本发明涉及化妆品领域,具体涉及一种复方美白组合物的制备方法及其应用。
背景技术：
：刺云实系苏木科云实属植物,拉丁学名为CaesalpiniaspinosaKuntze，是短周期珍贵经济树种，生长于南美洲西北部,当地称塔拉(TARA),它的豆壳含云实单宁47-55％,是生产多种化工、医药产品的重要原料,具有广泛的工业用途；它的种子含塔拉多糖22-34％,可用于生产塔拉胶(Taragum)，塔拉胶在食品、医药、纺织、造纸和石油钻井等方面有重要用途；它的种胚含粗蛋白40-60％,粗脂肪14％左右,可生产低脂豆蛋白，种胚所含的脂肪酸中,亚油酸占45％左右,亚油酸是一种重要的医药原料。刺云实虽在化妆品领域中应用未见报道，但是因其种胚富含多糖，粗蛋白，微量元素丰富,其中磷、铁、锌的含量均比大豆高,且无毒,在化妆品中具有极大的潜在的应用价值。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是提供一种主要由刺云实制得的兼具抗炎、抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性的复方美白组合物及其在化妆品中的应用，并提供该复方美白组合物的提取方法。一种复方美白组合物的制备方法，包括如下步骤：(1)按比例准备中草药原料：所述中草药原料由主料和辅料构成，所述主料为刺云实果，重量百分比为30-50％，辅料为短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤，重量百分比分别为20-30％，10-30％以及10-20％；(2)预处理：先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；再将四种中草药粉末混合均匀，制成刺云实果复配物；(3)提取：将所述刺云实果复配物和溶剂混合并提取，得提取溶液；(4)过滤：将所述提取溶液过滤，得提取物滤液；(5)浓缩：将所述提取物滤液浓缩，得提取物浓缩液；(6)复溶：将所述提取物浓缩液复溶，得提取物复溶物；(7)灭菌，将所述提取物复溶物灭菌，得复方美白组合物。本发明所述的复方美白组合物的制备方法，其中，步骤(3)中所述刺云实果复配物和溶剂按重量比1:(10-40)进行混合，在80-90℃的温度下提取1-3小时，得提取溶液。本发明所述的复方美白组合物的制备方法，其中，步骤(4)中所述过滤是80-100目过滤。本发明所述的复方美白组合物的制备方法，其中，步骤(6)中所述复溶采用1:20的二丙二醇水溶液复溶。本发明所述的复方美白组合物的制备方法，其中，步骤(3)中所述溶剂为60-90％的乙醇溶液或60-90％的丙酮溶液。本发明所述的复方美白组合物的制备方法，其中，步骤(3)中所述提取为搅拌回流提取或者超声提取。本发明所述的复方美白组合物在化妆品中的应用。一种化妆品，包括所述的复方美白组合物，所述复方美白组合物的用量为最终产品重量的1-10％。本发明所述的化妆品，其中，所述复方美白组合物的用量为最终产品重量的2-8％。本发明所述的化妆品，其中，所述化妆品中还包括溶剂、润肤剂、增溶剂、抗氧化剂、pH调节剂、促渗剂、乳化稳定剂、防腐剂、保湿剂、增稠剂、中和剂、螯合剂、表面活性剂、乳化剂、香精、着色剂、防晒剂、皮肤调理剂、活性物以及功效添加剂中的一种或几种。本发明所述的化妆品，其中，所述化妆品为化妆水，沐浴露、洁面膏、面膜、面霜、啫喱、乳液、精华液、卸妆油或透明皂。本发明复方美白组合物的制备方法与现有技术不同之处在于：刺云实果具有良好的抗炎、抗氧化活性，但没有抑制酪氨酸酶活性的功能，要想发挥它出色的抗衰老、美白等功效，需考虑进行复方提取，以充分发挥刺云实果抗炎、抗氧化活性的同时，承载更加优良的护肤功效。关于复方的选择，按照中医理论“辨证、整体、综合”及君臣组方原则“君、臣、佐、使”，进行复配，其中确定刺云实果为“君”的主要地位，选择与之性情相配的中草药进行复配组方，以最大化得到多糖，粗蛋白，微量元素为判断依据，中间进行提取工艺的优化设计，以期得到能为皮肤补充营养，具有美白功效、抗衰老功效最好的提取液应用到各类化妆品剂型里。