包含TNFSF14蛋白的皮肤美白用组合物的制作方法

本说明书涉及包含tnfsf14蛋白的皮肤美白用组合物。
背景技术：
：黑色素是具有黑色色素和蛋白的复合形式的酚的生物聚合物质，其在苹果、土豆和香蕉的切割表面暴露于空气并由此变棕色时发现，或从动物的外部羽毛、皮肤、头部、眼部等发现。黑色素与皮肤美白等直接相关，这是由于黑色素在皮肤上过度产生时会沉积在皮肤上形成斑、雀斑等，而且黑色素促进皮肤老化并且还可能导致皮肤癌。促黑色素细胞激素(msh)由于紫外线、炎症、激素等而分泌。msh与受体反应以提高camp，从而合成黑色素，合成的黑色素分泌至黑色素细胞外并起到保护皮肤免受紫外线等的作用。黑色素的合成主要由α-msh调节，mitf、tyr、trp1、trp2等被认为是参与黑色素合成的蛋白。肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白是肿瘤坏死因子受体超家族14(tnfrsf14)的配体。该蛋白起到淋巴细胞活性的辅助刺激物的作用，并且还可以起到抑制疱疹病毒感染的作用。还已知这种蛋白质刺激t细胞的增殖并引起肿瘤细胞的凋亡。然而，对tnfsf14与皮肤美白效果或黑色素产生有关的研究尚未知晓。参考文献清单专利文献专利文献1：韩国专利第10-1735564号(2017年5月8日)技术实现要素：[技术问题]在一个方面中，本发明的目的是开发一种显示皮肤美白效果的新物质并将该新物质应用于皮肤美白用组合物。[解决问题的技术方案]在一个方面，本发明提供了皮肤美白用组合物，包含肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白、以及编码该蛋白的多核苷酸中的一种或多种。在另一个方面，本发明提供了肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白、以及编码该蛋白的多核苷酸中的一种或多种在制造皮肤美白用组合物中用途。在另一个方面，本发明提供了皮肤美白用组合物，包含提高tnfsf14蛋白表达的物质。在另一个方面，本发明提供了提高tnfsf14蛋白表达的物质在制造皮肤美白用组合物中的用途。在另一个方面，本发明提供了体毛颜色控制用组合物，包含tnfsf14蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白或编码蛋白的多核苷酸中的一种或多种。在另一个方面，本发明提供了tnfsf14蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白或编码蛋白的多核苷酸中的一种或多种在制造体毛颜色控制用组合物中的用途。在另一个方面，本发明提供了以美容为目的控制体毛颜色的方法，包括使用该组合物处理体毛。在又另一个方面，本发明提供了筛选具有皮肤美白效果的物质的方法，包括：用测试物质处理细胞；以及在上述步骤之后，确认细胞中tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平是否改变。在又另一个方面，本发明提供了用于筛选具有皮肤美白效果的试剂盒，包含用于在用测试物质处理之前或之后显示tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的相对表达程度的检测单元。在又另一个方面，本发明提供了提供皮肤状态诊断所需的信息的方法，包括确认个体中tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平。[本发明的有益效果]本发明在一个方面提供了新的皮肤美白用组合物以及使用该皮肤美白用组合物的方法，该皮肤美白用组合物包含tnfsf14蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白或编码该蛋白的多核苷酸，因此，它可以促进与皮肤美白领域相关的市场拓展和产业发展。附图说明图1示出了当使用tnfsf14蛋白处理黑色素细胞时的颜色变化的结果；图2示出了当使用tnfsf14蛋白处理黑色素细胞与未使用tnfsf14蛋白处理的黑色素细胞相比所产生的黑色素的相对量；以及图3示出了当使用不同浓度的tnfsf14蛋白处理黑色素细胞时所产生的黑色素的相对量。具体实施方式在下文中，将详细地描述本说明书。如本文所使用的，术语“皮肤”意为覆盖动物体表的组织，是不仅包括覆盖面部、身体等体表的组织还包括头皮和头发的最宽泛的概念。如本文所使用的，“tnfsf14”是指肿瘤坏死因子超家族成员14，也被称为light(淋巴毒素，表现出诱导型表达，并与hsv糖蛋白d竞争t淋巴细胞上表达的受体hvem)如本文所使用的，“重组蛋白”也称为基因重组蛋白，是指通过用重组技术处理一种或多种多核苷酸或基因然后由处理的一种或多种多核苷酸或基因编码蛋白来获得的蛋白。tnfsf14蛋白与肿瘤坏死因子受体有关，并且通常是一种已经成为了肿瘤相关研究或炎症相关研究主题的蛋白。然而，尚不清楚tnfsf14蛋白质及其相关基因是否显示出与皮肤有关的效果，特别是皮肤美白效果和体毛颜色控制效果。本说明书实验性地研究显示，tnfsf14蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白以及编码该蛋白的多核苷酸抑制了黑色素细胞的黑色素产生，并且证明了该蛋白和该多核苷酸可以用于皮肤美白用组合物、体毛颜色控制用组合物、控制体毛颜色的方法、筛选具有皮肤美白效果的物质的方法、诊断皮肤状态的方法、提供皮肤状态诊断所需的信息的方法等。在一个方面，本发明涉及皮肤美白用组合物，其包含肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白或编码蛋白的多核苷酸中的一种或多种。