一种治疗妇科阴道炎的中药清洗液及其制备方法与流程

文档序号:16784255发布日期:2019-02-01 19:19阅读:409来源:国知局
本发明涉及医药
技术领域
,特别涉及一种治疗妇科阴道炎的中药清洗液及其制备方法。
背景技术
:阴道炎,是导致外阴阴道症状如瘙痒、灼痛、刺激和异常流液的一组病症。正常健康妇女阴道由于解剖组织的特点对病原体的侵入有自然防御功能。如阴道口的闭合,阴道前后壁紧贴,阴道上皮细胞在雌激素的影响下的增生和表层细胞角化,阴道酸碱度保持平衡,使适应碱性的病原体的繁殖受到抑制,而颈管黏液呈碱性,当阴道的自然防御功能受到破坏时,病原体易于侵入,导致阴道炎症。正常情况下有需氧菌及厌氧菌寄居在阴道内,形成正常的阴道菌群。任何原因将阴道与菌群之间的生态平衡打破,也可形成条件致病菌。临床上常见有:细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎、老年性阴道炎、幼女性阴道炎。金银花,自古被誉为清热解毒的良药。一是抗菌普及,对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾、伤寒、双球菌、肺炎双球菌、绿脓以及流感病毒等都有明显抑制作用。二是有增强免疫的功能,能促进转化,增强白细胞的吞噬功能。三是抗炎、解热,对炎症有明显抑制作用。苦参,味苦,寒。有清热燥湿,杀虫,利尿之功。用于热痢,便血,黄疸尿闭,赤白带下,阴肿阴痒,湿疹,湿疮,皮肤瘙痒,疥癣麻风,外治滴虫性阴道炎。苦参对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、乙型链球菌以及金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用。黄芩,味苦、性寒,有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。黄芩的临床抗菌性比黄连好,对痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性琏球菌、肺炎双球菌、白喉杆菌等有抑制作用,而且不产生抗药性。黄柏,为芸香科植物黄皮树的干燥树皮。有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮的功效。用于湿热泻痢,黄疸尿赤,带下阴痒,热淋涩痛,脚气痿蹙,骨蒸劳热,盗汗,遗精,疮疡肿毒,湿疹湿疮。黄柏对多种革兰氏阳性细菌具有良好的抗菌作用。申请号为201210357058.2的中国专利公开了一种治疗妇女带下病的药物洗液及制备方法,所述药物洗液由以下重量配比的中药原料药制备而成的:重楼16-22份、蛇床子18-24份、花椒12-18份、薄荷脑2-6份、栀子10-16份、芡实3-9份、何首乌3-7份、槟榔4-10份、茵陈18-26份、苦参15-21份、独活6-10份、百部13-19份、玄参8-12份、金银花13-19份、地肤子12-18份、白鲜皮6-10份、土荆皮14-20份、黄芩11-17份、赤芍6-12份、艾叶11-17份、石菖蒲9-13份、黄柏10-16份、苍术10-18份。申请号为201510985104.7的中国专利公开了一种治疗妇科疾病的复方苦参洗剂及其制备方法,它以20g苦参、10g黄柏、20g蛇床子、10g百部、10g鸦胆子、10g地肤子、15g白鲜皮、10g金银花、10g野菊花、10g土荆皮、10g石菖蒲、10g苍术、10g防风、10g黄芩和10g甘草为原料,经提取、过滤、浓缩、配制而成。现市场上有各种以中草药为原料制造的治疗妇科阴道炎的中药清洗液,但目前为止,尚未出现以金银花配以苦参、黄芩、黄柏制备的中药清洗液。技术实现要素:有鉴于此,本发明旨在提出一种治疗妇科阴道炎的中药清洗液及其制备方法,以通过诸药合用,迅速改善阴道炎的症状,替代西药的使用,减少本病的反复发作,以满足临床需求。为达到上述目的,本发明的技术方案是这样实现的:一种治疗妇科阴道炎的中药清洗液,所述清洗液由以下重量份的原料制成:金银花5~30份,苦参1~20份,黄芩1~10份,黄柏1~10份。进一步的,所述清洗液由以下重量份的原料制成:金银花15~25份,苦参5~19份,黄芩2~10份,黄柏5~9份。进一步的,所述金银花与黄柏的重量比为3:1。进一步的,所述清洗液中金银花、苦参、黄芩、黄柏的重量比为3:2:1:1。一种上述治疗妇科阴道炎的中药清洗液的制备方法,包括:(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份2~15倍量的水,浸泡20~60min,95℃~100℃煎煮1h~3h,煎煮1~3次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。