本发明涉及一种美白提亮组合物、制备方法和在化妆品中的应用，特别是涉及以熊果苷、VC、烟酰胺为活性成分的美白外用品，属于化妆品
技术领域：
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背景技术：
：黑素是深色素类物质的一种，能引起皮肤的着色，是在黑素细胞(Melanin)中由苯丙氨酸或酪氨酸经氧化等一系列生化反应生成的。酪氨酸酶兼具酪氨酸经化酶活性(催化酪氨酸一多巴)和多巴氧化酶活性(催化多巴一多巴醌)，是黑素细袍合成黑素的关键因素。熊果苷能迅速渗入肌肤，在不影响细胞增殖浓度的同时，能有效抑制皮肤中的酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的生成。它通过自身与酪氨酸酶直接结合，竞争多巴的结合位点，加速黑色素的分解与排泄，从而减少皮肤色素沉积。熊果苷能迅速渗入肌肤，在不影响细胞增殖浓度的同时，能有效地抑制皮肤中的酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的形成，通过自身与酪氨酶直接结合，加速黑色素的分解与排泄少从而减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，而且对黑色素细胞不产生毒害性、刺激性、致敏性等副作用，同时还有杀菌、消炎的作用。熊果苷作用原理类似美白药物对苯二酚。但对苯二酚存在副作用，注意事项很多，必须在医生的指导和监测下使用。而熊果苷的结构中比对苯二酚多了葡萄糖分子，刺激性较低，可以自由添加到保养品中，浓度上限高达7％。熊果苷的活性分子能够穿透基底层进行深度淡斑，对于黄褐斑、黑斑、日晒斑，药物过敏遗留下来的色素沉着都很强的治疗作用。但是，由于熊果苷被皮肤吸收后会还原成对苯二酚，因此会存在着类似对苯二酚的副作用。虽然对苯二酚应该算是极有效的美白成分，它除了能抵制酪氨酸酶活性，还有破坏已形成的黑色素细胞的能力，祛斑效果很好，但用后易引起皮肤潮红或过敏，对肌肤来说负担很大，我国是禁止这个成分的，主要是因为氢醌的副作用较大，过度使用会对皮肤产生细胞毒性，且有一定几率造成蓝黑斑，不仅如此，氢醌对人体也有胎儿致畸性和毒性，当含有熊果苷美白产品停用后面，由熊果苷还原产生的对苯二酚类物质会对皮肤细胞的活化、生长产生一定影响，使美白产品的效果不易长效发挥作用，存在着化妆品停用后面皮肤色泽、水分等会迅速复原，需要长期使用化妆品才能使效果保持，造成使用者较高的花费并会对皮肤产生刺激。技术实现要素：本发明所解决的技术问题是：美白外用化妆品中采用熊果苷等成分作为活性组分时容易导致对皮肤具有一定刺激作用，长效美白、护肤效果不好的问题，提供了一种组合物，通过组分之间相同协同，利于细胞活化再生，提高长效美白补水效果。技术方案是：根据本发明的第一个方面：一种美白提亮组合物，包括有按重量百分比计的如下组分：熊果苷25～30％，维生素C或者其衍生物10～15％、烟酰胺15～20％，丝氨酸蛋白酶抑制剂3～6％、人参皂苷1～2％、防晒剂30～35％。所述的防晒剂选自物理防晒剂或者化学防晒剂。所述的熊果苷选自α-熊果苷或者β-熊果苷。所述的人参皂苷为人参皂苷F1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb1或人参皂苷Rc中的一种或者几种的混合。根据本发明的第二个方面：包含有所述的美白提亮组合物的外用化妆品。所述的外用化妆品，所使用的载体选自包括乳状液、乳霜、洗剂、溶液、无水赋形剂、凝胶和软膏。所述的乳状液选自油包水、水包油包水、水包油、水包硅胶、硅胶包水、油包水包油或者硅胶包水包油的乳剂。根据本发明的第三个方面：一种包含有上述的美白提亮组合物的外用乳剂，采用水包油载体，包括有按重量百分比计的如下组分：美白提亮组合物10～15％、蜡类3～10％、植物来源的烃油3～6％、非乳化性交联型硅氧烷2～4％、非离子型表面活性剂1～4％、水70～75％。所述的蜡类是指熔点为75～100℃的动/植物来源的蜡类。根据本发明的第四个方面：所述的外用乳剂的制备方法，包括如下步骤：将美白提亮组合物、蜡类、植物来源的烃油、非乳化性交联型硅氧烷、一部分非离子表面活性剂混合均匀，得到油相；再将水和剩下的非离子表面活性剂混合均匀，得到水相；在高速分散的条件下，再将油相缓慢加入至水相当中，搅拌均匀，得到稳定的水包油乳液。