本发明涉及一种超声波辅助从白果中去除银杏酸的方法。
(二)背景技术
白果(学名：ginkgobiloba)，又名鸭脚子、灵眼、佛指柑，银杏、公孙树子，是银杏的种仁。经常食用白果，可以滋阴养颜抗衰老，扩张微血管，促进血液循环，使人肌肤、面部红润，精神焕发，延年益寿，是老幼皆宜的保健食品和款待国宾上客的特制佳肴。种仁中的黄酮甙、苦内脂对脑血栓、老年性痴呆、高血压、高血脂、冠心病、动脉硬化、脑功能减退等疾病还具有特殊的预防和治疗效果。
白果主要分为药用白果和食用白果两种，药用白果略带涩味，食用白果口感清爽。白果果仁除含有淀粉、蛋白质、脂肪、糖类之外，还含有维生素c、核黄素、胡萝卜素、钙、磷、铁、钾、镁等微量元素以及银杏酸、白果酚、五碳多糖，脂固醇等成分，营养丰富。性平、味甘、略苦涩，有毒。目前医药界认为，儿童生吃7～15枚，即可引起中毒，炒熟后毒性降低，但一次食入量也不能过多。
目前市场上白果产品很多，但是未见有专门针对白果中银杏酸等有毒成分的去除方法。
(三)
技术实现要素：
本发明提供了一种超声波辅助去除白果中银杏酸的方法，本发明方法结合了超声波法和蛋白酶酶解法的长处，摒弃了单一方法的高品质和低成本难以融合的缺点，该方法既能保持白果中营养成分破坏少、银杏酸去除率高的效果，并且白果蛋白水解为短肽和氨基酸，更利于人体吸收利用，又能减少能耗降低加工成本。
本发明技术方案的如下：
一种超声波辅助去除白果中银杏酸的方法，所述方法为：
(1)取新鲜白果(市售)，除去外壳、种皮后，经粉碎、干燥、研磨、过筛，得到银杏粉；
具体的，步骤(1)所述粉碎、干燥、研磨、过筛的操作方法为：将去除了外壳、种皮的新鲜白果放入粉碎机内粉碎成糊状，接着于60～80℃干燥至水分含量为8～10％，再经研磨，过150～180目筛，得到银杏粉；
(2)将步骤(1)所得银杏粉与水按料液比1：20～30(g：ml)混合，然后加入中性蛋白酶，在温度38～45℃、超声波频率20～40khz的条件下酶解1～1.5h，之后过滤，收集滤饼(无需干燥)；
所述中性蛋白酶与银杏粉的质量比为1：50～100；
所述中性蛋白酶的酶活为50000u/g；
(3)取步骤(2)所得滤饼，按料液比1：40～50(g：ml)与体积分数95～98％的乙醇水溶液混合，得到混合液，将所得混合液于温度45～60℃、超声波频率20～40khz、压力30～70pa的条件下旋蒸至初始体积的1/5～1/4，得到浓缩液，将所得浓缩液进行过滤，滤出固体干燥得到白果粉，完成银杏酸的去除；
所述滤出固体于60～80℃干燥至水分含量为8～10％，得到白果粉；
所得白果粉可通过hplc在310nm处检测银杏酸含量。
与现有技术相比，本发明具有如下优点及有益效果：
(1)本发明去除方法产品回收率高、银杏酸去除效果好，银杏酸含量小于3μg/g；
(2)本发明工艺简单，所用试剂易得、安全，生产成本低，易于实现工业化。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例中用到的新鲜白果为泰兴大佛指白果；中性蛋白酶购自诺维信(中国)生物技术有限公司，酶活50000u/g。
实施例1
(1)取市售新鲜白果，除去外壳、种皮，然后放入粉碎机内粉碎成糊状，将糊状物置于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，再进行研磨，过150目筛，得到银杏粉。
(2)电子分析天平称取10.00g银杏粉，与200ml水混合，然后加入0.1g中性蛋白酶，20khz超声波辅助促进下加热至38℃酶解1h，过滤，收集滤饼。
