促进皮肤角质更新的效果优异的皮肤外用剂组合物的制作方法

本发明涉及皮肤外用剂组合物，其含有源自济州青豆(学名：大豆(glycinemax)，普通名称：大豆(soybean)，品种名：pureunkong)，更精确地，含有源自济州青豆的发酵物的多肽(polypeptide)和乳酸钠(sodiumlactate)，从而促进皮肤角质更新的效果优异，并且减少皮肤角质量的效果、改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果优异。
背景技术：
：皮肤的角质层是与外部直接接触的最外层，保护皮肤和身体免受外部危险因素的危害。角质层中被称为角蛋白(keratin)的蛋白质占50％，其余由20％的脂肪、23％的水溶性物质及7％的水分组成。皮肤细胞不断地生成，并将现有的皮肤细胞逐渐推向角质层，此时，到达角质层的细胞为扁平的死细胞，亦称为“角质”。在皮肤中会产生一天有数百万个死亡的角质细胞脱落并由新的角质细胞替代的作用。如上所述，在表皮中新的细胞层的位置发生变化称为更新(turnover)。虽然根据部位或年龄有所不同，但在正常皮肤中这种表皮更新需要约4周。这种角质层没有正常剥离而是残留在皮肤表面时，角质层变厚且脸色会变得暗沉且会发黑。此外，残留在皮肤表面或毛发的毛囊中的杂质会通过氧或微生物得到氧化或分解，从而会引起诸如炎症的皮肤问题。α-羟基酸(aha；alphahydroxyacids)是代表性的化学性去角质成分，通过酸的作用有助于去除角质层中角质之间的连接结构，并且显示出温和的溶化角质的效果。具体而言，属于aha的成分有乙醇酸(glycolicacid)、乳酸(lacticacid)、苹果酸(malicacid)、柠檬酸(citricacid)、酒石酸(tartaricacid)等，其中乳酸(lacticacid)作为天然保湿因子(nmf；naturalmoisturizingfactor)正在用于化妆品中。济州青豆(学名：大豆(glycinemax)，普通名称：大豆(soybean)，品种名：pureunkong)在济州被称为“青卵豆”，意为青色的鸡蛋形状的豆。此外，济州青豆还用于做酱，因此也称作“酱豆”。济州青豆是仅仅生产于济州岛南部部分地区的本土资源，其种子难以保存，因此濒临灭绝。与普通的豆相比，济州青豆的个头长得高而容易受风的影响，并且栽培时间偏长，种植于济州之外的陆地时，其品质和成分会降低。已知济州青豆中所含有的异黄酮显著多于普通的豆，并且与市售的改良大酱相比，由济州青豆做的传统大酱通过自然产生的多种复合菌、霉菌、酶的作用，其的血栓溶解能力、抗癌效果等各种功效显著。本发明人通过研究及实验得知，源自济州青豆的多肽在皮肤细胞中促进胶原蛋白基因的表达，并且对细胞再生也具有效果。此外，本发明人确认了联合使用源自济州青豆的多肽与作为天然保湿因子而起到保湿剂作用的乳酸钠时能够显示出优异的促进皮肤角质更新的效果，从而完成了本发明。现有技术文献非专利文献(非专利文献1)1.网络文件“您知道济州青豆吗”(网络链接url：https://farmer-story.kakao.com/farmer-story/pureunbeans)。(非专利文献2)2.国产及耐除草剂豆的蛋白质组成分析(chunhuaweietal.,“proteincompositionofdomesticandglyphosate-tolerantsoybean”,journalofthekoreansocietyoffoodscienceandnutritionv.35no.4,2006,pp.470-475)。技术实现要素：要解决的技术问题本发明的目的在于提供皮肤外用剂组合物，本发明并没有局限于从源自豆的肽和乳酸钠中获得目前已知的分别为增强弹性或保湿效果等，而是通过联合使用源自济州青豆的多肽及乳酸钠两种成分，从而提供促进皮肤角质更新的效果优异的皮肤外用剂组合物。此外，本发明的目的在于提供减少角质量的效果、改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果优异的皮肤外用剂组合物。此外，本发明的目的在于提供济州青豆在制备皮肤外用剂组合物中的用途，更精确而言，提供源自济州青豆的发酵物的多肽及乳酸钠的混合物在制备皮肤外用剂组合物中的用途，更具体而言，提供用于促进皮肤角质的更新及/或改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度中的至少任一种的源自济州青豆的多肽及乳酸钠的混合物在制备皮肤外用剂组合物中的用途。