本发明属于抗敏多肽技术领域,尤其涉及一种具有抗敏作用的机体保护多肽及其制备方法。
背景技术:
目前,业内常用的现有技术是这样的:
多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等;通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫多肽。随着科技的发展,生产肽的方法也在不断发展,用途在不断增多,其中抗敏多肽受到爱美及健康人士的追捧,虽然抗敏多肽的种类繁多,但是现有的抗敏多肽的抗敏效果不佳,成分复杂,制备繁琐,浪费大量的人力和物力;现有的抗敏多肽,在抗敏的同时,没有对机体进行保护,不能满足一种多肽多种用途,使得使用者还要使用修复类产品配合其使用,增加经济支付,带来经济负担。
综上所述,现有技术存在的问题是:
(1)现有的抗敏多肽的抗敏效果不佳,成分复杂,合成繁琐,浪费大量的人力和物力;
(2)现有的抗敏多肽,在抗敏的同时,没有对机体进行保护,不能满足一种多肽多种用途,使得使用者还要使用修复类产品配合其使用,增加经济支付,带来经济负担。
技术实现要素:
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种具有抗敏作用的机体保护多肽及其制备方法。
本发明是这样实现的,一种具有抗敏作用机体保护多肽的美容品,所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品为:以十肽-4为活性成分配制而成;所述十肽-4氨基酸序列为:seqidno:1。
进一步,所述十肽-4氨基酸序列为seqidno:2。本发明的多肽呈中性,可以和任何物质混合。其钠盐,钾盐能够保持长期的活性。另外本多肽在液体里面能维持1-2年的稳定活性。主要特点是修复保护受损肌体细胞。
本发明的另一目的在于提供一种在所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品中的具有抗敏作用的机体保护多肽,所述具有抗敏作用的机体保护多肽按照质量份数由淡竹叶3~5份、金银花6~10份、薄荷6~10份、荷叶4~6份及十肽-40.5~0.9份组成。
本发明的另一目的在于提供一种所述具有抗敏作用的机体保护多肽的制备方法,所述的具有抗敏作用的机体保护多肽的制备方法,具体包括以下步骤:
步骤一:分别取淡竹叶、金银花、薄荷和荷叶,经过水提醇沉法制得淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物;
步骤二:将淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物添加到十肽-4中,搅拌均匀后,经均质、过滤、喷雾干燥,制得。
进一步,所述步骤一中,淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物的制备方法为:
(1)分别取淡竹叶、金银花、薄荷和荷叶,清洗、除杂后,经过超微粉碎过筛300目,制得淡竹叶粉、金银花粉、薄荷粉和荷叶粉;
(2)经过水提醇沉法制得淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物。
进一步,所述步骤二中,喷雾干燥温度为60~70℃,水分含量6~7%。
进一步,十肽-4的制备方法包括:
1)、十肽-4的化学合成:采用fmoc固相法合成;
2)合成的后处理,得到十肽-4粗品;
3)十肽-4粗品纯化,得到十肽-4纯品。
进一步,步骤1)中,采用fmoc固相法合成,包括:
采用全自动多肽合成仪器,按照10肽-4的序列,按照顺序放置好氨基酸;有机溶剂采用浓度20%的dmf二甲基甲酰胺,脱保护剂采用六氢吡啶;激活试剂采用tbtu+hobt+dic;然后启动仪器进行自动合成;
步骤2)中,合成的后处理包括:
合成好后,把树脂从合成反应柱中取出,放入一底部有烧结玻璃滤片的玻璃容器中,分别依次用dmf二甲基甲酰胺,dcm二氯甲烷,meoh甲醇,dcm,meoh5-10倍的树脂体积冲洗树脂;树脂冲洗完毕,另取一带玻璃塞的试管,配置20毫升裂解试剂,配置方式包括:
(1):加17.5毫升tfa三氟乙酸于试管中;
(2):加新鲜的重蒸酚0.5克;
(3):加thioanisole1毫升;
(4):加anisole0.4毫升;
