含有桑辛素、桑黄铜G或桑白皮的,肌肉疾病的预防及治疗用或肌功能改善用组合物的制作方法

文档序号:15746297发布日期:2018-10-23 23:17阅读:256来源:国知局
本申请主张2015年5月26日申请的韩国注册专利第10-2015-0072738号的优先权,所述说明书的全部内容为本申请的参考文献。本发明涉及一种含有桑辛素、桑黄铜G或桑白皮的,肌肉疾病的预防及治疗用或肌功能改善用组合物,更具有来说,一种含有桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物为有效成分的,肌肉疾病的预防及治疗用或肌功能改善用组合物,通过增加参与肌蛋白质合成的p-mTOR的蛋白质表达,抑制参与肌蛋白质分解的MuRF-1和atrogin-1的mRNA的表达,增加参与肌肉分化的MyoD和细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达,对肌肉疾病的预防及治疗或肌功能改善具有显著效果。
背景技术
:肌肉萎缩(Muscleatrophy)是指随着肌肉量的逐渐减少而发生的肌肉的弱化及退行(Cell,119(7):907-910,2004)。肌肉萎缩因不活动、氧化应激、慢性炎症而促发,弱化肌肉技能和运动能力(ClinicalNutrition,26(5):524-534,2007)。决定肌功能的最重要的要素是肌肉量,这通过蛋白质的合成与分解的均衡来维持。当蛋白质的分解多于合成时,发生肌肉萎缩(TheInternationalJournalofBiochemistryandCellBiology,37(10):1985-1996,2005)。肌肉大小通过肌肉内发生的同化作用(anabolism)和异化作用(catabolism)诱导的细胞内信号传递过程(signalingpathways)来调节,诱导肌蛋白质的合成的信号传递反应比分解多,肌蛋白质的合成增加,这显示为通过蛋白质增加使肌肉大小增加(hypertrophy,肌肥大)或肌纤维数增加(hyperplasia)(TheKoreaJournalofSportsScience,20(3):1551-1561,2011)。参与肌蛋白质合成的因子在肌细胞内以刺激磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3kinase(PI3K))/Akt途径(Aktpathway)为基点,使下游蛋白(downstreamproteins)磷酸化,诱导蛋白质合成。通过PI3K/Akt传递信号的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin(mTOR))的活性被认为是综合多种生长信号的重要生长信号传递因子。mTOR使启动mRNA翻译(translation)的两个因子,4E结合蛋白(4E-bindingprotein(4EBP1))和p70核糖体蛋白S6激酶(phosphorylated70-kDaribosomalS6kinase(p70S6K))活性化,诱导肌蛋白质合成,对肌肉量的增加做出贡献(TheKoreaJournalofSportsScience,20(3):1551-1561,2011;TheInternationalJournalofBiochemistryandCellBiology,43(9):1267-1276,2011)。与此相反,叉头(forheadbox(FoxO))转录因子(transcriptionfactor),从细胞质移动到核内,则增加参与蛋白质分解的E3泛素连接酶(E3ubiquitinligase)因子atrogin-1和MuRF-1的表达(DiseaseModelsandMechanisms,6:25-39,2013)。这些因子的表达量增加时,促进肌肉内的蛋白质分解,导致肌肉量减少。因此促进mTOR的活性和抑制atrogin-1和MuRF-1的表达可以增加肌肉蛋白质的量从而增加肌肉量。肌肉细胞的分化和肌肉的形成,通过多种肌肉调节因子(muscleregulatoryfactors)来调节。其中,MyoD启动肌肉特异基因的表达,诱导肌肉卫星细胞(musclesatellitecells)分化肌肉成肌细胞(myoblast)。通过MyoD的活性来诱导肌细胞生成素(myogenin)的表达,作为成肌细胞融合(fusion)的最重要要素,参与肌管(myotube)的形成。通过所述过程形成的肌纤维形成肌纤维束,最终形成肌肉(CellularandMolecularLifeSciences,70:4117-4130,2013)。桑白皮(MoriCortexRadicis)是把属于桑科(Moraceae)桑属(Morusspp.)植物的桑树(Morusalba)或其他植物的根皮干燥而得的。被成为桑树的Morusalba已被报告具有抗肥胖(NutritionResearchandPractice,8(6):613-617,2014)、抗老化(JournalofKoreaSocietyofFoodScienceandNutrition,42(11):1744-1752,2013)、抗糖尿(JournalofEthnopharmacology,100(3):333-338,2005)、抗氧化和美白(FoodandChemicalToxicology,49(4):785-790,2011)等活性。桑辛素(Morusin)和桑黄铜G(kuwanonG)是主要从桑白皮中发现的黄酮(flavone)(MicrochemicalJournal,110:731-738,2013)。桑辛素已被报告具有抗菌(JournalofChinaPharmaceuticalUniversity,45(2):221-226,2014)、抗肥胖(Molecule,16(7):6010-6022,2011)、抗癌(ToxicologyLetters232(2):490-498,2015)的活性。桑黄铜G已被报告具有抗菌(JournalofEthnopharmacology,84(2-3):181-5,2003;Phytomedicine,11(7-8):666-672,2004)的活性。但在本发明之前,并没有关于桑白皮、桑辛素、桑黄铜G的肌肉疾病的预防及治疗或肌功能改善作用的相关报告。技术实现要素:因此本发明者寻找具有优秀的肌功能调节活性并可以安全使用的天然物质,结果确认桑辛素(morusin)、桑黄铜G(kuwanonG)或桑白皮提取物(MoriCortexRadicisextract)具有肌肉疾病的预防及治疗或肌功能改善活性,由此完成本发明。因此,本发明的目的是提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物。[化学式1][化学式2]本发明的另一个目的是提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防或肌功能改善用食品组合物。本发明的另一个目的是提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌功能改善用化妆品组合物。本发明的另一个目的是提供所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上的、用于预防肌肉疾病或制备治疗制剂的用途。本发明的另一个目的是提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上,将其按照有效量投入到需要该物质的个体为特征的预防或治疗肌肉疾病的方法。为了达到本发明的目的,本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物。[化学式1][化学式2]为了达到本发明的另一个目的,本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防或肌功能改善用食品组合物。