本发明将刺云实果及短叶丝兰根，伯尔硬胡桃籽，过岗龙茎藤进行复配，兼具抗炎、抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性，弥补了刺云实果仅具有较强的抗炎、抗氧化活性的不足，本发明将过岗龙茎藤经过炮制预处理，可以去掉其中的有毒成分，以防对皮肤造成刺激伤害，还得提高其有效成分的得率，将刺云实果复配物通过粉碎、搅拌热回流提取、经80-100目过滤，可以将杂质和大分子去掉，得到活性更好的有用小分子成分，然后浓缩、复溶、灭菌的处理制成复方美白组合物，其黄酮含量较高，DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、酪氨酸酶抑制率也比较高，可作为美白抗衰老功效成分应用于化妆品中。具体实施方式为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数或条件,可参照常规技术进行。本发明所述的短叶丝兰是百合科丝兰属的单子叶植物，生活在北美西南部，拉丁学名为Yuccabrevifolia，以根入药。有抗炎的作用；同时对自由基有一定的消除作用，有抗氧化的作用；对脂肪的分解有促进作用，可用作减肥产品，另外可以用作抗菌剂、螨过敏抑制剂。本发明所述伯尔硬胡桃属于漆树科植物，原产于南非，拉丁学名为Sclerocaryabirrea(A.Rich)Hochst.subsp.caffra(Sond.)Kokwaro，籽入药。果实可以鲜食，做果酱、果汁和果冻，还可以用来酿酒和制造酒精饮料。伯尔硬胡桃种子含油率为44-72％，伯尔硬胡桃油具有独特的坚果香味，含有丰富的不饱和脂肪酸、维生素E及固醇和黄酮类物质，树皮和树叶的提取物含有止泻、抗炎、防腐、杀菌、抗凝血、降血压、降血糖、抗痉挛和抗氧化等物质。本发明所述过岗龙为豆科榼藤子属植物,拉丁学名为Entadaphaseoloides(L.)Merr.，以藤及种仁入药。微苦、涩，平，具有祛风除湿，活血通络的功效。实施例1先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按照30％、30％、20％、20％的比例制成刺云实果复配物；将刺云实果复配物和60％的乙醇溶液按重量比1:10进行混合，制成混合物，将该混合物加热至90℃，超声提取1小时，制成刺云实果复配物的提取溶液；将刺云实果复配物的提取溶液80目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶物；将提取物复溶物灭菌，制成复方美白组合物。实施例2先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按40％、20％、30％、10％的比例制成刺云实果复配物；将刺云实果复配物和90％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至80℃，超声提取3小时，制成刺云实果复配物的提取溶液；将刺云实果复配物的提取溶液100目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶物；将提取物复溶物灭菌，制成复方美白组合物。实施例3先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按50％、25％、10％、15％的比例制成刺云实果复配物；将刺云实果复配物和75％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至85℃，搅拌热回流2小时，制成刺云实果复配物的提取溶液；将刺云实果复配物的提取溶液90目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。实施例4先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按45％、25％、15％、15％的比例制成刺云实果复配物；将刺云实果复配物和70％的乙醇溶液按重量比1:30进行混合，制成混合物，将该混合物加热至88℃，搅拌热回流超声提取2.5小时，制成刺云实果复配物的提取溶液；将刺云实果复配物的提取溶液95目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。