本发明涉及生命科学领域，尤其是一种动物头颅快速解剖及完整脑部组织分离方法。
背景技术：
动物的脑部是控制其行为和支配一切生命活动的中枢，主要包括大脑、小脑、下丘脑、垂体等组织。大脑支配动物的一切生命活动(如：语言、运动、听觉、视觉、情感表达等)，够调节消化、呼吸、循环、泌尿、生殖、运动等中枢；小脑通过它与大脑、脑干和脊髓之间丰富的传入和传出联系，参与躯体平衡和肌肉张力(肌紧张)的调节，以及随意运动的协调；下丘脑是大脑皮层下调节内脏活动的高级中枢，能把内脏活动和其它生理活动联系起来，调节体温、采食、内分泌腺活动以及机体水平衡等重要生理功能；垂体是动物体内主要的内分泌腺体，分泌多种激素，如促性腺激素、生长激素、促甲状腺激素、催产素、催乳素等，还能接受下丘脑分泌的促性腺激素释放激素，这些激素对于动物的新陈代谢、生长发育、生殖生理等有重要作用。采集完整无污染的脑部组织对于提取组织rna，研究脑部功能有重大意义。
现有的动物(如绵羊)脑部组织样品的采集方法主要是用电锯或者斧头纵向劈开头颅，将之分成两半，在劈开后，寻找采集大脑、小脑、下丘脑、垂体等脑部组织。此方法获得的脑部组织受机械损伤较大，易将大脑、小脑、下丘脑、垂体等组织弄碎，造成污染和损失，且操作人员的熟练程度对脑部组织的采集影响很大；由于脑部完整性较差，某些组织的寻找耗时较长，降低采样效率，同时样品由于长时间暴露在空气中造成降解，对提取rna进行后续实验的样品有毁灭性的影响。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种解剖动物头颅并获取完整脑部组织的方法，该方法操作时间短、样品完整性好、污染和组织损伤机率低、简单易行，克服了现有技术的不足。
本发明是这样实现的：动物头颅快速解剖及完整脑部组织分离方法，包括以下步骤：
(1)取已屠宰的动物头部，固定在台虎钳上，在垂直于动物鼻骨的方向用手术刀去除两眼间的头骨皮肤，同时去除两耳间头顶部至枕骨间的皮肤，使暴露的头骨呈“t”字样；
所述动物包括绵羊、山羊、猪、牛等；
(2)用电锯或手锯入骨一定深度，以穿透头骨且不损伤脑组织为准，沿“t”字垂直于地面切入头部；
对于绵羊和山羊以入骨0.5-1.0cm为佳；
(3)用手术刀从枕骨上缘0.5cm处至两侧眼眶沿脸颊切开皮肤，用手锯沿切口入骨一定深度，以穿透头骨且不损伤脑组织为准，切入头部；
对于绵羊和山羊以入骨1.0-1.5cm为佳；
(4)用骨凿插入“t”字切口轻撬，将大脑外的两侧头骨分离取走，暴露完整脑部组织；
(5)用手术剪和眼科镊剥离脑膜，取出大脑、小脑、下丘脑及其它脑部组织；
(6)取出大脑后，可用眼科剪将垂体从垂体窝里取出。
进一步地，上述方法还包括将取下的动物大脑、小脑、下丘脑和垂体等组织取下后装入冻存管中，立即放入液氮保存；或者将脑组织置于装有4％多聚甲醛的50ml离心管盛装后于4℃保存。
本发明方法适用于绵羊、山羊、猪、牛等；不同动物锯子的入骨深度、切开长度等一些参数需要调整，不同动物的开口位置基本一致。
具体地，本发明提供一种动物头颅快速解剖及完整脑部组织分离方法，包括以下步骤：
(1)取已屠宰的绵羊或山羊头部，固定在台虎钳上，在垂直于绵羊鼻骨的方向用手术刀去除两眼间的头骨皮肤，同时去除两耳间头顶部至枕骨间的皮肤，使暴露的头骨呈“t”字样；
(2)用电锯或手锯入骨0.5-1.0cm，沿“t”字垂直于地面切入羊头；
(3)用手术刀从枕骨上缘0.5cm处至两侧眼眶沿脸颊切开皮肤，用手锯沿切口入骨1.0-1.5cm切入羊头；
(4)用骨凿插入“t”字切口轻撬，将大脑外的两侧头骨分离取走，暴露完整脑部组织；
(5)用手术剪和眼科镊剥离脑膜，取出大脑、小脑、下丘脑及其它脑部组织；
(6)取出大脑后，可用眼科剪将垂体从垂体窝里取出。
与现有技术相比，本发明能够快速的将动物的头骨分开，获取完整、无污染的大脑、小脑、垂体、下丘脑等脑部组织样品，与传统斧头劈开头骨的方法相比，提高了脑部各组织样品采集的完整性，降低了操作污染和样品损坏的风险，方法简单，耗时短，使用效果好，对于大规模动物屠宰试验中样品的采集有良好的应用前景。
附图说明
图1为实施例1切口位置示意图；图1中a、b、c表示切口，切口c为两侧对称切口。
图2a为实施例1采集到的绵羊脑部组织图片；图2b为现有方法采集到的绵羊脑部组织图片。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
实施例1
本发明的实施例：绵羊头颅快速解剖及完整脑部组织分离法，包括以下步骤：
(1)取已屠宰的绵羊头部，固定在台虎钳上，在垂直于绵羊鼻骨的方向用手术刀去除两眼间的头骨皮肤，同时去除两耳间头顶部至枕骨间的皮肤，使暴露的头骨呈“t”字样；
(2)用电锯或手锯入骨0.5-1.0cm，沿“t”字垂直于地面切入羊头，即图1中切口a和b(也可以理解为由切口a和b构成“t”字样)；
(3)用手术刀从枕骨上缘0.5cm处至两侧眼眶沿脸颊切开皮肤，用手锯沿切口入骨1.0-1.5cm切入羊头，即图1中切口c，切口c为两侧对称切口；
(4)用骨凿插入“t”字切口轻撬，将大脑外的两侧头骨分离取走，暴露完整脑部组织；
(5)用手术剪和眼科镊剥离脑膜，取出大脑、小脑、下丘脑及其它脑部组织，见图2a；
(6)取出大脑后，可用眼科剪将垂体从垂体窝里取出。
将取下的绵羊大脑、小脑、下丘脑和垂体等组织取下后装入冻存管中，立即放入液氮保存；或者用装有4％多聚甲醛的50ml离心管盛装后放入4℃。
实施例2
将实施例1采集的绵羊脑部组织与现有方法取得的绵羊脑部组织(见图2b)进行对比：分别采集绵羊的大脑等组织，发现本发明完整性较好，且污染损伤较小，样品定位和采集较易。