本发明属于家禽养殖技术领域，特别涉及一种预防家禽脂肪肝的组合药物及其制备方法。
背景技术：
家禽脂肪肝综合征是对养殖户有着严重影响的疾病之一，患上脂肪肝综合征发病鸡群的产蛋效率相对于正常鸡群下降30%，其死亡率为2%，同时也有个别病禽出现肝破裂、出血、肝功能障碍等死亡症状。脂肪肝成因以近年来提出的以氧化应激和脂质过氧化为轴心的“二次打击”假设为依据，“二次打击”学说认为：初次打击主要为胰岛素抵抗（insulinresistance，ir），ir通过促进外周脂肪分解和高胰岛素血症引起肝细胞脂肪变性，为氧应激提供了足够的反应基质；第二次打击主要ros增多，导致脂质过氧化，有证据表明，代谢综合征的患者体内血管的氧化应激明显的增强，在综合征早期，内皮的功能紊乱。
实际生产中，该病以预防为主，发病时辅以药物治疗。目前，无论是学术界还是产业界，对于家禽脂肪肝的研究基本集中在家禽营养和饲料领域，但是时至今日，脂肪肝的病症仍然在各主要家禽中频繁出现。
发明专利cn201310606940.0，一种治疗禽类脂肪肝综合征的冲剂及其制备方法，主要组分组成，并按重量份数计为，原料组成如下：柴胡500份，菟丝子、枸杞、当归各300份，五味子200份，板蓝根400份，牛膝、茯苓、骨补脂各150份，绿豆200份，将柴胡、菟丝子、枸杞、当归、板蓝根、牛膝、茯苓、骨补脂、绿豆混合均匀，加水煎煮两次，每次2小时，合并煎液，滤过，温度保持60℃减压浓缩至相对密度为1.25～1.30g/ml的浸膏，备用；五味子份，粉碎成粗粉，用75％酒精回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，回收酒精，温度保持60℃减压浓缩至相对密度为1.25～1.30g/ml的浸膏；浸膏合并，粉碎，加入适量辅料，制颗粒，即得。该发明制作的治疗禽类脂肪肝综合征的冲剂工艺控制简单，生物利用度高，药效好，疗效快，成本低。
发明专利cn201310400131.4，治疗家禽脂肪肝出血综合征的纯中药组合物及其制备方法，其制备方法按如下步骤进行：(1)将组方中的各种成分分别超微粉碎后过700目筛；(2)按重量称取香薷15~35份、白术15~35份、茯苓15~45份、郁李仁15~35份、陈皮15~45份、牛蒡子15~45份，混合5~10分钟至均匀；(3)按重量称取甘草15~45份、白及15~45份、黄芪15~45份、酸枣仁15~45份、远志15~45份、赤小豆15~45份，混合5~10分钟至均匀；(4)合并上述(2)、(3)步骤制得的组合物，继续混合10-15分钟至均匀即成。该发明的有益效果是：组方合理，制备简单，纯中药组合物无毒副作用、无药物残留，疗效非常显著，临床证明对治疗家禽脂肪肝出血综合征有特效。
现有技术中，还未能研发出能完全治愈脂肪肝的药物，对于家禽脂肪肝也只能以预防为主，以中药物作为治疗脂肪肝的药剂具有药效好、抵抗性小等特点，是学术研究者的研究热点，但是以中药为预防和治疗家禽脂肪肝药物还是存在着家禽食欲低、吸收难等缺点。
技术实现要素：
针对现有技术中预防和治疗家禽脂肪肝的药物研究少，药效作用低、功能少和吸收率不高的特点，本发明提供一种预防家禽脂肪的药物组合及其制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种预防家禽脂肪肝的药物组合，由以下重量份数比组分制备而得：茄子加工粉末5~10份、紫薯加工粉末10~15份、大豆多肽5~10份、中药挥发油12~18份、葡萄皮浸提液1~4份、沙芥提取物2~8份、硫酸化壳聚糖溶液8~16份、海藻酸钠10~14份、木糖醇5~10份；
由以下步骤制备而得：
（1）取葡萄皮浸提液和沙芥提取物加入到中药挥发油中，50~60℃水浴加热40~50min，然后加入硫酸化壳聚糖溶液混合均匀，得到混合液1；
（2）将大豆多肽加入到混合液1中，于涡旋振荡器上振荡30~50min，然后加入海藻酸钠进行混合得到混合液2，最后将混合液2快速放入乳化器中进行乳化1~2h，离心收集得到乳化液；
（3）将茄子加工粉末和紫薯加工粉末进行混合，再加入乳化液和木糖醇，继续混匀10~15min，即得到预防家禽脂肪肝的药物组合。