技术方案本发明提供皮肤外用剂组合物，其以特定的比例含有源自济州青豆的多肽及乳酸钠，从而促进皮肤角质更新的效果优异，并且减少皮肤角质量的效果、改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果优异。所使用的源自济州青豆的多肽是以济州青豆作为原料并经过枯草芽孢杆菌液态发酵和超滤工序制备的低分子量肽。发明效果本发明的皮肤外用剂组合物的皮肤角质剥离能力突出，缩短角质更新周期，从而促进皮肤角质更新的效果优异。此外，通过减少没有脱落而长时间残留在皮肤上使皮肤暗沉或成为引起皮肤问题的原因的角质的量，从而显示出改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果。附图说明图1为使用visioscanvc98拍摄的使用实施例1的皮肤外用剂组合物之前和使用3天后、使用1周后、使用2周后的角质量的照片。图2为使用i-scope拍摄的使用实施例1的皮肤外用剂组合物之前和使用3天后、使用1周后、使用2周后的角质的照片。图3是为了了解实施例1中制备的皮肤外用剂组合物的角质剥离能力而将受试者前臂部分的角质进行荧光染色后涂布样品并进行荧光拍摄的照片。所显示的荧光深表示角质剥离相对较差(各照片的左侧：没有涂布时，各照片的右侧：涂布实施例1时)。图4为示出利用液相色谱法(uplc)对本发明的源自济州青豆的多肽的氨基酸成分进行分析的结果。图5为将本发明的源自济州青豆的多肽的氨基酸含量组成换算为百分数示出的图表。图6为利用lc-esi-ms分析的本发明的源自济州青豆的多肽的二肽分析结果。图6a为总离子电流，图6b为从总离子电流中提取的离子(leu/val相关二肽离子)。具体实施方式本发明涉及皮肤外用剂组合物，其含有源自济州青豆的多肽和乳酸钠作为有效成分，从而促进皮肤角质更新的效果优异，并且减少皮肤角质量的效果、改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果优异。目前已知源自豆的肽或水解豆蛋白质具有防止老化及保湿的效果，尤其，本发明人通过试验确认了源自济州青豆的多肽促进胶原蛋白基因的表达，并且对细胞再生具有效果。此外，已知乳酸钠是以乳酸的钠盐形态广泛用于保湿化妆品中的成分，并且作为天然保湿因子(nmf)之一起到保湿剂(humectant)的作用。本发明的目的在于同时使用这种源自济州青豆的多肽和乳酸钠，从而增大角质剥离的功效，并促进皮肤角质的更新。现有的角质剥离产品主要依赖于在表皮上剥离(exfoliation)角质的功能。但是，为了更彻底地剥离角质，不仅要在表皮上剥离角质，而且还要活化皮肤颗粒层和基底层中的新细胞的生成和分化才能促进更新，并能够维持皮肤的恒常性。本发明人确认了源自济州青豆的多肽在皮肤细胞中具有促进胶原蛋白基因的表达及细胞再生的效果。并且，预测联合使用源自济州青豆的多肽与乳酸钠时，会显示出促进皮肤角质更新的效果。并预测得到提高的皮肤再生能力更加活跃地将健康的细胞推向上方，从而减少更新周期，并且也有助于维持角质剥离后的皮肤的恒常性，通过后述的实施例和试验例等确认了其协同效果，从而完成了本发明。用于本发明的皮肤外用剂组合物的源自济州青豆的多肽可以利用枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)将生产于济州岛南部地区的济州本土资源济州青豆进行液态发酵，从而分解为低分子肽，然后经过超滤工序来制备。更详细地，粉碎济州青豆，并将过滤的济州青豆放入精制水中添加枯草芽孢杆菌进行发酵，然后利用超滤膜进行过滤，并将滤液进行浓缩后进行喷雾干燥，最终可以得到粉末形态的源自济州青豆的多肽。本发明的源自济州青豆的多肽是具有小于3,000da的平均分子量的低分子量肽。所述低分子量肽可以具有优选为1,000da～2,500da，更优选为1,000da～1,500da的平均分子量。本发明的皮肤外用剂组合物中，相对于组合物的总重量，可以含有以干燥重量计为0.000001～5重量％的源自济州青豆的多肽。当源自济州青豆的多肽含量小于0.000001重量％时，含量过低，从而难以期待其作为皮肤外用剂的功效，当源自济州青豆的多肽含量超过5重量％时，具有皮肤安全性方面的忧患。更详细地，优选含有0.005～0.05重量％的源自济州青豆的多肽。本发明的皮肤外用剂组合物中，相对于组合物的总重量，可以含有0.000001～20重量％的乳酸钠。