本发明涉及一种双层结构白芨敷料的制备方法，属于生物医药技术领域。
背景技术
在外科临床使用中，伤口的快速止血，对患者的术后恢复有着重要的影响。白芨作为传统中药中的一种止血材料，其块茎提取物白芨多糖具有极佳的止血性和较强的抗菌性，而且是一种水溶性物质。白芨多糖作为白芨块茎的主要功能成分，因其具有优良的收敛止血、抗菌消炎、去腐生肌的功效，且其生物性良好、可生物降解、无毒副作用，在创伤敷料领域应用日益广泛。
现有的白芨敷料在外科手术使用中会因为医生佩戴的手套上沾有血水的原因导致溶解和粘连，从而不利于敷料在伤口处的贴服，同时溶解粘连在手套上的部分造成浪费。
中国专利公开号是cn106075551a，公开日期为2016年11月09日，发明名称为一种互穿网络型白芨多糖膜的制备方法，该发明将从天然白芨块茎提取的白芨多糖粉末溶于水，制成白芨多糖铸膜液，利用双向冰晶诱导生长技术驱使白芨多糖铸膜液完全固化成型，成型后在真空低温环境下冷冻干燥形成具有互穿网络型多糖膜材料。该方法制备的白芨多糖膜内部层片规则交互排列，具有良好的力学性能，且保留了白芨止血快、抑菌和促愈合的功效。但该方法制备的白芨多糖膜也因其互穿网络型结构导致遇水溶解速度加快，从而在取用时溶解粘连情况加重，不利于膜对伤口的贴服，操作不便，浪费严重。中国专利公开号是cn102961776a，公开日期为2013年03月13日，发明名称为：一种白芨止血纱布的制备方法，该发明采用水提醇沉法从白芨茎块中提取白芨胶并溶于水配制白芨胶纺丝液，以无水乙醇为凝固浴纺成长丝，采用针织、机织或无纺的方法织成纱布，将纱布裁剪、消毒和包装后获得水溶性止血纱布。该发明制备的止血纱布由白芨长丝构成，在体内能被降解吸收，与生物相容性好，对伤口无副作用，具有良好的抗菌、消炎和快速止血的疗效，提高了伤口愈合的速度。但由于白芨多糖极易溶于水，在操作中易粘连难脱离，在使用中无法很好贴服伤口。
现有白芨敷料存在易溶易粘连难脱落贴服问题，在其他的双层敷料制备中，常采用异种材料作为表层材料，针对白芨敷料会限制白芨敷料的应用范围，而且双层结构白芨敷料的制备存在界面间力学强度无法满足使用要求的问题。
技术实现要素：
针对上述存在问题，本发明的目的在于提供一种双层结构白芨敷料的制备方法。
为实现上述目的，本发明的技术解决方案为：
一种双层结构白芨敷料的制备方法，所述的制备方法按以下步骤进行：
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为3～20min，浸泡温度为25～40℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶于水的杂质，收集初步清洁的白芨茎块于30～50℃烘箱干燥18～24h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为1～3h，浸泡温度为20～30℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于30～50℃烘箱干燥18～24h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为0.5～3h，浸泡温度为50～90℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程3～10次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于30～80℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为1.5～5％的白芨多糖浓缩液。
向获得的白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的1～2倍，洗涤沉淀物次数为2～10次，每次洗涤时间为1～5min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为40～80℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为3～10％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.1～0.5mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-50～-80℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成3～8mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-60～-80℃、真空度为1～5pa的环境中冷冻干燥，24～48h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为10～200mm，宽为10～200mm，高为3～15mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为1～4％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取20％～50％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.3～1.0ml/min的速度滴加到在200～500r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌2～5h后，置于真空度为0.05～0.1mpa的环境中3～6h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为96:4～99:1。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置5～30min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.2:1～1:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-60～-80℃、真空度为1～5pa的环境中冷冻干燥，24～48h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
由于采用了以上技术方案，本发明的制备方法采用两步法制备得到表层难溶于水、贴服层易溶于水的双层结构白芨敷料。在贴服层上引入难溶于水的表层，当医生取用该敷料，难溶解的表层敷料首先与医生带血液的手相接触，不会引起溶解粘连现象，便于医生的使用。第一步先制备贴服层白芨多孔敷料，第二步将第一步得到的贴服层白芨多孔敷料平铺在平板模具凹槽底部，并将整个模具转移至隔热容器，在容器内倒入液氮，然后将表层铸膜液倒入贴服层上，至模具内所有溶液冻结后，再将完全定向冻结成型膜的双层结构敷料置于温度为-60～-80℃、真空度为1～5pa的环境中冷冻干燥。两步法使双层结构的贴服层为横向单向规则排布通孔、竖向无序分布孔洞的结构，保证了贴服层敷料的柔软性、贴服伤口的舒适性和伤口愈合的最佳环境，表层为竖向通孔，保证了伤口内外空气的流通，且竖向通孔使得表层敷料膜有极好的力学性能。本发明的制备方法通过先制备出白芨多孔敷料，再在其上部冻结成型表层敷料，保证了两层结合的紧密性，连接的可靠性。两步法分两步冷冻干燥，一方面可以降低仪器的损耗，每一步的冷冻干燥时间都会缩短；另一方面连接的可靠性得到保证。
本发明的制备方法由于将贴服层白芨敷料先制备成型膜，再将表层铸膜液倒入其上部时，会有部分铸膜液进入其孔洞，但在低温下，铸膜液会被迅速冷冻成型呈现密实固态阻止剩余铸膜液的进入。且低温下白芨多糖的水溶性下降，不会产生贴服层白芨多糖被溶解的问题。
本发明的制备方法制得的双层结构白芨敷料，表层与贴服层之间在冻结成型时紧密连接，冷冻干燥后，孔洞相互交织，形成可靠的物理锁合，获得足够的力学强度，贴服层横向通孔结构，保证了敷料的柔软性，不刺激伤口，表层竖向通孔，力学性能良好，保证了敷料的形状保持性。敷料整体质地柔软，可以很好的贴服伤口，高效地发挥白芨多糖的功效，促进伤口的愈合，抑制细菌的产生。