本文所公开的与tnfsf14蛋白具有氨基酸序列同源性的蛋白可包括：与tnfsf14蛋白具有80％以上、85％以上、90％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上、99％以上的氨基酸序列同源性的蛋白。另外，本文公开的蛋白可包括包含seqidno:1的蛋白、或其中seqidno:1的片段和1个以上氨基酸、2个以上氨基酸、3个以上氨基酸、4个以上氨基酸、5个以上氨基酸、6个以上氨基酸、7个以上氨基酸被改变的蛋白。在本发明的一个方面，该蛋白可以以与标记物质耦合的形式包含在组合物中。根据另一个方面，该标记物质可以是荧光物质或对比物质。在本发明的另一方面，该荧光物质可以为异硫氰酸荧光素(fitc)。在本发明的一个方面，氨基酸改变属于导致肽或蛋白的物理化学性质改变的性质。例如，可以进行提高肽热稳定性、改变基质特异性、改变最适ph等的氨基酸改变。如本文所使用的，术语“氨基酸”不仅包括天然地合成肽或蛋白的22种标准氨基酸，还包括d-异构体和修饰的氨基酸。因此，在本发明的一个方面，肽可以为包含d-氨基酸的肽。同时，在本发明的另一个方面，肽或蛋白可包含翻译后修饰的非标准氨基酸等。翻译后修饰的实例包括磷酸化、糖基化、酰基化(包括例如乙酰化、肉豆蔻酰化和棕榈酰化)、烷基化、羧基化、羟基化、糖化、生物素化、泛素化、化学性质改变(例如β-去除脱酰亚胺化和脱酰胺化)、以及结构改变(例如二硫键桥的形成)。另外，其实例可包括由在与用于形成肽缀合物的交联剂结合的过程中发生的化学反应所导致的氨基酸的改变，例如氨基、羧基、或另一侧链的改变。本文所公开的蛋白或肽可以为从天然来源鉴别和分离的野生型蛋白或肽。同时，本文所公开的蛋白或肽可以为变体，该变体包含与seqidno:1的整个氨基酸序列或其片段相比取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸的氨基酸序列。不仅在变体中，而且在野生型蛋白或野生型多肽中的氨基酸变化也包括不显著影响蛋白折叠和/或活性的保守性氨基酸取代。保守性取代的实例在碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和甲硫氨酸)、芳族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)和小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和苏氨酸)的组内。一般来说，不改变特定活性的氨基酸取代是本领域已知的。最常发生的交换为ala/ser、val/ile、asp/glu、thr/ser、ala/gly、ala/thr、ser/asn、ala/val、ser/gly、tyr/phe、ala/pro、lys/arg、asp/asn、leu/ile、leu/val、ala/glu、和asp/gly，反之亦然。保守性取代的其它实例包括下表所示的那些。[表1]原始氨基酸示例性的残基取代优选的残基取代ala(a)val；leu；ilevalarg(r)lys；gln；asnlysasn(n)gln；his；asp,lys；argglnasp(d)glu；asnglucys(c)ser；alasergln(q)asn；gluasnglu(e)asp；glnaspgly(g)alaalahis(h)asn；gln；lys；argargile(i)leu；val；met；ala；phe；正亮氨酸leuleu(l)norleucine；ile；val；met；ala；pheilelys(k)arg；gln；asnargmet(m)leu；phe；ileleuphe(f)leu；val；ile；ala；tyrtyrpro(p)alaalaser(s)thrthrthr(t)sersertrp(w)tyr；phetyrtyr(y)trp；phe；thr；serpheval(v)ile；leu；met；phe；ala；正亮氨酸leu通过选择以下方面显著不同的取代基来进行蛋白或肽的生物学特性中的实质性改变：(a)对维持取代区域中的多肽骨架结构，例如片状构型或螺旋构型的效果，(b)对于维持靶标部位的分子的电荷或疏水性的效果，(c)对于维持侧链的体积的效果。基于常见的侧链性质，将天然残基分为以下的组：(1)疏水性残基：正亮氨酸、met,ala,val,leu和ile；(2)中性亲水性残基：cys,ser和thr；(3)酸性残基：asp和glu；(4)碱性残基：asn,gln,his,lys和arg；(5)影响链取向的残基：gly和pro；以及(6)芳族残基：trp,tyr和phe。通过这些类别中的成员之一与另一类别交换，将发生非保守性取代。与维持蛋白或肽的适当立体结构无关的任何半胱氨酸残基通常也可以用丝氨酸取代，以提高分子的氧化稳定性并防止异常交联。换句话说，半胱氨酸键可以添加至蛋白或肽中以提高稳定性。其它类型的蛋白或肽的氨基酸变体是抗体的糖基化模式改变的那些变体。术语改变是指肽中发现的一个或多个碳水化合物部分的缺失和/或蛋白或肽中不存在的一个或多个糖基化位点的添加。蛋白或肽的糖基化典型地为n-连接或o-连接。n-连接意为碳水化合物部分连接于天冬酰胺残基的侧链。三肽序列天冬酰胺-x-丝氨酸和天冬酰胺-x-苏氨酸(其中x是除了脯氨酸以外的任意氨基酸)是用于使碳水化合物部分酶促地连接到天冬酰胺侧链的识别序列。因此，当这些三肽序列中的一种存在于多肽中时，产生潜在的糖基化位点。o-连接的糖基化意为将糖n-乙酰半乳糖胺、半乳糖或木糖连接于羟基氨基酸，该羟基氨基酸最常见为丝氨酸或苏氨酸，但是也可以使用5-羟脯氨酸或5-羟赖氨酸。通过改变氨基酸以便包含上述三肽序列中的一种或多种可以方便地将糖基化位点添加至蛋白或肽中(在n-连接糖基化位点的情况下)。