当乳酸钠的含量小于0.000001重量％时，含量过低，从而难以期待其作为皮肤外用剂的功效，当乳酸钠的含量超过20重量％时，具有皮肤安全性性方面的忧患。更详细地，优选含有1～10重量％的乳酸钠。本发明的皮肤外用剂组合物具有促进皮肤角质更新的效果。此外，具有减少角质量的效果、改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度的效果。本发明的组合物中，以重量为基准，以1:100～1:2000，优选以1:100～1:500的混合比混合源自济州青豆的多肽及乳酸钠时，有利于显示出促进皮肤角质更新的效果的同时，显示出改善皮肤纹理、肤色、透明度及化妆均匀度中的至少一种以上的效果。本发明的皮肤外用剂组合物可以以溶液、凝胶、固体、无水糊状物、水包油型乳液、悬浮液、微乳、微胶囊、微颗粒球，或以离子型(脂质体)及非离子型小囊分散剂的形态，或以护肤水、乳液、霜、面膜、凝胶、粉、软膏或喷雾剂等形态用于化妆品中。本发明的皮肤外用剂组合物可以进一步含有诸如脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、凝胶剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foamingagent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、金属离子屏蔽剂、螯合剂、保存剂、维生素、阻断剂、湿润剂、精油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质小囊或化妆品中通常使用的任意其他成分的化妆品学或皮肤科学领域中通常使用的助剂。所述成分之外，本发明的皮肤外用剂组合物可以进一步使用本领域中通常使用的附加性的添加物质。下面，通过实施例及试验例对本发明进行更加详细的说明。但是，下述实施例及试验例仅仅是用于帮助理解本发明的示例，本发明的内容并不受其限定。[参考例1]源自济州青豆的多肽的制备本发明中所使用的源自济州青豆的多肽是在济州岛西归浦市中文洞生产的济州青豆中添加枯草芽孢杆菌进行液态发酵，并应用超滤工序制备的具有小于3,000da的平均分子量的低分子量肽。具体而言，粉碎(grinding)济州青豆，将4kg的经过100目(mesh)进行过滤的济州青豆放入40kg的精制水中，并添加40g的枯草芽孢杆菌，在50℃下发酵6小时，然后在90～95℃下使其失活(deactivation)30分钟，并冷却至50～60℃。接着，利用10kda尺寸的超滤膜(ultrafiltrationmembrane)进行过滤，并在60℃下将滤液进行浓缩(concentration)，最后进行喷雾干燥(spray-dry；条件：搅拌速度(stirringspeed)为30rpm，进口(input)温度为185℃，出口(output)温度为85～90℃)，最终得到粉末形态的源自济州青豆的多肽。[参考例2]源自baegunkong的肽的制备除了用baegunkong代替济州青豆之外，通过与[参考例1]相同的步骤来制备源自baegunkong的肽。[参考例3]源自pungsankong的肽的制备除了用pungsankong代替济州青豆之外，通过与[参考例1]相同的步骤来制备源自pungsankong的肽。[参考例4]乳酸钠乳酸钠使用了corbion公司的s/pf60。[实施例及比较例的制备]以下述表1的组成制备了包含所述参考例1的源自济州青豆的多肽和所述参考例4的乳酸钠的实施例1～3、包含所述参考例2的源自baegunkong的肽和乳酸钠的比较例1、包含所述参考例1的源自济州青豆的多肽和乳酸钾的比较例2及包含所述参考例3的源自pungsankong的肽和乳酸钠的比较例3的去角质霜(peelingcream)。[表1]成分实施例1实施例2实施例3比较例1比较例2比较例3源自济州青豆的多肽0.010.010.00500.010源自baegunkong的肽0000.0100源自pungsankong的肽000000.01乳酸钠1051010010乳酸钾0000100角鲨烷555555聚山梨醇酯600.50.50.50.50.50.5鲸蜡硬脂醇1.51.51.51.51.51.5甘油222222精制水至100至100至100至100至100至100合计100100100100100100通过人体应用试验确认了所制备的上述实施例及比较例组合物的改善角质量、皮肤纹理、肤色、皮肤透明度及化妆均匀度的效果和促进皮肤角质更新的效果。