实施例5先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，用时粉碎；然后将上述其他三味中草药原料中的异物挑出后进行烘干粉碎处理，得中草药原料粉末；将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按50％、24％、14％、12％的比例制成刺云实果复配物；将刺云实果复配物和90％的乙醇溶液按重量比1:40进行混合，制成混合物，将该混合物加热至82℃，搅拌热回流3小时，制成刺云实果复配物的提取溶液；将刺云实果复配物的提取溶液85目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。本发明的配方不局限于实施例1-5，研究发现，采用本发明范围内的其他的组合也具有相似的效果，比如将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按照34％、20％、29％、17％的比例制成刺云实果复配物；或者将刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤分别按43％、22％、16％、19％的比例制成刺云实果复配物；最终制得的复方美白组合物，也能起到本发明的效果。实施例6：一种含复方美白组合物的美白精华液，包括如下质量百分含量的各组分,如表1-2所示：表1表2项目对比例1对比例2对比例3对比例4组分％％％％复方美白组合物5555甘油10101010甘油聚丙烯酸酯0.50.50.50.5透明质酸钠0.050.050.050.05尿素1111PCA钠0.50.50.50.5聚季铵盐-511111海藻糖0.30.30.30.3羟乙基脲0.50.50.50.5乙醇2.52.52.52.5丝氨酸0.50.50.50.5出芽短梗酶多糖0.50.50.50.5泛醇0.50.50.50.5卡波姆0.30.30.30.3PEG-40氢化蓖麻油0.030.030.030.03氨甲基丙醇0.30.30.30.3山梨酸钾0.50.50.50.5水余量余量余量余量其中，精华液1-5中所述复方美白组合物分别为实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5所述的复方美白组合物；其中精华液1中所述的防腐剂为苯甲醇，精华液2中所述的防腐剂为山梨酸钾，精华液3中所述的防腐剂为山梨酸钾，精华液4中所述的防腐剂为苯乙醇，精华液5中所述的防腐剂为山梨酸钾。其中，对比例1中所述的复方美白组合物由如下制备方法制备而得：将刺云实果和75％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至85℃，搅拌热回流2小时，制成刺云实果的提取溶液；将刺云实果的提取溶液90目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。其中，对比例2中所述的复方美白组合物由如下制备方法制备而得：将短叶丝兰根和75％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至85℃，搅拌热回流2小时，制成短叶丝兰根的提取溶液；将短叶丝兰根的提取溶液90目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。其中，对比例3中所述的复方美白组合物由如下制备方法制备而得：将伯尔硬胡桃籽和75％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至85℃，搅拌热回流2小时，制成伯尔硬胡桃籽的提取溶液；将伯尔硬胡桃籽的提取溶液90目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。其中，对比例4中所述的复方美白组合物由如下制备方法制备而得：先取过岗龙茎藤，除去杂质，置炒制容器内，用文火加热，炒至颜色加深至黄黑色，有香气逸出时，取出晾凉，然后粉碎；将过岗龙茎藤和75％的丙酮溶液按重量比1:25进行混合，制成混合物，将该混合物加热至85℃，搅拌热回流2小时，制成过岗龙茎藤的提取溶液；将过岗龙茎藤的提取溶液90目过滤，制成提取物滤液；将提取物滤液浓缩，制成提取物浓缩液；将提取物浓缩液用1:20的二丙二醇水溶液复溶，制成提取物复溶液；将提取物复溶液灭菌，制成复方美白组合物。本发明含复方美白组合物的美白精华液的功效评估1、酪氨酸酶抑制率参与黑色素合成主要有三种酶：酪氨酸酶、多巴色素互变酶和二羟基吲哚羧酸氧化酶。酪氨酸酶属氧化还原酶，是黑色素合成的主要限速酶，酪氨酸酶与其底物L-酪氨酸可以发生催化反应。