通过将一个或多个丝氨酸或苏氨酸残基添加至原始抗体的序列或用这些残基取代原始抗体的序列，可以实现这样的改变(在o-连接糖基化位点的情况下)。作为一个实施例，tnfsf14蛋白可具有或包含由seqidno:1所示的氨基酸序列。在本发明的另一个方面，具有seqidno:1的序列的蛋白、作为seqidno:1的序列的片段的肽、以及与该蛋白或肽具有90％以上序列同源性的蛋白或肽包括合成或重组产生的肽或蛋白。作为另一个实施例，该多核苷酸可具有或包含编码由seqidno:1所示的氨基酸序列的碱基序列。作为另一个实施例，该多核苷酸可以为tnfsf14基因的mrna。作为另一个实施例，该组合物可抑制黑色素产生或减少黑色素表达。黑色素是从动物的外部羽毛、皮肤、头部、眼睛等观察到的，当黑色素过度产生时，它会沉积在皮肤上形成斑、雀斑等，还促进皮肤老化，并且还可能导致皮肤癌。由于黑色素过度产生导致的疾病或症状被认为是选自由以下组成的组中的一种或多种：斑、雀斑、老年斑、瑕疵(blemishes)、表皮黑色素细胞损伤、咖啡牛奶斑(cafe'saulaitmacules)、痣、贝克痣、扁平痣、黑子、黑色点、真皮黑色素细胞病变、蒙古斑、太田痣、迟发性双侧太田痣样色素斑、伊藤痣、青色痣、黑色素细胞痣、交界痣、复合痣、真皮内痣、晕痣、先天性黑色素细胞痣、斯皮茨痣(spitznevus)、发育不良痣(dysplasticnevus)、黑色素瘤(melanoma)、恶性雀斑样痣黑色素瘤(lentigomalignamelanoma)、浅表扩散性黑色素瘤、肢端雀斑样黑色素瘤(acrallentiginousmelanoma)、结节型黑色素瘤、色素性基底细胞癌、色素性皮肤纤维瘤、皮样囊肿、瘢痕疙瘩、紫外线导致的色素沉积、药物导致的色素沉积、炎症后色素沉积、皮肤炎导致的色素沉积、以及角化棘皮瘤。根据本发明的一个方面的tnfsf14蛋白和编码tnfsf14蛋白的多核苷酸可以抑制细胞中的黑色素生成，当黑色素产生被抑制时，可以改善上述疾病或症状，因此在一个方面中，本发明可改善上述的疾病或症状(参见实验例1)。作为另一个实施例，美白是改善或缓和选自由以下组成的组中的一种或多种：斑、雀斑、黑色点、痣、黑色素瘤、紫外线导致的色素沉积、药物导致的色素沉积、炎症后色素沉积、以及皮肤炎导致的色素沉积。作为另一个实施例，该蛋白的含量可以为相对于组合物的总重量的0.00001wt％至10wt％。在一个方面，该含量可以为0.00001wt％以上、0.00005wt％以上、0.0001wt％以上、0.0005wt％以上、0.001wt％以上、0.005wt％以上、0.01wt％以上、0.05wt％以上、0.1wt％以上、0.5wt％以上、1wt％以上、3wt％以上、5wt％以上、或8wt％以上。在另一个方面，该含量可以为10wt％以下、8wt％以下、5wt％以下、3wt％以下、2wt％以下、1wt％以下、0.5wt％以下、0.1wt％以下、0.05wt％以下、0.01wt％以下、0.005wt％以下、0.001wt％以下、0.0005wt％以下、0.0001wt％以下、0.00005wt％以下、或0.00003wt％以下。作为另一个实施例，该蛋白的剂量可以为0.00001mg/kg/day至20mg/kg/day。在一个方面，该剂量可以为0.00001mg/kg/day以上、0.00005mg/kg/day以上、0.0001mg/kg/day以上、0.0005mg/kg/day以上、0.001mg/kg/day以上、0.005mg/kg/day以上、0.01mg/kg/day以上、0.05mg/kg/day以上、0.1mg/kg/day以上、0.5mg/kg/day以上、1mg/kg/day以上、3mg/kg/day以上、5mg/kg/day以上、8mg/kg/day以上、10mg/kg/day以上、14mg/kg/day以上、16mg/kg/day以上、或18mg/kg/day以上。在另一个方面，该含量可以为20mg/kg/day以下、18mg/kg/day以下、16mg/kg/day以下、14mg/kg/day以下、12mg/kg/day以下、10mg/kg/day以下、8mg/kg/day以下、6mg/kg/day以下、4mg/kg/day以下、2mg/kg/day以下、1mg/kg/day以下、0.5mg/kg/day以下、0.1mg/kg/day以下、0.05mg/kg/day以下、0.01mg/kg/day以下、0.005mg/kg/day以下、0.001mg/kg/day以下、0.0005mg/kg/day以下、0.0001mg/kg/day以下、或0.00005mg/kg/day以下。该成分的剂量的确定在本领域技术人员的水平范围内，并且每日剂量可以根据诸如要给药的受试者的进展、发病时间、年龄、健康状态、并发症等各种因素来变化。作为一个实施例，该组合物的给药方式可以为透皮、皮下、皮内、肌内、血管内、或口服给药，但不限于此，透皮给药是优选的。作为另一个实施例，该多核苷酸可以通过包含在载体内来给药。可使用任何载体作为载体，只要该载体可以由本领域技术人员使用并且可以包含该多核苷酸。作为另一个实施例，该皮肤美白用组合物可以为化妆用组合物。在另一个方面，本发明可以为皮肤美白用组合物，其包含增强肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白的表达的物质。当tnfsf14蛋白表达增强时，黑色素细胞中的黑色素含量因tnfsf14蛋白量增加而减少，因此增强tnfsf14蛋白表达的物质可被用于皮肤美白用组合物中。