方法。



背景技术:

皮肤的水合保湿是维持皮肤结构完整性和屏障功能的重要因素。健康的肌肤水分保持与水分蒸散保持平衡,病理过程和环境因素(如温度、湿度、过度清洁等)会破坏这种平衡,导致皮肤干燥。保湿对于维持皮肤美观非常重要,保湿物质能够修复受损的皮肤屏障,保持皮肤水分可以增强皮肤弹性,使皮肤代谢正常,减少皱纹和色斑的生成,增加角质层含水量,改善皮肤保水能力。目前,市面上销售的保湿产品多含有透明质酸,该物质是目前发现的自然界中保湿性较好的物质,被称为理想的天然保湿因子。但该类保湿产品功能较为单一,且以霜类(W/O)为主,有效物质进入皮肤,需经过破相的阶段,不能迅速扩散至皮肤真皮层,保湿效果较差。



技术实现要素:

有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种美白保湿爽肤水及其制备方法,本发明提供美白保湿爽肤水具有良好的美白和保湿效果。

本发明提供了一种美白保湿爽肤水,包括:透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水。

优选的,所述透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为(0.01~0.10)mg:(0.01~0.05)mg:(0.10~0.50) mg:50mL:(100~150)mL。

优选的,所述脂肪间充质干细胞条件培养基按照如下方法进行制备:

a)将清洗后的P3~P5代的脂肪间充质干细胞与消化液混合消化后,加入完全培养基终止酶解,得到混合液;

b)将所述混合液依次进行固液离心、重悬、接种和培养后,收集上清液,离心浓缩,得到脂肪间充质干细胞条件培养基。

优选的,所述消化液包括浓度为0.05wt%~0.3wt%胰酶和浓度为 0.01wt%~0.04wt%的EDTA溶液。

优选的,所述完全培养基为无酚红1640培养基。

优选的,所述脂肪间充质干细胞的接种的传代密度为8000~15000个细胞 /cm2

优选的,所述培养的时间为24~72h。

本发明还提供了一种美白保湿爽肤水的制备方法,包括以下步骤:

A)将去离子水、透明质酸、维他命C和胶原蛋白混合搅拌,过滤,得到混合溶液;

B)将混合溶液与脂肪间充质干细胞条件培养基混合搅拌,得到美白保湿爽肤水。

优选的,所述步骤A)混合搅拌的温度为25℃,步骤B)混合搅拌的温度为4℃。

优选的,所述过滤的选用的滤膜的规格为0.22μm。

与现有技术相比,本发明提供了一种美白保湿爽肤水,包括:透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水。本发明提供的美白保湿爽肤水中包括脂肪间充质干细胞条件培养基、维他命C和胶原蛋白等天然成分,其中的脂肪间充质干细胞条件培养基中含有的多种活细胞因子能从根本上修复皮肤细胞,改善皮肤质地。并且,配方中除了含有透明质酸等保湿成分,还添加了维他命C,起到抗氧化功能,添加了胶原蛋白,维持皮肤的弹性。

具体实施方式

本发明提供了一种美白保湿爽肤水,包括:透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水。

在本发明中,所述透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为(0.01~0.10)mg:(0.01~0.05)mg:(0.10~0.50) mg:50mL:(100~150)mL,本发明所述质量体积比仅是一个比例关系,其数值和单位可以成比例的扩大与缩小。

在本发明的一些具体实施方式中,所述透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为0.01mg:0.02mg:0.10mg: 50mL:150mL;在本发明的另一些具体实施方式中,所述透明质酸、维他命 C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为0.10mg:0.02mg:0.10mg:50mL:150mL;在本发明的另一些具体实施方式中,所述透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为0.01mg:0.02mg:0.50mg:50mL:150mL;在本发明的另一些具体实施方式中,所述透明质酸、维他命C、胶原蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养基和水的质量体积比为0.10mg:0.02mg:0.50mg:50mL:150mL。

在本发明中,所述胶原蛋白优选为短肽类型的胶原蛋白,更优选为五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和十肽中的一种或多种。

所述脂肪间充质干细胞条件培养基按照如下方法进行制备:

a)将清洗后的P3~P5代的脂肪间充质干细胞与消化液混合消化后,加入完全培养基终止酶解,得到混合液;

b)将所述混合液依次进行离心、重悬、接种和培养后,收集上清液,离心浓缩,得到脂肪间充质干细胞条件培养基。

在本发明中,优选以P3~P5代的脂肪间充质干细胞作为原料,所述P3~P5 代的脂肪间充质干细胞的汇合度优选为80%~90%。首先将P3~P5代的脂肪间充质干细胞进行清洗,其中,所述清洗的清洗液优选为PBS缓冲液。所述清洗的次数优选为1~3遍。

得到清洗后的P3~P5代的脂肪间充质干细胞后,将其与消化液混合消化。

在本发明中,所述消化液优选包括浓度为0.05wt%~0.3wt%胰酶和浓度为 0.01wt%~0.04wt%的EDTA溶液。所述消化液的加入量优选为0.015~0.04 mL/cm2。所述消化的时间优选为1~3min。