当在实验体系中添加了有酪氨酸酶活性抑制作用的试剂后，对催化反应可以产生抑制作用，通过测定添加试剂前后于475nm处的吸光值，来评价试剂对酪氨酸酶活性的抑制率。不同受试浓度下，含复方美白组合物的美白精华液酪氨酸酶抑制率实验结果如表3所示：表3由表3可知，含复方美白组合物的美白精华液具有良好的酪氨酸酶抑制率，当受试浓度为1.0％时，本发明含复方美白组合物的美白精华液酪氨酸酶抑制率达到70％左右，表明本发明含复方美白组合物的美白精华液具有良好的酪氨酸酶抑制率；且在相同的浓度下，含复方美白组合物的美白精华液酪氨酸酶的抑制率高于市售美白竞品。2、黑色素细胞试验探讨含复方美白组合物精华液对黑色素细胞的增殖及美白作用的影响。利用B16黑色素瘤细胞，测定精华液对黑色素细胞增殖作用的影响，以及对黑色素细胞合成黑色素的影响。(1)细胞增殖率的测定(MTT法)培养小鼠黑色素瘤B16细胞，待细胞生长到对数期，用0.25％胰酶消化，调整细胞浓度为5×104个/mL，接种于96孔板中，每孔100μL。置于培养箱中培养24h后，弃上清液，添加含药培养基，每个样品三个浓度组。每一浓度设3个复孔，对照组不加药物，代之以相应的溶媒。孵育72h后，每孔加入5g/L的MTT溶液20μL，4h后弃上清液，每孔加入细胞裂解液100μL，继续培养过夜，在酶标仪上检测各孔吸光度值，波长为570nm。细胞增殖抑制率％＝(1-药物组平均吸光值/对照组平均吸光值)×100(2)黑色素合成抑制率的测定将B16黑色素细胞以20×104个/mL的密度接种于96孔板中。每孔1mL，孵育24h后，弃上清液，添加待测药物(样品作用浓度同前述)，药物作用72h后，弃上清液，PBS洗涤，每孔加入含10％DMSO的1mol/LNaOH溶液500μL，震荡5min。测量490nm下各孔吸光值。黑色素合成抑制率％＝[1-(药物孔490nm吸光度值/药物孔570nm吸光度)/(对照孔490nm吸光度值/对照孔570nm吸光度)]×100加入不同浓度含复方美白组合物的美白精华液受试物后，样品对黑色素细胞黑色素合成抑制率及细胞增殖抑制率实验结果如表4所示：表4不同浓度含复方美白组合物的美白精华液样品对B16细胞的增殖抑制率和黑色素合成抑制率结论：加入不同浓度的受试物后，含复方美白组合物的美白精华液样品具有较好的抑制黑色素细胞合成黑色素的作用，在受试浓度范围内(0.5-2.0％)，黑色素合成抑制率在33-41％，表明本发明含复方美白组合物的美白精华液具有良好的美白功效，相同浓度条件下，含复方美白组合物的美白精华液黑色素合成抑制率高于市售竞品，且对细胞增殖的影响高于市售竞品。3、人群试用调查为测试产品的实际使用效果,对精华液1-5和对比例1-4制得的样品分别进行了人群试用调查,派发样品给500名年龄28-42岁的志愿者(其中女性385名)，身体健康，生活规律，无皮肤病，志愿者随机均分为10组，其中一组是市售产品美白精华液。志愿者清洁脸部皮肤后，擦干，用手将适量精华液涂抹在左侧脸部，右侧脸部不涂抹，作为美白霜测试对比区，受试期间脸部不涂抹其他的化妆品或药物，连续使用30天查看使用效果，并填写调查问卷。分级判定的标准：显著有效：相对右侧脸部，实验区色斑问题被彻底解决，皮肤光滑如新，莹白润泽。有效：相对右侧脸部，实验区色斑明显变淡，形成不久的色斑甚至会完全消失，皮肤变得白皙。无效：相对右侧脸部，实验区色斑无明显变化或加深，肤色没有变化。人群试用调查结果表5试用结果显著有效/例有效/例无效/例精华液125205精华液223234精华液327212精华液44190精华液54190对比例11841对比例21742对比例30644对比例41544市售产品122018结论：在含复方美白组合物的美白精华液样品中，添加了全部成分(刺云实果、短叶丝兰根、伯尔硬胡桃籽、过岗龙茎藤)的精华液1-5效果(显著有效≥23例)比只添加单独成分的对比例1-4的效果(显著有效≤1例)要好，且只添加单独成分的对比例1-4的效果并不显著，结果表明所述复方美白组合物中各成分在美白肌肤和祛除色斑等方面具有相互协同的作用并取得较好的效果。由精华液1-5与市售产品(显著有效12例)对比可知，本发明的美白效果更好。经问卷得知，使有本发明精华液产品，温和无刺激，肤感很好。以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。当前第1页1 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