在另一个方面，本发明可以为体毛颜色控制用组合物，其包含肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白、与tnfsf14蛋白具有90％以上的氨基酸序列同源性的蛋白、或编码该蛋白的多核苷酸中的一种或多种。作为一个实施例，体毛包括身体的所有毛发，但是其优选可以为头发。作为另一个实施例，颜色控制可以为选自由美白、变灰、变褐、变黄、和变红组成的组中的一种或多种。在另一个方面，本发明可以为皮肤美白用试剂盒，其包含上述组合物和说明。在另一个方面，本发明可以为头发颜色控制用试剂盒，其包含上述组合物和说明。在一个方面，本发明可以为以美容为目的控制体毛颜色的方法，其包括使用根据本发明的一个方面的组合物处理体毛。在另一个方面，本发明可以为筛选具有皮肤美白效果的物质的方法，包括：用测试物质处理细胞；以及在上述步骤之后，确认细胞中肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平是否改变。作为一个实施例，本发明可以为筛选具有皮肤美白效果的物质的方法，该方法还包括：当用该测试物质处理后tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平比用该测试物质处理前tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平高时，将该测试物质判定为具有皮肤美白效果的物质。在另一个方面，本发明可以为用于筛选具有皮肤美白效果的试剂盒，该试剂盒包含检测单元，用于在用测试物质处理之前或之后显示肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的相对表达程度。作为一个实施例，该试剂盒还可包含黑色素细胞和说明书，可在说明书中描述筛选具有皮肤美白效果的物质的方法。在另一个方面，本发明可以是提供皮肤状态诊断所需的信息的方法，包括确认个体中肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平。作为一个实施例，皮肤状态可以是与黑色素相关的皮肤状态。如本文所使用的，“与黑色素相关的皮肤状态”意为直接或间接涉及黑色素色素或黑色素细胞的皮肤状态，例如，皮肤状态包括对使黑色素形成的刺激显示高敏感性或低敏感性的皮肤、具有黑色素沉积未来进一步进展或被抑制的可能性的皮肤、处于与黑色素相关的皮肤疾病的高风险或低风险的皮肤、以及具有明色或暗色的皮肤。根据本发明的一个方面，该刺激可以是外因性刺激或内因性刺激中的一种或多种。根据本发明的一个实施例，该外因性刺激可包括由紫外线、身体压力、疤痕和重金属导致的刺激、由化学物质导致的刺激、由微生物导致的感染、以及压力。根据本发明的另一个实施例，该内因性刺激可包括体内的氧化应激变化、衰老、炎症、激素变化、包括肝脏在内的消化器官功能障碍、基因异常、代谢紊乱、营养不良状况、以及维生素和矿物质的过量或缺乏。作为另一个实施例，表达水平的确认可以是在形成黑色素的特定刺激物施加于tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸之前或之后对tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度进行比较。在一个实施例中，表达水平的确认或表达程度的比较可以由本领域技术人员适当地选自已知的技术，例如免疫荧光分析、蛋白印迹杂交、斑点印迹、elisa、rna印迹杂交(northernblot)、pcr、rt-qpcr、gc-ms、lc-ms、nmr等，但不限于此。例如，表达水平的确认或表达程度的比较可以从收获黑色素细胞或未分离细胞的个体直接检测tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度以互相比较表达程度。收获或检测可以通过本领域技术人员已知的任何方法进行。根据本发明的另一个实施例，tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平的确认或表达程度的比较可以是在两个特定时间点比较个体的全部皮肤或特定皮肤区域中tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平或表达程度。例如，可以由从全部皮肤或特定皮肤区域收获黑色素细胞或未分离细胞的个体直接检测tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达水平或表达程度以互相比较表达水平或表达程度。收获或检测可以通过本领域已知的任何方法进行。作为另一个实施例，皮肤状态诊断可以是判断皮肤为全部皮肤或特定皮肤区域中黑色素沉积增加或减少，从而可进行皮肤变黑或美白的皮肤。如本文所使用的，“皮肤变黑”包括施加或消除各种因素或刺激而全部皮肤或特定皮肤区域由此变暗或变黑的现象。另外，如本文所使用的，“皮肤美白”包括施加或消除各种因素或刺激而使得全部皮肤或特定皮肤区域由此变亮或变白的现象。根据本发明的另一个实施例，皮肤状态诊断可以是根据tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度来判断皮肤变黑或美白的可能性的等级。根据一个实施例，该等级可以为基于获得自使用一定数量的个体制备的皮肤样品的tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度的数据确定的参考值、以及通过基于该参考值分段而确定的等级。当该组合物为药物组合物时，该药物组合物可以另外包含保存剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化促进剂、药物佐剂(例如用于控制渗透压的盐和/或缓冲剂)、以及其它治疗上有用的物质，可根据常规方法将该药物配制成各种口服或非肠道的给药形式。