本发明涉及化妆品领域,具体涉及娑罗树籽提取物的化妆品用途。
背景技术：
娑罗树（学名：shorearobustagaertn.）：是娑罗双属的模式种。产于印度及马来半岛等南亚热带雨林之中，属多年生乔木。因其气味芳香，木材坚固，故可用来制作家具或建材，又可供作药用或香料。种子可食。树脂可为沥青之代用品，并可供涂料及作药用,土人常用以治疗消化不良、淋疾等病症。被佛教视之为圣树之一。
娑罗树生长比较缓慢。在潮湿的地方它是常绿植物，在干躁的地方则是落叶灌木，在每年的二月到四月之间它的叶子几乎掉光，可是到了五月叶子又重新长出来。生存能力强。
现代研究发现,婆罗双树种子粉含淀粉57-60%,蛋白质10-14%,还有10-14%的单宁。在化妆品中加入单宁，最直接的效果就是收敛作用。含单宁的化妆品在防水条件下对皮肤有很好的附着力,可使粗大毛孔收缩、绷紧而减少皱纹,使皮肤显出细腻的外观。
婆罗双树种子粉富含单宁，对应用到化妆品中具有很高的价值。但是目前尚未有婆罗双树种子及其提取物应用在化妆品中的研究报道。
技术实现要素：
本发明目的在于提供娑罗树籽提取物，以其为活性成分的化妆品，它的制备方法，及其在制备化妆品中的应用。本发明明确了娑罗树籽提取物具有良好的护肤效果和安全性，是一种良好的天然护肤化妆品原材料。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
一种娑罗树籽提取物的提取方法，包括以下步骤：
s1.真空微波预处理：取娑罗树籽，粉碎，过筛，转移至真空微波炉内，进行真空微波预处理，得到预处理产物;
s2.将提取溶剂加入到步骤s1制得预处理产物中，回流提取，收集提取液，浓缩干燥即得娑罗树籽提取物。
在其中一些实施例中，所述步骤s1中所述的粉碎方式包括但不限于研磨或剪切或超声，优选为研磨。
在其中一些实施例中，所述步骤s1中所述的过筛为20-40目过筛。
在其中一些实施例中，所述步骤s1中所述真空微波预处理的真空度为0.1-0.12mpa，微波处理时间为6-8min，维持腔体温度为160-180℃,微波处理剂量为1.8-2.5kw/kg，优选为2kw/kg。
在其中一些实施例中，所述步骤s2中所述提取溶剂与预处理产物的重量比为（10-30）：1；所述提取溶剂为体积分数80-90％的乙醇溶液或80-90％的丙酮溶液，优选为体积分数90％的乙醇溶液。
在其中一些实施例中，所述步骤s2中所述的回流提取的次数为2-4次，每次为1-2h，在50-60℃进行，优选为55℃。
在其中一些实施例中，所述步骤s2在得到提取液后，还可对所述提取液做进一步精制，例如采用离子交换树脂、活性炭柱或膜过滤等方法，优选为膜过滤。
其中，所述膜过滤，为小于等于10000道尔顿微滤膜过滤，优选小于等于8000道尔顿微滤膜过滤，更优选小于等于5000道尔顿的微滤膜过滤。
在其中一些实施例中，所述步骤s2获得提取物后，还可以对所述提取物进一步纯化：所述纯化为用100份的水把1份的提取物溶解成水溶液，经大孔树脂吸附纯化，用无水乙醇洗脱，浓缩洗脱液，干燥得娑罗树籽提取物。
发明人意外发现，真空微波处理对后续提取的效率有较大影响，经过真空微波处理后，提取效率高，对娑罗树籽的单宁成分破坏少，尤其对获得的单宁有效成分的得率有较大影响。不受特殊理论的限制，推测其可能的原因是经过真空微波处理，由于微波频率与化学基团的旋转振动频率接近,可用以改变分子的构象,有选择的活化或破化淀粉和蛋白质反应基团,促进化学反应,抑制副反应，有利于提升单宁得率，又或者是细胞中的水分快速汽化,形成向外扩散的蒸汽压作用于细胞壁,并在纹孔膜等薄弱环节形成突破，造成纹孔膜破裂，从而有利于后续提取。
本发明还提供娑罗树籽提取物在制备化妆品中的应用。
进一步的，所述的娑罗树籽提取物在制备防晒或美白化妆品中的应用。
进一步的，娑罗树籽提取物作为化妆品添加剂在化妆品中的应用，其添加量占化妆品总质量的0.01-1wt％。
进一步的，所述化妆品可以为护肤乳液。
进一步的，护肤乳液包括以下质量百分含量的组分，如表1所示：
表1
与现有技术相比，本发明具备如下的有益效果：
本发明通过对娑罗树籽进行提取得到目标提取物，对目标提取物进行了细胞毒性实验和防晒实验，证明了目标提取物的安全性和紫外线的吸收能力，明确了目标提取物优良的化妆品活性和药物活性。本发明提高了娑罗树籽的利用功能和附加值，又拓展了天然护肤品植物原料的来源。本发明提供了一种娑罗树籽提取方法，包括：将娑罗树籽粉末进行真空微波预处理后提取，得到提取物，该提取方法提取效率高，没有引入对人体有刺激性的危害物，对娑罗树籽的单宁破坏少，该提取方法提取的娑罗树籽提取物单宁含量和纯度高，有助于娑罗树籽作用的发挥，并且，该提取方法易于操作，适用于产业化推广应用。实验结果证明，该提取方法提取的娑罗树籽提取物安全性强，具备显著防晒、美白的功效。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数或条件,可参照常规技术进行。