根据本发明的第五个方面：所述的美白提亮组合物在制备化妆品中的应用。有益效果本发明提供的美白组合物中，通过熊果苷、维C衍生物、烟酰胺产生美白效果，同时利用丝氨酸蛋白酶抑制剂对皮肤细胞的蛋白类成分进行保护，促进细胞活化再生，消除熊果苷还原后产生的对苯二酚带来的细胞毒性，达到长效美白、活化细胞的作用；该组合物应用于化妆品中，例如面膜、乳液、霜剂中具有对皮肤刺激小、作用时间长的优点。具体实施方式下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。本文使用的近似语在整个说明书和权利要求书中可用于修饰任何数量表述，其可在不导致其相关的基本功能发生变化的条件下准许进行改变。因此，由诸如“约”的术语修饰的值并不局限于所指定的精确值。在至少一些情况下，近似语可与用于测量该值的仪器的精度相对应。除非上下文或语句中另有指出，否则范围界限可以进行组合和/或互换，并且这种范围被确定为且包括本文中所包括的所有子范围。除了在操作实施例中或其他地方中指明之外，说明书和权利要求书中所使用的所有表示成分的量、反应条件等等的数字或表达在所有情况下都应被理解为受到词语“约”的修饰。本文使用的词语“包括”、“包含”、“具有”或其任何其他变体意欲涵盖非排它性的包括。例如，包括列出要素的工艺、方法、物品或设备不必受限于那些要素，而是可以包括其他没有明确列出或属于这种工艺、方法、物品或设备固有的要素。以范围形式表达的值应当以灵活的方式理解为不仅包括明确列举出的作为范围限值的数值，而且还包括涵盖在该范围内的所有单个数值或子区间，犹如每个数值和子区间被明确列举出。例如，“大约0.1％至约5％”的浓度范围应当理解为不仅包括明确列举出的约0.1％至约5％的浓度，还包括有所指范围内的单个浓度(如，1％、2％、3％和4％)和子区间(例如，0.1％至0.5％、1％至2.2％、3.3％至4.4％)。本发明所提供的组合物主要包括如下的组分：熊果苷，维生素C或者其衍生物、烟酰胺，丝氨酸蛋白酶抑制剂、人参叶提取物、防晒剂。熊果苷，是组合物中起到美白、抑制黑色素生成的主要活性物质，它可以选自α-熊果苷或者β-熊果苷。维生素C或者其衍生物，起到辅助增白的作用。烟酰胺用作美白成分时，证明对治疗黄褐斑和紫外线造成的色素沉着过度有一定功效。丝氨酸蛋白酶抑制剂用于提高皮肤细胞的活性，避免熊果苷还原产物对皮肤细胞的刺激的作用，例如可以是抑肽酶及其类似物。人参皂苷用于抑制酪氨酸酶的活性，进一步增加改善发暗的肤色或防止皮肤的色素沉着的效果，例如可以采用人参皂苷为人参皂苷F1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb1或人参皂苷Rc，其中优选采用人参皂苷Rb1。防晒剂，用于防止皮肤细胞对UVA、UVB的吸收。本发明中所采用的防晒剂，没有特别限定，可以包括化学和物理防晒物质。可以使用的化学防晒物质的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、戊基二甲醇PABA酯和辛基二甲醇PABA酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、乙基二羟基丙醇PABA酯、二苯甲酮(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1到12)、肉桂酸盐/酯(甲氧基肉桂酸辛酯、对甲氧基肉桂酸异戊酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西诺沙酯、二异丙基肉桂酸甲酯、甲氧基肉桂酸DEA盐、二异丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水杨酸酯(均甲基水杨酸酯、水杨酸苄酯、乙二醇水杨酸酯、异丙基苄醇水杨酸酯等)、邻氨基苯甲酸盐/酯、尿刊酸乙酯、原膜散酯、水杨酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、2-羟基-1,4-萘醌和二羟基丙酮、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸脂聚二甲基硅氧烷、对苯二亚甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠、二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并恶唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基苯酚和双乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亚甲基莰酮和4-甲氧基肉桂酸异戊酯。