(3)取步骤(2)所得滤饼，与400ml体积分数95％的乙醇水溶液混合，在50℃恒温水浴锅中，20khz超声波辅助促进下，于30pa旋蒸3h，所得浓缩液的体积为初始体积的1/5，之后过滤，滤饼于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，得到白果粉9.32g。
本实施例所制备的白果粉为白色，hplc检测银杏酸质量含量为2.84μg/g。
实施例2
(1)取市售新鲜白果，除去外壳、种皮，然后放入粉碎机内粉碎成糊状，将糊状物置于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，再进行研磨，过180目筛，得到银杏粉。
(2)电子分析天平称取10.00g银杏粉，与250ml水混合，然后加入0.15g中性蛋白酶，30khz超声波辅助促进下加热至40℃酶解1.5h，过滤，收集滤饼。
(3)取步骤(2)所得滤饼，与500ml体积分数95％的乙醇水溶液混合，在50℃恒温水浴锅中，30khz超声波辅助促进下，于50pa旋蒸3.5h，所得浓缩液的体积为初始体积的1/4，之后过滤，滤饼于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，得到白果粉9.27g。
本实施例所制备的白果粉为白色，hplc检测银杏酸质量含量为2.61μg/g。
实施例3
(1)取市售新鲜白果，除去外壳、种皮，然后放入粉碎机内粉碎成糊状，将糊状物置于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，再进行研磨，过180目筛，得到银杏粉。
(2)电子分析天平称取10.00g银杏粉，与300ml水混合，然后加入0.2g中性蛋白酶，40khz超声波辅助促进下加热至45℃酶解1.5h，过滤，收集滤饼。
(3)取步骤(2)所得滤饼，与400ml体积分数98％的乙醇水溶液混合，在60℃恒温水浴锅中，40khz超声波辅助促进下，于60pa旋蒸3h，所得浓缩液的体积为初始体积的1/5，之后过滤，滤饼于80℃下干燥24h(至水分含量为10％)，得到白果粉9.35g。
本实施例所制备的白果粉为白色，hplc检测银杏酸质量含量为2.96μg/g。
对比例
目前没有对白果进行脱银杏酸的工艺，都是简单蒸煮，有从银杏叶提取物中去除银杏酸。比如一种去除银杏提取物中银杏酸的方法(cn201510147957.3)中所述的方法。该方法需要特制泡沫分离器，使用大量化学试剂nahco3、span-40和tween-20，去除后银杏酸含量为4.3ppm。具体为：
(1)原料称量：称取市售的25g银杏提取物。
(2)配制悬浮液：用700ml水加入到盛有市售的银杏提取物的烧杯中，充分搅拌，使提取物尽可能溶解。
(3)加入饱和nahco3溶液,调节ph，使等于8。
(4)表面活性剂用量：称取表面活性剂，所述表面活性剂为span-40和tween-20混合物，两者的质量比为1:2。
(5)将上述的悬浮液中加入表面活性剂，混合后转移入泡沫分离器中。
(6)上述工作完成后，在室温下从泡沫分离器底部通入空气。控制空气的气速在80ml/min左右。
(7)收集泡沫分离器上端带出的泡沫,泡沫即为含银杏酸的溶液。泡沫分离器内处理后的溶液即为去除银杏酸的溶液,用高效液相色谱法,色谱柱为hiqsilc18柱,流动相为甲醇3％hac溶液，流速1ml/min，检测波长为310nm，柱温40℃。将上述去除银杏酸的溶液浓缩、烘干，即得到去除银杏酸的银杏提取物22.74g。此法测定后换算得到最后提取物产品中银杏酸含量为4.3ppm。
本发明方法使用环境友好的乙醇作为溶剂，使用物理方法超声波辅助，且产品银杏酸含量远低于上述技术，具有明显优势。