当该组合物的给药方式为口服给药时，该组合物可采取例如以下的剂型：片剂、丸剂、硬胶囊和软胶囊、液体、混悬剂、乳剂、糖浆剂、粉剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂等，并且该剂型除包含活性成分外可包含表面活性剂、稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素、或甘氨酸)、和润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸及其镁或钙盐、或聚乙二醇)。片剂还可包含结合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、或聚乙烯吡咯烷酮，并且如果需要，片剂可包含药物添加剂，例如崩解剂(例如淀粉、琼脂、和海藻酸或其钠盐)、吸收剂、着色剂、调味剂、和甜味剂。可以通过常规的混合、颗粒化或涂覆方法制备片剂。另外，当该组合物的给药方式是胃肠外给药时，胃肠外给药的形式可以为透皮给药的剂型，例如，该剂型可以为例如以下的剂型：注射剂、滴剂、软膏剂、洗剂、凝胶剂、霜剂、喷雾剂、混悬剂、乳剂、栓剂、贴剂等，但不限于此。该药物组合物可以胃肠外、直肠、局部、透皮、皮下等给药。该药物组合物可以是皮肤外用剂，该皮肤外用剂是可包括从皮肤外部给药的任何物质的通用术语，其中可包括药物或准药物的各种制剂。根据本发明的又另一个方面，该组合物可以为作为化妆用组合物的皮肤美白用组合物。化妆用组合物可另外包含一般的化妆用组合物所包含的功能性添加剂和成分。该功能性添加剂可包含选自由以下组成的组中的成分：水溶性维生素、油溶性维生素、聚合肽、聚合多糖、鞘脂、和海藻提取物组成的组的成分。除了这些而包含的成分之外，还可包括油脂成分、保湿剂、润肤剂、表面活性剂、有机颜料和无机颜料、有机粉末、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、ph调节剂、酒精、着色剂、香料、血液循环促进剂、冷感提供剂、止汗剂、净化水等。化妆用组合物的剂型不特别地限制，并且可以适当地根据目的选择。例如，化妆用组合物可以制备成选自由以下组成的组中的剂型的一种或多种：化妆水、皮肤软化剂、爽肤水(skintoner)、收敛剂、洗剂、乳液、保湿液、滋养液、按摩霜、滋养霜、保湿霜、护手霜、粉底、精华液、滋养精华液、面膜、香皂、洁肤泡沫、洁肤液、洁肤霜、身体乳液、和身体清洁剂，但不限于此。当根据本发明的一个方面的剂型为糊剂、乳膏剂或凝胶剂时，可使用动物纤维、植物纤维、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石、氧化锌等作为载体组分。当根据本发明的一个方面的剂型为粉剂或喷雾剂时，可使用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙、或聚酰胺粉末可用作载体组分，尤其在喷雾剂的情况下，它可以含有喷射剂例如氯氟烃、丙烷/丁烷、或二甲醚。当根据本发明的一个方面的剂型为溶液剂或乳剂时，使用溶剂、溶剂化剂、或乳化剂作为载体组分，例如，有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂族酯、聚乙二醇、或脱水山梨糖醇的脂肪酸酯。当根据本发明的一个方面的剂型为混悬剂时，可使用液体稀释剂(例如水、乙醇、或丙二醇)、悬浮剂(例如乙氧基化异硬脂醇)、聚氧乙烯山梨糖醇酯或聚氧乙烯脱水山梨聚糖酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂、黄蓍胶等作为载体组分。当根据本发明的一个方面的剂型为含有表面活性剂的清洁剂时，可以使用脂肪族醇硫酸盐、脂肪族醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸盐、咪唑啉衍生物、牛磺酸甲酯、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰氨基甜菜碱、脂肪族醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、亚麻酸衍生物、乙氧基化甘油脂肪酸酯等作为载体组分。根据本发明的另一个方面，该组合物可以是作为食品或健康食品组合物的皮肤美白用组合物。该食品或健康食品组合物可以是液体或固体形式的剂型，例如，有各种类型的食品、饮料、口香糖、茶、维生素复合物、保健功能食品、保健辅助食品等，并且它可以以粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或饮料的形式使用。在食品组合物的各剂型中，除了活性成分外的本领域常用的成分可以由本领域技术人员根据使用的剂型或目的没有难度地适当选择或混合，当活性成分与其他成分同时给药时，可以表现出协同效应。除了本文公开的活性成分之外可以包含的液体成分没有特别限制，并且可以添加各种调味剂或天然碳水化合物作为普通饮料中的附加成分。天然碳水化合物的示例可包括：单糖(例如葡萄糖、果糖)、二糖(例如麦芽糖、蔗糖)、普通糖类(例如糊精、环糊精)、以及糖醇(例如木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇)等。可以使用天然调味剂(奇异果甜蛋白、甜叶菊提取物(例如莱鲍迪甙a和甘草甜素))和合成调味剂(例如糖精和阿斯巴甜)有利地作为调味剂。天然碳水化合物的比例通常可以为每100ml或100g本文公开的组合物约1至20g，并且在一个方面可以为每100ml或100g本文公开的组合物约5至12g。