物理防晒物质的非限制性实例包括高岭土、滑石、凡士林和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。上述的组合物的制备方法，没有特别限定，只要采用合适的混合手段将其各个组分混合即可。上述的美白组合物可以并入所有类型的载体。非限制性实例包括乳状液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅胶、硅胶包水、油包水包油、硅胶包水包油的乳剂)、乳霜、洗剂、溶液(水溶液或者水-乙醇溶液)、无水赋形剂(例如口红和粉末)、凝胶和软膏，合适的载体对于本领域的普通技术任意是明显的，并且适用于本发明。在一个优选的实施例中，本发明的组合物特别适用于水包油乳化液，可以采用如下按重量百分比计的配方：美白提亮组合物10～15％、蜡类3～10％、植物来源的烃油3～6％、非乳化性交联型硅氧烷2～4％、非离子型表面活性剂1～4％、水70～75％。其中，蜡类、植物来源的烃油类和非乳化性交联型硅氧烷是作为油相的组分，非离子表面活性剂直到乳化和分散的效果，水作为主要的基质。其中，蜡类可以指熔点为75～100℃的动/植物来源的蜡类。另外，更优选植物来源的蜡类。具体而言可列举出巴西棕榈蜡。植物来源的烃油，例如植物甾醇酯，如植物甾醇油酸酯、植物甾醇异硬脂酸酯和月桂酰/辛基十二烷醇/植物甾醇谷氨酸酯，由甘油的脂肪酸酯形成的甘油三酯，其中脂肪酸特别可具有C4至C36，尤其是C18至C36的链长，这些油可能是直链或支链的，和饱和或不饱和的；这些油尤其可以是庚酸或辛酸甘油三酯、乳木果油、紫花苜蓿油、罂粟籽油、笋瓜油、小米油、大麦油、藜麦油、黑麦油、石栗油、西番莲油、牛油树脂、芦荟油、甜杏仁油、桃核油、花生油、摩洛哥坚果油、鳄梨油、木棉油、琉璃苣油、西兰花油、金盏花油、亚麻荠油、芥花油、胡萝卜油、红花油、大麻油、菜籽油、棉籽油、椰子油、骨髓籽油、小麦胚芽油、荷荷巴油、百合油、澳洲坚果油、玉米油、白芒花籽油、圣约翰草油、栀子花油、榛果油、杏仁油、核桃油、橄榄油、月见草油、棕榈油、黑醋栗籽油、奇异果籽油、葡萄籽油、阿月浑子籽油、笋瓜油、南瓜籽油、藜麦油、麝香玫瑰油、芝麻油、大豆油、葵花油、蓖麻油和西瓜籽油及其混合物。非乳化性交联型硅氧烷优选为选自由下述构成的组中的1种或2种以上：二甲基聚硅氧烷交联聚合物、(二甲基聚硅氧烷/乙烯基二甲基聚硅氧烷)交联聚合物、(二甲基聚硅氧烷/苯基乙烯基二甲基聚硅氧烷)交联聚合物、(乙烯基二甲基聚硅氧烷/十二烷基二甲基聚硅氧烷)交联聚合物、(十二烷基聚二甲基甲硅烷氧基乙基二甲基聚硅氧烷/双-乙烯基二甲基聚硅氧烷)交联聚合物、烷基(C30-45)十六烷基二甲基聚硅氧烷交联聚合物、十六烷基二甲基聚硅氧烷交联聚合物。另外，在不有损本发明的效果的范围内，上述水包油型乳化防晒化妆品可以根据需要适宜配合化妆品和准药品领域中通常配合的各种成分，例如：粉末成分、固体油脂、保湿剂、增稠剂、金属离子封闭剂、色素、pH调节剂、皮肤营养剂、维生素、防腐剂、抗氧化剂、抗氧化助剂、香料等。本发明所述的水包油型乳化防晒化妆品可以根据乳化物的制造中一直使用的方法而制造。例如，将油相成分和水相成分各自混合而分别调制油相和水相，混合水相和油相并用均质混合器等乳化，由此能够得到本发明的水包油型乳化防晒化妆品。在一个实施例中，其制造方法包括如下步骤：将美白提亮组合物、蜡类、植物来源的烃油、高级醇、一部分非离子表面活性剂混合均匀，得到油相；再将水和剩下的非离子表面活性剂混合均匀，得到水相；在高速分散的条件下，再将油相缓慢加入至水相当中，搅拌均匀，得到稳定的水包油乳液。