本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种保湿修复组合物及其应用。
背景技术：
如今，随着环境污染的加剧，以及人们工作压力的增大、作息不规律等因素，皮肤干燥、瘙痒等皮肤障碍问题日益困扰着人们，保湿类化妆品正受到越来越多的消费者的重视。保湿类化妆品主要是通过保湿剂来达到保湿效果，保湿剂是人们日常皮肤护理产品中的一个重要部分，用以保持角质层的水分，维持皮肤弹性，促进皮肤屏障功能的修复。
传统的化妆品保湿剂虽然大部分保湿效果和稳定性都较好，但普遍存在黏腻感，用后肤感不够清爽，保湿时间也不够长久。甚至有些保湿剂在一定条件下还会吸收皮肤里层的水分，造成皮肤更加干燥；或者封闭性太强，造成皮肤排泄不畅，对皮肤的新陈代谢功能造成一定的阻碍。
很多天然植物本身具有很强的保水能力，有的甚至在干燥高温的沙漠地区，也能顽强地存活。利用这些植物，提取其功效成分应用到化妆品中，即能达到良好的长效保水效果，又能达到安全环保的目的。含有天然植物保湿活性成分的化妆品因其功效好、副作用小、更具安全性，获得越来越多消费者的青睐。因此，研究开发应用于化妆品中的天然植物保湿活性化成分，已成为化妆品产业可持续发展的一个重要环节。
技术实现要素：
本发明的目的在于解决上述现有技术中存在的缺点和不足，提供一种保湿修复组合物。该保湿修复组合物具有补水、锁水及长效保湿的效果，清爽不黏腻，安全性高，无刺激，吸收快，适用于各种肤质。
为实现其目的，本发明采取的技术方案为：
一种保湿修复组合物，其特征在于，包括如下组分：密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺。
密罗木(myrothamnusflabellifolia)，又名南非凤凰草，别名“重生草”、“复活草”，生长在非洲南部的干旱地区，其生长环境为无水、高盐及强日照的极端气候条件。密罗木的生长机制为：植物积累低分子量的化合物甘油葡糖苷，它能保持植物结构的活性，保护植物不会完全被干燥，保护细胞膜和特定的蛋白质，通过增加细胞内的渗透压来降低水流失到外部环境中。当下雨时，甘油葡糖苷激活细胞植物功能，使细胞快速变绿。密罗木干细胞提取物含有高浓度的甘油葡糖苷，具有优异的保湿、促进细胞活性、保护角质层及抗炎等作用。目前，还未见将密罗木干细胞提取物应用于化妆品的报道出现，为此，本发明开创性地将密罗木干细胞提取物应用于化妆品中。本发明将密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺复配成保湿修复组合物，经实验验证，密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺三者相互作用，起到了协同增效的效果，使所述保湿修复组合物的保湿修复功效更好。
优选地，按质量比计，所述密罗木干细胞提取物：透明质酸：神经酰胺＝90～120:20～40:15～35。本发明通过实验发现，密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺以该质量比复配时，所述保湿修复组合物的保湿修复功效和使用肤感均较好。
更优选地，按质量比计，所述密罗木干细胞提取物：透明质酸：神经酰胺＝100～110:25～35:20～30。本发明通过实验发现，密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺以该质量比复配时，所述保湿修复组合物的保湿修复功效和使用肤感更好。
最优选地，按质量比计，所述密罗木干细胞提取物：透明质酸：神经酰胺＝105:30:25。本发明通过实验发现，密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺以该质量比复配时，所述保湿修复组合物的保湿修复功效和使用肤感最好。
优选地，所述密罗木干细胞提取物的制备方法，包括如下步骤：取密罗木幼嫩部位，对其进行消毒，然后利用固体培养基培养获得分生芽原基，再利用液体培养基对分生芽原基进行传代培养获得密罗木干细胞，最后将获得的密罗木干细胞冷冻干燥后粉碎，制得所述密罗木干细胞提取物。
优选地，所述密罗木干细胞提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)前期处理：取密罗木幼嫩的芽尖或茎尖，先用浓度为70％～75％的酒精浸泡10～120s，再用浓度为5％的naclo溶液反复清洗三次，最后用无菌水冲洗干净。
(2)接种增殖培养：将消毒后的芽尖或茎尖接种在固体培养基上，25℃暗箱培养，每两周继代培养一次，继代培养2个月，获得分生芽原基；所述固体培养基为含有萘乙酸和6-苄氨基嘌呤的ms固体培养基；优选地，所述ms固体培养基中，萘乙酸的浓度为1.5umol/l，6-苄氨基嘌呤的浓度为8umol/l。