进一步的,所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液的制备方法,包括:(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份5~10倍量的水,浸泡30~40min,100℃微沸煎煮1h~2h,煎煮1~2次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用300~400目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。进一步的,包括:(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的金银花和黄柏投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份5倍量的水,浸泡40min,100℃微沸煎煮1h,冷却至室温即得提取液a;(3)将苦参和黄芩投入到另一多功能提取罐中,加入金银花重量份5倍量的水,100℃微沸煎煮1h,冷却至室温即得提取液b;(4)将所述提取液a和所述提取液b分别过滤后混合,50~60℃煎煮0.5h后,冷却至室温,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却至室温,即得所述治疗妇科阴道炎的中药清洗液。相对于现有技术,本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液及其制备方法具有以下优势:(1)本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液配伍合理、诸药合用,能够燥湿止痒、清热解毒、抗菌消炎,迅速改善阴道炎的症状,无毒副作用,安全性高,具有良好的抗炎、抑菌、止痒作用,可以替代西药的使用,能够有效减少本病的反复发作。(2)本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液中,金银花与黄柏的重量比存在独特的关联性,当金银花与黄柏的重量比为3:1时,本发明所述清洗液对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用更佳,尤其是对金黄色葡萄球菌的抑制作用十分明显。(3)本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液中,当金银花、苦参、黄芩、黄柏的重量比为3:2:1:1时,所述中药清洗液的抗炎作用更优。(3)本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液的制备方法采用四味纯天然中药炮制而成,药源丰富,组分配伍合理、科学,工艺稳定可控,能够有效获取方剂中药效成分,使药物性能稳定、可靠,另外,所述方法简单、便捷,不但提高了生产效率,而且有效降低了生产成本。(4)本发明所述的治疗妇科阴道炎的中药清洗液的制备方法通过采用金银花和黄柏制备提取液a、通过苦参和黄芩制备提取液b,再将提取液a和提取液b混合制备清洗液,使得所述中药清洗液的止痒作用得到极大提高,同时可确保所述中药清洗液具有较好的清热燥湿效果。具体实施方式下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。实施例1:一、配方(1)原料:金银花5kg,苦参20kg,黄芩2kg,黄柏5kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份2倍量的水,浸泡20min,95℃煎煮1h,煎煮1次,即得提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用300目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例2:一、配方(1)原料:金银花30kg,苦参5kg,黄芩1kg,黄柏10kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份15倍量的水,浸泡60min,100℃微沸煎煮3h,煎煮3次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用300目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例3:一、配方(1)原料:金银花25kg,苦参1kg,黄芩10kg,黄柏1kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份10倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用350目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例4:一、配方(1)原料:金银花15kg,苦参19kg,黄芩5kg,黄柏9kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份5倍量的水,浸泡40min,100℃微沸煎煮1.5h,煎煮1次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用400目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例5:一、配方(1)原料:金银花15kg,苦参6kg,黄芩5kg,黄柏5kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份8倍量的水,浸泡35min,100℃微沸煎煮1h,煎煮1次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用300目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例6:一、配方(1)原料:金银花18kg,苦参7kg,黄芩4kg,黄柏6kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份10倍量的水,浸泡40min,100℃微沸煎煮1h,煎煮1次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用400目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例7:一、配方(1)原料:金银花18kg,苦参12kg,黄芩6kg,黄柏6kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的药材投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份10倍量的水,浸泡40min,100℃微沸煎煮1h,煎煮1次,合并提取液,备用;(3)将所述提取液冷却至室温,用400目筛过滤,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却,即得治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实施例8:一、配方(1)原料:金银花18kg,苦参12kg,黄芩6kg,黄柏6kg。二、制备方法(1)按照配方要求称取各药材;(2)将称取的金银花和黄柏投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份5倍量的水,浸泡40min,100℃微沸煎煮1h,冷却至室温即得提取液a;(3)将苦参和黄芩投入到另一多功能提取罐中,加入金银花重量份5倍量的水,100℃微沸煎煮1h,冷却至室温即得提取液b;(4)将所述提取液a和所述提取液b分别过滤后混合,50-60℃煎煮0.5h后,冷却至室温,灌封,130℃高温灭菌10秒,冷却至室温,即得所述治疗妇科阴道炎的中药清洗液。实验例1:药物急毒性和药物长期毒性实验采用短期被动皮肤过敏实验进行药物急毒性研究、采用长期血管刺激性实验进行药物长期毒性研究,进而对本发明所述清洗液的安全性进行研究。一、实验材料:(1)实验动物sd大鼠,雌雄各半,体重250~300g(spf级),大耳白家兔,体重2.5±0.5kg(普通级),对每只动物进行编号和称重,检疫观察3d后进行实验。对实验动物进行外观体征、行为活动、摄食量和体重观察。饲养环境,室温19~26℃,日温差≤4℃,相对湿度40%~70%,昼夜明暗交替时间12h/12h。实验用动物均购自中国医学科学院实验动物中心。(2)实验样品与试剂实验试剂:卵白蛋白,艾美捷科技有限公司;实验样品:d1:金银花清洗液:金银花40kg投入到多功能提取罐中,加入金银花重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得金银花清洗液。d2:黄芩清洗液:黄芩40kg投入到多功能提取罐中,加入黄芩重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得黄芩清洗液。d3:苦参清洗液:苦参40kg投入到多功能提取罐中,加入苦参重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得苦参清洗液。d4:黄柏清洗液:黄柏40kg投入到多功能提取罐中,加入黄柏重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得黄柏清洗液。d5:黄芩、苦参、黄柏组合清洗液:黄芩10kg、苦参20kg、黄柏10kg投入到多功能提取罐中,加入总重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得黄芩、苦参、黄柏组合清洗液。d6:金银花、苦参、黄柏组合清洗液:金银花30kg、苦参20kg、黄柏10kg投入到多功能提取罐中,加入总重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得金银花、苦参、黄柏组合清洗液。