本发明涉及一种含有桂花干细胞提取物的美白、祛痘组合物及其制备方法。
背景技术：
对于中性和油性的痤疮肌肤，其皮肤油脂分泌旺盛，在额头、鼻翼处易造成油脂堆积，而且多毛孔粗大，皮肤厚硬不光滑。过多分泌的油脂容易造成毛孔的堵塞、黑头粉刺和痘痘的滋生，目前，很多祛痘(祛痤疮)产品用到激素，抗生素，维甲酸，果酸等成分，刺激性大，容易引起皮肤对痤疮杆菌的耐药性，安全性不断受到质疑。例如，常被用来作为去粉刺，止痒杀菌，软化皮肤角质层的水杨酸就不能超过0.5％的用量，而且用后皮肤干燥，会产生紧绷感，而现有的天然组合祛痘产品中，往往只是单一的选择天然提取物来消炎杀菌，并没有针对所引起的痤疮的细菌来解决问题，所以见效速度往往不是很快。
皱纹和色素沉着是皮肤老化的主要外部特征，也是众多女人眼中的大忌。人的皮肤从25岁左右起就进入老化状态：皮脂分泌量和角质细胞间脂质也减少，经皮水份损失上升；表皮细胞分化能力降低，角质层变薄，表皮萎缩产生细皱纹。真皮产生不溶性胶原，弹性降低，透明质酸也随年龄增加而减少，致使真皮水份减少，产生较深的皱纹。
再者，在紫外线照射下，皮肤中产生活性氧和过氧化脂质，过氧化脂质在氧化酶作用下分解成丙二醛等物质，与蛋白质反应，形成褐素斑，产生色素沉着。
目前市场上抗衰老化妆品琳琅满目，常用的淡斑美白皱的主要活性成分有：抗氧化类；激素类；微量元素类；抗衰老生化制剂和抗衰老天然提取物类。这些活性成分，大多数为化学合成制剂，应用到护肤品，短时间内能起到淡斑美白的效果，但是长时间使用会给皮肤带来伤害，加快皮肤的老化。
干细胞是一种尚未分化发育的种子细胞，具有无限自我更新复制和分化潜能，这是干细胞用于美容产品的基础。植物干细胞是存在于茎端分生组织和根尖分生组织中的一类特殊细胞群，具有自我更新能力，又能产生具有持续分裂能力的子细胞，这些特殊细胞是植物根、茎、叶和花等器官的发生的源泉。植物干细胞技术是以植物的伤口复原机制为基础，先令植物形成伤口从而诱导复原组织细胞的形成，复原组织包含了未分化的细胞即干细胞，将这些复原组织细胞收集起来并在培养液中培养。干细胞美容技术及其相关产品近两年受到美容界专家及业内人士的广泛关注。
技术实现要素：
本发明的目的在于，提供一种含有桂花干细胞提取物的美白、祛痘组合物，该组合物既具有较好的祛痘功能，又能够起到美白的作用。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种含有桂花干细胞提取物的美白、祛痘组合物，包括以下重量份的组分桂花干细胞提取物4-12份、羊耳菊提取物4-12、番茄提取物2-6份。
现有技术中一般是采用单个提取物进行祛痘或者美白，然而其效果不尽量理想，本申请发明人经过大量研究发现，将桂花干细胞提取物、羊耳菊提取物进行复配，其祛痘效果显著优于单独提取物；将桂花干细胞提取物、番茄提取物进行复配，其美白效果显著优于单独提取物。
优选地，所述桂花干细胞提取物和羊耳菊提取物的重量比为1:1。将桂花干细胞提取物、羊耳菊提取物按照上述配比进行复配，其祛痘效果最好。
优选地，所述桂花干细胞提取物和番茄提取物的重量比为2:1。将桂花干细胞提取物、番茄提取物按照上述配比进行复配，其美白效果最好。
优选地，所述组合物还包括防腐剂、乳化剂、润肤剂、皮肤保湿剂、香精和水。优选地，所述乳化剂选自鲸蜡硬脂醇聚醚-6、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、单硬脂酸甘油酯。所述的润肤剂选自白矿油、硬脂酸、鲸蜡硬脂醇、橄榄油、辛酸/葵酸三甘油脂、乳木果油、霍霍巴油、硅油。所述的皮肤保湿剂选自甘油、丙二醇、1，3丁二醇。
优选地，所述桂花干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：
1)桂花形成层干细胞的分离及培养：将桂花叶片经过消毒处理后，在无菌条件下，将消毒后的桂花叶片切成0.5cm*0.5cm大小，接种在wpm培养基上，使叶背面与wpm培养基接触，在25℃下黑暗培养；两周后将形成层干细胞转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到桂花形成层干细胞；
2)收集培养桂花形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和桂花形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到桂花干细胞提取物。
本发明提供了一种上述所述的组合物的制备方法，所述制备方法是将各组分原料按重量配比准确称量，充分混合并搅拌均匀，即得到所述组合物。
优选地，所述组合物的剂型为溶液、喷剂、粉状、膏状或乳状液。
本发明提供了一种美白、祛痘护肤品，包括油相、水相，所述水相包括上述所述的组合物。
优选地，所述美白、祛痘护肤品还包括香精和防腐剂。
本发明的有益效果在于：本发明提供了一种含有桂花干细胞提取物的美白、祛痘组合物，该组合物不仅能够明显降低皮肤粗糙度，达到美白效果，还具有较佳的祛痘效果，并且安全无刺激。
具体实施方式
以下实施例所涉及各原料如无特别说明，均为市售通用产品。
本发明桂花干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：
1)桂花形成层干细胞的分离及培养：将桂花叶片经过消毒处理后，在无菌条件下，将消毒后的桂花叶片切成0.5cm*0.5cm大小，接种在wpm培养基上，使叶背面与wpm培养基接触，在25℃下黑暗培养；两周后将形成层干细胞转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到桂花形成层干细胞；
2)收集培养桂花形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和桂花形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到桂花干细胞提取物。