人体应用试验的对象为25～35岁女性(平均年龄：29.391±3.313)，最终的有效评价人员数为23名，中途淘汰人员数为2名。试验时间共为4周(使用产品前、使用3天后、使用7天后、使用2周后、使用4周后)，以每天1次的频率将上述实施例及比较例的霜涂布于面部及前臂进行测试。[试验例1：皮肤角质量的测量]利用visioscanvc98(courage-khazakaelectronicgmbh公司，德国)，在使用上述实施例1的去角质霜之前和使用3天后、使用1周后、使用2周后测量皮肤角质量。就测量而言，利用特殊膜(corneofix)采集脸颊部位的角质后，用visioscanvc98拍摄影像并进行分析，并将根据下述式计算得出的测量值d.i(desquamationindex：表皮脱落指数)用作评价皮肤角质的资料。上述式中，d.i为表皮脱落指数(％)，a为由角质细胞覆盖的面积百分数，tn为与厚度相关的角质细胞的百分数，n为厚度水平(1～5)。根据其结果得出的角质量d.i的平均值和得到改善的受试者人数分别示于下述表2和表3中。[表2][表3]如上述表2所示，与使用前相比，使用本发明的皮肤外用剂组合物时，在使用3天后、使用1周后、使用2周后的角质量d.i的平均值减少7.940％、13.197％、15.924％，得到显著的减少(p<0.017)。此外，如上述表3所示，角质量d.i指数得到改善的受试者人数在使用3天后为73.9％，使用1周后和使用2周后为87％，显示出非常高的比率。因此，得以确认本发明的皮肤外用剂组合物的减少角质量的效果突出。[试验例2：角质量改善的肉眼评价(角质量+角质成熟的肉眼评价)]角质量改善的肉眼评价是利用i-scope对使用上述实施例1的去角质霜之前和使用3天后、使用1周后、使用2周后的皮肤角质量和角质成熟进行肉眼评价。根据其结果得出的角质量的肉眼评价分数的平均值和角质成熟(maturation)的肉眼评价分数的平均值，以及它们的合计分数示于下述表4中，得到改善的受试者人数示于下述表5中。[表4][表5]如上述表4所示，与使用前相比，使用1周后、使用2周后的角质量的肉眼评价分数的平均值增加35.410％、56.253％，得到显著的增加(p<0.017)。与使用前相比，角质成熟的肉眼评价分数的平均值没有显示出显著的差异。与使用前相比，使用3天后、使用1周后、使用2周后的合计分数(角质量的肉眼评价+角质成熟(maturation)的肉眼评价)增加17.564％、26.358％、31.842％，得到显著的增加(p<0.017)。此外，如上述表5所示，角质的肉眼评价合计分数中，得到改善的受试者人数的比率在使用3天后为56.5％，使用1周后为69.6％，使用2周后为73.9％，显示出高的比率。因此，得以确认在对本发明的皮肤外用剂组合物进行肉眼评价时，判断为具有减少角质量的效果的受试者人数多。[试验例3：化妆均匀度的测量]化妆均匀度的测量是利用visia-cr(canfieldimagingsystems公司，美国)对面部进行测量，在使用上述实施例1的去角质霜之前和使用3天后，将相同量的化妆产品涂布于面部之后进行拍摄。指定拍摄图像的特定区域，然后利用image-proplus分析了表示该区域的皮肤均匀度的强度(intensity)的标准偏差。强度(intensity)的标准偏差值越减少，表示化妆均匀度越会得到改善。根据其结果得出的化妆均匀度(强度的标准偏差(intensity’sstd))的平均值示于下述表6中，将得到改善的受试者人数示于下述表7中。[表6][表7]如上述表6所示，与使用前相比，使用本发明的皮肤外用剂组合物时，在使用3天后的化妆均匀度(强度的标准偏差(intensity’sstd))的平均值减少8.831％，得到显著的减少(p<0.05)。此外，如上述表7所示，化妆均匀度得到改善的受试者人数在使用3天后为95.7％，显示出非常高的比率。因此，得以确认本发明的皮肤外用剂组合物的改善化妆均匀度的效果突出。[试验例4：皮肤纹理、肤色、皮肤透明度的测量]皮肤纹理的测量是利用3d皮肤摄影设备primospremium(gfmesstechnikgmbh公司，德国)对面部脸颊部位进行测量。测量是对相同的部位进行拍摄，并对储存的图像的皮肤ra值进行分析。ra表示平均粗糙度(averageroughness)，值越减少，表示皮肤纹理越会得到改善。肤色测量是利用visia-cr(canfieldimagingsystems公司，美国)对相同部位进行测量。