盐肤木果实或其提取物的用途的制作方法

本发明涉及盐肤木果实或其提取物在制备治疗和/或预防酒精性脂肪肝及肝损伤的保健食品或药品中的应用，属于食品或医药技术领域。

背景技术：

酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，afld)是过量饮酒引起的肝细胞损伤性疾病，可逆转也可进一步发展为肝纤维化和肝硬化，表现为渐进性的肝脏脂肪变性、肝炎、肝纤维化和肝硬化。酒精在胃中缓慢少量吸收，主要在十二指肠和上段回肠通过单纯扩散吸收。仅有2%～10%通过肺脏和肾脏排出，其余的90%～98%在肝脏内氧化代谢。大约90%的重度饮酒者(酒精摄入多于60克/天)患有酒精性脂肪肝，其中有10%～35%的重度饮酒者会进一步发展成酒精性肝炎，5%～15%的重度饮酒者会发展成肝硬化。afld在肝脏疾病发病中占相当高的比例，在一些饮酒普遍的国家如中国、俄罗斯、美国、法国、德国、意大利、西班牙等，酒精性肝病的发病率较高，资料显示酒精性肝硬化发病占所有肝硬化的50%～75%。饮酒是我国一个非常传统的饮食习惯，并且随着我国人民的生活水平不断增高，酒类产品的消耗量也逐年递增，从而导致人群中酒精性脂肪肝病的发病率明显上升。但是目前临床上对afld的治疗却缺乏有针对性的靶点治疗方法，只能被动的以对症处理为主(用营养支持来防治营养不良和用糖皮质激素来控制炎症），尚无防治酒精性脂肪肝及肝损伤的特效药。目前全世界都在积极寻找防治酒精性脂肪肝及肝损伤的方法及天然产物从而应对日益严峻的酒精性脂肪肝及肝损伤相关疾病问题。因此，对传统药食两用中草药防治酒精性脂肪肝及肝损伤的开发具有极其重要的意义。

盐肤木（rhuschinensismill.）果实又名盐麸子、叛奴盐、盐梅子等，是漆树科植物盐肤木的果实。生于海拔350-2300m的石灰山灌丛、疏林中。为我国常见的野生阳性树。分布东北及云南、四川、山西、安徽、江苏、广西等地。漆树对土壤条件要求不高，常见于未耕地，也是众所周知的中国蚜虫五倍子的主体。盐肤木在中国古代各地早已用于治疗疾病。例如，盐肤木叶用于治疗炎症和腹泻；根用于治疗疟疾和黄疸；果实和种子经常用于治疗痢疾。与其他部位相比，果实不仅可以作为草药使用，还可以作为调味品和饮料使用。此外，成熟果实经常在中国的一些地方新鲜地吃。目前国内外对盐肤木果实提取物防治酒精性脂肪肝及肝损伤的相关研究未见有文献报道。

技术实现要素：

本发明目的在于提供盐肤木果实或其提取物在医药和保健食品方面的新用途，具体而言就是将盐肤木果实或其提取物应用在制备治疗和/或预防酒精性脂肪肝及肝损伤等相关疾病中新药物和新保健食品中。

本发明致力于盐肤木果实防治酒精性脂肪肝及肝损伤的实验研究，经过多重途径证实盐肤木果实或其提取物对酒精性脂肪肝及肝损伤有显著的保护作用。

本发明中盐肤木果实提取物是盐肤木果实的水提取物或醇提取物。

本发明人对盐肤木果实防治酒精性脂肪肝及肝损伤进行了系列的研究，证实了盐肤木果实提取物具有确切的肝保护功能，因此可用于防治酒精性脂肪肝及肝损伤新药和新保健食品的制备与开发。盐肤木果实提取物用于制备防治酒精性脂肪肝及肝损伤药物和保健食品具有以下这些优势：盐肤木植物可以适应各种恶劣的自然环境，在我国的分布非常的广泛，其果实价格非常的低廉；在云南等地盐肤木果实经常被用作调味品和饮品的制作原料，是一种传统药食两用的果实，安全性高；提取和制备的工艺流程简单、市场前景可观、蕴藏着巨大的社会和经济效应。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、本发明为盐肤木果实发掘了新的保健食品或医疗用途，开拓了一个新的研究领域；

2、本发明通过实验发现盐肤木果实不同提取物在较低浓度下均可以有效的阻遏酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏中脂肪颗粒的沉积，且提取物来自于用作调味料的天然植物原材料，安全性高。

附图说明

图1是酒精联合高脂饲料所致大鼠酒精性脂肪肝及盐肤木果实不同提取物干预后的肝脏病理切片的h&e染色图（h&e×200），其中a为对照组；b为模型组；c为醇提物低浓度组；d为醇提物高浓度组；e为水提物低浓度组；f为水提物高浓度组。

具体实施方式

下面结合病理切片附图和实验实例的数据来进一步的阐述本发明。这些实验的事例仅用于说明本发明，不用于限制本发明的应用范围。在阅读了本发明的记载以后，本领域的科技人员对其等效的各种改动、修改和修饰，都属于本发明权利要求所限定的范围。

酒精性脂肪肝的实例

应用灌胃酒精联合饲喂高脂饲料的方法建立酒精性脂肪肝的模型，通过动物模型实验观察盐肤木果实的醇提取物和水提取物对酒精性脂肪肝及肝损伤的防治作用。

1.实验材料

1.1动物、饲料及试剂

sd雄性大鼠，辽宁长生生物技术股份有限公司。高脂饲料，进多丰生物有限公司。56°红星二锅头，北京红星股份有限公司。试剂盒，南京建成生物科技有限公司。

1.2提取物

盐肤木果实提取物主要采用乙醇或沸水来提取其中有效成分。具体方法如下：水提取物主要模拟药典中煎熬的特性，在沸水中煮沸1小时，料液比为1:20；煮沸以后趁热离心，转速4000r/min，上清液进行抽滤，抽滤以后的样品进行浓缩，最后冻干制得，待用。