本发明利用中药剂结合葡萄酿酒废弃物葡萄皮浸提液制备成预防家禽脂肪肝的药物组合，利用硫酸化壳聚糖衍生物与大豆多肽交联，并在海藻酸钠的作用下包裹沙芥提取物、葡萄皮浸提物和中药挥发油，再与茄子和紫薯加工粉混合制备成预防家禽脂肪肝的药物组合，提高了家禽肝细胞对各治疗脂肪肝的药物的吸收作用，降低了多肽口服的限制，促进了家禽的胃消化能力，提高家禽的免疫力，使得患病家禽能更快的恢复到正常状况。中药挥发油白芷挥发油和薄荷油能提高细胞的吸收能力，促进药物的吸收，紫薯和茄子加工粉末协同提高脂质的抗氧化作用，降低脂质过氧化导致肝脏损伤，沙芥提取物能促进胃部平滑肌舒张，提高胃部动力，促进消化吸收，使机体能对药物更好的进行吸收。本发明的药物组合原料利用率高，原料来源广，均以天然物质作为基础，绿色环保，具有很好的效益。
研究表明，大豆蛋白具有够降低血清胆固醇含量的作用，与大豆蛋白相比，大豆多肽具有更为显著的降低血清胆固醇和肝脏胆固醇的作用，大豆多肽可能通过阻碍肠道内胆固醇吸收，并促使其排除体外的机制，降低了血清和肝组织胆固醇的含量，摄入适量的大豆多肽能够显著降低血清胆固醇和甘油三酯的含量；大豆多肽具有更强的促进能量代谢的效果，比仅仅用低热量食品是更能加速皮下脂肪的减少，这是因为大豆多肽的摄入促进了基础代谢，使食后发热量大大增加，保证了能量代谢更快的进行；但是多肽受口服吸收的限制，由于消化酶的降解作用及消化道黏膜的屏障作用等影响，多肽类药物的口服生物利用度较低、半衰期较短，本发明利用硫酸化壳聚糖与大豆多肽交联，包裹中药挥发油促进多肽的吸收速率，使得多肽不受口服的限制，能更加有效的发挥生物作用，另一方面，多肽交联后的硫酸化壳聚糖具有更好的药物包容性，能负载更多的药量以利于对肝细胞进行保护作用，同时改善细胞吸收效率，更快的发挥药效。
作为本发明的进一步改进，所述的紫薯加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将紫薯洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成紫薯粉末；
（2）按照料液比为1:(6~15)在紫薯粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至80~90℃，同时在50w、40khz超声下提取30~50min，然后在4000~10000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到紫薯加工粉末。
作为本发明的进一步改进，所述的茄子加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将茄子洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成茄子粉末；
（2）按照料液比为1:(6~15)在茄子粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至80~90℃，同时在50w、40khz超声下提取30~50min，然后在4000~10000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到茄子加工粉末。
茄子纤维中所含有的抑角苷也具有降低胆固醇的功效，同时富含维生素p，能改善微细血管脆性，防止小血管出血，有效改善家禽脂肪肝出血症状，茄子和紫薯中含有丰富的抗氧化物质花青素，两者在一定比例混合使用能提高抗氧化性；紫薯富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质及膳食纤维等，能够有效预防动脉硬化，修补心肌，增强机体免疫力，可以有效改善脂肪肝家禽的肝出血症状，同时能改善患病家禽的消化系统，使家禽能提高进食效率，加速症状愈合；茄子和紫薯混合后抗氧化作用增强，随着两者比例的增加，协同率逐渐降低，出现抗氧化拮抗作用，本发明经过实验发现，茄子加工粉末和紫薯加工粉末用量比为1:(1.5~2)时抗氧化作用一直处于增强趋势。
作为本发明的进一步改进，所述的中药挥发油为白芷挥发油、薄荷油中的一种。
中药挥发性成分广泛存在于菊科、芸香科、伞形科、姜科等科属植物中，具有抗菌、抗炎、抗癌、抗病毒等生物活性，主要应用于心脑血管系统、中枢神经系统、呼吸系统、胃肠道系统等疾病治疗，含有挥发性成分的中药大多具有芳香开窍、引药上行的功效。研究表明，中药挥发性成分对相伍成分的吸收及生物利用度存在不同程度的影响，白芷挥发油和薄荷油能增强细胞膜的流动性、促进细胞膜孔形成从而提高膜通透性，从而使得大豆多肽、葡萄皮浸提物和沙芥提取物能被肝细胞更快的吸收，起到保护肝脏的作用从而预防脂肪肝。