d7:金银花、黄芩、黄柏组合清洗液:金银花30kg、黄芩10kg、黄柏10kg投入到多功能提取罐中,加入总重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得金银花、黄芩、黄柏组合清洗液。d8:金银花、黄芩、苦参组合清洗液:金银花30kg、黄芩10kg、苦参20kg投入到多功能提取罐中,加入总重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得金银花、黄芩、苦参组合清洗液。d9:本发明实施例1清洗液:采用实施例1的配方与制法制备。d10:本发明实施例2清洗液:采用实施例3的配方与制法制备。d11:本发明实施例3清洗液:采用实施例5的配方与制法制备。d12:本发明实施例4清洗液:采用实施例6的配方与制法制备。d13:本发明实施例5清洗液:采用实施例7的配方与制法制备。d14:本发明实施例6清洗液:采用实施例8的配方与制法制备。d15(对比组):以201210357058.2实施例1的方式制备清洗液。d16(对比组):以201510985104.7的具体实施方式制备清洗液。d17:金银花、黄柏组合清洗液:金银花30kg、黄柏10kg投入到多功能提取罐中,加入总重量份8倍量的水,浸泡30min,100℃微沸煎煮2h,煎煮2次,合并提取液,将提取液冷却至室温,过滤,灌封,高温灭菌,冷却,即得金银花、黄柏组合清洗液。二、实验方法(1)短期被动皮肤过敏实验:将所述样品d1~d16的清洗液浓缩成生药浓度为0.80g/ml溶液,4℃保存、备用,使用时恢复至室温。取sd大鼠54只,随机分为18组:阳性对照组、阴性对照组、d1~d16清洗液组,每组3只。对各组sd大鼠腹腔分别注射相应药物致敏,阳性对照组(卵白蛋白3mg/只)、阴性对照组(0.9%氯化钠注射液)、d1~d16清洗液组(相应清洗液3mg/只),隔日1次,共5次。末次致敏注射后第12天采血,血液2000r/min离心10min,分离血清,-20℃保存,2周内备用。另取sd大鼠54只随机分为18组:阳性对照组、阴性对照组、d1~d16清洗液组,每组3只。各sd大鼠两侧背部脱毛3×4cm2,上述各组抗血清用生理盐水稀释成1:2和1:8,各取0.1ml分别皮内注射于相应组大鼠背部左右两侧。24h后各组静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原加等量的0.5%伊文思蓝染料共1ml激发。激发20min后各组动物腹主动脉采血,离心取血清测定血清ige含量,采血后即刻处死动物,测量皮肤内层的蓝色斑点大小,直径>5mm者为阳性。(2)长期血管刺激性实验:将所述样品d9、d15和d16的清洗液分别浓缩成生药浓度为0.80g/ml、0.5g/ml、0.2g/ml的溶液,4℃保存、备用,使用时恢复至室温。取大耳白家兔18只,随机分为9组,分组情况见表1所示。按照表1所示,按0.5ml/kg体重,向各组家兔耳缘静脉左耳和右耳滴注药物,每天给药1次,连续14d,每天给药前以及末次给药后48h对动物和注射部位进行肉眼观察,观察记录注射部位有无红肿、充血等刺激现象。末次给药后48h每组处死半数动物,以耳缘静脉注射点至向心方向(避开注射部位)2cm,连续取3段血管连同周围组织,每段1cm,用10%甲醛溶液固定,做病理组织学检查,观察静脉血管组织有无炎症反应,甚至变性、坏死等显著性刺激反应。剩余动物继续观察14d后再进行组织病理学检查,以了解刺激性反应的可逆性。表1长期血管刺激性实验要求三、实验结果(1)短期被动皮肤过敏实验:激发后,各组大鼠左右两侧蓝斑情况和血清ige含量见表2,经过统计学计算,实验结果具有统计学意义(p小于0.01)。表2药物急毒性实验结果通过上表2可得:与阴性对照组相比,阳性对照组血清ige含量明显增高(p<0.01),d1~d14各清洗液组血清ige含量未见明显改变,d15与d16两组血清ige含量略有升高。以上结果表明在该实验条件下本发明清洗液未引起大鼠同种被动皮肤过敏反应,说明本发明中药清洗液短期大剂量使用安全可靠。而与d15与d16清洗液组相比,说明本发明中药清洗液的药物急毒性更低,短期大剂量使用更加安全可靠。(2)长期血管刺激性实验结果见表3所示,经过统计学计算,实验结果具有统计学意义(p小于0.01)。表3长期血管刺激性实验结果通过上表3可得:在实验期间,本发明所述清洗液d9高、中、低剂量组的实验动物的左耳和右耳给药局部血管均未见任何刺激反应症状,刺激反应评分为0分;病理学检查结果显示给药结束及恢复期结束时,实验动物0.9%氯化钠注射液对照侧和高、中、低剂量组血管及周围组织均未见明显异常。说明在本次试验条件下,向家兔静脉注射本发明所述清洗液d9高、中、低剂量,对注射部位无刺激性,说明本发明洗液长期使用安全。