指定所拍摄的图像的特定区域，然后利用image-proplus分析了表示该区域的皮肤亮度的l*值。图像的l*值越增加，表示肤色越会得到改善。皮肤透明度的测量是使用translucency(tls850)进行测量。测量是将translucency探头(probe)接触于皮肤，并实施3次，然后将alpha值用作皮肤透明度评价资料，alpha值越减少，表示皮肤透明度越会得到改善。分别在使用上述实施例1的去角质霜之前、使用3天后、使用1周后进行测量。根据其结果得出的皮肤纹理(ra)、肤色(l*)、皮肤透明度(alpha)的各个平均值示于下述表8中，将得到改善的受试者人数示于表9中。[表8][表9]如上述表8所示，与使用前相比，使用本发明的皮肤外用剂组合物时，在使用1周后的皮肤纹理(ra)的平均值减少6.218％，得到显著的减少(p<0.05)。与使用前相比，在使用3天后、使用1周后的肤色(l*)的平均值增加0.913％、1.865％，得到显著的增加(p<0.025)。与使用前相比，在使用3天后、使用1周后的皮肤透明度(alpha)的平均值减少1.220％、1.524％，得到显著的减少(p<0.05)。此外，如上述表9所示，在使用1周后，皮肤纹理、肤色、透明度得到改善的受试者人数分别为82.6％、95.7％、87.0％，显示出非常高的比率。因此，得以确认本发明的皮肤外用剂组合物的改善皮肤纹理、肤色、透明度的效果突出。[试验例5：角质更新效果的测量]角质更新效果的测量是对制备的上述实施例1～3及比较例1～3的角质剥离能力进行评价，进行下述试验。该实验是以23名的25～35岁女性作为对象，经过4周的时间来进行试验，评价方法为如下：1.清洗前臂后选定4cm2的部位。2.将100μl的丹磺酰氯(dansylchloride；甘油三酯油中)加(loading)到直径为20mm的滤纸上，然后罩在试验部位。3.确认荧光染色后稳定24小时，然后每天1次向试验部位涂布32μl的样品(一名试验者以滚压(rolling)涂布样品20次)。4.每天阻断其他光且在uv下进行角质层的荧光拍摄。<拍摄条件>在数码相机的手动模式下，光圈为3.5，快门速度为5。<角质剥离能力的评价方法>-用丹磺酰氯对前臂进行荧光染色，然后根据荧光强度减少的比率对使用产品时的角质剥离能力进行分析。利用连续的t-检验(p<0.05)、anova检验及技术性统计分析对显著性差异进行分析，其结果示于表10、表11及图3中。[表10][表11]如上述表10所示，与使用前相比，使用实施例1的组合物时，角质剥离能力荧光强度(intensity)的平均值在使用1周后减少45.775％，使用2周后减少50.475％，使用4周后减少64.313％，得到显著的减少(p<0.05)。实施例2的角质剥离能力荧光强度(intensity)的平均值在使用1周后减少44.638％，使用2周后减少50.664％，使用4周后减少63.845％，得到显著的减少(p<0.05)，实施例3的角质剥离能力荧光强度(intensity)的平均值在使用1周后减少44.883％，使用2周后减少50.662％，使用4周后减少63.112％，得到显著的减少(p<0.05)。与其相比，比较例1的强度(intensity)值在使用1周后减少39.511％，使用2周后减少49.929％，使用4周后减少56.569％，得到显著的减少(p<0.05)，比较例2的强度(intensity)值在使用1周后减少33.215％，使用2周后减少49.626％，使用4周后减少56.403％，得到显著的减少(p<0.05)，比较例3的强度(intensity)值在使用1周后减少36.167％，使用2周后减少49.282％，使用4周后减少53.405％，得到显著的减少(p<0.05)。就未涂布实施例或比较例的组合物的情况而言，与使用前相比，其强度(intensity)值在使用1周后减少41.908％，使用2周后减少49.730％，使用4周后减少51.790％，得到显著的减少(p<0.05)。与未涂布时相比，实施例1～3的强度(intensity)值在使用前和使用1周后、使用2周后、使用4周后显示出显著的差异(p<0.05)，与比较例1～3相比，实施例1～3的强度(intensity)值也显示出显著的差异(p<0.05)。尤其在使用4周后，与未涂布相比，实施例1～3的强度(intensity)减少率高约11.3％～约12.5％，与比较例1～3相比，实施例1～3的强度(intensity)减少率也高约6.5％～10.9％。