本发明涉及医药
技术领域：
，尤其涉及曲札茋苷在制备治疗和/或预防炎性肠病的药物中的应用。
背景技术：
：炎性肠病(inflammatoryboweldisease,ibd)是一种特殊的慢性肠道炎症性疾病，主要包括溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,uc)和克罗恩病(crohnsdisease,cd)。据文献报道，近5年我国ibd病例数是上世纪90年代同期的8-10倍，已成为消化系统常见疾病和慢性腹泻的主要原因。临床上，ibd患者表现为反复的腹痛、腹泻、粘液血便、甚至出现各种全身并发症如视物模糊、关节疼痛、皮疹等。ibd起病少数急骤、多数缓慢、病程可分为持续性，或呈发作期与缓解期相交替的慢性过程。ibd多采用内科治疗，主要药物包括水杨酸类、激素类、免疫抑制剂三大类，但副作用大，且疗效不稳定，仅能缓解症状而难以达到有效治疗的目的。因此，寻找新型的、更高效、更安全的idb治疗或预防药物有重要意义。茋类物质是一类由二苯乙烯作为母体结构的衍生物。白藜芦醇(resveratrol)是天然茋类成分的代表，其药理作用研究主要集中于抗氧化、抗肿瘤以及植物雌激素活性等方面。国内在茋苷类成分如虎杖苷(polydatin，piceid)、大黄降脂素(rhapontin，rhaponticin，土大黄苷)、二苯乙烯苷的降血脂、降血糖以及心脑血管活性方面也有很多研究。因此，茋及茋苷类物质在多方面凸显出的潜在应用价值受到越来越多的关注。曲札茋苷是一种从拉萨大黄中提取的茋苷类化合物，含量为3％～5％，也可以通过化学合成获得。安全性研究表明曲札茋苷安全性良好，急性毒性试验中，24小时内给小鼠单次灌胃最大给药量为13.33g/kg.bw，比格犬为5g/kg.bw，遗传毒性试验中未见致染色体畸变、致突变作用。目前的研究表明，曲札茋苷具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗癌、治疗抑郁症和心脑血管疾病等多方面的活性应用，但未见在治疗和预防炎性肠病药物中的用途报道。技术实现要素：有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供曲札茋苷在制备治疗和/或预防炎性肠病的药物中的应用。本发明提供了曲札茋苷在制备降低结肠组织tnf-α和/或il-6的药物中的应用。本发明实验表明：与正常对照组小鼠比较，模型组小鼠结肠组织tnf-α和il-6含量显著增高(###p<0.001)；与模型组小鼠比较，曲札茋苷组呈剂量依赖性显著降低结肠组织tnf-α和il-6含量(***p<0.001，**p<0.01)；阳性药组也明显降低了结肠组织tnf-α和il-6含量(*p<0.05)。本发明还提供了曲札茋苷在制备改善结肠充血水肿的药物中的应用。实验表明，dss模型组结肠重量/长度比值明显比正常对照组大，表明模型组充血肿胀情况比较严重，而曲札茋苷组和阳性药组结肠重量/长度比值明显低于模型组，表明曲札茋苷和阳性药柳氮磺胺吡啶都可以逆转dss引起的小鼠结肠充血水肿。本发明还提供了曲札茋苷在制备预防和/或治疗炎性肠病的药物中的应用。本发明中，所述炎性肠病为溃疡性结肠炎和/或克罗恩病。本发明实施例中，与正常对照组相比，dss模型组小鼠在造模第3天大便性状开始发生变化，出现腹泻，第4天后腹泻加重、出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降；曲札茋苷组50mg/kg组小鼠在造模第3天出现腹泻，第4天后出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降，第7天剩4只动物便血，其余动物便血减少或消失、饮食有所增加、体重开始恢复；曲札茋苷组100mg/kg组小鼠在造模第4天出现腹泻，第5天后有5只动物出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降，第7天剩1只动物便血，其余动物便血消失、体重恢复；阳性药组(柳氮磺胺吡啶)小鼠在造模第3天出现腹泻，第4天后出现便血、饮食减退、体重下降，第7天剩3只动物便血，其余动物便血减少或消失、饮食有所增加、体重恢复。