红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物中的应用的制作方法

文档序号:17260279发布日期:2019-03-30 09:36阅读:238来源:国知局

本发明属于生物医药领域,具体涉及红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物和功能食品中的应用。



背景技术:

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,在我国成为女性恶性肿瘤发病率仅次于乳腺癌的癌症。据统计,在2012年世界宫颈癌新增病例52.8万,死亡病例26.6万,且这个数据仍在持续增加。宫颈癌是发展中国家的一个严重公共卫生问题,约87%的死亡病例都发生在发展中国家。

红芸豆(phaseolusvulgarislinn.sp.)学名红菜豆,为蝶形花亚科(faboideae)菜豆属(phaseolusl.)植物。红芸豆具有很高的食用和药用价值,可以提高人体自身免疫力、增强抗病能力,心脏病、动脉硬化、高血脂、低血钾和忌盐患者适用。目前,尚未见红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞作用研究的相关报道。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物和功能食品中的应用。

本发明所用红芸豆为豆科植物红芸豆phaseolusvulgarislinn.sp.的干燥种子。

本发明提供的红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物和功能食品中的应用,所述的红芸豆皮提取物按如下方法制备得到:

(1)取一定量红芸豆,浸泡过夜,剥离豆皮,干燥,粉碎;

(2)将步骤(1)得到的红芸豆皮粉末加入液固比为10-15ml/g的乙醇溶液,乙醇浓度60%,超声提取3次,每次30min,所得提取液合并,过滤,减压浓缩干燥后得红芸豆皮提取物。

药效学实验结果显示,本发明提供的红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞系hela细胞有很强的抑制作用,ic50值为4.41μg/ml。

本发明提供的提取物为来源于常用食材红芸豆的天然活性成分,安全可靠,为开发疗效好且毒副作用小的新型抗宫颈癌药物和功能食品提供了新的途径。

具体实施方式

下面通过具体实施例对一种红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物和功能食品中的应用做进一步详细说明。

实施例1红芸豆皮提取物的制备

(1)取500g红芸豆,浸泡过夜,分离豆皮,干燥,粉碎。

(2)将步骤(1)得到的红芸豆皮粉末加入液固比为14ml/g的乙醇溶液,乙醇浓度60%,超声提取3次,每次30min,所得提取液合并,过滤,减压浓缩滤液得1.4g红芸豆皮提取物。

实施例2红芸豆皮提取物的制备

(1)取500g红芸豆,浸泡过夜,分离豆皮,干燥,粉碎。

(2)将步骤(1)得到的红芸豆皮粉末加入液固比为12ml/g的乙醇溶液,乙醇浓度60%,超声提取3次,每次30min,所得提取液合并,过滤,减压浓缩滤液得1.0g红芸豆皮提取物。

实施例3红芸豆皮提取物的制备

(1)取500g红芸豆,浸泡过夜,分离豆皮,干燥,粉碎。

(2)将步骤(1)得到的红芸豆皮粉末加入液固比为16ml/g的乙醇溶液,乙醇浓度60%,超声提取3次,每次30min,所得提取液合并,过滤,减压浓缩滤液得1.3g红芸豆皮提取物。

实施例4红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞系hela细胞的抑制试验

药品及试剂:红芸豆皮提取物按实施例1制备得到,为暗红色粉末;宫颈癌细胞系hela细胞,购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。

实验方法:将对数生长的hela细胞,用0.25%的胰蛋白酶消化,离心,然后加入含10%胎牛血清的dmem培养基,制成细胞悬液。将其稀释至1.0×105个/ml,接种至96孔板中,每孔100μl,培养24h。按实施例1方法制得红芸豆皮提取物,将其用dmso溶解,-20℃保存备用,临用时培养液稀释成所需浓度。24h后,按实验组和对照组分别更换等体积不同药物浓度的培养液,每组6个平行,相同条件下再培养24h。去上清液,每孔加入含10%mtt(5mg/ml)的培养基,继续培养4h后,终止培养,小心吸去孔内培养液,加入100μldmso溶解、振荡、混匀,酶标法490nm下测定所得溶液光密度值,带入公式求得不同浓度药物作用后hela细胞生长抑制率。

抑制率(%)=(od对照-od实验)/od对照×100%。

实验设三次重复,结果取平均数。红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞系hela细胞的抑制作用的结果如表1所示。

计算半数抑制浓度ic50。实验结果见表1。

表1红芸豆皮提取物对宫颈癌hela细胞的抑制率及半数抑制浓度(ic50,μg/ml)

实验结果表明,红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞系hela细胞有明显抑制作用,且ic50值为4.41μg/ml。



技术特征:

技术总结
本发明公开了红芸豆皮提取物在制备抗宫颈癌药物中的应用。所述红芸豆皮提取物是按如下方法制备:以红芸豆为原料,浸泡过夜后分离豆皮,干燥,粉碎后用60%乙醇水溶液超声提取,将提取液浓缩干燥后得到。本发明得到的红芸豆皮提取物对宫颈癌细胞具有很好的抑制效果,实验表明对宫颈癌细胞系Hela细胞的抑制作用,IC50值为4.41μg/mL。提取物来源于天然食材,安全性高,具有较好的药用和食疗前景。

技术研发人员:李震宇;聂佳慧;秦雪梅
受保护的技术使用者:山西大学
技术研发日:2018.12.24
技术公布日:2019.03.29
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