d15高剂量组在实验过程中左耳见红肿、充血刺激现象,给药结束时左耳有炎症反应,且恢复期结束时左耳仍有炎症反应,刺激性反应具有不可逆性。d16高剂量组和d16中剂量组中均发现:在实验过程中左耳见红肿、充血刺激现象,给药结束时左耳有炎症反应,但恢复期结束时左耳炎症反应消失,刺激性反应具有可逆性。通过上述结果,可以得到:本次试验条件下,本发明所述清洗液d9与d15、d16相比,对注射部位刺激性更弱,不易引发炎症,本发明洗液长期使用更加安全。实验例2:清洗液抗炎作用研究一、实验试剂与样品:(1)实验试剂:组织胺:中国医科院药物研究所;二甲苯:北京精细化工厂;伊文氏兰:西德serva公司生产,上海化学试剂厂分装;0.9%生理盐水:北京森尤斯医药有限公司;洁尔阴洗液:四川恩威制药有限公司。(2)实验样品:将实验例1所得的样品d1~d16分别浓缩至含生药浓度为0.80g/ml的溶液,然后制备湿巾,备用。d18:将洁尔阴洗液稀释10倍后即得d18清洗液,备用。二、实验动物:昆明种雄性小鼠、体重25-30g,购自中国医学科学院实验动物中心。三、实验方法:取体重25-30g,昆明种雄性小鼠36只,随机分为18组:对照组、d1~d16清洗液组、洁尔阴洗液组,每组2只。分别于对照组每只小鼠右耳廓处用棉球涂抹生理盐水、于d1~d16清洗液组每只小鼠右耳廓处用相应清洗液制备的湿巾涂抹、于洁尔阴洗液组每只小鼠右耳廓处涂抹d18清洗液。10分钟一次,连续6次,共计1小时。然后将100%二甲苯涂于各小鼠右耳前后两面,分别于致炎后0.5h、l.5h、2.5h对各组小鼠再涂抹3次上述三种药液(对照组,生理盐水;d1~d16清洗液组,相应清洗液制备的湿巾;洁尔阴洗液组,d18清洗液),左耳用等量生理盐水同期对照;致炎后4小时将动物断头处死,沿耳廓基线剪下两耳,将两耳用直径打孔机打下耳片称重,每鼠两耳片重量之差即为肿胀度。四、实验结果:清洗液抗炎作用研究结果见表4所示,经过统计学计算,实验结果具有统计学意义(p小于0.01)。表4清洗液抗炎作用研究结果组别体重左耳重g右耳重g两耳差值g对照组41.83±3.027.66±0.039.77±0.272.11±0.92d1清洗液组41.52±2.987.62±0.029.46±0.211.84±0.85d2清洗液组41.76±2.347.51±0.039.47±0.181.96±0.76d3清洗液组41.27±2.157.23±0.069.29±0.142.06±0.56d4清洗液组41.42±2.077.29±0.079.30±0.252.01±0.27d5清洗液组41.63±2.197.82±0.029.56±0.181.74±0.31d6清洗液组41.94±2.877.90±0.089.86±0.171.96±0.29d7清洗液组41.25±3.077.15±0.048.83±0.271.68±0.46d8清洗液组41.57±3.227.24±0.019.11±0.141.87±0.51d9清洗液组41.61±3.417.36±0.058.23±0.120.87±0.34d10清洗液组41.18±2.087.31±0.048.07±0.250.76±0.32d11清洗液组41.72±2.547.84±0.068.25±0.210.41±0.27d12清洗液组41.69±2.617.64±0.048.07±0.160.43±0.35d13清洗液组41.17±2.777.61±0.037.82±0.180.21±0.26d14清洗液组41.25±3.797.28±0.077.47±0.210.19±0.22d15清洗液组41.23±3.247.26±0.028.22±0.170.96±0.32d16清洗液组41.84±3.577.45±0.038.40±0.190.95±0.29洁尔阴洗液组41.16±3.547.59±0.028.48±0.130.89±0.35通过表4可得:18组相互间小鼠体重比均为p>0.05,无显著性差异,18组相互间左耳重相比均无显著性差异。d1~d4清洗液组与对照组相比,两耳差值(肿胀度)无显著差异;d5~d8清洗液组的两耳差值(肿胀度)略低于对照组;d9~d14清洗液组的两耳差值(肿胀度)明显低于对照组;且d9~d14清洗液组的两耳差值(肿胀度)低于d15清洗液组、d16清洗液组和洁尔阴洗液组,说明本发明所述的d9~d14清洗液组抗炎作用优于d15清洗液组、d16清洗液组和洁尔阴洗液组。进一步,本发明d11~d14清洗液组的两耳差值(肿胀度)与其他组相比较低,所述本发明d11~d14清洗液组的抗炎作用较优。更进一步,申请人意外的发现,如本发明d13和d14清洗液组的抗炎作用研究结果所示,当金银花、苦参、黄芩、黄柏的重量比为3:2:1:1时,本发明所述的清洗液抗炎作用更优。实验例3:清洗液体外抗菌作用研究一、实验样品及试剂(1)实验试剂:金黄色葡萄球菌标准菌株atcc25923、大肠埃希氏菌标准菌株atcc25922、白色念珠菌耐氟康唑菌株(mic>16mg/l)。