本发明涉及化妆品领域,具体涉及一种具有修复功效的红松提取物及其应用。
背景技术：
红松(pinuskoraiensissieb.etzucc.)是主产于中国小兴安岭的珍贵树种。红松的种子俗称红松籽，又名罗松子、海松子、红松果等。唐代的《海药本草》中就有“海松子温胃肠，久服轻身，延年益寿”的记载。明朝李时珍对松子的药用曾给予很高的评价，他在《本草纲目》中写道：“海松子，释名新罗松子，气味甘小无毒；主治骨节风，头眩、去死肌、变白、散水气、润五脏、逐风痹寒气，虚羸少气补不足，肥五脏，散诸风、湿肠胃，久服身轻，延年不老。”现代研究表面，红松种仁中含有多种极具开发价值的生理活性物质,如维生素a、维生素e以及人体必需的多种不饱和脂肪酸、磷脂、甾醇、多糖、黄酮等,可食用或用于功能性食品,倍受历代医家、营养学家的推崇。在人们心目中，松子被视为“长寿果”，是中老年人的理想保健食物，也是女士们润肤美容的理想原材料。
然而，目前对红松籽提取物在化妆品中的应用研究较少，尚未有相关报道。本发明的发明人经过大量的研究和试验，结果制得了一种具有良好修复功效的红松籽提取物，从而完成了本发明。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种红松籽提取物，并将其应用在化妆品中，起到良好的修复作用。
一种红松籽提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将红松籽干燥，粉碎过筛得红松籽粉末；
(2)取红松籽粉末，加入ph4.0～5.5的乙酸钠-乙酸缓冲溶液，加入纤维素酶，进行酶解，得酶解液；
(3)向酶解液中加入无水乙醇，于微波反应器中进行微波辅助浸提，得提取液；
(4)抽滤提取液，将滤液旋转蒸发除去乙醇，即得红松籽提取物；
其中步骤（2）酶解所用纤维素酶的活力为40-60u/mg，其用量按红松籽粉：纤维素酶为1g:100u的比例。
在其中一些实施例中，步骤(1)中所述的干燥为于烘箱中60℃烘干至恒重，所述过筛为过40-80目过筛。
在其中一些实施例中，步骤(2)中所述加入缓冲溶液的量为红松籽重量的2-3倍，所述酶解为50～60℃的水浴中酶解1～2h。
在其中一些实施例中，步骤(3）中加入无水乙醇后，体系中乙醇的体积分数为60～80％。
在其中一些实施例中，步骤(3）中的微波提取条件为微波功率2-2.2kw/kg，微波处理时间为8～10min。
本发明的另一目的在于提供所述红松籽提取物在化妆品中的应用。
本发明所述红松籽提取物可以作为化妆品修复功效添加成分，应用于化妆品中。所述的红松籽提取物的用量，按质量百分比计算，其添加量占化妆品总质量的1-10wt％。所述的化妆品可以为膏霜、乳液、面膜、唇膏、化妆水等不同剂型。
一种含有上述红松籽提取物的护唇唇膏，由如下质量百分含量的组分组成：
十三烷醇偏苯三酸酯5-15%，
氢化松脂酸甲酯1-10%，
双-二甘油多酰基己二酸酯-21-10%，
辛基十二醇5-20%，
氢化棕榈仁油1-10%，
聚乙烯1-5%，
地蜡1-3%，
牛油果树（butyrospermumparkii）果脂0.1-3%，
白蜂蜡0.1-3%，
小烛树（euphorbiacerifera）蜡0.1-3%，
c12-15醇苯甲酸酯1-10%，
微晶蜡0.1-3%，
丙烯酸（酯）类/聚二甲基硅氧烷共聚物0.1-1%，
环五聚二甲基硅氧烷0.1-3%，
辛甘醇0.1-3%，
二氧化钛0.1-1%，
氧化铁类0.1-1%，
云母0.1-1%，
本发明所述红松籽提取物1-10%，
棕榈酸乙基己酯余量。
本发明具有如下的优点及有益效果：
1.本发明所述红松籽提取方法对比现有物理压榨法（普通法和螺旋法）和溶剂浸出法（水代法），具有如下优势：