为了达到本发明的另一个目的,本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌功能改善用化妆品组合物。为了达到本发明的另一个目的,本发明提供所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上的用于预防肌肉疾病或制备治疗制剂的用途。为了达到本发明的另一个目的,本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上,将其按照有效量投入到需要该物质的个体为特征的预防或治疗肌肉疾病的方法。下面将对本发明进行详细说明。本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物。[化学式1][化学式2]本发明中的所述桑白皮(MoriCortexRadicis)是把属于桑科(Moraceae)桑属(Morusspp.)植物的桑树(Morusalba)或其他植物的根皮干燥而得的。根据本发明的一个实施例,本发明者从桑白皮中分离所述化学式1表示的化合物桑辛素及所述化学式2表示的化合物桑黄铜G,并确认所述桑辛素、桑黄铜G及桑白皮提取物可以增加参与肌蛋白质合成的p-mTOR的蛋白质表达,抑制参与肌蛋白质分解的MuRF-1和atrogin-1的mRNA的表达,增加参与肌肉分化的MyoD和肌细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达,对增大肌肉量具有显著效果。所述化学式1的化合物或所述化学式2的化合物可以通过从植物提取物中分离或合成来使用,也可以使用市场上销售的化合物。本发明中所述化学式1表示的化合物或所述化学式2表示的化合物可以是从桑表皮提取物中分离出来的。所述化学式1表示的化合物或所述化学式2表示的化合物可以是从桑表皮中分离出来的。本发明中的桑白皮提取物可以通过已知的天然物提取方法来提取。优选地,可以通过水、碳数为1到6的有机溶剂及亚临界或超临界流体组合的群中选择一个以上的溶剂来提取。所述碳数为1到6的有机溶剂可以从碳数为1到6的乙醇(alcohol)、丙酮(acetone)、醚(ether)、苯(benzene)、三氯甲烷(chloroform)、乙酸乙酯(ethylacetate)、二氯甲烷(methylenechloride)、正己烷(hexane)、环己烷(cyclohexane)、石油醚(petroleumether)组合的群中选择,但不限于此。同时,本发明的桑白皮提取物可以通过把干燥的桑白皮利用适用于食品加工的纯净水、乙醇及亚临界水或超临界二氧化碳来提取、纯化而得或利用超高压提取装置来提取、纯化而得或从直接压榨桑白皮植物而得的油中分离纯化而得。例如,在100MPa的超高压条件下提取桑白皮而获得提取物。优选地,可以是100MPa至1000MPa的超高压条件,但并不限于此。本说明书中的“肌”是指筋、肌肉、腱,“肌功能”表示通过肌肉收缩发力的能力,包括肌肉为了克服阻力而最大限度发挥收缩力的能力即肌力、显示肌肉对既定的重量能够支撑多久或能够反复收缩放松几次的能力即肌持久力、短时间内发挥较强力量的能力即爆发力。这些肌功能由肝脏主管,其能力与肌肉量成正比。“肌功能改善”是指改善肌功能使其更好。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物可用于肌肉消耗或退化引起的肌肉疾病的预防或治疗。肌肉消耗及退化因遗传因素、后天因素、老化等原因发生,肌肉消耗的特征为肌肉量的逐渐损失,肌肉特别是骨骼肌或随意肌和心脏肌肉的减弱和退行。与此相关的疾病有张力缺乏症(atony)、肌萎缩症(muscularatrophy)、肌营养不良症(musculardystrophy)、肌肉退化、肌硬化症、肌营养不良症、肌萎缩侧索硬化症、肌无力症、恶病质(cachexia)、肌肉减少症(sarcopenia)等,但不限于此。本发明的组合物具有肌肉增大效果,对肌肉的种类没有限制。本发明中的肌肉疾病的预防及治疗用或肌功能改善用组合物可单独含有桑白皮提取物或含有一种以上桑白皮提取物和具有类似桑白皮提取物功能的活性成分。若含有追加的成分,本发明的组合物的肌功能改善效果会更加显著。添加所述成分时,可考虑复合使用时的皮肤稳定性、剂型化难易度、活性成分的稳定性。本发明的组成物可以制备为口服投入剂、经皮投入剂、吸入投入剂等药学组合物的形态、功能性食品、营养辅助剂、健康食品及食品添加剂等食品组合物形态或化妆品组合物形态被投入到体内。本发明中的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物具有显著的肌肉疾病的预防及治疗效果或肌功能改善效果。本发明的组合物具有促进肌肉量增加的效果,对于肌肉的种类没有限制。肌肉增加是在身体成分中提高肌肉的性能,通过体力运动或提高耐力增加肌肉量,还可以把具有增加肌肉效果的物质投入到体内的方式增加肌肉量。本发明中的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物具有优秀的增加肌肉量的活性,可以作为药学组合物的有效成分来使用。同时,本发明中的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物具有优秀的增加肌肉量的活性,可以作为食品组合物的有效成分来使用。同时,本发明中的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物具有优秀的增加肌肉量的活性,可以作为化妆品组合物的有效成分来使用。本发明中的药学组合物包括所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物的药剂学上可接受的盐。本说明书中“药剂学上可接受的盐”是指生理学上可接受的,投入到人体时,通常不会引起过敏反应或其他类似反应,所述盐优选为药剂学上可接受的游离酸(freeacid)形成的酸盐。所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物或桑白皮提取物的药剂学上可接受的盐可以利用有机酸或无机酸形成的酸盐,所述有机酸举例来说可以是甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸、异丁酸、三氟乙酸、羟基丁二酸、马来酸、丙二酸、富马酸、琥珀酸、琥珀酰胺酸、谷氨酸、酒石酸、草酸、柠檬酸、乙醇酸、葡糖醛酸、抗坏血酸、苯甲酸、酞酸、水杨酸、邻氨基苯甲酸、二氯乙酸、氨基氧乙酸、苯磺酸、p-甲苯磺酸或甲烷磺酸。所述无机酸举例来说可以是盐酸、溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸或硼酸。酸盐优选为盐酸盐或乙酸盐形式,更优选为盐酸盐形式。所述酸盐通过常规的盐制备方法来制备,即a)把所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物与酸直接混合或b)把其中一个在溶剂或含水溶剂中溶解并混合或c)把所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物置于溶剂或水下溶剂中的酸中,并将它们混合。另外,还可以追加的盐的形式加巴盐、加巴喷丁盐、普加巴林盐、烟酸盐、己二酸盐、半丙二酸盐、半胱氨酸盐、乙酰半胱氨酸盐、蛋氨酸盐、精氨酸盐、赖氨酸盐、鸟氨酸盐、天冬氨酸盐等。同时,本发明中的肌肉疾病的预防及治疗用药学组合物,还可以包括药学上可接受的载体。药学上可接受的载体有,例如口服投入用载体或非口服投入用载体。口服投入用载体可包括乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。非口服投入用载体可包括水、适合的油、盐水、水性葡萄糖和乙二醇等。另外,还可以包括稳定剂及防腐剂。