(3)传代培养：切取出细小的分生芽原基，接种到液体培养基中，然后置于回转式摇床上振荡培养，每10天更换一次培养基，9～10周后，过滤掉变大的不定形的外表变黑的外植体，获得小细胞团；继续用液体培养基对小细胞团进行继代培养并不断扩大培养体系，每2周更换一次培养基，获得密罗木干细胞；所述液体培养基为含有2,4-d和zt的1/2ms液体培养基；优选地，所述1/2ms液体培养基中，2,4-d的浓度为5umol/l，zt的浓度为1umol/l。
(4)将步骤(3)获得的密罗木干细胞于-25～-75℃下预冻2～8h，然后在液氮中速冻2～8h，然后解冻5～90min；重复前述操作2～8次后室温放置5～45min，最后粉碎至150～200目，制得所述密罗木干细胞提取物。
本发明还提供了所述保湿修复组合物在化妆品中的应用。
本发明还提供了一种化妆品，其含有所述保湿修复组合物。所述化妆品可以是霜、乳液、面膜、精华液等剂型，但不局限于此。
优选地，所述保湿修复组合物在化妆品中的重量百分含量为0.1％～10％。本发明通过实验发现，所述保湿修复组合物以该用量应用于化妆品时，能有效提升化妆品的保湿修复功效，且能将成本控制在合理范围。
本发明还提供了一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：所述保湿修复组合物0.1％～10％、保湿剂2％～15％、润肤剂0.01％～1％、表面活性剂0.1％～5％、防腐剂0.01％～2％、增稠剂0.01％～2％及去离子水余量。本发明配方的保湿修复乳液对皮肤温和无刺激，使用安全，具有优异的快速补水和长效保湿功效，清爽不黏腻，适用于各种肤质。
优选地，所述保湿剂为甘油、丁二醇、双丙甘醇中的至少一种。所述保湿剂为甘油、丁二醇、双丙甘醇中的至少两种时，组分之间可任意比例混合。
优选地，所述润肤剂为鳄梨油、霍霍巴油中的至少一种。所述润肤剂由鳄梨油和霍霍巴油组成时，鳄梨油与霍霍巴油可以任意比例混合。
优选地，所述表面活性剂为月桂酰谷氨酸钠、肉豆蔻酸、ppg-2羟乙基椰油酰胺中的至少一种。所述表面活性剂为月桂酰谷氨酸钠、肉豆蔻酸、ppg-2羟乙基椰油酰胺中的至少两种时，组分之间可任意比例混合。
优选地，所述防腐剂为秦椒果提取物、艾叶提取物、淡竹叶提取物、克莱柚果提取物和1,2-戊二醇中的混合物，其商品型号为：nq-2016-a，可购自北京耐确生化技术研究所。
优选地，所述增稠剂为卡波姆、黄原胶中的至少一种。所述增稠剂由卡波姆和黄原胶组成时，卡波姆与黄原胶可以任意比例混合。
优选地，所述保湿修复乳液由如下重量百分含量的组分组成：所述保湿修复组合物5％、保湿剂10％、润肤剂0.5％、表面活性剂2％、防腐剂1％、增稠剂0.1％及去离子水余量。以该配方制得的所述保湿修复乳液在补水和长效保湿方面的效果较好，且使用肤感最好，更易于被皮肤吸收，清爽不黏腻。
优选地，所述保湿修复乳液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将所述保湿剂、所述增稠剂和所述润肤剂加入乳化锅中，加入去离子水，在75～85℃下搅拌至混合均匀，保温灭菌，得到混合液a；
(2)待所述混合液a降温至50℃时，依次加入所述表面活性剂、所述防腐剂，继续搅拌至均匀，降温至室温时，加入所述保湿修复组合物，继续搅拌至均匀，制得所述保湿修复乳液。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明开创性地将密罗木干细胞提取物应用于化妆品中，并以密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺复配制成保湿修复组合物。经实验验证，所述保湿修复组合物具有补水、锁水及长效保湿的效果，清爽不黏腻，安全性高，无刺激，吸收快，适用于各种肤质。密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺三者能相互作用，产生协同增效的效果，使所述保湿修复组合物的保湿修复功效更好。本发明还提供了使所述保湿修复组合物在补水保湿作用和使用肤感方面均达到较优效果的配方，还提供了所述保湿修复组合物应用于乳液的优选配方。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，本发明通过下列实施例进一步说明。应理解，本发明实施例仅用于说明本发明的技术效果，而非用于限制本发明的保护范围。实施例中，所用方法如无特别说明，均为常规方法。
实施例1
本实施例1提供一种保湿修复组合物，其由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物105份、透明质酸30份和神经酰胺25份。
实施例2
本实施例2提供一种保湿修复组合物，其由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物110份、透明质酸25份和神经酰胺20份。
实施例3
本实施例3提供一种保湿修复组合物，其由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物100份、透明质酸35份和神经酰胺30份。
实施例4