实施例1
娑罗树籽提取物的制备：
s1.称取净娑罗树籽100g，研成粉末，20目过筛，转移至真空微波炉内，进行真空微波预处理，保持真空度为0.1mpa，微波剂量1.8kw/kg，处理时间6min，维持微波炉腔体温度为160℃，得到预处理产物;
s2.经s1步骤真空微波预处理后，用10倍重量的体积分数80％的乙醇溶液加入到预处理产物中，50℃回流提取1h，重复2次，收集提取液,浓缩，50℃干燥，得娑罗树籽提取物12.2g，提取率为12.2％。
实施例2
娑罗树籽提取物的制备：
s1.称取净娑罗树籽100g，研成粉末，40目过筛，转移至真空微波炉内，进行真空微波预处理，保持真空度为0.12mpa，微波剂量2.5kw/kg，处理时间8min，维持微波炉腔体温度为180℃，得到预处理产物;
s2.经s1步骤真空微波预处理后，用30倍重量的体积分数90％的乙醇溶液加入到预处理产物中，60℃回流提取2h，重复4次，收集提取液,使用10000道尔顿微滤膜过滤，得精制滤液，将精制滤液用旋转蒸发仪减压蒸馏，浓缩，60℃干燥，得粗提物，用100份的水把1份的提取物溶解成水溶液，经大孔树脂吸附纯化,再用无水乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，低温冷冻干燥，即得娑罗树籽提取物14g，提取率为14％。
实施例3
娑罗树籽提取物的制备：
s1.称取净娑罗树籽100g，超声粉碎，30目过筛，转移至真空微波炉内，进行真空微波预处理，保持真空度为0.11mpa，微波剂量2kw/kg，处理时间7min，维持微波炉腔体温度为170℃，得到预处理产物;
s2.经s1步骤真空微波预处理后，用20倍重量的体积分数85％的丙酮溶液加入到预处理产物中，55℃回流提取1.5h，重复3次，收集提取液,使用5000道尔顿微滤膜过滤，得精制滤液，将精制滤液用旋转蒸发仪减压蒸馏，浓缩，55℃干燥，得粗提物，用50份的水把1份的提取物溶解成水溶液，经大孔树脂吸附纯化,再用无水乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，低温冷冻干燥，即得娑罗树籽提取物13.8g，提取率为13.8％。
对比例1
无真空微波预处理步骤s1，其余步骤和条件同实施例1。
得娑罗树籽提取物4.8g，提取率为4.8％。
对比例2
无真空微波预处理步骤s1，其余步骤和条件同实施例2。
得娑罗树籽提取物5.4g，提取率为5.4％。
对比例3
无真空微波预处理步骤s1，其余步骤和条件同实施例3。
得娑罗树籽提取物5.2g，提取率为5.2％。
实施例4：将实施例1-3和对比例1-3的娑罗树籽提取物，分别添加至下述配方中，制成护肤乳液，依次计为护肤乳液1-6，其中，护肤乳液1-6包括如下质量百分含量的各组分,如表2所示：
表2
本发明功效测试：
1、单宁含量检测
本发明结合国家标准gb/t15686—2008，利用单宁与fe3+能快速反应生成稳定紫红色络合物的性质，建立了一种可应用于提取物中单宁含量的快速检测方法。并以实施例1-3和对比例1-3的娑罗树籽提取物为检测样品，对其单宁含量进行检测。
1）检测原理
单宁在弱碱性环境下和铁离子发生反应，生成紫红色络合物，这种络合物颜色的深浅与样品中单宁含量的大小成正比。用分光光度计在525nm波长处测定其吸光度值，与标准系列比较进行定量。
2）试验方法
单宁标准曲线的绘制：以单宁酸作为标准品，用75%二甲基甲酰胺溶液将其稀释成0，0.001，0.01，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，1.0g/ml标准系列溶液，分别移取1ml于试管中，依次准确加入5ml水、1ml3.5g/l柠檬酸铁铵溶液、1ml8.0g/l氨溶液，振荡摇匀，室温避光静置10min。将其倒入比色皿中，用分光光度计于波长为525n处测定吸光度值。同时以水作空白。
