本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种多臂型peg化克拉霉素衍生物及其制备及其制备方法及其在制备抗菌药物中的应用。
背景技术
克拉霉素(clarithromycin,简称cam),化学名称(-)-2r,3s,4s,5r,6r,8r,10r,11r,12s,13r-3-[(2,6-二去氧-3-c-甲基-3-o-甲基-α-l-吡喃核糖基)氧]-13-乙基-11,12-二羟基-6-甲氧基-2,4,6,8,10,12-六甲基{[(3,4,6-三去氧-3-二甲氨基)-β-d-吡喃木糖基]氧}-14-氧环十四烷-1,9-二酮,(-)-2r,3s,4s,5r,6r,8r,10r,11r,12s,13r-3-[(2,6-dideoxy-3-c-methyl-3-o-methyl-α-l-ribo-hexopyranosyl)-oxy]-13-ethyl-11,12-dihydroxy-6-methoxy-2,4,6,8,10,12-hexamethyl{[(3,4,6-trideoxy-3-dimethylamino)-β-d-xy-lo-hexopyranosyl]oxy}-14-oxacyclotetradecane-1,9-dione,是由日本大正制药株式会社(taishopharmaceuticalco.ltd.)在1980年发现、后由美国雅培公司(abbottlaboratories)开发成功、并在1991年10月由美国fda批准上市的一种新型红霉素药物，克拉霉素分子结构如图1所示,文献中出现过的克拉霉素其它名称和商品名有甲红霉素,6-甲基红霉素,6-甲氧基红霉素,克红霉素,克拉仙,6-methylerythromycin,clacid,claricid,biaxin,macladin,naxy,veclam,zeclar,clm,te-031和a-56268等.分子式c38h69no13,分子量747.96。
由于克拉霉素的抗菌活性强、组织分布广而且浓度高,具有非常广泛的临床应用前景,因而受到了全世界医药界的普遍重视.与红霉素相比,它克服了红霉素对酸不稳定的缺点,降低了胃肠道的不良反应,具有生物利用度高、组织穿透力强、抗菌谱广和半衰期长的优点,近年来又发现它能抑制幽门杆菌,现美国fda已批准该药与洛赛克合用,作为治疗幽门螺旋杆菌引起的胃及十二指肠溃疡的药物.此外,它也是治疗艾滋病患者分枝杆菌感染的首选药物.目前,克拉霉素是我国和世界多个国家包括美国等国家药典的药物,我国2000年版药典收载了克拉霉素的原料药、普通片剂及胶囊剂。但普通制剂每天需服一次,病人服药不方便,且不能更好地保证病人按医嘱服药。因此,非常有必要提供一种克拉霉素缓释药物。另外,克拉霉素普通制剂具有局部刺激性,胃肠道副反应大的缺陷。专利文献cn1273826a是通过将克拉霉素与山莨菪碱混合优化注射方式,但是却引入了山莨菪碱这种抗胆碱成药，增加了克拉霉素在受体代谢过程中过敏的可能性，不仅如此，机体摄入过量的山莨菪碱还极有可能导致中毒。cn1569016a和cn101002790a是通过优化口服方式，制备成缓释胶囊以及与高分子聚合物混合形成缓释剂的形式改善局部刺激，降低胃肠道副反应几率，其缺点是，将克拉霉素制备成混合缓释剂在机体内缓释效果不可控并且不稳定。况且，克拉霉素本身水溶性差,水中溶解度为1:10000,具有一定的脂溶性，但其在油中的溶解度较低也决定了很难将其开发成注射剂。现有技术的常规改进方案通过一定工艺将克拉霉素制成普通注射剂绝大部分都不稳定。
聚乙二醇(polyethyleneglycol，peg)是由环氧乙烷与水或乙二醇逐步发生加成聚合而得到的一类分子量较低的水溶性聚醚。小分子量的低聚聚乙二醇为无色、无臭有吸湿性的粘稠液体，分子中既有醚链，又有羟基，故具有独特的溶解性能，生物相容性好，在医药、材料和工程等领域具有很重要的应用前景。而普通的直链peg只有两个末端修饰基团，与小分子药物进行连接时，故载量很有限，而多臂型的peg具有超过2个可修饰的末端。多臂peg链能够与多个药物相连，药物的负载率大大提高。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供一种多臂peg化克拉霉素衍生物及其制备方法及其在抗菌药物方面的应用，通过化学键将克拉霉素固载到具有缓释作用的亲水性高分子聚合物多臂peg上，该多臂peg化克拉霉素衍生物在体内循环半衰期长，且经过多臂peg修饰的克拉霉素水溶性好。
一种多臂peg化克拉霉素衍生物，其结构式为：
，其中，n为分支数，n为1-3的整数。m为多臂peg中每一条臂上单体单元(-och2ch2-)的平均个数，m为24-250的整数。
进一步的，所述多臂peg化克拉霉素衍生物具有以下结构：
即，4arm-pegm-克拉霉素-iv结构式如下
6arm-pegm-克拉霉素-iv结构式如下：
8arm-pegm-克拉霉素-iv结构式如下：
其中，m为多臂peg中每一条臂上单体单元(-och2ch2-)的平均个数，m为24-250的整数。
进一步的，其合成路线如图2所示。
其中，步骤step1克拉霉素与己二酸酐，dmap在氯仿中反应得到中间体ii；步骤step2克拉霉素中间体ii在缩合剂作用下与多臂peg(iii:4arm-pegm-nh2or6arm-pegm-nh2or8arm-pegm-nh2)反应得到peg化的克拉霉素衍生物4,6or8-arm-pegm-克拉霉素-iv。
所述步骤1)是以氯仿为溶剂的条件下于90-110℃的反应温度，8-12h的反应时间下进行的。所述步骤2)是以n,n-二甲基甲酰胺为溶剂，所述缩合剂为hobt(1-羟基苯并三唑)和dipea(n，n-二异丙基乙胺)，于25-55℃的反应温度，12-24h的反应时间下进行的。所述多臂peg化克拉霉素衍生物用于制备抗菌药物的应用。