作为本发明的进一步改进，所述的硫酸化壳聚糖溶液是将硫酸化壳聚糖溶于生理盐水制备而成，浓度为50~100mg/ml。
硫酸化壳聚糖溶液可以通过降低血脂水平来使肝内的脂肪沉积得到改善，以及降低ast、alt水平来有效保护肝功能，提高紫薯和茄子的抗氧化能力，减轻肝脏脂肪沉积所造成的脂质过氧化性损害，防治肝纤维化的形成，抑制脂肪肝的恶化；壳聚糖的用量影响了药物的传递速率，过多的用量会使黏液层阻碍作用加大，降低了肽的流动性，从而导致葡萄皮提取液、沙芥提取物中的活性物质传递速率下降。
作为本发明的进一步改进，所述的葡萄皮浸提液制备方法如下：
（1）取酿酒后分离的葡萄皮渣，干燥粉碎过40目筛，得到葡萄皮粉；
（2）在葡萄皮粉中按照料液比为1:(20~25)加入水，用柠檬酸调节ph至1~2，加热至70℃保温水解2~3h，然后趁热用100目尼龙布过滤，即得到葡萄皮浸提液。
膳食纤维是一类在人体中难以被酶解消化的高分子多糖，具有，具有防止胆结石、排除体内有害金属离子、防止糖尿病、降低血清及胆固醇、防止高血压和心脏病等作用，葡萄皮中的总膳食纤维占皮渣干质量的75%，可溶性膳食纤维含量占总膳食纤维的15%，是一种预防脂肪肝的有效物质；
作为本发明的进一步改进，所述的沙芥提取物浓度为20~200mg/ml，制备方法如下：
（1）取新鲜的沙芥，剪去其根部保留地上部分，清洗干净后置于烘箱中60℃鼓风干燥2~3h，然后将其粉碎得到沙芥粉；
（2）将沙芥粉按照料液比为1:(6~8)加入体积分数为95%的乙醇，80~100℃下加热回流提取3次，2h/次，过滤合并滤液，得到滤液1；
（3）在步骤（2）所得残渣中按照料液比1:(6~8)加入体积分数50%的乙醇，按照步骤（2）的方法进行提取，得到滤液2；
（4）将滤液1和滤液2合并，置于旋转蒸发仪浓缩成为浸膏，挥发干燥得到沙芥提取物；
（5）将沙芥提取物溶解于体积浓度为0.03%的二甲基亚砜中制备成浓度为20~200mg/ml的溶液。
沙芥能减轻肝组织氧化应激和脂质过氧化反应，纠正脂质代谢紊乱，改善肝组织炎症损伤，同时能够通过抗脂质过氧化反应，提高肝细胞的抗氧化能力，促使氧化与抗氧化之间的动态平衡恢复，进而保护肝细胞结构和功能的完整，最终达到治疗脂肪肝的作用；同时沙芥舒张结肠平滑肌的作用，促进胃排空和小肠推进率，促进胃动力，从而提高家禽对药物的吸收效率，提高药物作用效率。
本发明的有益效果：
1、本发明制备的预防家禽脂肪肝的药物组合搭配合理，相互促进，提高了家禽对脂肪肝的抵抗能力，改善了消化系统，促进药物吸收，能使患病家禽也能有效吸收药物，提高家禽的胃动力和免疫力系统，使得家禽能更好的抵抗脂肪肝与治疗脂肪肝，具有很好的经济效益。
2、本发明制备的预防家禽脂肪肝的药物组合原料均为天然物质，相互之间协同促进，易于吸收，改善了葡萄酿酒废弃物的处理问题，原料利用率高，符合可持续循环发展的理念，绿色环保，具有很好的发展前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步说明。
实施例1
（1）取葡萄皮浸提液1份和浓度为20mg/ml的沙芥提取物2份加入到白芷挥发油12份中，50℃水浴加热40min，然后加入浓度为100mg/ml的硫酸化壳聚糖溶液8份混合均匀，得到混合液1；
（2）将大豆多肽5份加入到混合液1中，于涡旋振荡器上振荡30min，然后加入海藻酸钠10份进行混合得到混合液2，最后将混合液2快速放入乳化器中进行乳化1h，离心收集得到乳化液；
（3）将茄子加工粉末10份和紫薯加工粉末10份进行混合，再加入乳化液和木糖醇5份，继续混匀10min，即得到预防家禽脂肪肝的药物组合。
所述的紫薯加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将紫薯洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成紫薯粉末；
（2）按照料液比为1:6在紫薯粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至80℃，同时在50w、40khz超声下提取30min，然后在4000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到紫薯加工粉末。
