本发明涉及兽药领域，具体涉及一种兽用肠溶组合物及其制备方法。
背景技术：
：球虫病是一种常见的禽畜肠道寄生性原虫病，主要寄生在鸡、鸽、兔、猪、犬的肠上皮细胞中，由于肠道是重要的消化吸收器官，寄生虫成倍增殖导致禽畜肠道组织损伤、肠壁增厚，具体发病症状为：精神不佳、腹胀、腹泻、便血、痉挛甚至死亡。由于球虫病严重影响禽畜对饲料的消化吸收，使饲养效率降低，降低饲料报酬，给禽畜养殖造成巨大的经济损失。而更大的危害在于，球虫病在不同种类的禽畜中感染率均高达60-100%，死亡率50-80%。尤其是在环境卫生较差的地区，球虫的增殖传播速度相当惊人，所导致的传染和死亡率更高，甚至全群覆没。球虫病对畜牧业造成巨大危害，成为禽畜饲养业危害最大的寄生虫病之一。托曲珠利属三嗪酮化合物，具有广谱抗球虫活性。广泛用于球虫病。托曲珠利对球虫的作用部位十分广泛，对球虫的两个无性周期均有作用，如抑制裂殖体，小配子体的核分裂和小配子体的壁形成体。由于本品干扰球虫细胞核分裂和线粒体，影响虫体的呼吸和代谢功能，加之又能使细胞内质网膨大，发生严重空胞化，因而具有杀球虫作用。托曲珠利以内服给药为主，目前的普通托曲珠利口服制剂，活性成分不能直接到达病灶，加上禽畜消化道较短，消化吸收不充分，生物利用度大大降低，治愈率降低，使得用药时间延长；另一方面，托曲珠利水溶性差，将其溶于水时不稳定、易析出，而粉剂在与饲料混合过程中不易均匀分散于饲料中，且患球虫病的禽畜肠道损伤，进食量显著减少；多方面的不便，给用药增加了难度。因此需要一种可直达病灶，且服用一次即可较长时间停留在禽畜体内，以防治畜禽球虫病的药物。生物粘附给药系统（bioadhesivedrugdeliverysystems,bdds）是利用材料对生物粘膜表面的粘附性能，使给药系统在生物膜的特定部位滞留时间延长，达到药物在特定部位吸收的目的。这种系统可以粘附到靶部位，延长药物在病灶部位的保留时间，提高其治疗局部疾患的效果。但较少有生物粘附给药系统针对禽畜的研究。由于肠道的复杂性，使生物粘附给药系统的作用和效果变化很大。禽畜消化道较短，需要生物粘附片进入肠道后迅速粘附，而患球虫病禽畜肠道内有损伤，生物粘附片粘附力过强会进一步损伤肠道，另一方面，患球虫病禽畜肠道产生较多分泌粘液甚至出血，环境中的不断分泌的粘液易缩短生物粘附片的粘附时间，给生物粘附带来较多阻碍。目前尚没有用于治疗禽畜球虫病的针对性强的生物粘附给药系统的研究报道。技术实现要素：本发明针对上述问题，提供一种兽用肠溶组合物及其制备方法。本发明的第一个目的是提供一种兽用肠溶组合物，所述兽用肠溶组合物包括生物粘附型内芯和肠溶外层；所述生物粘附型内芯包括托曲珠利和骨架材料、粘附材料，所述肠溶外层包括肠溶包衣材料；所述组合物还包括药学上可接受的辅料；所述托曲珠利、骨架材料、粘附材料的质量比为（2.0-4.0）：（3.0-6.5）：（1.0-5.5），肠溶包衣材料的用量按重量百分比计为生物粘附型内芯的2-6％。托曲珠利、骨架材料和粘附材料在此比例下，粘附性能、吸水率、释放度优异。进一步的，所述骨架材料为十八醇和peg6000的混合，所述十八醇和peg6000的质量比为（0.5-2）：（2-5）。十八醇和peg6000按此比例混合加热熔融，与托曲珠利融合有良好的互溶性，进入禽畜肠道后，该骨架材料能够保持连续不断的稳定释放托曲珠利，在48小时内维持有效血药浓度。进一步的，所述粘附材料为carbopol934、香豆胶、羟丙甲基纤维素中一种或多种的混合物。本发明将香豆胶应用于生物粘附材料中，为生物粘附材料提供了新选择。香豆本身具有止痛、杀菌、清毒、驱虫功效，香豆胶在肠道的微碱性环境中的凝胶强度稳定，粘附于肠道中稳定释放托曲珠利，除具有粘附作用外，还与托曲珠利协同驱虫，另一方面，香豆胶在体内降解后能与血纤维蛋白形成可溶性的络合物，清理肠道内积累的有害物质，帮助禽畜在治疗球虫病的同时，将球虫排出体外，治疗禽畜球虫病针对性强。进一步的，由于carbopol934具有羟基、氨基等极性基团，遇水快速溶胀，在肠道微碱性环境中与托曲珠利相互作用，形成不溶性复合物，使托曲珠利缓慢释放，是粘合材料的较好选择。但是，carbopol934粘附力强，由于患球虫病的禽畜肠道内有损伤甚至出血，单纯以carbopol934为粘附材料会因粘附力过强，进一步损伤肠粘膜壁表面。