试样测定：提取物样品配制成0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0g/l标准系列溶液，分别准确吸取提取物溶液1ml于第1批试管中，依次加入6ml蒸馏水和1ml8.0g/l的氨溶液，振荡摇匀，10min后以水作空白，用分光光度计在波长为525nm处测定试样溶液的吸光度值a1。分别准确吸取1ml提取液于第2批试管中，依次加入5ml水、1ml3.5g/l柠檬酸铁铵溶液振荡，再加1ml8.0g/l氨溶液，振荡摇匀后计时，（10±1）min后，以水作空白，在525nm测定试样溶液的吸光度值a2。试样中单宁的吸光度测定结果a＝a2－a1，由回归方程计算出样品溶液单宁的质量浓度c。单宁含量以干基中单宁酸的质量分数表示，即单宁含量＝2c·1000/m。式中，c为从标准曲线上查得的单宁的质量浓度（mg/ml）；m为样品质量（g）。
表3不同娑罗树籽提取物中单宁含量
从上表可知，本发明实施例1-3所得的娑罗树籽提取物的单宁含量相对于对比例1-3高于200％（920.2/323.8*100%＞200%）。由此可见，本发明经过真空微波预处理后，再经乙醇或丙酮提取得到的娑罗树籽提取物中单宁的含量和纯度都更高，真空微波预处理是关键步骤，这一步骤对单宁的得率有较大影响，而且经过这一预处理后，对提取溶剂如乙醇、丙酮浓度要求降低。
2、娑罗树籽提取物的细胞毒性实验：通过mts比色法，确定样品的cc50(50％cytotoxicconcentration)，即对50％的细胞产生毒性时的药物浓度，从而确定以下活性实验的安全样品浓度。
实验方法：96孔细胞培养板上，将b16细胞与不同浓度的待测药物溶液混合，设定3个重复孔，同时设置不含药物的空白对照，37℃，5％co2培养24h，采用mts比色法检测细胞毒性，酶标仪测定od值，测定波长490nm。计算得到cc50值。
细胞存活率(％)＝实验孔od490nm/空白孔od490nm×100％
实验结果：实施例1-3所得娑罗树籽提取物的细胞存活率分别为89.35％，88.76％，88.96％，：均＞60%属于正常水平，可明显看出娑罗树籽提取物对细胞没有毒害作用，作为皮肤化妆品的天然原材料的安全性是有保证的。
3、防晒测试：
包含在阳光中的紫外线(uv)是波长比人类可感知的可见光的波长短的光。能够到达地表的uv的成分划分为波长为320-400nm的uv-a(长波长uv)和波长为290-320nm的uv-b(中波长uv)。这些uv的辐射会让皮肤产生大量自由基，导致细胞膜的过氧化反应，使黑色素细胞产生更多的黑色素，并往上分布到表皮角质层，造成黑色斑点。紫外线可以说是造成皮肤皱纹、老化、松弛及黑斑的最大元凶。
实验动物：取健康的小鼠35只，体重为180-220g，随机分成7组，每组5只小鼠：一组为空白组，6组为实验组(分别涂抹实施例1-3和对比例1-3的娑罗树籽提取物1%浓度水溶液)。
实验方法：各组小鼠用0.8％的硫酸钠进行背部脱毛，暴漏6cm×6cm的测试区。涂抹样品之前先用温水清洗皮肤，涂抹有受试样品溶液的小鼠放在阳光模拟实验箱中1h，连续进行3个月，期间及时剃去新长出的鼠毛。最终，利用皮肤黑色素仪测试受试小鼠皮肤黑色素含量mi值，实验结果，见表4：
从上表数据可看出实施例1-3和对比例1-3均能降低黑色素mi值，而本发明实施例1-3娑罗树籽提取物防晒效果更加显著，可以用在防晒或美白类化妆品中。
6、人群试用测试
为测试产品的实际使用效果,对护肤乳液1-6制得的样品分别进行了人群试用调查,派发样品给300名年龄26-40岁的志愿者（其中女性238名），身体健康，生活规律，无皮肤病，志愿者随机均分为6组。志愿者清洁脸部皮肤后，擦干，用手将适量护肤乳液涂抹在左侧脸部，右侧脸部不涂抹，作为测试对比区，受试期间脸部不涂抹其他的化妆品或药物，连续使用30天查看使用效果，并填写调查问卷。
分级判定的标准：
显著有效：相对右侧脸部，实验区色斑问题被彻底解决，皮肤光滑如新，莹白润泽，皮肤富有弹性。
有效：相对右侧脸部，实验区色斑明显变淡，形成不久的色斑甚至会完全消失，皮肤变得白皙，皮肤变得有弹性。
无效：相对右侧脸部，实验区色斑无明显变化或加深，肤色没有变化。
人群试用调查结果表5
结论：在含娑罗树籽提取物的护肤乳液样品中，本发明护肤乳液1-3，经使用30天后，皮肤光滑如新，莹白润泽，皮肤变得有弹性。而添加缺少真空微波预处理步骤得到的娑罗树籽提取物的护肤乳液4-6，经使用30天后，皮肤改善情况（显著有效率≤9例）远不如护肤乳液1-3的效果（显著有效率≥42例）。说明本发明护肤乳液具有良好的美白效果。
经问卷得知，使用本发明护肤乳液产品，温和无刺激，肤感很好。
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。