表层铸膜液用量决定了表层膜的厚度，影响着整块敷料的操作性。当表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比低于0.2:1时，表层膜厚度偏薄，在操作中阻碍水或血液进入底层敷料的能力低，容易导致敷料溶解，达不到防粘易操作的目的；当表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比高于1:1时，表层膜过厚，将会损伤敷料整体的柔软性，刺激伤口，不利于伤口愈合。因此，表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比选择为0.2:1～1:1。
选择液氮作为冷冻介质可保证表层铸膜液冰冻成型时，在与白芨多糖多孔膜接触面和与空气接触面之间形成足够大的温差，保证冰晶沿竖向定向生长，冷冻干燥后获得的表层敷料层孔结构为竖向通孔。同时，要确保液氮液面低于白芨多孔敷料的上表面。当液氮液面高于白芨多孔敷料的上表面时，表层铸膜液底层将会在低温下直接冻结成型，形成厚度难以控制的非定向膜，对表层敷料膜的孔结构影响严重，表层膜的力学性能下降。
本发明的制备方法解决了白芨敷料在临床医用中的难以避免的操作溶解浪费与粘连无法贴服伤口问题，达到了白芨的高效利用、节约资源与易于贴服伤口的目的。本发明的制备方法工艺简单、技术成熟，便于工业化的实现。双层结构白芨敷料根据伤口情况可调节两层厚度，适应伤口的愈合速度，两层间孔洞锁合牢靠，敷料整体力学性能优良。双层结构白芨敷料的制备所涉及的化学药品只有氢氧化钠和乙醇，不会产生有害物质，对伤口的愈合没有危害。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细描述：
一种双层结构白芨敷料的制备方法，所述的制备方法按以下步骤进行：
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为3～20min，浸泡温度为25～40℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶于水的杂质，收集初步清洁的白芨茎块于30～50℃烘箱干燥18～24h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为1～3h，浸泡温度为20～30℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于30～50℃烘箱干燥18～24h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3～1:10的比例浸泡，浸泡时间为0.5～3h，浸泡温度为50～90℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程3～10次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于30～80℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为1.5～5％的白芨多糖浓缩液。
向获得的白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的1～2倍，洗涤沉淀物次数为2～10次，每次洗涤时间为1～5min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为40～80℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为3～10％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.1～0.5mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-50～-80℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成3～8mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-60～-80℃、真空度为1～5pa的环境中冷冻干燥，24～48h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为10～200mm，宽为10～200mm，高为3～15mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为1～4％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取20％～50％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.3～1.0ml/min的速度滴加到在200～500r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌2～5h后，置于真空度为0.05～0.1mpa的环境中3～6h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为96:4～99:1。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置5～30min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.2:1～1:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-60～-80℃、真空度为1～5pa的环境中冷冻干燥，24～48h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
具体实施例
按上述制备方法
实施例一
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3的比例浸泡，浸泡时间为5min，浸泡温度为30℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶性杂质，收集初步清洁的白芨茎块于30℃烘箱干燥24h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:3的比例浸泡，浸泡时间为3h，浸泡温度为20℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于30℃烘箱干燥20h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:3的比例浸泡，浸泡时间为3h，浸泡温度为80℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程5次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于60℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为5％的白芨多糖浓缩液。