适合的稳定剂有亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸等抗氧化剂。适合的防腐剂有苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和异丁醇。其他药学上可接受的载体,可以参考以下文献中的记载。(Remington'sPharmaceuticalSciences,19thed.,MackPublishingCompany,Easton,PA,1995).本发明中的药学组合物可以通过任何方法给包括人类在内的哺乳动物投入使用。例如,可以口服投入或非口服投入,非口服投入的方法有向静脉内、肌肉内、动脉内、骨髓内、硬脑膜内、心脏内、经皮肤、皮下、腹腔内、鼻腔内、肠管、局部、舌下或直肠内投入,但不限于此。本发明中的药学组合物如前面所述,可以按照投入途径选择口服投入用或非口服投入用制剂被剂型化。被剂型化时,可以使用一个以上的的缓冲剂(例如,盐水或PBS)、抗氧化剂、制菌剂、螯合剂(例如,EDTA或谷胱甘肽)、填充剂、增量剂、粘合剂、佐剂(如氢氧化铝)、悬浮剂、浓稠剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂,稀释剂或赋形剂。口服投入用固体制剂有锭剂、丸剂、散剂、颗粒剂、液剂、凝胶剂、糖浆剂、泥浆剂、悬浮剂或胶囊剂等,这些固体制剂可以在本发明的药学组合物中添加一个以上赋形剂如淀粉(玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉等)、钙碳酸盐(calciumcarbonate)、蔗糖(sucrose)、乳糖(lactose)、葡萄糖、山梨醇、甘糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、凝胶等来制备。例如,将活性成分与固体赋形剂混合将其粉碎,添加适合的辅助剂,加工成颗粒混合物,可获得锭剂或糖衣锭剂。除了单纯的赋形剂以外,还可使用硬脂酸镁、滑石等润滑剂。用于口服的液状制剂有悬浮剂、内用液剂、油剂、糖浆剂等,除了通常使用的简单稀释剂水或液体石蜡外,还可以包括各种赋形剂,如润湿剂、甜味剂、芳香剂或防腐剂等。同时,根据情况添加交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸及海藻酸钠等作为崩解剂,还可以包括冷凝剂、润滑剂、润湿剂、香料、乳化剂及防腐剂。非口服投入的情况下,本发明中的药学组合物与适合的非口服用载体可通过所属行业已知的方法被剂型化为注射剂、经皮投入剂、鼻腔吸入剂形式。所述注射剂必须进行灭菌,要保护好以免被细菌和真菌等微生物污染。注射剂的适合的载体包括但不限于水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)和其混合物及/或包括植物油的溶剂或分散介质。优选地,适合的载体可以使用汉克斯液、林格氏溶液、含有酒精胺的PBS(phosphatebufferedsaline)或注射用灭菌水、10%乙醇、40%的丙二醇及5%的葡萄糖等等渗溶液。为了保护好所述注射剂以免被微生物污染,可添加对羟基本甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等多种抗菌剂及抗真菌剂。同时,所述注射剂大部分可以添加糖或氯化钠等等渗溶液。经皮投入剂包括软膏剂、霜剂、乳液剂、凝胶剂、外用液体剂,贴片剂、擦剂、气喷剂等形式。所述“经皮投入”是指把药学组合物投入到局部皮肤上,使药学组合物中所含的活性成分被传达到皮肤内。作为吸入投入剂,本发明中的化合物可选择适合的推进剂如使用二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适合的气体,从加压包或喷雾器中通过喷雾来很方便地投入。加压气雾剂的剂量单位,通过传达计量的量的阀来确定。例如,在吸入器或吹入器中使用的明胶胶囊或药筒可被剂型化为含有乳糖或淀粉等适合的粉末的粉末混合物。非口服投入用剂型在所有制药化学已被告知的处方书文献(Remington'sPharmaceuticalScience,15thEdition,1975.MackPublishingCompany,Easton,Pennsylvania18042,Chapter87:Blaug,Seymour)中记载。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物包括所述化学式1的化合物、化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中一个以上,并含有有效量时,可提供较好的肌肉疾病预防及治疗效果。本说明书中“有效量”是指与阴性对照组相比,显示出更多的反应的量,更优选地,是可以提高肌功能的充分的量。本发明中的药学组合物中所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物可占0.01至99.99%,剩余量为药学上可接受的载体。本发明中的药学组合物中包括的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物的有效量根据组合物的产品化形态而不同。本发明的药学组合物的总有效量可以按照单次量(singledose)来投入给患者或按照多次量(multipledose)长期投入的分次治疗方案(fractionatedtreatmentprotocol)来投入。本发明中的药学组合物根据疾病的种类可含有不同含量的活性成分。非口服投入时,以所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物为基准,每日每1公斤体重投入剂量优选为0.01至50mg,更优选为0.1至30mg,口服投入时,以所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物为基准,每日每1公斤体重投入剂量优选为0.01至100mg,更优选为0.01至10mg,可分1次或数次投入。但所述化学式1的化合物、化学式2的化合物及或桑白皮提取物的剂量,需考虑药学组合物的投入途径及治疗次数还需考虑患者的年龄、体重、健康状况、性别、疾病的严重程度、饮食和排泄率等多种因素后决定。考虑到以上因素,在所属领域具有通常知识的人可根据肌肉疾病预防及治疗的特定用途,决定所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物的合适的有效投入量。本发明中的药学组合物只要具有本发明的效果即可,并不局限于其剂型、投入途径及投入方法。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物可单独使用或与手术、放射治疗、激素治疗、化学治疗、生物反应调节剂等方法并用。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物可以是包括所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物组合的群中选择的一种以上作为有效成分的外用制剂的剂型。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物为皮肤外用制剂时,可含有脂肪物质、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂、胶凝剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foamingagent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型乳化剂、非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂、螯合剂、防腐剂、维生素、封闭剂、润湿剂、必需的油、染料、颜料、亲水性活性剂、亲油性活性剂或脂质囊泡等皮肤外用制剂中常规使用的任意其他成分的皮肤科学领域通常使用的辅助剂。