(1)提取时间短，提取效率高，最大程度保留热敏活性成分，且得率相对现有的水代法更高；
(2)本发明采用先酶解，再对原料进行微波提取，一方面酶解可以把淀粉和其他生物质等大分子转化成小分子，有利于后续的溶出，另一方面微波条件可以充分消除了酶对提取红松籽的影响，增加了最终的红松籽提取得率；且提取不会破坏红松籽的分子结构，对于红松籽提取物成品的稳定性以及功能特性具有良好的保护作用。
2.本发明提取方法得到的红松籽提取物应用到化妆品中，作为修复功效添加剂拓宽了其使用范围，红松籽提取物可有效促进创面愈合，明显减轻疼痛，能显著降低炎症和瘙痒的发生率，应用到化妆品中，具有润燥、修复、抗辐射、保湿等作用。
3.且红松籽乃药食两用药材，应用于化妆品，安全有保证。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数或条件,可参照常规技术进行。
本发明所述的红松籽提取物的化妆品中文名为：红松（pinuskoraiensis）籽提取物。
实施例1
一种红松籽提取物，选取红松籽作为原料，经过以下步骤提取得到：
(1)将红松籽置于烘箱中60℃烘干至恒重干燥，粉碎过40目筛得红松籽粉末；
(2)取红松籽粉末，加入红松籽重量3倍的ph4.0的乙酸钠-乙酸缓冲溶液，加入纤维素酶，在60℃的水浴中酶解1h，得酶解液；
(3)加入无水乙醇，使得体系中乙醇的体积分数为80％，微波反应器中进行微波辅助浸提，微波功率为2kw/kg，微波处理时间为10min，得提取液；
(4)抽滤提取液，滤液旋转蒸发除去乙醇，即得红松籽提取物，得率为58.2％；
上述酶解所用纤维素酶的活力为40u/mg，其用量按红松籽粉：纤维素酶为1g:100u的比例计算。
实施例2
一种红松籽提取物，选取红松籽作为原料，经过以下步骤提取得到：
(1)将红松籽置于烘箱中60℃烘干至恒重干燥，粉碎过80目筛得红松籽粉末；
(2)取红松籽粉末，加入红松籽重量2倍的ph5.5的乙酸钠-乙酸缓冲溶液，加入纤维素酶，在50℃的水浴中酶解2h，得酶解液；
(3)加入无水乙醇，使得体系中乙醇的体积分数为60％，微波反应器中进行微波辅助浸提，微波功率为2.2kw/kg，微波处理时间为8min，得提取液；
(4)抽滤提取液，滤液旋转蒸发除去乙醇，即得红松籽提取物，得率为60.4％；
上述酶解所用纤维素酶的活力为60u/mg，其用量按红松籽粉：纤维素酶为1g:100u的比例计算。
实施例3
一种红松籽提取物，选取红松籽作为原料，经过以下步骤提取得到：
(1)将红松籽置于烘箱中60℃烘干至恒重干燥，粉碎过60目筛得红松籽粉末；
(2)取红松籽粉末，加入红松籽重量2倍的ph5.0的乙酸钠-乙酸缓冲溶液，加入纤维素酶，在55℃的水浴中酶解1h，得酶解液；
(3)加入无水乙醇，使得体系中乙醇的体积分数为70％，微波反应器中进行微波辅助浸提，微波功率为2.1kw/kg，微波处理时间为9min，得提取液；
(4)抽滤提取液，滤液旋转蒸发除去乙醇，即得红松籽提取物，得率为64.6％；
上述酶解所用纤维素酶的活力为50u/mg，其用量按红松籽粉：纤维素酶为1g:100u的比例计算。
对比例1
一种红松籽提取物，选取红松籽作为原料，经过以下步骤提取得到：
1)将红松籽于60℃烘箱中烘干至恒重，粉碎后60目过筛得红松籽粉末；
2)取红松籽粉末100g，加入无水乙醇，使体系中乙醇的体积分数为70％，调整微波功率2.1kw/kg，于微波反应器中微波提取9min，得提取液；
3)抽滤提取液，滤液旋转蒸发除去乙醇，即得红松籽提取物；
本对比例不经酶解步骤得率为34.7％。
对比例2