针对该问题，本发明提供carbopol934与香豆胶混用的优选，除了调整粘附强度的作用外，还与托曲珠利协同驱虫，同时帮助清理肠道内积累的有害物质。carbopol934、香豆胶的比例对粘附片的粘附和释放有很大影响，当carbopol934：香豆胶的质量比为（4-6）:（2-3）范围内，生物粘附型内芯可随着肠溶外层的溶解，在肠道中快速膨胀形成网状凝胶结构，使水分渗入和药物释放减慢，保持托曲珠利的稳定释放，同时，针对患球虫病的禽畜肠道内有较多分泌粘液的情况，仍能具有足够的吸附能力，充分粘附在肠粘膜壁上释放药物，且不损伤肠粘膜壁。进一步的，所述carbopol934：香豆胶的质量比为6:2.5。进一步的，所述肠溶包衣材料为丙烯酸树脂溶液或乙基纤维素溶液。进一步的，所述辅料为硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、乳糖、微晶纤维素、糊精中的一种或几种的混合。本发明的第二个目的是提供一种兽用肠溶组合物的制备方法，包括以下步骤：s1：按比例称取托曲珠利、骨架材料、粘附材料、肠溶包衣材料、辅料；s2：取骨架材料于60-90℃混合加热熔融，加入托曲珠利细粉，搅拌1h，混合均匀，冷却至完全固化，真空干燥至水分2-3%后研磨，过80目筛制成分散粉末；s3：取粘附材料、辅料，混合均匀后，与s2所得分散粉末等量递加法混合均匀，过40目筛，加入辅料，粉末直接压片法制成生物粘附型内芯；s4：制备肠溶包衣材料，在s3所得生物粘附型内芯表面喷涂肠溶包衣材料，烘干，制得成品。进一步的，s3所述压片强度为4-11kn。优选的压片强度为8kn。进一步的，s3所述生物粘附型内芯直径7mm。本发明的有益效果为：（1）生物粘附技术和肠溶缓释技术相结合，制备的托曲珠利肠溶生物粘附缓释片具有肠道定位和生物粘附双重性能。禽畜球虫病病变部位主要在肠道，选择合适的肠溶包衣层使粘附内芯直接到达肠道，使有效成分在胃酸中不被破坏，能安全到达并粘附于病灶区域而起治疗作用，达到“靶向给药，长效释放”的目的，作用时间长、稳定性高，降低用药频率，方便用药。（2）结合患病禽畜胃肠道特点，对骨架材料、粘附材料、缓释材料的类型和配比进行改进，获得粘附性能、吸水率、释放度优异的托曲珠利生物粘附缓释片。（3）采用复合骨架材料与托曲珠利融合，保证进入禽畜肠道后，该骨架材料能够保持连续不断的稳定释放托曲珠利，长时间维持有效血药浓度。（4）本发明将香豆胶应用于生物粘附材料中，为生物粘附材料提供了新选择。香豆本身具有止痛、杀菌、清毒、驱虫功效，香豆胶在肠道的微碱性环境中的凝胶强度稳定，粘附于肠道中稳定释放托曲珠利，除具有粘附作用外，还与托曲珠利协同驱虫，另一方面，香豆胶在体内降解后能与血纤维蛋白形成可溶性的络合物，清理肠道内积累的有害物质，帮助禽畜在治疗球虫病的同时，将球虫排出体外，既是粘附材料又是治疗药物，使本组合物对治疗禽畜球虫病针对性强。（5）提供一个复合粘附材料的优选，可随着肠溶外层的溶解，在肠道中快速膨胀形成网状凝胶结构，使水分渗入和药物释放减慢，保持托曲珠利的稳定释放，同时，针对患球虫病的禽畜肠道内有较多分泌粘液的情况，仍能具有足够的吸附能力，充分粘附在肠粘膜壁上释放药物，且不损伤肠粘膜壁。具体实施方式实施例1按质量比2:6:5的比例称取托曲珠利、骨架材料、粘附材料。骨架材料为质量比为1:3的十八醇和peg6000，粘附材料为质量比为5:2的carbopol934和香豆胶，肠溶包衣材料为丙烯酸树脂溶液；取十八醇和peg6000混匀，于85℃混合加热熔融，加入托曲珠利细粉，搅拌1h，混合均匀，冷却至完全固化，真空干燥至水分3%后研磨，过80目筛制成分散粉末；取carbopol934和香豆胶粉末混合均匀后，与分散粉末等量递加法混合均匀，过40目筛，加2％微晶纤维素和1.5％硬脂酸镁，8kn压片强度，粉末直接压片法制成直径7mm生物粘附型内芯；制备肠溶包衣材料丙烯酸树脂溶液，在生物粘附型内芯表面喷涂肠溶包衣材料，包衣层使增重3％，烘干，制得本发明兽用肠溶组合物。实施例2按质量比3:5:4的比例称取托曲珠利、骨架材料、粘附材料。