本发明利用多臂peg无毒、易于结合的特性，分别把四臂peg，六臂peg和多臂peg与克拉霉素连接起来。形成的稳定结构的多臂peg负载的克拉霉素的前药，本发明的有益效果是：多臂peg化克拉霉素衍生物不仅具有良好的水溶性，更重要的是在一条多臂peg链能够与多个克拉霉素残基相连，药物的负载率大大提高，且它大大延长了药物的半衰期，使其在血浆中的存在时间显著增加，从而提高疗效。降低了药物的毒副作用，并同时增加了药物活性。
附图说明
图1是克拉霉素结构式；
图2是多臂型peg化克拉霉素衍生物的合成流程。
具体实施方式
下面结合实施例描述本发明的结合物及其制备方法，它不限制本发明，本发明的范围由权利要求限定。
实施例1：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后90℃搅拌10h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到中间体ii。收率：86％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.18(d,3h),1.19(m,1h),1.23(d,3h),1.39(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.85-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)4arm-peg24-克拉霉素-iv的制备
将10mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入10mmol的hobt和10mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的4arm-peg24-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到的4arm-peg24-克拉霉素-iv。收率：83％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.07(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.82(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.33(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，96h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h).
实施例2：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后90℃搅拌8h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到9mmol中间体ii。收率：80％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)4arm-peg124-克拉霉素-iv的制备
将10mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入10mmol的hobt和10mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的4arm-peg124-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到9.3mmol的4arm-peg124-克拉霉素-iv。收率：81.2％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.18(d,3h),1.20(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，496h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h).
实施例3：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后110℃搅拌10h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到9mmol中间体ii。收率：85％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)4arm-peg240-克拉霉素-iv的制备
将10mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入10mmol的hobt和10mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的4arm-peg240-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到9.3mmol的4arm-peg240-克拉霉素-iv。收率：83.4％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.18(d,3h),1.20(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.53(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，960h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.91(d,1h),5.05(dd,1h).