同时,所述成分可按照皮肤科学领域通常使用的量来添加。本发明中的肌肉疾病预防及治疗用药学组合物作为皮肤外用制剂时,可以采用软膏、贴剂、凝胶、霜剂或喷雾剂等剂型。本发明提供含有所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌肉疾病预防或肌功能改善用食品组合。[化学式1][化学式2]本发明的食品组合物包括功能性食品(functionalfood)、营养辅助剂(nutritionalsupplement)、健康食品(healthfood)、食品添加剂(foodadditives)及饲料等所有形式,把人类或家畜作为摄入对象。所述类型的食品组合物可根据所属行业常规方法按照各种形式制备。所述类型的食品组合物可根据所属行业常规方法按照各种形式制备。在一般食品中包括但不限于饮料(包括含酒精饮料)、水果及其加工食品(如水果罐头、瓶装水果、果酱、柠檬或橙子酿出的果酱)、鱼类、肉类及其加工食品(如火腿、香肠等)、面包以及面食类(如乌冬面、荞麦面、拉面、意大利面、通心粉等)、果汁、各种饮料、饼干、糖、乳制品(如黄油、芝士等)、食用植物油、人造黄油、植物性蛋白质、蒸煮袋食品、冷冻食品,各种调味料(如豆瓣酱、酱油、酱汁等)等,可以添加所述化学式1的化合物,化学式2的化合物或桑白皮提取物来制备。另外,营养辅助剂可以在胶囊,片剂,丸剂等中添加桑白皮提取物来制备,但不限于此。此外,健康功能食品,可以通过把所述桑白皮提取物本身添加到茶、果汁及饮料的形式制备,为了便于饮用(健康饮料),使其以液体化、颗粒化、胶囊化及粉末化的形式被摄取,但不限于此。另外,所述桑白皮提取物为了以食品添加剂的形式使用,使用粉末或浓缩液形式制备。此外,桑白皮提取物还可以与已知的具有肌肉疾病预防及肌功能的改善效果的活性成分混合,以组合物的形式制备。本发明中的肌肉疾病预防及肌功能改善用组合物以健康饮料的形式使用时,所述健康饮料组合物与常规饮料相同,含有各种香味剂或天然碳水化合物等添加成分。所述天然碳水化合物可以是葡萄糖、果糖等单糖;麦芽糖、蔗糖等双糖;糊精、环糊精等多糖;木糖醇、山梨醇、赤藓糖醇等糖醇。甜味剂可以使用索马甜、甜叶菊等天然甜味剂;糖精、阿斯巴甜等合成甜味剂。所述天然碳水化合物的比例是本发明的组合物每100mL约含0.01~0.04g,优选为约含0.02~0.03g。所述化学式1的化合物,化学式2的化合物或桑白皮提取物可作为有效成分包含在肌肉疾病预防及肌功能改善用食品组合物里,其量为可以产生肌肉疾病预防及肌功能改善的有效的量,无特别的限制,但优选为占全部组合物总量的0.01至100重量%。本发明中的食品组合物可以将所述化学式1的化合物,化学式2的化合物或桑白皮提取物和肌肉疾病预防及肌功能的改善用组合物中已知的有效的其他活性成分一起混合来制备。除所述成分外,本发明中的健康食品可以含有各种营养剂、维生素、电解质、风味剂、着色剂、果胶酸、果胶酸盐、海藻酸、海藻酸盐、有机酸,保护胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精或碳酸化剂等。另外,本发明的健康食品可以含有用于生产天然果汁、果汁饮料或蔬菜饮料的果肉。这些成分可以独立使用或混合使用。这种添加剂的比例不是很关键,但通常选择在每100重量份中本发明组合物占0.01至0.1重量份的范围内。本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分的肌功能改善用化妆品组合物。[化学式1][化学式2]本发明的化妆品组合物含有所述化学式1的化合物、化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上作为有效成分,与皮肤学上可接受的赋形剂混合,可以制备成基础化妆品组合物(如化妆水、霜、精华素、洁面泡沫和洁面水等洁面产品、面膜、身体护肤油)、彩妆化妆品组合物(粉底、口红、睫毛膏、隔离霜)、发用产品组合物(洗发水、护发素、焗油膏、发胶)及肥皂形式等。这样的赋形剂包括但不限于皮肤软化剂、皮肤渗透促进剂、着色剂、芳香剂、乳化剂、稠化剂和溶剂。另外,还可以含有香料、色素、杀菌剂、抗氧化剂、防腐剂、保湿剂等,为了提高物性还可以含有增稠剂、无机盐、合成高分子物质等。例如,当用本发明的化妆品组合物制备成洁面产品和肥皂时,可以通过将所述桑白皮提取物添加到通常的洁面剂和肥皂基质中来容易地生产洁面剂和肥皂。在生产霜剂的情况下,可以通过将桑白皮提取物或其盐添加到常规的水包油(O/W)型霜膏基质中来制备。还可以添加香料、螯合剂、色素、抗氧化剂、防腐剂等,为了改善物性还可以添加蛋白质、矿物质、维生素等合成或天然材料。本发明的化妆品组合物含有的所述化学式1的化合物、化学式2的化合物或桑白皮提取物的含量,对于全部组合物总重量,优选为占0.001至10重量%,更优选为占0.01至5重量%,但不限于此。所述含量低于0.001重量%时,无法期待预期的肌肉功能改善效果,若超过10重量%时,稳定性差及制备剂型时存在困难。本发明提供所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上的用于预防肌肉疾病或制备治疗制剂的用途。[化学式1][化学式2]本发明提供包括所述化学式1的化合物、所述化学式2的化合物及桑白皮提取物组合的群中选择的一个以上,将其按照有效量投入到需要该物质的个体为特征的预防或治疗肌肉疾病的方法。[化学式1][化学式2]本发明的所述“有效量”是指当向个体投入时,可以显示出肌肉疾病的改善、治疗和预防效果的量,所数“个体”是指动物,优选哺乳动物,尤其是包括人和家畜的动物,或动物来源的细胞、组织、器官等。所述个体可以是需要治疗的患者(patient)或家畜。与现有技术相比,本发明的有益效果如下:本发明中的桑辛素(morusin)、桑黄铜G(kuwanonG)或桑白皮提取物(MoriCortexRadicisextract),通过增加参与肌蛋白质合成的p-mTOR的蛋白质表达,抑制参与肌蛋白质分解的MuRF-1和atrogin-1的mRNA的表达,增加参与肌肉分化的MyoD和细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达,对增加肌肉量具有显著效果。同时,本发明为天然物质没有副作用,可以安全使用,可用于医药品、食品、化妆品。附图说明通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述,本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显:图1显示了在L6肌肉细胞中用桑辛素、桑黄铜G、桑白皮热水提取物或桑白皮乙醇提取物处理后p-mTOR的蛋白质表达的测量结果;图2显示了在L6肌肉细胞中用桑辛素处理后p-4EBP1和p-p70S6K的蛋白质表达的测量结果;图3显示了在L6肌肉细胞中用桑黄铜G处理后p-4EBP1和p-p70S6K的蛋白质表达的测量结果;图4显示在L6肌肉细胞中通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物处理后P70S6K蛋白表达的测量结果;图5显示在L6肌肉细胞中用桑辛素处理后MyoD和myognin的mRNA表达的测量结果;图6显示在L6肌肉细胞中用桑黄铜G处理后MyoD和myognin的mRNA表达的测量结果;图7显示在L6肌肉细胞中通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物处理后MyoD和myognin的mRNA表达的测量结果;图8显示了在L6肌肉细胞中用桑辛素处理后atrogin-1和MuRF-1mRNA表达的测量结果;图9显示了在L6肌肉细胞中用桑黄铜G处理后atrogin-1和MuRF-1mRNA表达的测量结果;图10显示了在L6肌肉细胞中通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物处理后atrogin-1和MuRF-1mRNA表达的测量结果。