在本发明中，所述炎性肠病为葡聚糖硫酸钠引起的炎性肠病。在本发明中，所述曲札茋苷在预防和/或治疗炎性肠病中的剂量为50mg/kg～100mg/kg。本发明还提供了一种预防和/或治疗炎性肠病的药物，包括曲札茋苷。本发明中，所述药物的剂型为口服剂、注射剂、皮肤贴剂或栓剂。本发明提供了曲札茋苷在制备治疗和/或预防炎性肠病的药物中的应用，本发明通过曲札茋苷对小鼠溃疡性结肠炎的防治试验，采用balb/c小鼠dss诱导法构建模型，评价了曲札茋苷50mg/kg和100mg/kg抗小鼠炎症性结肠炎的作用。结果表明，曲札茋苷能明显改善小鼠便血情况、减小结肠重量/长度比值、减少结肠粘膜充血，增加体重和活动性。因此，曲札茋苷对治疗或预防炎性肠病具有高效、低毒的特点，具有广阔的开发应用价值。附图说明图1示曲札茋苷对小鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织tnf-α和il-6含量的影响(n＝8)。具体实施方式本发明提供了曲札茋苷在制备治疗和/或预防炎性肠病的药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：实施例1通过药效试验证明曲札茋苷对小鼠溃疡性结肠炎模型的防治作用：1试剂与动物1.1供试品：曲札茋苷原料，昆药集团股份有限公司，性状：白色粉末；批号：20150407；保存条件：常温、避光；1.2对照品：柳氮磺胺吡啶(sasp，是最早用于ibd治疗的水杨酸制剂)，美仑生物，性状：黄色粉末；批号：a0322a；保存条件：常温、避光；1.3其它试剂：葡聚糖硫酸钠(dss)购自mpbiomedicals.llc(法国)；羧甲基纤维素钠购自天津市光复精细化工研究所；小鼠tnf-αelisa检测试剂盒(联科生物，lot：228271215)；小鼠il-6elisa检测试剂盒(联科生物，lot：220680144)；1.4实验动物：spf级balb/c小鼠，雄性，40只，体重：18±2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。小鼠饲养温度20-25℃，相对湿度50％-60％，可自由索食和饮水。2实验内容2.1动物分组实验动物分组及给药剂量见表1。将小鼠随机分为正常对照组、dss模型组、曲札茋苷50mg/kg组、曲札茋苷100mg/kg组及阳性药组(柳氮磺胺吡啶520mg/kg，按照临床剂量换算)。表1实施例小鼠分组及给药情况组别动物数量/只药物给药方式正常对照组80.5％cmc-na灌胃，每天1次dss模型组80.5％cmc-na灌胃，每天1次曲札茋苷低剂量组850mg/kg灌胃，每天1次曲札茋苷高剂量组8100mg/kg灌胃，每天1次柳氮磺胺吡啶组8520mg/kg灌胃，每天1次2.2建立dss诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型与给药配置3％(w/v)葡聚糖硫酸钠(dss)溶液，放置于饮水瓶中让小鼠自由饮用，以诱发试验性溃疡性结肠炎小鼠模型，观察小鼠体重变化、表观状况、结肠长度、病理学等为指标以确认造模是否成功。建模当天开始给药，连续7天，每天称量体重、观察小鼠精神状态、摄食量、大便性状等。2.3实验终点样品采集最后一次给药24h后，颈部脱臼处死小鼠，剪开腹膜，取出全部结肠，观察结肠病理变化，称量结肠重量并测量其长度。2.4评价指标2.4.1一般情况观察每日观察小鼠精神状态和进食情况等；每日称量小鼠体重，观察大便性状。2.4.2结肠重量/长度比值变化取出小鼠结肠后，用电子天平测量结肠重量，用游标卡尺测量其长度，计算结肠重量/长度的比值。2.4.3结肠组织观察评分观察结肠充血、溃疡、炎症情况等，并记录评分。