骨架材料为质量比为1.5:5的十八醇和peg6000，粘附材料为香豆胶，肠溶包衣材料为丙烯酸树脂溶液；取十八醇和peg6000混匀，于90℃混合加热熔融，加入托曲珠利细粉，搅拌1h，混合均匀，冷却至完全固化，真空干燥至水分2%后研磨，过80目筛制成分散粉末；取香豆胶粉末，与分散粉末等量递加法混合均匀，过40目筛，加5％微晶纤维素和0.5％硬脂酸镁，11kn压片强度，粉末直接压片法制成直径7mm生物粘附型内芯；制备肠溶包衣材料丙烯酸树脂溶液，在生物粘附型内芯表面喷涂肠溶包衣材料，包衣层使增重2％，烘干，制得本发明兽用肠溶组合物。实施例3本发明实施例所制备的兽用肠溶组合物体外生物粘附性能试验试验方法：1、体外粘附力实验：取禁食24h的家兔一只，耳缘静脉注射空气处死，取小肠，用ph6.8磷酸盐缓冲液冲洗除去内容物，剪成小块，放于-20℃冰箱中保存，实验前一夜放于4℃冰箱中解冻，实验前放置至室温。实验分为7组：1个对照组（托曲珠利普通制剂）和6个实验组（实施例1制备的组合物3组，实施例2制备的组合物3组）。取7片肠粘膜分别固定于7个设置挂钩的薄片a上。取1片托曲珠利普通制剂，3片实施例1制备组合物粘附内芯，3片实施例2制备组合物粘附内芯，分别固定于7个设置挂钩的薄片b上，将薄片b挂在支架上，用模拟肠液润湿粘附内芯表面5min后，接触薄片a上的小肠，并给与100g压力，维持施压2min。将薄片a上的挂钩系一塑料袋自然垂下，以5ml/min速度向塑料袋中加水，直至因拉力过大而分离，称取薄片a、塑料袋及袋中水的重量，即为组织粘附力大小。本发明实施例1提供的粘附内芯平均粘附力达152.21g/cm2，实施例2提供的粘附内芯平均粘附力达114.50g/cm2，而普通片附力为14.74g/cm2。2、体外粘附时间实验：实验分为7组：1个对照组（托曲珠利普通制剂）和6个实验组（实施例1制备的组合物3组，实施例2制备的组合物3组）。取1片托曲珠利普通制剂，3片实施例1制备组合物粘附内芯，3片实施例2制备组合物粘附内芯，分别用模拟肠液润湿10min后与小肠粘膜接触，不施加力，将其浸泡于模拟肠液中，室温下，观察粘附内芯从肠膜中分离的时间，即为粘附时间。本发明实施例1提供的粘附内芯平均粘附时间达31h，实施例2提供的粘附内芯平均粘附时间达26h，而普通片立即与肠膜分离并施药。实施例4本发明所制备的兽用肠溶组合物给药实验结果实验分为5组：感染对照组、阴性对照组、托曲珠利普通制剂对照组和实施例1组合物实验组、实施例2组合物实验组，取无球虫感染的家兔随机分组，每组4只。分别记录实验前体重，用具有侵染力的混合球虫卵囊经口感染家兔。感染后，每天观察各组家兔的精神状态、采食量、饮水量、粪便情况，感染第5天起，感染对照组、阴性对照组不给药，实施例1和实施例2所制备的兽用肠溶组合物空腹给药3次（感染第5天、第7天、第9天各1次），托曲珠利普通制剂对照组以1:100的比例将药物与饲料拌匀连续用药6天，托曲珠利普通制剂用药最后一天，即攻毒后第10天，称重各组家兔，计算增重率、存活率，剖检所有攻毒家兔，取出肠道，观察小肠、盲肠的变化状况，进行病变计分，根据计分情况记录病变值，再将小肠和盲肠内容物分别收集，收集其中的卵囊，分别记录各组实验家兔的具体情况。各实验组对球虫感染家兔的治疗效果如表1所示。计算抗球虫指数（aci）=（相对增重率＋存活率）×100-（病变值＋卵囊值）。抗球虫指数＞180者为高效抗球虫药；抗球虫指数160-180者为中效抗球虫药；抗球虫指数120-160者为低效抗球虫药；抗球虫指数＜120者为无效抗球虫药。表1：各实验组对球虫感染家兔的治疗效果组别存活率（%）相对增重率（%）病变值卵囊值aci托曲珠利普通制剂9897.137.50187.53实施例1组合物10099.276.00193.27实施例2组合物9998.856.50191.35感染对照7539.2337.5175.73阴性对照1001000.00200实验结果显示，本发明实施例1和实施例2法制备的兽用肠溶组合物，仅需隔天喂药1次，即可以在家兔体内保持长时间较高的血药浓度，存活率达100%，相对增重率达99.27%，aci达193.27，高于将药物与饲料拌匀每天连续用药的托曲珠利普通制剂对照组，且剖验肠道后，肠道出血、肠壁增厚的情况明显轻于托曲珠利普通制剂对照组，证实香豆胶除粘附作用外，还与托曲珠利协同驱虫，生物利用度高，喂食一次即可长时间有效预防、治疗球虫病。当前第1页12