醇提取物采用质量浓度80%的乙醇溶液进行超声提取，提取温度为25℃，料液比为1:5提取时间为30min，滤渣复提一次，然后4000r/min离心取上清液浓缩冻干制得。

1.3仪器

全自动生化分析仪，深圳雷杜生命科学股份有限公司。

2.方法与结果

2.1造模

雄性大鼠都是4-8周龄的spf级sd大鼠，体重在200g左右偏差5%左右的体重。实验动物来源于辽宁长生生物技术股份有限公司，大鼠的编号为sckk（辽）2015-0001。具体是把60只老鼠分成6组（每笼10只），水提取物、醇提取物各两组；编号如下：

group1：对照组（主要以蒸馏水灌胃，n）、group2模型组（白酒灌胃，m）、group3醇提取物低浓度300mg/kg（灌酒和醇提取物，al）、group4醇提取物高浓度900mg/kg（灌酒和醇提取物，ah）、group5水提取物低浓度300mg/kg（灌酒和水提取物，wl）、group6水提取物高浓度900mg/kg（灌酒和水提取物，wh）。第一次给药前所有动物禁食12h，并且在给药前记录各个老鼠的体重（不禁水）。按照标准的大鼠饲养环境饲养大鼠（购买后，在该环境下适应七天）。造模的方式如下：每天早上9点以5ml/kg的灌胃体积，灌入对应剂量的两类提取物或是蒸馏水，然后在30min以后灌入对应体积的白酒（对照组不灌白酒，用蒸馏水代替，且白酒和提取物的总共的体积不能超过灌胃的体积）。在灌胃以后，各个组给予高脂饲料的喂养。在饲养80天以后，对所有的大鼠禁食12h，使用10%的水合氯醛麻醉大鼠，称重，取血液制成血清待测，随后进行血清生化分析；取肝脏称重，随后取肝左叶，浸没在10%的福尔马林溶液中，待后续进行h&e染色。

2.2结果

2.2.1盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠体重和肝指数的影响

表1.盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠体重和肝指数的影响

注：^*表示模型组与空白对照组相比有显著性差异（p<0.05），^#表示给药组与模型组相比有显著性差异（p<0.05）；

与空白对照组相比，高脂模型组的肝指数显著的增加（p<0.05）；而与高脂模型组相比，盐肤木果实的水提取物和醇提取物可以显著降低肝指数（p<0.05），但是最终体重各个组别之间没有显著的差异（p>0.05）。

2.2.2盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠血脂和肝功能酶的影响

表2.盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠血脂和肝功能酶的影响

注：^*表示模型组与空白对照组相比有显著性差异（p<0.05），^#表示给药组与模型组相比有显著性差异（p<0.05）；

与空白组相比，模型组血清中的甘油三脂和总胆固醇含量都显著性的上升（p<0.05）。而与模型组相比，盐肤木果实水提取物和醇提取物可以显著的降低血清中的甘油三脂和总胆固醇的含量（p<0.05）。另外，从表2中可以看出，与空白组相比，模型组血清中alt和ast含量显著升高（p<0.05），说明酒精加高脂饮食对大鼠肝脏细胞造成了明显的损伤；但是与模型组相比，各给药组的大鼠血清中alt和ast含量均显著下降（p<0.05），说明盐肤木果实提取物可以有效防治酒精造成的肝损伤，尤其是高浓度的醇提物，其对肝细胞酒精损伤的保护作用最强，alt和ast基本恢复正常。

2.2.3盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠肝脂的影响

表3.盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠肝脂的影响

注：^*表示模型组与空白对照组相比有显著性差异（p<0.05），^#表示给药组与模型组相比有显著性差异（p<0.05）；

在动物的肝脏中，与空白对照组相比，高脂模型大鼠的肝中甘油三酯和总胆固醇的含量均显著升高（p<0.05）。而与高脂模型组相比，盐肤木果实的水提取物或醇提取物处理组的甘油三酯含量均显著下降（p<0.05），且与空白对照组没有显著差异（p>0.05），这一结果与对应的肝脏切片可以相互印证，进一步证实盐肤木果实的水或醇提取物可以有效的防治酒精性脂肪肝。另外，高浓度醇提取物和低浓度水提取物可以显著降低肝脏中总胆固醇含量（p<0.05）。

2.2.4盐肤木果实提取物对酒精性脂肪肝大鼠肝组织病理情况的影响

大鼠肝脏病理切片如图1所示，在光镜下观察酒精性脂肪肝切片，空白组的大鼠切片中肝细胞的形状正常，细胞核状态正常，且肝细胞中没有明显的脂肪粒形成。模型组中，可以明显的观察到细胞核的聚集和肝细胞的损伤，不仅如此，在肝细胞中也有明显的脂肪粒形成。醇提取物的切片中酒精对肝造成的损伤大大的减少，且脂肪粒形成的很少。同样，盐肤木果实水提取物也可以显著地抑制酒精对肝细胞的损伤和脂肪粒的形成。

综上所述：可以确定盐肤木果实的提取物可以有效的抑制长期饮酒所造成的脂肪在肝细胞中的积累，且可以有效的阻止酒精对肝细胞的损伤。从而确定盐肤木果实及其提取物可以防治酒精性脂肪肝及肝损伤。