实施例1组合物的制备美白提亮组合物，是由按重量比计的如下组分制备得到：熊果苷30％，维生素C15％、烟酰胺20％，丝氨酸蛋白酶抑制剂抑肽酶4％、人参皂苷Rb11％、防晒剂(乙基己基三嗪酮与滑石粉按重量比1：4混合而成)30％。将各个组分按重量比混合均匀即可。实施例2组合物的制备美白提亮组合物，是由按重量比计的如下组分制备得到：熊果苷28％，维生素C12％、烟酰胺17％，丝氨酸蛋白酶抑制剂抑肽酶6％、人参皂苷Rb12％、防晒剂(对氨基苯甲酸与二氧化钛按重量比1：5混合而成)35％。将各个组分按重量比混合均匀即可。实施例3组合物的制备美白提亮组合物，是由按重量比计的如下组分制备得到：熊果苷25％，维生素C14％、烟酰胺18％，丝氨酸蛋白酶抑制剂抑肽酶6％、人参皂苷Rb12％、防晒剂(辛基三嗪酮与二氧化钛按重量比1：5混合而成)35％。将各个组分按重量比混合均匀即可。对照例1与实施例3的区别在于：组合物中未加入丝氨酸蛋白酶抑制剂。对照例2与实施例3的区别在于：组合物中未加入熊果苷。提取物美白功能体外评价实验1、试样的配制以实施例1～3和对照例1～2中制备的组合物的提取物为样品。将样品1g溶于99g二甲亚砜中，配成质量分数为1％的样品溶液，离心分离后取上清液进行下面试验。2、抑制酪氨酸酶活力效果评价试验按下表准确吸取样品溶液、pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液(PBS)和质量分数为0.1％的多巴溶液，充分混合，于30℃孵育5min后，加入活度为110U/mL的酪氨酸酶溶液，再在30℃下孵育10min，迅速转移至比色皿中，在475nm处测吸光度。反应液成分1组2组3组4组样品溶液mL11磷酸盐缓冲溶液mL22.511.5多巴溶液mL111酪氨酸酶溶液mL0.50.5总体积mL3.53.53.53.5按式(1)计算样品对酪氨酸酶的相对抑制率(I)。I＝[(A1-A2)-(A3-A4)]×100％÷(A1-A2)(1)式中：A1、A2、A3、A4分别为1组～4组溶液的吸光度。抑制黑色素细胞中黑色素合成试验将B16黑色素瘤细胞以1×105个/mL的密度接种于96孔板中，每孔90μL，CO2孵箱中孵育24小时后，每孔加入样品溶液。同时设立培养基和细胞的空白对照组。将培养板置于孵箱中孵育72小时后，弃去上清液，PBS洗涤两遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min，每孔加入2mL维持液终止消化。混匀后，每种浓度取出0.5mL做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min离心分离5min，弃去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解，选择490nm波长在酶联免疫检测仪下测定吸光度值。按式(2)计算样品对黑色素合成抑制率(I’)。I’＝(1-A5÷P1/A6÷P2)×100％(2)式中：A5为药物孔吸光度值；P1为药物孔细胞密度；A6为对照孔吸光度值；P2为对照孔细胞密度。实施例1实施例2实施例3对照例1对照例2对酪氨酸酶的抑制率％90.388.589.490.654.1对黑色素合成的抑制率％82.180.781.382.142.7从上表中可以看出，上述的组合物具有较好的对酪氨酸酶的抑制效率，并能抑制黑色素的合成，对照例1中未加入丝氨酸蛋白酶抑制剂对于体外合成试验未显示出明显影响，对照例2中由于未加入熊果苷，表现出对酪氨酸酶和黑色素合成的抑制率降低。实施例4水包油乳液的制备采用实施例1中的组合物，美白提亮组合物13％、巴西棕榈蜡7％、小麦胚芽油5％、聚二甲基硅氧烷交联聚合物2％、非离子型表面活性剂3％、水70％。将美白提亮组合物、蜡类、植物来源的烃油、非乳化性交联型硅氧烷、一半的非离子表面活性剂混合均匀，升温至50℃搅拌10min，得到油相；再将水和剩下的非离子表面活性剂混合均匀，升温至75℃搅拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的条件下，再将油相缓慢加入至水相当中，搅拌均匀，得到稳定的水包油乳液。实施例5水包油乳液的制备采用实施例2中的组合物，美白提亮组合物10％、巴西棕榈蜡3％、鳄梨油5％、聚二甲基硅氧烷交联聚合物3％、非离子型表面活性剂4％、水75％。