具体实施方式下面将通过本发明的实施例对本发明进行详细说明。但,下面将要描述的实施例仅为本发明的示例性说明,本发明的内容并不局限于此。参照例1:桑辛素(morusin)的物质信息名称:Morusin;2-(2,4-Dihydroxyphenyl)-5-hydroxy-8,8-dimethyl-3-(3-methyl-2-buten-1-yl)-4H,8H-benzo[1,2-b:3,4-b']dipyran-4-oneCASNo.:62596-29-6参照例2:桑黄铜G(kuwanonG)的物质信息名称:kuwanonG;8-[(1S,5R,6S)-6-(2,4-Dihydroxybenzoyl)-5-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-methyl-2-cyclohexen-1-yl]-2-(2,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-(3-methyl-2-buten-1-yl)-4H-chromen-4-oneCASNo.:75629-19-5<实施例1>桑白皮提取物的制备<1-1>桑白皮甲醇提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将100g粉碎的桑白皮样品加入到1L100%甲醇中,并在24小时室温下重复提取3次。提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,过滤后的提取物用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分,得到桑白皮甲醇提取物。<1-2>桑白皮乙醇提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将100g粉碎的桑白皮样品加入到1L100%乙醇中,并在24小时室温下重复提取3次。提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,过滤后的提取物用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分,得到桑白皮乙醇提取物。<1-3>桑白皮乙酸乙酯提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将100g粉碎的桑白皮样品加入到1L100%乙酸乙酯中,并在24小时室温下重复提取3次。提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,过滤后的提取物用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分,得到桑白皮乙酸乙酯提取物。<1-4>桑白皮己烷提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将100g粉碎的桑白皮样品加入到1L100%己烷中,并在24小时室温下重复提取3次。提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,过滤后的提取物用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分,得到桑白皮己烷提取物。<1-5>桑白皮热水提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将100g粉碎的桑白皮样品加入到1L水中,并80℃搅拌2小时提取。提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,过滤后的提取物用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分,得到桑白皮热水提取物。<1-6>桑白皮超高压提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将1g粉碎的桑白皮样品和76ml的18%乙醇置于聚乙烯(polyethylene)包装中并密封,并用超高压提取装置(FrescalMFP-7000;三菱重工,日本东京)提取。超高压提取条件为提取压力320MPa,提取时间5分钟。用沃特曼(Whatman)2号滤纸过滤提取的样品,用真空旋转浓缩器浓缩过滤后的提取物,除去溶剂成分,得到桑白皮超高压提取物。<1-7>桑白皮超临界流体提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将1g粉碎的桑白皮样品装入样品盒中,用超临界流体萃取装置(SFX3560,IscoInc.,Lincoln,NE,USA)萃取。超临界流体萃取条件为萃取压力40MPa,萃取温度50℃,超临界二氧化碳流速60mL/分钟,萃取时间60分钟。完成超临界流体萃取后,通过降低萃取装置的压力,解除超临界流体状态,获得桑白皮超临界流体萃取物。<1-8>桑白皮亚临界流体提取物的制备用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,将1g粉碎的桑白皮样品加入到10ml蒸馏水中,用亚临界流体萃取装置(DIONEXAcceleratedSolventExtractor100,DIONEXco.,USA)萃取。亚临界流体萃取条件为2.5MPa,萃取温度为150℃,萃取时间为15分钟。将提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸过滤,并将过滤的提取物在-40℃冻干,获得桑白皮亚临界流体提取物。<实施例2>桑辛素、桑黄铜G的分离<2-1>桑辛素的分离用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,然后将100g粉碎的桑白皮样品放入1升100%乙醇并在24小时室温下重复提取3次。所提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,被过滤的提取液用真空旋转浓缩器浓缩,获得桑白皮乙醇提取物。将乙醇提取物装填到硅胶(silicagel;70-230mesh,Merck&Co.,WhitehouseStation,NJ,USA)填充柱上,使用己烷、乙酸乙酯、甲醇的混合溶剂系统收集。并根据上述收集顺序分成8个较低的分划物。把第二个分划物再次用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分。将浓缩液装填到填充有RP-18的柱中,使用混合了水、甲醇和乙腈的溶剂系统进行收集。并根据上述收集顺序分为5个较低的分划物。从其中的5号分划物分离并纯化所述化学式1的化合物桑辛素。[化学式1]<2-2>桑黄铜G的分离用搅拌机粉碎干燥的桑白皮,然后将100g粉碎的桑白皮样品放入1升100%乙醇并在24小时室温下重复提取3次。所提取的样品用沃特曼(Whatman)2号滤纸减压过滤,被过滤的提取液用真空旋转浓缩器浓缩,获得桑白皮乙醇提取物。将乙醇提取物装填到硅胶(silicagel;70-230mesh,Merck&Co.,WhitehouseStation,NJ,USA)填充柱上,使用己烷、乙酸乙酯、甲醇的混合溶剂系统收集。并根据上述收集顺序分成8个较低的分划物。把第六个分划物再次用真空旋转浓缩器浓缩除去溶剂成分。将浓缩液装填到填充有RP-18的柱中,使用混合了水、甲醇和乙腈的溶剂系统进行收集。并根据上述收集顺序分为6个较低的分划物。从其中的3号分划物分离并纯化所述化学式2的化合物桑黄铜G。