评分标准：0分无损伤；1分黏膜充血、水肿，未出现溃疡；2分黏膜充血、水肿、轻度糜烂，无溃疡；3分黏膜充血、水肿、中度糜烂，有单个溃疡；4分黏膜充血、水肿、重度糜烂，有多处溃疡；5分黏膜充血、水肿、重度糜烂，有大于1cm2的溃疡。2.4.4elisa法检测结肠组织中tnf-α和il-6含量。按照试剂盒说明书检测。2.5统计学分析数据以均值±标准差(mean±sem)表示，通过one-way或two-wayrepeatmeasureanovapost-hocdunnett’test进行组间比较，显著性差异的标准为0.05。3实验结果和分析3.1一般情况观察结果与正常对照组相比，dss模型组小鼠在造模第3天大便性状开始发生变化，出现腹泻，第4天后腹泻加重、出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降；曲札茋苷组50mg/kg组小鼠在造模第3天出现腹泻，第4天后出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降，第7天剩4只动物便血，其余动物便血减少或消失、饮食有所增加、体重开始恢复；曲札茋苷组100mg/kg组小鼠在造模第4天出现腹泻，第5天后有5只动物出现便血、饮食减退、活动减少、体重下降，第7天剩1只动物便血，其余动物便血消失、体重恢复；阳性药组(柳氮磺胺吡啶)小鼠在造模第3天出现腹泻，第4天后出现便血、饮食减退、体重下降，第7天剩3只动物便血，其余动物便血减少或消失、饮食有所增加、体重恢复。体重变化及大便性状情况见表2所示：表2曲札茋苷对小鼠溃疡性结肠炎期间体重变化及大便性状的影响(n＝8)3.2结肠重量/长度比值变化dss模型组结肠重量/长度比值明显比正常对照组大，表明模型组充血肿胀情况比较严重，而曲札茋苷组和阳性药组结肠重量/长度比值明显低于模型组，表明曲札茋苷和阳性药柳氮磺胺吡啶都可以逆转dss引起的小鼠结肠充血水肿。结肠重量、长度及二者比值见表3所示：表3实施例小鼠结肠重量、长度及二者比值(n＝8)注：与正常对照组相比，###p<0.001；与模型组相比，*p<0.053.3结肠组织观察评分结肠组织观察评分反映药物对小鼠溃疡性结肠炎的治疗效果，结果见表4所示：表4实施例曲札茋苷对小鼠溃疡性结肠炎的治疗效果(n＝8)组别7天后结肠组织观察评分正常对照组0.250±0.267dss模型组2.938±1.084###曲札茋苷50mg/kg2.250±1.282*曲札茋苷100mg/kg1.750±1.035***柳氮磺胺吡啶520mg/kg2.125±1.246**注：与正常对照组相比，###p<0.001；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0013.4结肠组织中tnf-α和il-6水平采用酶联免疫法，检测不同组小鼠结肠组织细胞因子tnf-α和il-6水平。结果显示：与正常对照组小鼠比较，模型组小鼠结肠组织tnf-α和il-6含量显著增高(###p<0.001)；与模型组小鼠比较，曲札茋苷组呈剂量依赖性显著降低结肠组织tnf-α和il-6含量(***p<0.001，**p<0.01)；阳性药组也明显降低了结肠组织tnf-α和il-6含量(*p<0.05)。结果见图1：4结论从在动物水平进行的溃疡性结肠炎治疗药效评价结果表明，本发明中的曲札茋苷具备非常好的溃疡性结肠炎治疗作用，其中100mg/kg剂量下效果优于阳性药柳氮磺胺吡啶，为将其开发成为低毒、高效、安全的新型炎性肠病治疗药物提供了科学依据。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
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的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12