以上试剂都加入后,轻微震荡混匀,加入放入树脂的玻璃容器中;反应2.5小时;待反应完毕,用真空抽滤的办法分离树脂和裂解试剂;把裂解试剂放入一球形烧瓶中,用旋转蒸发的办法减压蒸去液体物质,只留下固体;
另取100毫升的冷乙醚加入球形烧瓶中,大量的白色沉淀物质,为粗多肽;离心分离乙醚和多肽;丢弃上清乙醚,多肽继续用冷乙醚洗涤,离心,得到十肽-4粗品;
步骤3)中,十肽-4粗品用冻干机冻干,进行合成产物的纯化:
采用高效液相色谱纯化,上样量为柱体积的10%,浓度为20%左右粗品。流动相a0.1%tfa的甲醇,b0.1%tfa的去离子水;时间30分钟,采用线性梯度,a在30分钟内从5%升至45%,收集有效峰,检测纯度,冻干得到纯品。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述具有抗敏作用的机体保护多肽制备的抗敏面膜。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述具有抗敏作用的机体保护多肽制备的护肤品。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述具有抗敏作用的机体保护多肽制备的面膜液。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述具有抗敏作用的机体保护多肽制备的抗敏外用消炎药膏。
综上所述,本发明的优点及积极效果为:
本发明的抗敏效果好,可以有效预防和改善皮肤的过敏想象,同时可以应用于抗敏消炎药膏中,提高过敏患处的治疗速度及效果;本发明中淡竹叶,具有清凉解热的功效,具有抗衰、美容养颜的作用;金银花,具有清热解毒、抗炎、抑菌杀菌的功效;薄荷,外用可治神经痛、皮肤瘙痒、皮疹和湿疹等,同时具有怡人的气味,可以改善本品的总体气味,起到矫味剂的作用;荷叶,主要有清热解暑,升发清阳,散瘀止血的功效,清暑化湿,升发清阳,凉血止血;因此本发明还具有一定的机体保护作用。
本发明采用高效液相色谱纯化,上样量为柱体积的10%,浓度为20%左右粗品。流动相a0.1%tfa的甲醇,b0.1%tfa的去离子水;时间30分钟,采用线性梯度,a在30分钟内从5%升至45%,收集有效峰,检测纯度,冻干得到十肽-4纯品。有效成分纯度高,相比于现有技术的植物提取方式,降低了成本,取得了良好的效果。
附图说明
图1是本发明实施例提供的具有抗敏作用的机体保护多肽的制备方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
现有的抗敏多肽的抗敏效果不佳,成分复杂,制备繁琐,浪费大量的人力和物力。
下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。
本发明实施例提供的具有抗敏作用机体保护多肽的美容品,所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品为:以至少配制有十肽-4为活性成分的具有抗敏作用的机体保护多肽制备具有抗敏作用机体保护多肽的美容品;所述十肽-4氨基酸序列为:seqidno:1。
所述十肽-4氨基酸序列为seqidno:2。
本发明的十肽-4氨基酸序列为:seqidno:1:glygluproproproglyargproalaasp;
或seqidno:2:proproproleulysproalaasn。
本发明提供一种在所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品中的具有抗敏作用的机体保护多肽,所述具有抗敏作用的机体保护多肽按照质量份数由淡竹叶3~5份、金银花6~10份、薄荷6~10份、荷叶4~6份及十肽-40.5~0.9份组成。
本发明提供一种具有抗敏作用的机体保护多肽的制备方法,具体包括以下步骤:
s101:分别取淡竹叶、金银花、薄荷和荷叶,经过水提醇沉法制得淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物;
s102:将淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物添加到十肽-4中,搅拌均匀后,经均质、过滤、喷雾干燥,制得。
所述步骤s101中,淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物的制备方法为:
(1)分别取淡竹叶、金银花、薄荷和荷叶,清洗、除杂后,经过超微粉碎过筛300目,制得淡竹叶粉、金银花粉、薄荷粉和荷叶粉;
(2)经过水提醇沉法制得淡竹叶提取物、金银花提取物、薄荷提取物和荷叶提取物。
步骤s102中,本发明实施例提供的喷雾干燥温度为60~70℃,水分含量控制在6~7%。
本发明实施例提供的具有抗敏作用的机体保护多肽,应用于抗敏外用消炎药膏中。
下面结合十肽-4的合成对本发明的应用作进一步描述。
1、十肽-4的化学合成采用fmoc固相法合成:
采用全自动多肽合成仪器,按照10肽-4的序列,按照顺序放置好氨基酸。有机溶剂采用dmf(二甲基甲酰胺),脱保护剂采用六氢吡啶:二甲基甲酰胺(20%),激活试剂采用tbtu+hobt+dic。然后启动仪器进行自动合成。
2、合成的后处理:
合成好后,把树脂从合成反应柱中取出,放入一底部有烧结玻璃滤片的玻璃容器中,分别依次用dmf(二甲基甲酰胺),dcm(二氯甲烷),meoh(甲醇),dcm,meoh5-10倍的树脂体积冲洗树脂。
树脂冲洗完毕,另取一带玻璃塞的试管,配置20毫升裂解试剂,配置方式如下:
(1):加17.5毫升tfa(三氟乙酸)于试管中;(tfa有强腐蚀性和挥发性,应在通风厨中操作);
(2):加新鲜的重蒸酚0.5克;
(3):加thioanisole1毫升;
(4):加anisole0.4毫升
以上试剂都加入后,轻微震荡混匀,加入放入树脂的玻璃容器中。反应2.5小时。待反应完毕,用真空抽滤的办法分离树脂和裂解试剂。把裂解试剂放入一球形烧瓶中,用旋转蒸发的办法减压蒸去液体物质,只留下固体。
另取100毫升的冷乙醚加入球形烧瓶中,此时有大量的白色沉淀物质,为粗多肽。离心分离乙醚和多肽。丢弃上清乙醚,多肽继续用冷乙醚洗涤,离心,得到十肽-4粗品。
3、十肽-4粗品用冻干机冻干,用于下一步纯化。
合成产物的纯化:
纯化采用高效液相色谱纯化,上样量为柱体积的10%,浓度为20%左右粗品。流动相a0.1%tfa的甲醇,b0.1%tfa的去离子水。时间30分钟,采用线性梯度,a在30分钟内从5%升至45%,收集有效峰,检测纯度,冻干得到纯品。
下面结合具体的中药对本发明的应用原理作详细说明;
淡竹叶,具有清凉解热的功效,具有抗衰、美容养颜的作用;
金银花,具有清热解毒、抗炎、抑菌杀菌的功效;
薄荷,外用可治神经痛、皮肤瘙痒、皮疹和湿疹等,同时具有怡人的气味,可以改善本品的总体气味,起到矫味剂的作用;
荷叶,主要有清热解暑,升发清阳,散瘀止血的功效,清暑化湿,升发清阳,凉血止血。
本发明的十肽-4氨基酸序列为:seqidno:1:glygluproproproglyargproalaasp;
或seqidno:2:proproproleulysproalaasn。
下面结合具体实施对本发明的应用原理作进一步详细说明;
实施例1
本发明提供一种在所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品用途中的具有抗敏作用的机体保护多肽,所述具有抗敏作用的机体保护多肽按照质量份数由淡竹叶3份、金银花6份、薄荷6份、荷叶4份及十肽-40.5份组成。
实施例2
本发明提供一种在所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品中的具有抗敏作用的机体保护多肽,所述具有抗敏作用的机体保护多肽按照质量份数由淡竹叶5份、金银花10份、薄荷10份、荷叶6份及十肽-40.9份组成。
实施例3
本发明提供一种在所述具有抗敏作用机体保护多肽的美容品中的具有抗敏作用的机体保护多肽,所述具有抗敏作用的机体保护多肽按照质量份数由淡竹叶4份、金银花7份、薄荷8份、荷叶5份及十肽-40.7份组成。
实施例;
选取100名皮肤易过敏的年轻女性作为实验者进行试验,首先对所有实验者进行实验前的皮肤测试,将100实验者分为四个小组,每个小组分别使用某品牌抗过敏面膜、实施例1组分、实施例2组分、实施例3组分的面膜,前三天每天使用一贴,三天之后,每隔两天在同一时间使用一次,连续使用3个月,之后对实验者的皮肤进行皮肤测试,分析产品效果,结果如下表所示。
表1;
下面结合具体实验对本发明作进一步描述。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。