向白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的2倍，洗涤沉淀物次数为6次，每次洗涤时间为5min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为60℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为4％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.1mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-50℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成3mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-60℃、真空度为1pa的环境中冷冻干燥，24h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为10mm，宽为10mm，高为4mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为1％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取20％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以1.0ml/min的速度滴加到在300r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌2h后，置于真空度为0.05mpa的环境中3h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为96:4。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置5min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.2:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-60℃、真空度为1pa的环境中冷冻干燥，24h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
实施例二
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:5的比例浸泡，浸泡时间为10min，浸泡温度为30℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶性杂质，收集初步清洁的白芨茎块于50℃烘箱干燥20h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:6的比例浸泡，浸泡时间为2h，浸泡温度为30℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于50℃烘箱干燥24h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:5的比例浸泡，浸泡时间为1h，浸泡温度为90℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程8次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于50℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为1.5％的白芨多糖浓缩液。
向白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的1倍，洗涤沉淀物次数为6次，每次洗涤时间为3min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为50℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为6％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.2mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-60℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成3mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-80℃、真空度为2pa的环境中冷冻干燥，26h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为100mm，宽为100mm，高为6mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为1.5％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取50％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.5ml/min的速度滴加到在450r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌3h后，置于真空度为0.05mpa的环境中3.5h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为98:2。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置30min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为1:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-80℃、真空度为5pa的环境中冷冻干燥，48h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
实施例三
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:6的比例浸泡，浸泡时间为15min，浸泡温度为35℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶性杂质，收集初步清洁的白芨茎块于35℃烘箱干燥21h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:8的比例浸泡，浸泡时间为1.5h，浸泡温度为25℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于45℃烘箱干燥20h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:6的比例浸泡，浸泡时间为2.5h，浸泡温度为80℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程8次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于65℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为3％的白芨多糖浓缩液。