接着,用完全培养基终止酶解,得到混合液。

在本发明中,所述完全培养基优选为无酚红1640培养基。所述完全培养基的添加量与所述消化液的体积比优选为(5~10):1,更优选为(6~9):1。

得到混合液后,将所述混合液进行离心,得到固体物质。在本发明中,所述离心的速度为200~400g,所述离心的时间为5~10min。

接着,将所述固体物质进行重悬,在本发明中,优选采用完全培养基进行重悬。完全培养基优选采用无酚红1640培养基。

本发明对所述无酚红1640培养基的来源并没有特殊限制,一般市售即可。本发明使用的无酚红1640培养基购于Gibco公司。

将所述重悬后的细胞接种,优选接种于培养皿或培养瓶。所述脂肪间充质干细胞的接种的传代密度为8000~15000个细胞/cm2,优选为10000~12000 个细胞/cm2

接种后,进行细胞培养,所述培养的时间为24~72h。

细胞培养结束后,收集培养上清液。将所述上清液离心浓缩,得到脂肪间充质干细胞条件培养基。所述离心的速度为200~400g,所述离心的时间为 5min。

离心结束后,将所述上清液进行浓缩,得到脂肪间充质干细胞条件培养基。所述浓缩后的脂肪间充质干细胞条件培养基的体积优选为50mL。所述 50mL的脂肪间充质干细胞条件培养基中包括1×107~5×107个细胞。

最后,将所述脂肪间充质干细胞条件培养基置于2~8℃保存备用。

在本发明中,所述美白保湿爽肤水中还可以包括防腐剂,在本发明中,所述防腐剂优选为尼泊金酯类复配体系防腐剂、重氮咪唑烷基脲和IPBC复配体系防腐剂、重氮咪唑烷基脲和尼泊金酯复配体系防腐剂,所述防腐剂的添加量优选为(0.02~0.05)g:100mL水,更优选为0.03g:100mL水。

本发明还提供了一种美白保湿爽肤水的制备方法,包括以下步骤:

A)将去离子水、透明质酸、维他命C和胶原蛋白混合搅拌,过滤,得到混合溶液;

B)将混合溶液与脂肪间充质干细胞条件培养基混合搅拌,得到美白保湿爽肤水。

本发明首先将去离子水、透明质酸、维他命C和胶原蛋白混合搅拌,过滤,得到混合溶液。

具体的,在本发明中,向去离子水中添加透明质酸、维他命C和胶原蛋白,混合搅拌溶解。在本发明中,所述混合搅拌的温度优选为25℃。

混合搅拌后,进行过滤。在本发明中,优选采用0.22μm的滤膜进行过滤。过滤结束后,得到混合溶液,将所述混合溶液置于4℃条件下进行保存。

接着,将所述混合溶液与上述制备得到的脂肪间充质干细胞条件培养基混合搅拌,得到美白保湿爽肤水。

其中,所述混合搅拌的温度优选为2~8℃。

本发明提供的美白保湿爽肤水中包括脂肪间充质干细胞条件培养基、维他命C和胶原蛋白等天然成分,其中的脂肪间充质干细胞条件培养基中含有的多种活细胞因 子能从根本上修复皮肤细胞,改善皮肤质地。并且,配方中除了含有透明质酸等保湿成分,还添加了维他命C,起到抗氧化功能,添加了胶原蛋白,维持皮肤的弹性。

为了进一步理解本发明,下面结合实施例对本发明提供的美白保湿爽肤水及其制备方法进行说明,本发的保护范围不受以下实施例的限制。

实施例1

取汇合度85%的P3-P5代的脂肪间充质干细胞,用PBS洗1~3遍后,往细胞中加入0.01%的胰酶+0.02%EDTA消化1~3min,用5倍于消化液的完全培养基终止酶解,300g离心5min,用完全培养基重悬后,接种于培养皿或培养瓶中,传代密度为10000个细胞每cm2。细胞连续生长48h,收集培养上清, 300g离心5min,取上清,通过浓缩把体积浓缩至50mL,置于4℃保存备用。

实施例2~10

按照表1的配方进行美白保湿爽肤水的配置。

表1美白保湿爽肤水配方

具体方法为:

①去离子水中添加透明质酸、胶原蛋白(商品澳洲名:mmV胶原蛋白肽)、维他命C和尼泊金酯类防腐剂(无锡陆氏食品添加剂有限公司提供:复合尼泊金酯钠(广谱型)),25℃下搅拌溶解,0.22um滤膜过滤后置于4℃下保存。

②把冷却至4℃的透明质酸和胶原等混合溶液和浓缩后的实施例1制备的 ADSCs条件培养基缓慢混匀,充分搅拌后分装置于4℃下保存备用。

对比例1

以150ml的去离子水为空白对照。

实施例11

取健康皮肤,无明显过敏特征,肤质较为均匀相似、年龄21~56岁的女性受试者100名,随机分为5组,每组各20名。

保湿效果按照学位论文:拉娃拉.巴扎尔.《保湿产品功效检测方法的评价》,2012硕士学位论文.结果见表2,表2为皮肤角质层含水量以及皮肤保水能力结果。

表2皮肤角质层含水量以及皮肤保水能力结果

*表示P<0.05,每组实施例使用前后具有显著性差异。

从对比例1的数据可知,使用产品4周后皮肤的含水量为35.21±12.47,保水能力仍维持在65.33±12.18,与使用前对比,并没有明显改善。

从对实施例2~5的数据可知,使用本产品4周后,皮肤的含水量均提高了10~20左右,保水能力同样提升了35~50,与使用前对比,皮肤的明显含水量明显提高,P<0.05;保水能力同样得到改善,P<0.05。

从对实施例6~10的数据可知,使用本产品4周后,皮肤的含水量均提高了20%左右,保水能力同样提升了38~41%,与使用前对比,皮肤的明显含水量明显提高,P<0.05;保水能力同样得到改善,P<0.05。

以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

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