(2)实验样品:将实验例1所得的样品d5~d16分别浓缩至含生药浓度为0.80g/ml的溶液,然后制备湿巾,备用。二、实验方法采用药基法,将d5~d16的清洗液分别浓缩成浸膏,用少量体积分数80%乙醇溶液助溶,再用蒸馏水配成100g/l的药物母液,过滤除菌后,将母液按比例加入融化的mh琼脂(白色念珠菌用沙氏琼脂),混匀铺板,得到每1ml含药量分别为10,5,4,3,2,1,0.5,0.25,0.125mg的含药琼脂平板。用微量加样器逐个点种菌液(含菌量约107cfu/ml)1μl,形成的菌液圈直径为5mm左右,菌液干后置37℃孵育18h,菌落生长被完全抑制的最低药物浓度为该药对检测菌的mic值。每个受试药样平行做3次实验,以不含药的mh琼脂平板作对照组。体外联合抑菌实验结果,见表5,经过统计学计算,实验结果具有统计学意义(p小于0.01)。表5体外联合抑菌实验结果由上表5可得:本发明所述清洗液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌均有明显抑制作用。对比本发明所述d5~d8清洗液组与d9~d14清洗液组可得:本发明所述d9~d14清洗液组对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌的抑制作用更加明显。对比d9~d14清洗液组与d15~d16清洗液组可得:各清洗液组对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌均有明显抑制作用,且d11~d14清洗液组对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用更佳,尤其是对金黄色葡萄球菌的抑制作用十分明显。申请人在研究过程中发现:金银花与黄柏的重量比在此方中存在独特的关联性,当金银花与黄柏的重量比为3:1时,如d11~d14清洗液组的抑菌实验结果所示,本发明所述清洗液对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用更佳,尤其是对金黄色葡萄球菌的抑制作用十分明显。实验例4:清洗液止痒作用研究一、实验样品及试剂(1)实验试剂:0.9%生理盐水:北京森尤斯医药有限公司;磷酸组织胺:东京化成工业株式会社;洁尔阴洗液:四川恩威制药有限公司。(2)实验样品:将实验例1所得的样品d6、d9~d17分别浓缩至含生药浓度为0.80g/ml的溶液,然后制备湿巾,备用。d18:将洁尔阴洗液稀释10倍后即得d18清洗液。(3)实验动物:豚鼠,雌雄各半,体重350±50g(普通级),实验用动物均购自中国医学科学院实验动物中心。二、实验方法将48只豚鼠随机分12组,包括:对照组、d6清洗液组、d9~d18清洗液组,每组4只,分别于各组豚鼠的右后足背剪毛部位湿敷(胶带固定)生理盐水(对照组)、稀释10倍后的洁尔阴洗液(d18清洗液组)、对应样品制得的清洗液湿巾(d6清洗液组、d9~d17清洗液组),10分钟加液一次,连续6次,共计1小时;在各部位滴0.01%的磷酸组织胺50μl/爪,以后每隔3min在同部位再滴浓度递增为0.02%、0.03%、0.04%等量的磷酸组织胺,直至豚鼠出现舔足为止,以此段时间内给各动物所滴的磷酸组织胺的总量为致痒阈,并将每组内各动物的致痒阈和皮肤厚度进行分析。三、实验结果本发明所述清洗液止痒作用研究结果见表6,经过统计学计算,实验结果具有统计学意义(p小于0.01)。表6止痒作用研究结果由表6可得:d6、d9~d18清洗液组与对照组相比,致痒阈有明显差异,说明d6、d9~d18清洗液组均具有明显的止痒作用。对比本发明所述d9~d14清洗液组可得,d11~d14清洗液组的止痒作用明显优于d9~d10清洗液组。对比d11~d14清洗液组和d15、d16、d18清洗液组可得,d11~d14清洗液组的止痒作用优于d15、d16、d18清洗液组。对比d11~d14各清洗液组可得,d14清洗液组的止痒作用得到了大幅提高,申请人进行了进一步研究,通过d6、d17、d9、d14的止痒作用实验结果发现:虽然已知的是,在所述清洗液中,起止痒作用的成分主要为苦参,但若将金银花、黄柏和苦参一起煎煮,却不利于苦参止痒作用的发挥,在止痒作用实验结果中,d6的止痒作用与d17的止痒作用相差并不明显,而当将金银花、苦参、黄芩、黄柏一起煎煮时,苦参的止痒作用能够得到一定程度的发挥。进一步的,当将金银花和黄柏单独煎煮,之后与苦参和黄芩的煎煮液混合时,可进一步有效促进所述清洗液中苦参止痒作用的发挥,提高清洗液的止痒效果。此外,申请人研究发现,当将金银花和黄柏单独煎煮,之后与苦参和黄芩的煎煮液混合时,所述清洗液不但具有较好的止痒作用,而且可同时具有良好的清热燥湿效果。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12
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