[化学式2]<实施例3>桑辛素、桑黄铜G或桑白皮的肌肉生成活性把肌肉细胞L6成肌细胞(L6myoblast;ATCC,Manassas,VA,USA)和含有10%胎牛血清(fetalbovineserum;FBS;Hyclone,Logan,UT,USA)的DMEM培养基(Dulbecco'smodifiedEagle'sMedia;DMEM;Hyclone)装入6孔板,使其达到2X105细胞/mL。当细胞密度达到80~85%时,取出孔中的培养基,在含有2%马血清(horseserum;HS;Hyclone)的DMEM(Hyclone)里溶解所述实施例1-2中制备的桑白皮乙醇提取物(20μg/mL)、1-5中制备的桑白皮热水提取物(20μg/mL)、所述实施例2中分离并纯化的桑辛素(5μM)、桑黄铜G(5μM),用其处理细胞,诱导肌管(myotube)分化。此时,用0.01%DMSO代替样品处理的组用作对照组。每2天替换一次培养基,分化进行6天后,用含有蛋白酶抑制剂混合物(proteinaseinhibitorcocktail)的NP-40缓冲液(ELPIS-Biotech,Daejeon,Korea)进行溶解。将溶解在缓冲溶液中的细胞转移到1.5mL管(tube)中,并以13,000rpm离心10分钟,仅取出上清液。使用布拉德福(Bradford,Bio-RadLaboratoriesInc.,Hercules,CA,USA)法对上清液定量。将定量的蛋白质煮沸5分钟,通过10%SDS-PAGE电泳分离,并将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上。p-mTOR的第一抗体(Cellsignalingtechnology,Beverly,MA,USA)在2.5%牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)里按照1:1000的比例稀释,与传递到硝酸纤维素膜上的蛋白质在室温下反应20小时。与第一抗体反应后,使用TBST(Tris-bufferSalineTween20)将硝化纤维素膜洗涤三次,持续10分钟。把耦联了可标记第一抗体的辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)的抗兔(anti-rabbit)第二抗体(BethylLaboratories,Inc.,Montgomery,TA,USA)在2.5%BSA里按照1:1000的比例稀释,与硝酸纤维素膜用在室温下反应2小时,然后使用TBST洗涤三次每次10分钟。蛋白条带(Proteinband)利用ECL蛋白印迹检测试剂(ECLwesternblottingdetectionreagents;Amersham,Tokyo,Japan)显色,利用G;BOXEF成像系统(imagingsystem)(Syngene,Cambridge,UK)确认已显色的蛋白条带(Proteinband)。其结果如图1。其结果如图1显示,可以确认经桑白皮乙醇提取物、桑白皮热水提取物、桑辛素、桑黄铜G处理的L6肌肉细胞,p-mTOR的表达量增加。这表明,本发明的桑白皮乙醇提取物、桑白皮热水提取物、桑辛素、桑黄铜G的增加肌肉生成的能力优秀。<实施例4>在L6肌肉细胞中桑辛素的mRNA翻译(translation)促进活性使用0.1和1μM的浓度的实施例2-1中制备的桑辛素,以与实施例3中相同的方式进行实验。用参与mRNA翻译(translation)过程的p-p70S6K和p-4EBP1第一抗体(SantaCruzBiotechnology,SantaCruz,CA,USA)代替p-mTOR第一抗体进行处理,确认蛋白条带(proteinband)。结果,如图2所示,通过用桑辛素进行处理,增加了L6肌肉细胞中参与mRNA翻译(translation)的p-p70S6K和p-4EBP1的蛋白质表达。这表明本发明的桑辛素在肌肉细胞中促进了肌肉生成的mRNA翻译(translation)过程。<实施例5>在L6肌肉细胞中桑黄铜G的mRNA翻译(translation)促进活性使用1和5μM的浓度的实施例2-2中制备的桑黄铜G,以与实施例3中相同的方式进行实验。用参与mRNA翻译(translation)过程的p-p70S6K和p-4EBP1第一抗体(SantaCruzBiotechnology,SantaCruz,CA,USA)代替p-mTOR第一抗体进行处理,确认蛋白条带(proteinband)。结果,如图3所示,通过用桑黄铜G进行处理,增加了L6肌肉细胞中参与mRNA翻译(translation)的p-p70S6K和p-4EBP1的蛋白质表达。这表明本发明的桑黄铜G在肌肉细胞中促进了肌肉生成的mRNA翻译(translation)过程。<实施例6>在L6肌肉细胞中桑白皮提取物的mRNA翻译(translation)促进活性使用15μg/mL浓度的实施例1-2到1-5中制备的桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物,以与实施例3中相同的方式进行实验。用参与mRNA翻译(translation)过程的p-p70S6K和p-4EBP1第一抗体(SantaCruzBiotechnology,SantaCruz,CA,USA)代替p-mTOR第一抗体进行处理,确认蛋白条带(proteinband)。结果,如图4所示,通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物进行处理,增加了L6肌肉细胞中参与mRNA翻译(translation)的p-p70S6K和p-4EBP1的蛋白质表达。这表明本发明的桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物在肌肉细胞中促进了肌肉生成的mRNA翻译(translation)过程。<实施例7>桑辛素的肌肉分化活性把肌肉细胞L6成肌细胞(L6myoblast,ATCC)和含有10%FBS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)装入6孔板,使其达到2X105细胞/mL。当细胞密度达到80~85%时,取出孔中的培养基,在含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)里把所述实施例2-1中制备的桑辛素按照0.1和1μM浓度溶解,用其处理细胞,诱导肌管(myotube)分化。此时,用0.01%DMSO代替样品处理的组用作对照组。每2天替换一次培养基,分化进行6天后,用TRIzol试剂(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)分离总RNA。使用紫外分光光度计(NanoDrop1000;ThermoFisherScientificInc.,MA,USA)对分离的总RNA进行定量。使用定量的16μL的RNA,利用逆转录酶预混料(ReverseTranscriptasePremix,ELPIS-Biotech)和PCR设备(GeneAmpPCRSystem2700;AppliedBiosystems,MA,USA)在42℃/55分钟、70℃/15分钟条件下合成cDNA。合成的16μL的cDNA中取4μL的cDNA,利用所述特异性引物(Bioneer,Daejeon,Korea)及PCRpremix(ELPIS-Biotech)在95℃下30秒、在60℃下1分钟,72℃下1分钟,重复进行30次PCR。MyoDForwardprimer:5'-TTTCGACTCACCAGACCTGC-3'(序列号1)Reverseprimer:5'-CAGAGCCTGCAGACCTTCAA-3'(序列号2)细胞生成素(myogenin)Forwardprimer:5'-TTTCGCACCTGATGGACCTG-3'(序列号3)Reverseprimer:5'-CTTTCTTGAGCCTGCGCTTC-3'(序列号4)β-Actin:Forwardprimer:5'-AGCCATGTACGTAGCCATCC-3’(序列号5)Reverseprimer:5'-CTCTCAGCTGTGGTGCTGAA-3’(序列号6)通过在1.5%琼脂糖凝胶(agarosegel)上电泳分离PCR扩增的cDNA,并使用G;BOXEF成像系统(Syngene)确认cDNA带(band)。