所述的茄子加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将茄子洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成茄子粉末；
（2）按照料液比为1:15在茄子粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至90℃，同时在50w、40khz超声下提取50min，然后在10000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到茄子加工粉末。
所述的葡萄皮浸提液制备方法如下：
（1）取酿酒后分离的葡萄皮渣，干燥粉碎过40目筛，得到葡萄皮粉；
（2）在葡萄皮粉中按照料液比为1:20加入水，用柠檬酸调节ph至2，加热至70℃保温水解2h，然后趁热用100目尼龙布过滤，即得到葡萄皮浸提液。
所述的沙芥提取物制备方法如下：
（1）取新鲜的沙芥，剪去其根部保留地上部分，清洗干净后置于烘箱中60℃鼓风干燥2~3h，然后将其粉碎得到沙芥粉；
（2）将沙芥粉按照料液比为1:6加入体积分数为95%的乙醇，80℃下加热回流提取3次，2h/次，过滤合并滤液，得到滤液1；
（3）在步骤（2）所得残渣中按照料液比1:6加入体积分数50%的乙醇，按照步骤（2）的方法进行提取，得到滤液2；
（4）将滤液1和滤液2合并，置于旋转蒸发仪浓缩成为浸膏，挥发干燥得到沙芥提取物；
（5）将沙芥提取物溶解于体积浓度为0.03%的二甲基亚砜中制备成浓度为20mg/ml的溶液。
实施例2
（1）取葡萄皮浸提液4份和浓度为200mg/ml的沙芥提取物8份加入到薄荷油18份中，50~60℃水浴加热50min，然后加入浓度为50mg/ml的硫酸化壳聚糖溶液16份混合均匀，得到混合液1；
（2）将大豆多肽10份加入到混合液1中，于涡旋振荡器上振荡50min，然后加入海藻酸钠14份进行混合得到混合液2，最后将混合液2快速放入乳化器中进行乳化2h，离心收集得到乳化液；
（3）将茄子加工粉末5份和紫薯加工粉末15份进行混合，再加入乳化液和木糖醇10份，继续混匀15min，即得到预防家禽脂肪肝的药物组合。
所述的紫薯加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将紫薯洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成紫薯粉末；
（2）按照料液比为1:15在紫薯粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至90℃，同时在50w、40khz超声下提取50min，然后在10000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到紫薯加工粉末。
所述的茄子加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将茄子洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成茄子粉末；
（2）按照料液比为1:6在茄子粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至80℃，同时在50w、40khz超声下提取30min，然后在4000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到茄子加工粉末。
所述的葡萄皮浸提液制备方法如下：
（1）取酿酒后分离的葡萄皮渣，干燥粉碎过40目筛，得到葡萄皮粉；
（2）在葡萄皮粉中按照料液比为1:25加入水，用柠檬酸调节ph至1，加热至70℃保温水解3h，然后趁热用100目尼龙布过滤，即得到葡萄皮浸提液。
所述的沙芥提取物制备方法如下：
（1）取新鲜的沙芥，剪去其根部保留地上部分，清洗干净后置于烘箱中60℃鼓风干燥3h，然后将其粉碎得到沙芥粉；
（2）将沙芥粉按照料液比为1:8加入体积分数为95%的乙醇，100℃下加热回流提取3次，2h/次，过滤合并滤液，得到滤液1；
（3）在步骤（2）所得残渣中按照料液比1:8加入体积分数50%的乙醇，按照步骤（2）的方法进行提取，得到滤液2；