本实施例4提供一种保湿修复组合物，其由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物90份、透明质酸40份和神经酰胺35份。
实施例5
本实施例5提供一种保湿修复组合物，其由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物120份、透明质酸20份和神经酰胺15份。
实施例6
本实施例6提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例1的保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
实施例7
本实施例7提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例2的保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
实施例8
本实施例8提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例3的保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
实施例9
本实施例9提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例4的保湿修复组合物10％、甘油1％、双丙甘醇1％、鳄梨油0.01％、月桂酰谷氨酸钠0.1％、nq-2016-a防腐剂2％、黄原胶0.01％及去离子水余量。
实施例10
本实施例10提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例5的保湿修复组合物8％、丁二醇3％、甘油2％、鳄梨油0.1％、肉豆蔻酸0.5％、月桂酰谷氨酸钠0.5％、nq-2016-a防腐剂1.5％、黄原胶0.05％及去离子水余量。
实施例11
本实施例11提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例3的保湿修复组合物3％、甘油3％、丁二醇6％、双丙甘醇3％、鳄梨油0.4％、霍霍巴油0.4％、月桂酰谷氨酸钠0.5％、肉豆蔻酸0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂0.5％、卡波姆0.5％及去离子水余量。
实施例12
本实施例12提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例2的保湿修复组合物1％、丁二醇10％、甘油5％、霍霍巴油1％、ppg-2羟乙基椰油酰胺4％、nq-2016-a防腐剂0.2％、卡波姆1％、黄原胶0.5％及去离子水余量。
实施例13
本实施例13提供一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：实施例1的保湿修复组合物0.1％、丁二醇10％、双丙甘醇5％、鳄梨油1％、月桂酰谷氨酸钠5％、nq-2016-a防腐剂0.01％、卡波姆2％及去离子水余量。
实施例14
本实施例提供一种实施例6～13的保湿修复乳液的制备方法，其包括如下步骤：
(1)将保湿剂、增稠剂和润肤剂加入乳化锅中，加入去离子水，在75～85℃下，以1000～1500r/min的转速搅拌至混合均匀，保温30min灭菌，得到混合液a；
(2)待混合液a降温至50℃时，依次加入表面活性剂、防腐剂，以1000～1500r/min的转速继续搅拌20min，使物料混合均匀，继续降温至室温时，加入保湿修复组合物，继续搅拌至均匀，即可。
实施例15
本实施例提供一种上述实施例所用的密罗木干细胞提取物的制备方法，其包括如下步骤：
(1)前期处理：取密罗木幼嫩的茎尖，先用浓度为70％的酒精浸泡60s，再用浓度为5％的naclo溶液反复清洗三次，最后用无菌水冲洗干净。
(2)接种增殖培养：将消毒后的茎尖接种在固体培养基上，25℃暗箱培养，每两周继代培养一次，继代培养2个月，获得分生芽原基；所述固体培养基为含有萘乙酸和6-苄氨基嘌呤的ms固体培养基；所述ms固体培养基中，萘乙酸的浓度为1.5umol/l，6-苄氨基嘌呤的浓度为8umol/l。
(3)传代培养：切取出细小的分生芽原基，接种到液体培养基中，然后置于回转式摇床上振荡培养，每10天更换一次培养基，10周后，过滤掉变大的不定形的外表变黑的外植体，获得小细胞团；继续用液体培养基对小细胞团进行继代培养并不断扩大培养体系，每2周更换一次培养基，获得密罗木干细胞；所述液体培养基为含有2,4-d和zt的1/2ms液体培养基；优选地，所述1/2ms液体培养基中，2,4-d的浓度为5umol/l，zt的浓度为1umol/l。
(4)将步骤(3)获得的密罗木干细胞于-50℃下预冻5h，然后在液氮中速冻4.5h，然后解冻40min；重复前述操作5次后室温放置30min，最后粉碎至200目，制得所述密罗木干细胞提取物。
对比例1
一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：丁二醇10.5％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2.1％、nq-2016-a防腐剂1.1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
对比例2
一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
所述保湿修复组合物由如下重量份的组分组成：透明质酸30份和神经酰胺25份。
对比例3
一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
所述保湿修复组合物由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物105份和神经酰胺25份。
对比例4
一种保湿修复乳液，其由如下重量百分含量的组分组成：保湿修复组合物5％、丁二醇10％、霍霍巴油0.5％、ppg-2羟乙基椰油酰胺2％、nq-2016-a防腐剂1％、卡波姆0.1％及去离子水余量。
所述保湿修复组合物由如下重量份的组分组成：密罗木干细胞提取物105份和透明质酸30份。
对比例1～4的保湿修复乳液的制备方法参照实施例14。
一、安全性测试
以2015年《化妆品安全技术规范》为参照标准，对实施例1～5的保湿修复组合物、实施例6～13的保湿修复乳液、以及对比例1～4的保湿修复乳液进行化妆品刺激性评价，测试方法为皮肤贴斑试验，对年龄在16～65岁随机分布的85人进行测试。
测试方法：将受试物放入斑试器内，用量约为0.020～0.025g，将加有受试物的斑试器用无刺激胶带贴覆于受试者的背部或前臂屈侧，用手掌轻压使之均匀地贴覆在皮肤上，持续24h。去除受试斑试器后30min，待压痕消失后观察皮肤反应。如结果为阴性，于斑贴试验后24h和48h分别再观察一次。
评价标准：0级：阴性反应；1级：可疑反应，仅有微弱红斑；2级：弱阳性反应，红斑、浸润、水肿、可有丘疹；3级：强阳性反应，红斑、浸润、水肿、可有丘疹、反应可超出受试区；4级：极强阳性反应，明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹、反应超出受试区。
测试结果：所有受试者的皮肤反应均为阴性。
上述测试结果说明，本发明提供的保湿修复组合物和保湿修复乳液对皮肤温和无刺激，使用安全。
二、保湿效果测试
皮肤角质层水合率试验：工作原理是以电容器为仪器探头，由于水是皮肤上介质常数最大的物质，当皮肤水分含量发生变化时，皮肤的电容值也发生变化，所以可以通过测定皮肤电容值，分析皮肤表面水分含量。常用的仪器是corneometercm825。通过测量使用产品前后皮肤角质层电容值的变化来衡量角质层含水量的变化，从而评价化妆品的保湿功效。此种方法对皮肤角质层的水分含量进行定量化，能够灵敏地反应皮肤水分含量的变化，且重现性好，是目前保湿化妆品功效评价常用的方法之一。
实验方法：在应试者左右前臂屈侧划出3×3cm2大小的正方形实验区域，以左臂作为保湿品的测试区域，右臂相应的对称区域为空白对照，然后用corneometercm825测试检测每个试验部位的水分含量，分别重复5次，得出平均值。用式(1)计算水合率。
对实施例6～13的保湿修复乳液、及对比例1～4的保湿修复乳液进行保湿效果测试，结果如表1所示。
表1保湿效果
结果分析：
1、从实施例6～13的结果可知，本发明实施例提供的保湿修复乳液具有较好的保湿功效，尤其以实施例6～8的效果较好，说明乳液配方中的组分用量不同，会对乳液的保湿功效造成一定程度的影响。实施例6～8中，以实施例6的效果最好，说明密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺的质量比为105:30:25时，保湿修复组合物的保湿功效最好。
2、比较实施例6～13和对比例1的结果可知，本发明提供的保湿修复组合物能有效提升乳液的保湿功效。
3、比较实施例6和对比例2～4的结果可知，密罗木干细胞提取物、透明质酸和神经酰胺复配，具有协同增效的效果，显著提升保湿修复乳液的保湿功效。
三、肤感评价
对实施例6～13和对比例1～4的乳液进行肤感评价。
方法：采用双盲随机对比测试，由10名肤感评价专家对各个实施例、对比例的样品分别进行对比评分。测试方法是在手背上(约5cm直径的圆为评价区域)进行产品评价，左右手背加样量各为50μl。志愿者参考标准品的尺度，对各个阶段的肤感进行打分，除去评分最大值与最小值，取均值。感官评价参数及评分标准参考表2，评价结果见表3。
表2感官评价参数及评分标准
表3评价结果
结果分析：从表3的评价结果可看出，本发明实施例的乳液在所有的评价项目中，均获得较好的评价，其中，实施例6～10的使用肤感较理想，保湿效果好，用后清爽不黏腻，吸收快。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。