将美白提亮组合物、蜡类、植物来源的烃油、非乳化性交联型硅氧烷、一半的非离子表面活性剂混合均匀，升温至50℃搅拌10min，得到油相；再将水和剩下的非离子表面活性剂混合均匀，升温至75℃搅拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的条件下，再将油相缓慢加入至水相当中，搅拌均匀，得到稳定的水包油乳液。实施例6水包油乳液的制备采用实施例3中的组合物，美白提亮组合物11％、巴西棕榈蜡4％、橄榄油3％、聚二甲基硅氧烷交联聚合物4％、非离子型表面活性剂3％、水75％。将美白提亮组合物、蜡类、植物来源的烃油、非乳化性交联型硅氧烷、一半的非离子表面活性剂混合均匀，升温至50℃搅拌10min，得到油相；再将水和剩下的非离子表面活性剂混合均匀，升温至75℃搅拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的条件下，再将油相缓慢加入至水相当中，搅拌均匀，得到稳定的水包油乳液。对照例2与实施例6的区别在于：采用的美白提亮组合物是对照例1中制备得到的，用于替代实施例3中制备得到的。对照例3与实施例6的区别在于：采用的美白提亮组合物是对照例2中制备得到的，用于替代实施例3中制备得到的。美白祛斑功效试验美白祛斑功效试验，包括加速皮肤黑色素的转移、代谢和提高皮肤亮度试验。下述美白功效试验均采用人体测试方式，用皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+MPA9测试仪测定皮肤的黑色素含量和亮度。选取120个自愿者，男女各半，随机分为6组，每组20人，每组分别用实施例4～6、对照例2～3和空白样进行试验，空白样为普通的75％乙醇，各组的测试数据均取平均值。受试部位前2～3天不能使用任何产品；用干的面巾纸将双手前臂内侧擦拭干净并做4×4cm2试验区域测定标记，用皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+MPA9测试仪测定受试皮肤的黑色素含量和皮肤亮度；用乳胶指套将测试样品和空白组按2.0±0.1mg样品/cm2的用量分别涂抹在左右手臂上，每天早晚各涂抹一次，每次涂抹后轻轻涂搓5min，连续涂抹4周，涂抹后分别测量第1～4周每个区域的黑色素含量和皮肤亮度；4周后，停止使用外用药物，再继续测定皮色素含量和皮肤亮度2周。(1)黑色素含量变化分析皮肤黑色素含量变化反映在测试周期内，试验区域皮肤黑色素含量随时间变化规律。其值越大，皮肤黑色素含量越大，反之，皮肤黑色素含量。黑色素含量差值(ΔT)＝使用产品后各时间点黑色素含量(Tn)-使用产品前黑色素含量(T0)。受试部位皮肤黑色素含量与初始值的差值在测试周期4周内，实施例中提供的水包油乳液具有较好的降低皮肤黑色素含量的效果，黑色素含量均为负值，并逐渐下降，说明外用化妆品具有祛黑的作用，同时，空白样品的色素变化率都为正值。另外，当第5周停药之后，对照例1的样品使用后的皮肤黑色素含量显著恢复，到第6周时已经提高至-0.87，而使用了实施例6的样本的黑色素含量升高缓慢，说明加入了丝氨酸蛋白酶抑制剂的化妆品具有较好的保持细胞活性，防止熊果苷还原产物刺激皮肤的作用，具有长效抑黑的作用；对照例3中的样品中未加入熊果苷，皮肤未受到熊果苷还原产物的影响，停药后皮肤亮度的变化不大，丝氨酸蛋白酶抑制剂在对照例3中加入后所起的作用不显著。(2)皮肤亮度的变化分析皮肤亮度变化反映在测试周期内，考察实验区域皮肤亮度L值随时间变化规律。其值越大，皮肤亮度越大，反之，皮肤亮度越低。皮肤亮度差值(ΔT)＝使用产品后各时间点L值(Tn)-使用产品前L值(T0)。受试部位皮肤亮度L值与初始值的差值从上表中可以看出，空白样品的皮肤亮度在测试的6周内基本保持稳定，而实施例中的样品具有使皮肤亮度稳定上升的效果；在第5、6周停药后，对照例2中的样品的皮肤亮度明显出现了下降，而实施例中的样品的亮度保持稳定，说明加入了丝氨酸蛋白酶抑制剂的外用皮肤试验中，能够有效地抑制熊果苷的降解对皮肤的影响，促使细胞活化，使美白效果更持久。当前第1页1 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