本发明涉及属于中药提取领域，特别涉及一种药桑叶中活性物质的提取方法。
背景技术：
药桑在植物分类学上属桑科，桑属，黑桑种(morusnigral.)，由于新疆南部，生态环境独特，日照时间长、昼夜温差大、干旱，使药桑形成具有体细胞染色体倍数性为自然22倍体(2n＝22x＝308)稀贵桑树资源，目前主要分布于新疆阿克苏、和田和喀什等地区，是新疆地区在全国独一无二的桑种质资源。现代药理学及化学成分研究表明桑叶具有降血糖、抗氧化、抗病毒等多种药理活性，其中生物碱以及黄酮类物质是桑叶中主要的降血糖活性成分。俞灵莺等报道给糖尿病大鼠灌胃桑叶总黄酮后，血糖由18.4mmol/l降至10.2mmol/l(p＜0.001)，降糖作用显著。陈建国等指出：桑叶多糖能够调节糖代谢、降低血糖、改善糖尿病症状的作用。1976年yagi等初次从桑树中分离得到生物碱成分，买买提依明等曾对药桑叶片中的生物碱成分进行检测，发现其主要成分为1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，dnj)，含量为1.8933mg/g。此外，有研究表明，桑叶总黄酮也能够抑制双糖酶活性，从而具有显著的降血糖作用。而且将类黄酮与dnj结合能更有效的抑制血糖上升，表明类黄酮与桑叶dnj有一定的协同作用。而中南大学湘雅医学院生理学系对一种以桑叶为主要原料的降血糖保健品进行研究，也发现桑叶多糖、生物碱及产品中其他成分有一定的协同配伍作用，以上研究均是采用的随机浓度组合方法来研究不同物质之间的协同作用，但如何定量分析各成分之间的协同、相加或拮抗作用并未采用统计学方法。目前普遍用chou-talalay(又称中位药效法)公式来评价药物协同作用效果，chou-talalay是由chou和talalay开发出的第3代药物联合作用量-效分析软件“compusyn”，是目前被广泛认可的药物协同作用定量分析方法，该公式主要用联合指数(combinationindex，ci)来定量描述药物之间的相互关系。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提出的一种药桑叶中活性物质的提取方法，其以新疆特色药桑桑叶为材料，在本实验室已建立的集成提取工艺基础上，通过适当优化，获得化学成分和含量基本稳定、具有降血糖活性的生物碱、黄酮和多糖的粗提物。
一种药桑叶中活性物质的提取方法，包括如下步骤：
s1、准确称取干燥药桑叶粉末300.0g，按1：20料液比加入6.0l石油醚，70℃回流4h，过滤；
s2、滤渣按料液比1:20加入6.0l65％乙醇，浸泡一天一夜，过滤，滤液减压浓缩得桑叶浸膏；
s3、桑叶浸膏经过树脂分离纯化，分别得到生物碱、黄酮和多糖的三种粗提物。
所述步骤s3中，桑叶浸膏经大孔树脂处理后，先用水洗脱，得到粗生物碱和粗多糖，再用乙醇洗脱得到粗黄酮；粗生物碱和粗多糖再进行分离处理。
粗生物碱和粗多糖经过离子树脂处理，先后用水和氨水洗脱，得到粗多糖和粗生物碱。
本发明中提取方法提取的活性物质的化学成分和含量稳定，具有重复性，保证了中药物原料的可靠性。
具体实施方式
为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本发明，下面将对本发明作进一步的说明。
一种药桑叶中活性物质的提取方法，包括如下步骤：
s1、准确称取干燥药桑叶粉末300.0g，按1：20料液比加入6.0l石油醚，70℃回流4h，过滤；
s2、滤渣按料液比1:20加入6.0l65％乙醇，浸泡一天一夜，过滤，滤液减压浓缩得桑叶浸膏；
s3、桑叶浸膏经过树脂分离纯化，分别得到生物碱、黄酮和多糖的三种粗提物。
所述步骤s3中，桑叶浸膏经大孔树脂处理后，先用水洗脱，得到粗生物碱和粗多糖，再用乙醇洗脱得到粗黄酮；粗生物碱和粗多糖再进行分离处理。
粗生物碱和粗多糖经过离子树脂处理，先后用水和氨水洗脱，得到粗多糖和粗生物碱。
本发明中提取方法提取的活性物质的化学成分和含量稳定，具有重复性，保证了中药物原料的可靠性。
本发明以药桑叶为实验原料，通过集成提取工艺，获得三种含量稳定的粗提物成分，后续研究其对ɑ-葡萄糖苷酶的抑制作用，并进行不同粗提物间组合物对ɑ-葡萄糖苷酶抑制活性的研究。采用乙醇提取、柱色谱分离纯化等方法，获得桑叶中具有潜在降血糖活性的物质黄酮、多糖和生物碱粗提物；利用α-葡萄糖苷酶抑制模型评价三种粗提物对ɑ-葡萄糖苷酶的抑制作用，并进一步采用compusyn软件对不同粗提物间的相互作用进行统计学分析。实验结果表明：桑叶中黄酮、生物碱、多糖粗提物对α-葡萄糖苷酶均具有抑制活性，且生物碱粗提物的抑制活性显著高于阳性对照(阿卡波糖)，多糖粗提物在高质量浓度作用下具有α-葡萄糖苷酶抑制作用，表现为抑制作用与多糖质量浓度成正比；在本实验所使用的质量浓度与剂量配比内三种粗提物相互组合时，黄酮+生物碱组合、多糖+生物碱组合，表现为拮抗作用；黄酮+多糖组合、黄酮+多糖+生物碱组合，在高的质量浓度下对ɑ-葡萄糖苷酶表现为协同作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。