向白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的1.5倍，洗涤沉淀物次数为6次，每次洗涤时间为2.5min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为60℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为8％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.3mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-60℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成6mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-60℃、真空度为1pa的环境中冷冻干燥，36h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为200mm，宽为200mm，高为10mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为3％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取45％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.8ml/min的速度滴加到在225r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌3.5h后，置于真空度为0.05mpa的环境中6h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为99:1。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置15min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.5:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-70℃、真空度为3pa的环境中冷冻干燥，30h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
实施例四
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:9的比例浸泡，浸泡时间为3.5min，浸泡温度为38℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶性杂质，收集初步清洁的白芨茎块于48℃烘箱干燥22h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:7的比例浸泡，浸泡时间为2.5h，浸泡温度为30℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于36℃烘箱干燥21h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:4的比例浸泡，浸泡时间为2h，浸泡温度为80℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程10次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于65℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为3％的白芨多糖浓缩液。
向白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的2倍，洗涤沉淀物次数为10次，每次洗涤时间为1min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为60℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为10％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.5mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-65℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成8mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-80℃、真空度为3pa的环境中冷冻干燥，48h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为200mm，宽为180mm，高为15mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为2.5％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取30％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.3ml/min的速度滴加到在500r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌2.5h后，置于真空度为0.08mpa的环境中5.5h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为97:3。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置20min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.8:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-70℃、真空度为2pa的环境中冷冻干燥，42h后取出，即获得双层结构白芨敷料。
实施例五
a白芨多糖的提取
将干燥的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:8的比例浸泡，浸泡时间为10min，浸泡温度为38℃，纱布过滤，除掉可溶和不溶性杂质，收集初步清洁的白芨茎块于48℃烘箱干燥22h。
将初步清洁干燥后的白芨茎块与无水乙醇以质量比1:3的比例浸泡，浸泡时间为3h，浸泡温度为27℃，纱布过滤，除掉可溶性色素，收集白芨茎块于40℃烘箱干燥25h。
取除去色素后的白芨茎块与蒸馏水以质量比1:10的比例浸泡，浸泡时间为0.8h，浸泡温度为90℃，纱布过滤，收集白芨多糖滤液。
将提取白芨多糖滤液后的白芨茎块继续提取白芨多糖滤液的浸泡和过滤过程7次，所加蒸馏水的质量不变，合并分次收集的白芨多糖滤液，并置于60℃的旋转蒸发仪中浓缩，获得质量浓度为2％的白芨多糖浓缩液。
向白芨多糖浓缩液中加入无水乙醇搅拌，醇沉，过滤得到沉淀，并用无水乙醇洗涤过滤得到的沉淀，其中，醇沉所加无水乙醇的体积为白芨多糖浓缩液体积的1.8倍，洗涤沉淀物次数为6次，每次洗涤时间为2min，将洗涤后的白芨多糖置于烘箱中干燥，干燥温度为80℃，制得干燥的白芨多糖。
b白芨多糖铸膜液的制备
将步骤a制备的干燥白芨多糖溶解在水中配制出质量分数为3％的白芨多糖溶液，并置于真空度为0.15mpa的真空状态下去除气泡，获得白芨多糖铸膜液，备用。
c贴服层敷料的制备
将步骤b制备的白芨多糖铸膜液倒入平板模具的凹槽内，在凹槽内垂直于底面的一个侧面上设置有传递温度的金属传导器，用隔热材料包裹平板模具，将平板模具水平放置于-75℃的环境中，直到平板模具内的白芨多糖铸膜液完全定向冻结成型膜，形成5mm厚的白芨多糖膜，再将脱模后的白芨多糖膜置于温度为-70℃、真空度为4pa的环境中冷冻干燥，45h后取出，即获得贴服层白芨多孔敷料。
其中，上述平板模具凹槽的长为100mm，宽为100mm，高为10mm。
d氢氧化钠水溶液的制备
将氢氧化钠溶解在水中配制出质量分数为2.8％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀冷却至室温。
e表层铸膜液的制备
取20％～50％步骤b中制备的白芨多糖铸膜液，将步骤c制备的氢氧化钠溶液以0.6ml/min的速度滴加到在480r/min速度下搅拌的白芨多糖铸膜液中，搅拌3.6h后，置于真空度为0.07mpa的环境中5.5h去除气泡，得到表层铸膜液。
其中，白芨多糖铸膜液与氢氧化钠的质量比为98:2。
f双层结构白芨敷料的制备
将步骤c中所制备的贴服层白芨多孔敷料放入上述未设置有金属传导器的平板模具凹槽中，将模具转移至隔热容器内，在容器内倒入液氮，液氮液面不超过白芨多孔敷料上表面，静置5min，将步骤e制备的表层铸膜液倒入凹槽内，所用表层铸膜液与制备白芨多孔敷料所用白芨多糖铸膜液的体积比为0.6:1，待模具内所有溶液冻结成型，取下模具，将双层型膜置于温度为-60℃、真空度为2pa的环境中冷冻干燥，32h后取出，即获得双层结构白芨敷料。