结果如图5所示。结果,如图5所示,通过用桑辛素进行处理,增加了在L6肌肉细胞中MyoD和肌细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达。这表明本发明的桑辛素在肌肉细胞中促进肌肉分化的能力优秀。<实施例8>桑黄铜G的肌肉分化活性以与所述实施例7相同的方法培养肌肉细胞L6成肌细胞(L6myoblast,ATCC),在含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)里把所述实施例2-2分离并纯化的桑黄铜G按照1和5μM浓度溶解,用其处理细胞,诱导肌管(myotube)分化。此时,用0.01%DMSO代替样品处理的组用作对照组。每2天替换一次培养基,分化进行6天后,用与实施例7相同的方法进行RT-PCR。结果,如图6所示,通过用桑黄铜G进行处理,增加了在L6肌肉细胞中MyoD和肌细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达。这表明本发明的桑黄铜G在肌肉细胞中促进肌肉分化的能力优秀。<实施例9>桑白皮提取物的肌肉分化活性以与所述实施例7相同的方法培养肌肉细胞L6成肌细胞(L6myoblast,ATCC),在含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)里把所示实施例1-2到1-5制备的桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物按照15μg/ml浓度溶解,用其处理细胞,诱导肌管(myotube)分化。此时,用0.01%DMSO代替样品处理的组用作对照组。每2天替换一次培养基,分化进行6天后,用与实施例7相同的方法进行RT-PCR。结果,如图7所示,通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物进行处理,增加了在L6肌肉细胞中MyoD和肌细胞生成素(myogenin)的mRNA的表达。这表明本发明的桑白皮提取物在肌肉细胞中促进肌肉分化的能力优秀。<实施例10>桑辛素的肌蛋白质分解抑制活性把肌肉细胞L6成肌细胞(L6myoblast,ATCC)和含有10%FBS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)装入6孔板,使其达到2X105细胞/mL。当细胞密度达到80~85%时,取出孔中的培养基,用含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)处理细胞,诱导肌管(myotube)分化。每2天替换一次培养基,分化进行共6天。分化后,在含有50ng/mLα肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactoralph,TNF-α;PeproTech,RockyHills,NJ,USA)的DMEM(Hyclone)里把所述实施例2-1制备的桑辛素按照0.1和1μM浓度溶解,用其处理细胞。6小时后,用TRIzol试剂(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)分离总RNA。使用紫外分光光度计(NanoDrop1000;ThermoFisherScientificInc.,MA,USA)对分离的总RNA进行定量。使用定量的16μL的RNA,利用逆转录酶预混料(ReverseTranscriptasePremix,ELPIS-Biotech)和PCR设备(GeneAmpPCRSystem2700;AppliedBiosystems,AppliedBiosystems)在42℃/55分钟、70℃/15分钟条件下合成cDNA。合成的16μL的cDNA中取4μL的cDNA,利用所述特异性引物(Bioneer)及PCRpremix(ELPIS-Biotech)在95℃下30秒、在60℃下1分钟,72℃下1分钟,重复进行30次PCR。Atrogin-1Forwardprimer:5'-CCCTGAGTGGCATCGCCCAA-3'(序列号7)Reverseprimer:5'-AGGTCCCGCCCATCGCTCA-3'(序列号8)MuRF-1Forwardprimer:5'-GAAATGCTATGCAGAACCTG-3'(序列号9)Reverseprimer:5'-ATTCCTGCTTGTAGATGTCG-3'(序列号10)β-Actin:Forwardprimer:5'-AGCCATGTACGTAGCCATCC-3’(序列号11)Reverseprimer:5'-CTCTCAGCTGTGGTGCTGAA-3’(序列号12)通过在1.5%琼脂糖凝胶(agarosegel)上电泳分离PCR扩增的cDNA,并使用G;BOXEF成像系统(Syngene)确认cDNA带(band)。结果如图8所示。结果,如图8所示,通过用桑辛素进行处理,减少了在L6肌肉细胞中atrogin-1及MuRF-1的mRNA的表达。这表明本发明的桑辛素在肌肉细胞中抑制肌蛋白质分解能力优秀。<实施例11>桑黄铜G的肌蛋白质分解抑制活性使用与所述实施例10相同的方法,用含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)处理细胞,诱导肌管(myotube)分化后,在含有50ng/mLTNF-α(PeproTech)的DMEM(Hyclone)里把所述实施例2-2分离纯化的桑黄铜G按照1和5μM浓度溶解,用与实施例10相同的方法进行RT-PCR。结果,如图9所示,通过用桑黄铜G进行处理,减少了在L6肌肉细胞中atrogin-1及MuRF-1的mRNA的表达。这表明本发明的桑黄铜G在肌肉细胞中抑制肌蛋白质分解能力优秀。<实施例12>桑白皮提取物的肌蛋白质分解抑制活性使用与所述实施例10相同的方法,用含有2%HS(Hyclone)的DMEM(Hyclone)处理细胞,诱导肌管(myotube)分化后,在含有50ng/mLTNF-α(PeproTech)的DMEM(Hyclone)里把所示实施例1-2到1-5制备的桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物按照10μg/ml浓度溶解,用与实施例10相同的方法进行RT-PCR。结果,如图10所示,通过用桑白皮己烷提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物和热水提取物进行处理,减少了在L6肌肉细胞中atrogin-1及MuRF-1的mRNA的表达。这表明本发明的桑白皮在肌肉细胞中抑制肌蛋白质分解能力优秀。<实施例13>桑白皮高压提取物的肌肉生成活性所述实施例1-6制备的桑白皮超高压提取物、实施例1-7制备的桑白皮超临界流体提取物、实施例1-8制备的桑白皮亚临界流体提取物,以20ppm的浓度用与所述实施例3相同的方法对肌肉细胞进行处理。使用ECL蛋白印迹试剂(westernblottingdetectionreagents;Amersham,Tokyo,Japan)使p-mTOR蛋白条带显色,并使用G;BOXEF成像系统(G;BOXEFimagingsystem;Syngene,Cambridge,UK)测定显色的蛋白条带的密度(density)。此时,对照组蛋白条带的密度设定为100%,样品处理的实验组中的蛋白条带的密度用相对百分比(%)表示。其结果如下表1显示。