在一个方面，食品组合物可以包含各种营养物、维生素、矿物质(电解质)、调味剂(例如合成调味剂、天然调味剂等)、着色剂和增稠剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸及其任何盐、藻酸及其任何盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、ph调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、用于碳酸饮料的碳酸化剂等。在另一个方面，食品组合物可包含用于生产天然果汁和蔬菜饮料的果肉。这些成分可以独立或组合使用。添加剂的比例可以变化，但是通常选自每100重量份本文公开的组合物0.001至约20重量份的范围。到目前为止，皮肤色素和tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸之间的关系尚未知晓，本发明在一个方面鉴定了这种关系。本发明发现了通过利用该关系筛选发挥皮肤美白效果的物质的方法。另外，可以制造包含检测单元的试剂盒，该检测单元能够通过应用这一点来证实或显示tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度。此外，通过证实tnfsf14蛋白或编码tnfsf14蛋白的多核苷酸的表达程度，可以提供评估或诊断与黑色素相关的皮肤状态所需的信息。在下文中，将参考实施例和实验例更详细地描述本发明的一个方面的构成和效果。但是，提供以下实例仅用于说明性目的以便于理解本发明，并且本发明的主旨和范围不限于此。[实施例1]实验材料的制备肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14)是配体基因，通常使用重组蛋白进行针对基因所编码的蛋白的实验。获得tnfsf14的重组蛋白以确认根据本发明的一个方面的用途和效果。具体地，重组人light/tnfsf14蛋白(货号664-li，genbank登录号o43557)购自r&d系统公司(614mckinleyplacene,minneapolis,mn55413,us)。重组人tnfsf14蛋白的氨基酸序列如下。seqidno:1:meesvvrpsvfvvdgqtdipftrlgrshrrqscsvarvglglllllmgaglavqgwfllqlhwrlgemvtrlpdgpagsweqliqerrshevnpaahltganssltgsggpllwetqlglaflrglsyhdgalvvtkagyyyiyskvqlggvgcplglastithglykrtprypeelellvsqqspcgratsssrvwwdssflggvvhleagekvvvrvlderlvrlrdgtrsyfgafmvtnfsf14基因的碱基序列(或mrna碱基序列)由与seqidno:1的氨基酸序列对应的碱基组成，并且与以下seqidno:2的碱基序列(或genbank登录号nm_003807)相同。seqidno:2:使用市面上易购得的细胞作为实验中所使用的黑色素细胞。在根据本发明的一个方面的实验中，使用了购自lifetechnology公司的显示正常色素沉积水平的黑色素细胞(人表皮黑色素细胞，新生儿的，色素沉积适中的供体，hemn-mp或mc-mp)以及购自lifetechnology的显示低色素沉积水平的黑色素细胞(人表皮黑色素细胞，新生儿的，色素沉积微弱的供体，hemn-mp或mc-mp)。购买并使用由lonza(us)制造的mgmtm-4bulletkittm(产品号：cc-3249)作为用于培养黑色素细胞的培养基。[实验例1]所产生的黑色素的量的检测使用mgmtm-4bulletkittm培养一种显示正常色素沉积而另一种显示微弱色素沉积的两种黑色素细胞，并用重组tnfsf14蛋白分别处理。具体地，当所培养的每种黑色素细胞的融合度为70％时，用25ng/ml(每1ml培养基25ng)重组tnfsf14蛋白处理黑色素细胞，4天后，将每种细胞用5mlpbs缓冲液洗涤两次。然后，将1mlpbs缓冲液添加至细胞，使用刮刀刮下并收集所有细胞。然后，通过在13000rpm下离心5分钟制备细胞颗粒。然后观察细胞颗粒的颜色，并互相比较色素形成的程度。另外，将细胞颗粒溶于200μl1nnaoh，通过检测450nm处吸光度来检测黑色素的量。其结果是，获得了图1至3所示的结果。图1中，左上部中的“con”是指完全未处理的显示正常色素沉积的黑色素细胞(mc-mp)的对照组，右上部中的“con”是指完全未处理的显示微弱色素沉积的黑色素细胞(mc-lp)的对照组。左上部的“light”是指用tnfsf14处理的显示正常色素沉积的黑色素细胞(mc-mp)的对照组，右上部中的“light”是指用tnfsf14处理的显示微弱色素沉积的黑色素细胞(mc-lp)的对照组。图2是示出当将显示正常色素沉积的黑色素细胞(mc-mp)中的黑色素含量视为1时，对其他实验组中的黑色素含量的相对评价的图。换句话说，在两种黑色素细胞均使用tnfsf14蛋白(即light)处理后，所产生的黑色素的量减少了约50％，由此证实了，即使使用少量的tnfsf14蛋白也可以显著有效地抑制黑色素的产生。还证实了当tnfsf14蛋白的含量为25ng/ml时可获得与这些结果类似的结果(如图3，可以看出当tnfsf14蛋白的含量为10至50ng/ml时可以获得相似的结果)。由于tnfsf14蛋白是由tnfsf14基因编码的，还证实了，当tnfsf14基因的量增加或其表达增强时，可以以相同的方式有效地抑制黑色素产生。[剂型例1]软化化妆水(化妆水)使用以下制备软化化妆水(化妆水)：3.0wt％tnfsf14蛋白、1.00wt％l-抗坏血酸-2-磷酸酯镁盐、1.00wt％水溶性胶原蛋白(1％水溶液)、0.10wt％柠檬酸钠、0.05wt％柠檬酸、0.20wt％甘草提取物、3.00wt％1,3-丁二醇，其余为水。