这表示本发明的实施例的角质剥离能力在通常的更新周期4周后时刻显示出最为明显的效果。此外，如上述表11所示，就在角质剥离能力评价中得到改善的受试者人数而言，与使用前相比，使用实施例1的组合物时，在使用1周后、使用2周后为100％，为非常高的比率。并且，与使用前相比，实施例2和实施例3的组合物在使用1周后得到改善的受试者人数分别为100％和95.6％，也显示出非常高的比率。图3是为了了解本发明的皮肤外用剂组合物的角质剥离能力，将涂布实施例1的部位和未涂布的部位的角质进行荧光染色，然后涂布样品进行荧光拍摄的照片，所显示的荧光深表示角质剥离相对较差。通过图3可以确认，与未涂布时相比，使用实施例1的组合物时，在使用1周后的荧光强度得到明显的减少。因此，通过表10～表11、图3的结果可以知道，与未涂布时相比，使用含有源自济州青豆的多肽及乳酸钠的实施例1～3的组合物时，皮肤角质剥离能力更加突出。此外，可知与含有源自其他豆的肽来代替源自济州青豆的多肽的比较例1及比较例3、以及含有乳酸钾来代替乳酸钠的比较例2相比，实施例1～3的角质剥离能力更优异，尤其含有0.01重量％的源自济州青豆的多肽及10重量％的乳酸钠的实施例1的角质剥离能力最为优异。因此，可以确认本发明的含有源自济州青豆的多肽及乳酸钠的皮肤外用剂组合物的角质剥离能力优异，从而促进皮肤角质更新的效果突出。[试验例6]源自济州青豆的多肽的氨基酸分析利用超高效液相色谱仪(ultraperformanceliquidchromatography)(watersuplch-class，沃特世公司(watersco.ltd.)，美国)对上述参考例1中制备的最终粉末形态的源自济州青豆的多肽中所包含的氨基酸的成分进行分析。用所述uplc分析的色谱图示于图4中，根据所述氨基酸分析的源自济州青豆的多肽的氨基酸含量如下述表12中所示。将其换算为百分数的图表如图5中所示。[表12]通过上述表12和图5的结果，确认了在10μg/mg以上的源自济州青豆的多肽中，异亮氨酸(13.5％)和苯丙氨酸(10.7％)最为丰富。此外，根据上述氨基酸分析结果，可知与韩国产的其他品种的豆相比，源自济州青豆的多肽的异亮氨酸非常丰富。在文献[国产及耐除草剂豆的蛋白质组成分析(chunhuaweietal.,“proteincompositionofdomesticandglyphosate-tolerantsoybean”,journalofthekoreansocietyoffoodscienceandnutritionv.35no.4,2006,pp.470-475)]中记载的pungsankong的氨基酸组成中，谷氨酰胺最为丰富(15.54％)，其次依次为苯丙氨酸(9.00％)、甘氨酸(8.50％)。并且，该文献还记载了其他韩国产豆hwanggumkong和duyukong的氨基酸组成比中，除了色氨酸和醇溶蛋白之外，也均与pungsankong相似。与此相比，本发明的源自济州青豆的多肽的谷氨酰胺的含量低至1.1％，另一方面，与韩国产的其他品种相比，异亮氨酸的含量显著突出，为13.5％。[试验例7]源自济州青豆的多肽的二肽的分析对上述参考例1中制备的最终粉末形态的源自济州青豆的多肽进行预处理，然后通过lc-esi-ms实施二肽离子分析。在1.5ml的玻璃瓶中，每1mg的样品中以1,000ppm加入1ml的蒸馏水，进行超声波处理(sonication)10分钟，在13,000rpm、4℃下离心分离20分钟，然后取100μl的上清液进行分析。利用液相色谱质谱仪(liquidchromatographymassspectrometry)(thermoqexactiveplus，赛默飞世尔科技公司(thermofisherscientific)，美国)对经过预处理的所述上清液进行分析。通过上述lc-esi-ms分析的源自济州青豆的多肽的总离子电流示于图6a中。从该总离子电流中提取了m/z为231.16942～231.17061范围的与leu/val相关的二肽离子。其结果示于图6b中，所提取的与leu/val相关的二肽离子含量示于下述表5中。val-ile和val-leu是利用ile-val的标准品进行相对定量。[表13]通过上述离子分析，确认了本发明的源自济州青豆的多肽中分别以106、57、25ppm的高浓度含有属于leu-val二肽中的一种的val-leu、val-ile和ile-val二肽。当前第1页12