实施例1
本发明所述美白、祛痘组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物8份、羊耳菊提取物8份、番茄提取物4份。
实施例2
本发明所述美白、祛痘组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物4份、羊耳菊提取物12份、番茄提取物4份。
实施例3
本发明所述美白、祛痘组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物12份、羊耳菊提取物4份、番茄提取物4份。
对比例1
对比例1的配方为：桂花干细胞提取物16份、番茄提取物4份。
对比例2
对比例2的配方为：羊耳菊提取物16份、番茄提取物4份。
实施例1-3以及对比文件1-2的制备方法：将各组分原料按上述重量配比准确称量，充分混合并搅拌均匀，即可。
将实施例1-3以及对比例1、2的组合物制备祛痘凝胶，由载体和功效成分两部分组成，按重量百分比计，包括如下组分：
载体：丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物1.5％，甘油5％，1,2-戊二醇：3％，去离子水86.6％；
功效成分：实施例1-3以及对比例1、2的组合物中的一种0.1％。
将载体组分加热到85℃，待其完全溶解后，启用搅拌器进行搅拌30min，使用循环冷却搅拌降温至45℃时，边加功效成分边搅拌，直至搅拌均匀。
一、本发明实施例1-3祛痘功效评价试验
对60个年龄在20～28岁的青春痘患者进行试验，其中男、女各30名。将其分成6组，每组10人(男女各5名)，对实施例1～3以及对比例1、2进行试验。使用方法为：洁面后，用棉签将上述实施例1～3以及对比例1、2所得的祛痘凝胶直接涂抹于患处，每天涂抹1～3次，连续28天，观察患处肿胀、痛、痒以及有无过敏症状，以治疗有效率(患处明显减小，痛痒症状明显减轻的处理痘点数占总处理痘点数的百分比)进行评估，试验结果见表1。
表1测试结果
由表1可知：在护肤品中添加桂花干细胞提取物或羊耳菊提取物均能达到祛痘效果，而桂花干细胞提取物和羊耳菊提取物复配添加在护肤品中，祛痘效果协同增效，显著高于单独添加，其中实施例1的祛痘效果最好，当然就算不涂抹祛痘产品，人体身上的痘点也会自然消失一部分。
实施例4
本发明所述美白、祛痘的组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物8份、羊耳菊提取物8份、番茄提取物4份。
实施例5
本发明所述美白、祛痘的组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物12份、羊耳菊提取物8份、番茄提取物2份。
实施例6
本发明所述美白、祛痘的组合物的一种实施例，所述组合物包括以下重量份的组分：桂花干细胞提取物4份、羊耳菊提取物8份、番茄提取物6份。
对比例3
对比例3的配方为：桂花干细胞提取物12重量份、羊耳菊提取物8重量份。
对比例4
对比例4的配方为：羊耳菊提取物8重量份、番茄提取物12重量份。
实施例4-6以及对比例3-4的制备方法：将各组分原料按上述重量配比准确称量，充分混合并搅拌均匀，即可。
二、本发明实施例4-6美白功效评价试验
方法：
以0.2mol/lph＝6.8的磷酸缓冲液(pbs)分别配制：
试样溶液1：实施例4组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液2：实施例5组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液3：实施例6组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液4：对比例3组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液5：对比例4组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
在0.9ml的试样溶液中，加入1mll-酪氨酸(0.3mol)和1mlph＝6.8的磷酸缓冲液(pbs),在37℃恒温水槽中预热10分钟，再加入0.1ml酪氨酸酶水溶液(1.0mg/ml，mcllvains缓冲液)，充分搅拌，在37℃反应15分钟后，测定475nm吸光度(d1)。另外，用上述磷酸缓冲液代替式样溶液进行同样的反应，测得吸光度(d2)。为了对照，在不加试样溶液和酪氨酸酶的条件下，测得吸光度(d3)。用下式计算出酪氨酸酶活性抑制率。
酪氨酸酶活性抑制率(％)＝(d2-d1)/(d2-d3)×100
表2：酪氨酸酶活性抑制率测试表
由上表可见将桂花干细胞提取物、番茄提取物按照上述配比进行复配，酪氨酸酶活性抑制率意外提高，美白效果协同增效，并且实施例4的组合物美白效果最好。
三、安全性试验
试验材料和方法
动物：普通级大耳白兔4只，体重2.3—2.7公斤，体查动物未见异常。
环境条件：室温：22℃—26℃，相对湿度：65％—69％；
试验方法：
依据《化妆品卫生规范》(2007年版)急性皮肤刺激性试验，试验前24小时，将试验动物背部脊柱两侧毛剪掉，去毛范围3厘米×3厘米。取受试无原性0.5克直接涂抹在右侧皮肤上，以洁净纱布覆盖，用无刺激性胶布固定2小时。另外一侧为阴性对照。除去受试物后的1小时、24小时、48小时72小时观察受试动物接触部位皮肤反应并做记录。
在本试验条件下，本发明实施例1-6组合物对大白兔急性皮肤刺激试验按皮肤刺激强度分级为无刺激性。
本发明实施例1-6组合物的安全性测定：
通过动物实验和人体斑贴试验证明了本发明实施例1-6组合物安全，人体斑贴试验由本公司专业人员进行。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。