（4）将滤液1和滤液2合并，置于旋转蒸发仪浓缩成为浸膏，挥发干燥得到沙芥提取物；
（5）将沙芥提取物溶解于体积浓度为0.03%的二甲基亚砜中制备成浓度为200mg/ml的溶液。
实施例3
（1）取葡萄皮浸提液3份和浓度为100mg/ml的沙芥提取物6份加入到白芷挥发油15份中，55℃水浴加热45min，然后加入浓度为80mg/ml的硫酸化壳聚糖溶液12份混合均匀，得到混合液1；
（2）将大豆多肽8份加入到混合液1中，于涡旋振荡器上振荡40min，然后加入海藻酸钠12份进行混合得到混合液2，最后将混合液2快速放入乳化器中进行乳化2h，离心收集得到乳化液；
（3）将茄子加工粉末7份和紫薯加工粉末14份进行混合，再加入乳化液和木糖醇9份，继续混匀12min，即得到预防家禽脂肪肝的药物组合。
所述的紫薯加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将紫薯洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成紫薯粉末；
（2）按照料液比为1:8在紫薯粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至85℃，同时在50w、40khz超声下提取40min，然后在8000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到紫薯加工粉末。
所述的茄子加工粉末由以下方法制备而得：
（1）将茄子洗净晾干，切成小块后捣碎，置于-80℃冰箱速冻并干燥成茄子粉末；
（2）按照料液比为1:10在茄子粉末中加入体积分数为80%的甲醇溶液，加热至85℃，同时在50w、40khz超声下提取40min，然后在6000r/min下离心5min，分离上清液，重复提取2次后合并上清液，然后将上清液冷冻干燥，得到茄子加工粉末。
所述的葡萄皮浸提液制备方法如下：
（1）取酿酒后分离的葡萄皮渣，干燥粉碎过40目筛，得到葡萄皮粉；
（2）在葡萄皮粉中按照料液比为1:23加入水，用柠檬酸调节ph至2，加热至70℃保温水解2h，然后趁热用100目尼龙布过滤，即得到葡萄皮浸提液。
所述的沙芥提取物制备方法如下：
（1）取新鲜的沙芥，剪去其根部保留地上部分，清洗干净后置于烘箱中60℃鼓风干燥2~3h，然后将其粉碎得到沙芥粉；
（2）将沙芥粉按照料液比为1:7加入体积分数为95%的乙醇，95℃下加热回流提取3次，2h/次，过滤合并滤液，得到滤液1；
（3）在步骤（2）所得残渣中按照料液比1:7加入体积分数50%的乙醇，按照步骤（2）的方法进行提取，得到滤液2；
（4）将滤液1和滤液2合并，置于旋转蒸发仪浓缩成为浸膏，挥发干燥得到沙芥提取物；
（5）将沙芥提取物溶解于体积浓度为0.03%的二甲基亚砜中制备成浓度为100mg/ml的溶液。
试验例
临床实验动物选用180日龄、体重在1.5kg-1.6kg，实验室确诊为家禽脂肪肝出血综合征的患病鸡进行试验。将患病鸡隔离单独饲养，饲喂全价饲料，并随机分为3组，每组100只，3组饲养环境完全相同，实验时间共进行7天。
空白对照组：不做任何处理。
药物对照组：用市售药物（降脂灵）按其说明书使用治疗。
本发明药物组合组：将本发明产品(本发明实施例3所制得的药物组合)喂食患病鸡，日服用量为：每100克本发明实施例2药物组合拌料20公斤饲料或饮水35公斤，每日1-2次；口服后通过胃肠道吸收达到治疗疾病的目的。
计算方法：死亡率＝死亡动物数/试验动物数×100％，治愈率＝治愈动物数/试验动物数×100％。
疗效评定标准：
治愈：精神正常，采食饮水正常，冠和肉髯等正常，健康活泼，剖检肝脏等组织器官正常。
结束有症状：临床症状没有改善甚至加重。
表1是实验结束时的结果(实验第7天)。
表1
由表1可以看出，本发明制备的药物组合相比于市售药物（降脂灵）在治愈率方面具有更好的疗效，死亡率相比于市售药物下降了5%，具有很好的疗效。
安全性试验
选取200日龄健康鸡100只，按照1g本发明实施例2制备的药物组合拌料2公斤饲料，每日进食2次，共服用5天，用药期间，健康鸡没有任何不良或者异常行为表现，采食饮水正常，体重增加和空白对照组（即健康不给药）相比差异不显著。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。