表1桑白皮高压提取物的增加p-mTOR蛋白质表达量的效果如表1所示,桑白皮超高压提取物、桑白皮超临界流体提取物、桑白皮亚临界流体提取物可增加参与肌功能改善的主要基因p-mTOR蛋白质的表达量。<实施例14>确认在动物样本中的肌肉量增加效果5周龄的维斯塔尔大鼠(Wistarrat)适应一周后,供应TNF-α100ng/g两周诱导肌肉萎缩,然后根据体重随机分组,每组8只,共分5组用于实验。实验组用实施例1-2制备的桑白皮乙醇提取物按照500mg/公斤体重、实施例1-5制备的桑白皮热水提取物按照500mg/公斤体重、实施例2-1制备的桑辛素按照300mg/公斤体重、实施例2-2制备的桑黄铜G按照300mg/公斤体重的浓度,悬浮在0.25%的羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose)里,每天给药一次,持续8周。作为对照组,使用与实验组摄入的相同量的、投入TNF-α的0.25%羧甲基纤维素。投入样本8周后,切下右小腿下方肌肉,并用微量天平(microbalance;MettlerPE160,USA)称重。其结果,如表2所示,桑白皮乙醇提取物,桑白皮热水提取物、桑辛素、桑黄铜G实验组的肌肉重量与对照组相比,分别显著(P<0.01)增加20.78%、17.35%、23.97%和22.60%。这些结果表明,本发明的桑白皮提取物和从其中分离的桑辛素和桑黄铜G起到有效增加肌肉量的作用。表2不同处理物质对应的小腿肌肉重量实验组平均小腿肌肉重量(mg)对照组438±20.8桑白皮乙醇提取物529±30.5桑白皮热水提取物514±19.5桑辛素543±32.9桑黄铜G537±15.2下面,将对含有本发明的所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物作为活性成分的医药品、食品或化妆品的制备例进行说明,但这仅是示例性说明,本发明不限于此。使用所述具有优秀的预防及治疗肌肉疾病与改善肌功能效果的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照下列组成成分与组成比,通过常规方法制备制备例1至3的医药品、食品及化妆品。<制备例1>医药品<1-1>散剂混合50mg所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物与2g结晶纤维素后,按照常规散剂制备方法将其填入密封袋制备散剂。<1-2>锭剂混合50mg所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物、400mg结晶纤维素、5mg硬脂酸镁后,按照常规锭剂制备方法压锭制备锭剂。<1-3>胶囊混合30mg所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物、100mg乳清蛋白、400mg结晶纤维素、6mg硬脂酸镁后,按照常规胶囊制备方法将混合物装入明胶胶囊制备胶囊。<1-4>注射剂按照常规注射剂制备方法,将活性成分溶解于注射用蒸馏水中,将pH调整至7.5左右后,混合100mg实施例2的桑辛素或桑黄铜G、注射用蒸馏水、pH调节剂,并装入2mL安瓿灭菌制备注射剂。<制备例2>食品<2-1>健康食品的制备混合1000mg所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物、70μg维生素A醋酸酯、1.0mg维生素E、0.13mg维生素B1、0.15mg维生素B2、0.5mg维生素B6、0.2μg维生素B12、10mg维生素C、10μg生物素、1.7mg烟酰胺、50μg叶酸、0.5mg泛酸钙、1.75mg硫酸亚铁、0.82mg氧化锌、25.3mg碳酸镁、15mg磷酸一钾,55mg二磷酸钙、90mg柠檬酸钾、100mg碳酸钙、24.8mg氯化镁来制备,混合比例可以任意变更,可以按照常规健康食品制备方法混合所述成分,制备成颗粒并将其用于制备健康食品组合物。<2-2>健康饮料的制备在1000mg所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物、1000mg柠檬酸、100g寡糖,2g梅子浓缩液和1g牛磺酸中,添加纯净水900mL,按照常规健康饮料的制备方法将上述成分混合,在85℃下搅拌约1小时后,将溶液过滤,转入2L无菌容器,密封灭菌后冷藏,用于制备健康饮料组合物。<2-3>口香糖用20重量%的胶基、76.9重量%的糖、1重量%的香料和2重量%的水与0.1重量%的所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,用常规方法制备口香糖。<2-4>糖用60重量%的糖、39.8重量%的淀粉糖浆、0.1重量%的香料和与0.1重量%的所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,用常规方法制备口香糖。<2-5>饼干用25.59重量%一级低筋、22.22重量%一级中筋、4.80重量%的精白糖、0.73重量%的食盐、0.78重量%的葡萄糖、11.78重量%的棕榈起酥油、1.54重量%的铵、0.17重量%的碳酸氢钠、0.16重量%的亚硫酸氢钠、1.45重量%的米粉、0.0001重量%的维生素B、0.04重量%的乳香、20.6998重量%的水、1.16重量%的全脂奶粉、0.29重量%的替代奶粉、0.03重量%的磷酸钙、0.29重量%散盐、7.27重量%的喷雾油和重量%所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,用常规方式制备饼干。<制备例3>化妆品<3-1>营养化妆水(乳液)根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表3所示的营养化妆水的配方比例制备营养化妆水。表3<3-2>柔肤化妆水(润肤露)根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表4所示的柔肤化妆水的配方比例制备柔肤化妆水。表4<3-3>营养霜根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表5所示的营养霜的配方比例制备营养霜。表5配方成分制备例3-3(重量%)桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物2.0聚山梨酯601.5脱水山梨糖醇倍半油酸酯0.5PEG60硬化蓖麻油2.0液体石蜡10角鲨烷5.0辛酸/癸酸甘油三酯5.0甘油5.0丁二醇3.0丙二醇3.0三乙醇胺0.2防腐剂适量色素适量香料适量纯化水至100<3-4>按摩膏根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表6所示的按摩膏的配方比例制备按摩膏。表6<3-5>面膜根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表7所示的面膜的配方比例制备面膜。表7配方成分制备例3-5(重量%)桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物1.0聚乙烯醇13.0羧甲基纤维素钠0.2甘油5.0尿囊素0.1乙醇6.0PEG12壬基苯基醚0.3聚山梨酯600.3防腐剂、色素、香料适量纯化水至100<3-6>凝胶根据常规方法,用所述实施例1至2的桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物,按照如下表8所示的凝胶的配方比例制备凝胶。表8配方成分制备例3-6(重量%)桑辛素、桑黄铜G或桑白皮提取物0.5乙二胺醋酸钠0.05甘油5.0羧乙烯聚合物0.3乙醇5.0PEG60硬化蓖麻油0.5三乙醇胺0.3防腐剂、色素、香料适量纯化水至100当前第1页1 2 3 
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