实施例4：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后110℃搅拌12h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到9mmol中间体ii。收率：90.6％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)6arm-peg24-克拉霉素-iv的制备
将14mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入14mmol的hobt和14mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的6arm-peg24-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到9.3mmol的6arm-peg24-克拉霉素-iv。收率：87.2％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.70(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.21(s,1h),3.33(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，96h),3.62(d,1h),3.64(m,3h),3.76(d,1h),3.81(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.91(d,1h),5.05(dd,1h).
实施例5：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后90℃搅拌12h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到9mmol中间体ii。收率：80.9％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.14(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)6arm-peg110-克拉霉素-iv的制备
将14mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入14mmol的hobt和14mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的6arm-peg110-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到9.3mmol的6arm-peg110-克拉霉素-iv。收率：92.3％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.18(d,3h),1.20(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.53(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.24(s,6h),2.38(m,1h),2.48(m,2h),2.51(m,1h),2.61(m,1h),2.69(m,2h),2.85-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.14(d,1h),3.16(m,1h),3.20(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，480h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.77(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.42(d,1h),4.90(d,1h),5.05(dd,1h).
实施例6：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后110℃搅拌8h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到中间体ii。收率：91％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.64(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)6arm-peg240-克拉霉素-iv的制备
将10mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入14mmol的hobt和14mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的6arm-peg240-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到6arm-peg240-克拉霉素-iv。收率：94.3％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，960h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h).
实施例7：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后110℃搅拌12h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到中间体ii。收率：88％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)8arm-peg20-克拉霉素-iv的制备
将18mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入18mmol的hobt和18mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的8arm-peg20-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到8arm-peg20-克拉霉素-iv。收率：92.2％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，80h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h).
实施例7：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后90℃搅拌11h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到中间体ii。收率：86.8％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)8arm-peg110-克拉霉素-iv的制备
将18mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入18mmol的hobt和18mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的8arm-peg110-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到8arm-peg110-克拉霉素-iv。收率：90.6％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，480h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h).
实施例8：
(1)中间体ii的制备
将10mmol克拉霉素溶于90ml氯仿中，在常温下，加入11mmol的己二酸酐，10mmol的dmap，然后110℃搅拌12h。反应完毕，减压蒸除溶液，得到粗品。粗品用层析柱纯化，得到中间体ii。收率：90.5％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.51(m,1h),1.67(m,1h),1.67(m,1h),1.80(m,1h),1.84(dd,1h),1.91(m,1h),2.05(m,2h),2.22(s,6h),2.36(m,1h),2.46(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.68(m,2h),2.84-2.83(m,1h),3.01(m,1h),3.04(s,3h),3.14(d,1h),3.15(m,1h),3.18(s,1h,12-oh),3.31(s,3h),3.36(m,2h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.75(d,1h),3.79(d,1h),4.21(m,1h),4.40(d,1h),4.89(d,1h),5.03(dd,1h).
(2)8arm-peg240-克拉霉素-iv的制备
将18mmol中间体ii溶于50mln,n-二甲基甲酰胺中，加入18mmol的hobt和18mmol的dipea，25℃下搅拌2h。往反应中加入2mmol的8arm-peg110-nh2，反应在30℃进行12小时。tlc跟踪检测克拉霉素反应完全后，通过重结晶和层析柱纯化，得到8arm-peg240-克拉霉素-iv。收率：93.5％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.85(t,3h),1.06(d,3h),1.13(d,3h),1.15(d,3h),1.16(s,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.17(d,3h),1.19(m,1h),1.22(d,3h),1.38(s,3h),1.47(m,1h),1.52(m,1h),1.68(m,1h),1.66(m,1h),1.81(m,1h),1.84(dd,1h),1.92(m,1h),2.06(m,2h),2.23(s,6h),2.37(m,1h),2.47(m,2h),2.51(m,1h),2.60(m,1h),2.69(m,2h),2.84-2.81(m,1h),3.02(m,1h),3.05(s,3h),3.15(d,1h),3.16(m,1h),3.19(s,1h),3.32(s,3h),3.36(m,2h),3.579～3.540(m，960h),3.62(d,1h),3.63(m,3h),3.76(d,1h),3.80(d,1h),4.22(m,1h),4.41(d,1h),4.90(d,1h),5.04(dd,1h)。