[剂型例2]霜剂使用以下制备霜制剂：3.00wt％tnfsf14蛋白、2.00wt％聚乙二醇单硬脂酸酯、5.00wt％自乳化单硬脂酸甘油酯、4.00wt％丙二醇、6.00wt％角鲨烯、6.00wt％三-2-乙基己烷甘油酯、1.00wt％鞘糖脂、7.00wt％1,3-丁二醇、5.00wt％蜂蜡，其余为水。[剂型例3]面膜使用以下制备面膜：3.00wt％tnfsf14蛋白、13.00wt％聚乙烯醇、1.00wt％l-抗坏血酸-2-磷酸镁盐、1.00wt％月桂酰羟脯氨酸、2.00wt％水溶性胶原蛋白(1％水溶液)、3.00wt％1,3-丁二醇、5.00wt％乙醇，其余为水。[剂型例4]健康食品根据下表所示的组成通过常见方法制备了健康食品。[表2]作为实例，该维生素和矿物质混合物的组成比例是通过混合对健康食品来说相对适合的成分而获得的，但该混合比可以任意地改变。根据生产健康食品的常见方法可以混合以上成分，并根据常见方法将以上成分用于健康食品组合物的生产中。[剂型例5]健康饮料根据下表所示的组成通过常见方法制备了健康食品。[表3]成分含量tnfsf14蛋白5mg柠檬酸1000mg寡聚糖100g梅浓缩物2g牛磺酸1g纯化水其余总体积900ml根据生产健康饮料的常规方法，通过添加纯化水作为其余成分来混合上述成分，以使总体积为900ml，如表3所示，然后搅拌并在85℃下加热约1小时，然后将溶液过滤并倾倒至灭菌的2升容器，密封，灭菌，然后在冰箱中储存，从而制备健康饮料。已经详细地描述了本发明的具体部分，对本领域技术人员将显而易见的是，该具体描述仅是优选的实施方式，并且本发明的范围不限于此。因此，本发明的实际范围将通过所附权利要求及其等价物限定。序列表<110>株式会社爱茉莉太平洋<120>包含tnfsf14蛋白的皮肤美白用组合物<130>of18p048<150>kr10-2017-0081207<151>2017-06-27<160>2<170>siposequencelisting1.0<210>1<211>240<212>prt<213>智人()<400>1metglugluservalvalargproservalphevalvalaspglygln151015thraspileprophethrargleuglyargserhisargargglnser202530cysservalalaargvalglyleuglyleuleuleuleuleumetgly354045alaglyleualavalglnglytrppheleuleuglnleuhistrparg505560leuglyglumetvalthrargleuproaspglyproalaglysertrp65707580gluglnleuileglngluargargserhisgluvalasnproalaala859095hisleuthrglyalaasnserserleuthrglyserglyglyproleu100105110leutrpgluthrglnleuglyleualapheleuargglyleusertyr115120125hisaspglyalaleuvalvalthrlysalaglytyrtyrtyriletyr130135140serlysvalglnleuglyglyvalglycysproleuglyleualaser145150155160thrilethrhisglyleutyrlysargthrproargtyrprogluglu165170175leugluleuleuvalserglnglnserprocysglyargalathrser180185190serserargvaltrptrpaspserserpheleuglyglyvalvalhis195200205leuglualaglyglulysvalvalvalargvalleuaspgluargleu210215220valargleuargaspglythrargsertyrpheglyalaphemetval225230235240<210>2<211>2894<212>dna<213>智人()<400>2cgagactccatctcaaaaacaaaacaaataaacgaacaaaaaaacccacaacgtattatt60ttcttgtttacgaggtttcttgtctctctggctccaccagaagaggagcagggacccttc120ttgctgttgttcattgctgcatcccccacaccgagagcagagcctggcatgggcagaaag180tcctcagtcgatatttggtggccccaagcgaatgaagcatccaagaagggaaagctgggg240gctccccactgcacttgccacctgagtcacattttcagaagcctctggaaagtcgtgcac300agcccaggagtgttgagcaatttcggtttcctctgaggttgaaggacccaggcgtgtcag360ccctgctccagacaccttgggcatggaggagagtgtcgtacggccctcagtgtttgtggt420ggatggacagaccgacatcccattcacgaggctgggacgaagccaccggagacagtcgtg480cagtgtggcccgggtgggtctgggtctcttgctgttgctgatgggggccgggctggccgt540ccaaggctggttcctcctgcagctgcactggcgtctaggagagatggtcacccgcctgcc600tgacggacctgcaggctcctgggagcagctgatacaagagcgaaggtctcacgaggtcaa660cccagcagcgcatctcacaggggccaactccagcttgaccggcagcggggggccgctgtt720atgggagactcagctgggcctggccttcctgaggggcctcagctaccacgatggggccct780tgtggtcaccaaagctggctactactacatctactccaaggtgcagctgggcggtgtggg840ctgcccgctgggcctggccagcaccatcacccacggcctctacaagcgcacaccccgcta900ccccgaggagctggagctgttggtcagccagcagtcaccctgcggacgggccaccagcag960ctcccgggtctggtgggacagcagcttcctgggtggtgtggtacacctggaggctgggga1020gaaggtggtcgtccgtgtgctggatgaacgcctggttcgactgcgtgatggtacccggtc1080ttacttcggggctttcatggtgtgaaggaaggagcgtggtgcattggacatgggtctgac1140acgtggagaactcagagggtgcctcaggggaaagaaaactcacgaagcagaggctgggcg1200tggtggctctcgcctgtaatcccagcactttgggaggccaaggcaggcggatcacctgag1260gtcaggagttcgagaccagcctggctaacatggcaaaaccccatctctactaaaaataca1320aaaattagccggacgtggtggtgcctgcctgtaatccagctactcaggaggctgaggcag1380gataattttgcttaaacccgggaggcggaggttgcagtgagccgagatcacaccactgca1440ctccaacctgggaaacgcagtgagactgtgcctcaaaaaaaagaaaggaagaaaaaagaa1500aactcaggaaacagatcttgggggacactccagggaacccaaaactcaaaggcggagagc1560tcagtgggcaccaccaaggcgagatgaagccccagcaggcaccttcagaagacccacgta1620gactgcagaccctgccacggacaatactaaggacaaaaacccagagacttggggtctgtg1680ggcccccaaacatggggtaaagttgatttgcctgatattcaggaagaaggggtgaggggt1740gggtatttatgcttttgattcagaagaaagtggggcttgggattccagggacttggctgg1800gggtgggaaacttcatccacttccctactctcatcatgagtacggacagggtgggcggga1860gactgatcatcgggactcatcatgaagagcccagccccaccccacatactcagatcccac1920ccacagactggtggccacacctcagcctggtcacaaagagttacactcagatacatgagc1980acggcagcgtgctcataactgtttaacaaccagctgtcctgggagggggacagctttgta2040atgtttgccaatttccatggtgtaaatgctaccaccatggctgatttcatcactgccaag2100catagacatccctaataggacaccacggatctgtccccggcatccggcccagggcctggc2160acaaagcatgctctagggaaatgcttgctgattgaaaggaaggaagaatgactctacagt2220cacacctatggcatcccacaaaatctgtcacatggctgcataatctcagccactctttca2280caactatagactcatacacgcgaagtgccagattcatgcacaaccacacaatcacatgga2340agtcacagacggcatcacagacagtcacagcactgtgtgtatgttataacacaagcacac2400aaaactcagacagcatcccagctacacagccactcccagaggtgtcaccgtcacacttgg2460taattaatactcattacattagacacagacagaccaagttatagtcagacctggttacac2520acatacacacacacaatatcaccatgacaaatacacattacacacacacaacatcacaat2580gacaaacacacattacacacacaacatcacgatgacaaacacacattacacacacaacat2640cacgatgacaaacacacattacacacacatcacaatgacaaacacaacattacacacaca2700caacatcacaatgacacacacatcacacacacatcacaatgacaaacacacaacattaca2760cacatatacacacagcctgagggccctccccagcccagactaacacatctcggggtgagg2820accagaccttgttcataaccctgggcctcttaaccactgatctttgaaataaatggcaaa2880tagttgtacctgga2894当前第1页12