一种红松籽提取物，选取红松籽作为原料，经过以下步骤提取得到：
准确称取磨碎后的红松籽粉末100g，加入一定比例的水，调整料液比为1:7.5g/ml，提取ph值9、提取温度70℃的提取条件，提取时间2ｈ，于4000r/min条件下离心15min，吸去乳化层及水层，于40℃条件下真空干燥至恒重，本对比例采用水代法提取，得率50.4%。
实验1对干燥综合征模型小鼠涎腺干预作用测试
材料：百白破疫苗购自北京天坛生物制品股份有限公司，批号:2018060402;弗氏完全佐剂:sigmausa，批号:018k0619－81－2;考马斯亮蓝试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号:20180618;trizl:invitrgen，usa，批号:0382739。
动物选择：balb/c小鼠120只，spf级，雌性，体质量20g左右。购自重庆医科大学实验动物中心
实验方法
分组将动物随机分成共5组，每组30只。空白对照组、强的松组、实施例1-3组。取36只同种小鼠，无菌条件下取颌下腺，匀浆后，测定抗原浓度2171μg/ml，加pbs缓冲液稀释到1000μg/ml，加入同体积弗氏完全佐剂，最后浓度为500μg/ml，每只小鼠背部多点注射抗原，总量为1ml/只。同时背部注射百白破疫苗0.5ml，产生类似于人类ss的唾液腺改变及临床表现特点，于造模第2天开始予低、中、高剂量实施例1-3组所得提取物、强的松对ss小鼠进行治疗。空白对照组，每天正常饲养，不给予任何药物，实施例组动物为低剂量组(17g·kg－1·d－1)，中剂量组(34g·kg－1·d－1)，高剂量组(68g·kg－1·d－1)，强的松组给予强的松0.32mg/d灌胃，4周后处死小鼠进行药效评价。
唾液量测定:将无菌的脱脂棉球制成干重为5mg的棉球，放入小鼠的后颊部，5min后取出，电子天平上称重。
唾液分泌量(mg)=棉球湿重－棉球干重。
各组小鼠唾液流量变化比较见表1。
表1造模4周后唾液流量比较(取平均值)mg
实施例1-3所得红松籽提取物低、中、高剂量组和强的松组小鼠颌下腺涎腺组织中有淋巴细胞浸润，说明本发明红松籽提取方法得到的红松籽提取物有润燥功效。
实施例4
制备如表2所示组成的护唇唇膏1-3和对比例3-4，由以下质量百分含量的组分组成：
表2
实验2人群试用测试
人群入选标准:嘴唇出现干枯甚至脱皮或开裂、皮肤松弛、唇纹增多、唇色焦枯黯淡无光、嘴角开裂。
按照以上人群入选标准，选择病例250例。男90例，女160例；年龄在18～55岁，平均34.8岁，随机均分为5组，每组50人。
使用方法:实施例组敷本发明护唇唇膏1-3制得的样品,1天早晚各1次，每次涂抹均匀唇部即可；对比组涂对比例3-4制得的样品。
观察方法:两周后观察疗效，唇部紧致，唇纹消失，唇色红润有光泽，脱皮消失，无开裂为治愈；唇部紧致，唇纹减少，唇色焦枯减弱变得红润，脱皮减少，开裂逐渐愈合为有效；无变化或加重为无效。
结果如表3所示：
表3
由表3记录的数据可知，本发明制备得到的护唇唇膏1-3涂抹患处，经使用两周后，都显出有效果，治愈率达60%以上（33/50*100%）。与添加未进行酶解处理制得红松籽提取物的对比例3以及添加采用水代法制得红松籽的对比例4相比，治愈率更高。
据受试者反应，使用本发明护唇唇膏，安全无刺激，无不良反应,是能对唇部滋润，平滑细纹，可有效促进唇创面愈合，明显改善唇色焦枯黯淡等症状，让嘴唇变得红润，干湿适度，润滑有光，老少皆可使用；尤其是有唇部发炎的试用者，经使用本发明护唇唇膏两周后，炎症也得以治愈。
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。