一种制作痰涂片的痰液收集管的制作方法

本实用新型属于细胞病理学领域，具体涉及一种细胞病理学中制作痰涂片的专用离心管。

背景技术：

细胞病理学通过分析细胞或者小的细胞团诊断多种疾病和评估健康状况。痰液细胞病理学检查因具有高度特异性、无创性、经济快捷等优点在肺癌诊断中具有独特的价值。传统的痰涂片制备利用竹签蘸取痰液涂抹于载玻片上，固定染色后显微镜下观察。该方法制备痰涂片具有明显的局限性，主要表现在：受粘液的影响，涂片厚薄不均，细胞数量少，致阳性检出率低，假阴性率增高，肺癌早期筛查受到很大的影响；受粘液影响，无法对痰液标本进行免疫组化、分子病理等更进一步的检测；受粘液影响，无法将痰液标本制作成细胞蜡块，进行长期保存。

传统的痰液收集盒只能收集痰标本，无法进行离心，需添加粘液溶解剂后将其转移到离心管中才能离心收集细胞，离心后又需使用移液器或吸管吸取将细胞转移至载玻片上，操作繁琐，使用耗材多。

传统的痰涂片制备方法利用竹签蘸取痰液进行涂片，细胞数量少，且只能进行HE染色，做基本的病理诊断，不能进行免疫组化或分子病理等更进一步的检测，更无法制备痰液细胞蜡块。也有一些方法，先将痰液进行粘液溶解处理，离心后再做细胞涂片，但痰液收集与离心分开进行，不仅易出错，造成交叉污染，且提高了耗材成本。

技术实现要素：

本实用新型提供了一种制备痰涂片的痰液收集管，其由离心收集管、滴管、收集管盖，收集管盖设置在离心收集管上端且螺纹连接，滴管一端穿过收集管盖设置在离心收集管内，另一端通过盖帽设置在收集管盖上，盖帽与收集管盖的顶部螺纹连接，滴管管体上部(位于滴管胶头下方)为可伸缩结构，该可伸缩结构拉伸后可增加吸管长度，方便吸取离心收集管底部的标本。

所述离心收集管的底部为中空的倒圆锥形。

所述离心收集管上设置有刻度。

所述滴管上设置有刻度。

所述收集管盖为带有凸台的盖子，盖帽与凸台螺纹连接，防止离心过程中，吸管被甩出。

根据收集痰液的量设计成不同粗细的收集管，离心收集管上段直径固定40mm，方便收集痰液，下段直径10-30mm，总容量为15mL-50mL，以满足不同量的痰液标本。

收集管由透明塑料制成，便于观察痰液收集的量，粘液溶解及离心情况。

与该痰液收集管配合使用的是专用的痰液保存液，其中起细胞固定作用的成分为乙醚与95％乙醇等量混合液；乙醇具有脱水作用，可用于固定细胞；乙醚可溶解脂肪，利于细胞着色；乙醚乙醇混合后，具有了固定兼脱水作用,使涂片细胞结构清晰，核浆分明，颜色鲜艳。粘液溶解剂为0.5mol/L的1,4-二硫苏糖醇[DTT]，为一种强还原剂，可溶解痰液中的粘液，并且易溶于乙醇、乙醚、丙酮、和氯仿等有机溶剂中。常用的痰粘液溶解法有物理搅拌乳化痰、多种蛋白分解酶处理痰液、液基薄层制片法处理痰液等，都有各自的缺点。物理搅拌法及蛋白酶处理可能影响细胞形态及后续免疫组化及分子病理检测工作；液基薄层制片法价格较贵，制片过程繁琐；而其它痰液溶解剂不能很好的溶解于乙醇乙醚混合固定液中。

痰液专用收集管和专用保存液能够方便的获得痰液中较多的脱落细胞，制作涂片，现以15mL收集管为例加以说明。痰液专用收集管中提前加入3mL痰液保存液。清晨痰量多，含菌量亦大，先用洁口液，再用凉开水或生理盐水漱口，以除去口腔中细菌，深吸气后用力咳出1－2口痰于痰液专用收集盒中，拧紧收集盖后上下颠倒，使痰液与保存液混匀，利于保持细胞形态。待痰液收集管送至实验室后，使用涡旋震荡器，使痰液与保存液中的DTT充分混匀，置于离心机中配平后1000r/min离心5min，离心机停止后，取出收集管，可见收集管底部有细胞沉渣，即为收集的脱落细胞。根据沉淀的量用吸管吸弃部分上清，用吸管轻轻吹打剩余的上清液与沉淀，直至混匀。采用推片涂片或滴片法进行制片，涂片微干后进行固定、染色、脱水、透明、封片。

以痰液专用收集管和痰液保存液能方便的制作痰细胞块，现以15mL收集管为例加以说明。按体积比1:1的比例分别加入95％的乙醇和乙醚溶液至混合溶液体积达到40ml左右，制备成混合固定液，再加入1.545g DTT到混合固定液中，待DTT充分溶解后再按体积比1:1的比例分别加入95％的乙醇和乙醚溶液，定容至50ml，配制成DTT终浓度为0.5mol/L的痰液专用保存液，过滤除菌后分装3ml于痰液专用收集管中。清晨痰量多，含菌量亦大，先用洁口液，再用凉开水或生理盐水漱口，以除去口腔中细菌，深吸气后用力咳出1－2口痰于痰液专用收集盒中，拧紧收集盖后上下颠倒，使痰液与保存液混匀，利于保持细胞形态。待痰液收集管送至实验室后，使用涡旋震荡器，使痰液与保存液中的DTT充分混匀，置于离心机中配平后1000r/min离心5min，离心机停止后，取出收集管，可见收集管底部有白色沉淀，即为收集的脱落细胞。用吸管吸弃全分上清后，沉淀物中加入95％酒精10ml，3000r/min离心5min后静置固定1h，弃去上清酒精，将已固定凝集的细胞团块轻巧取出，滤纸包埋，常规脱水、透明、浸蜡、包埋切片、HE染色后镜检。痰细胞蜡块还可进行免疫组化和分子病理等更进一步的检测。

该痰液专用收集管和痰液专用保存液配合使用，适用于从下呼吸道痰、气管抽吸物、支气管肺灌洗吸出液中脱落细胞的收集。

与现有技术方法相比，本实用新型有以下有益技术效果：

本实用新型提供了一种能够随时收集痰液并保持痰液中脱落细胞正常细胞形态的痰液收集管及痰液保存液。该痰液收集管将同时具有固定细胞和溶解粘液的痰液保存液置于一种方便离心的收集管中，可以在受检者有痰时随时收集痰液，同时痰液专用收集管为广口设计，利于从患者口中接收痰液。结合收集管中的吸管，可有效避免交叉污染，有利于细胞病理学质量控制和标准化操作。而痰液收集管中的痰液保存液能够有效的获取粘液中的脱落细胞，同时保持痰液中脱落细胞的正常细胞形态，利于后续的细胞染色等常规病理操作。含有痰液样本的收集管可常温存放1-2天，给予受检者充足的时间运输样本，常温保存也降低了运输成本。同时由于痰液保存液是液体，能够充分有效的与痰液接触，并且痰液保存液的成分相对简单且成本低廉，非常适合临床推广应用。

本实用新型方法简单、价格便宜，能够商业化推广。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图；

图中：1-离心收集管；2-滴管；3-收集管盖；4-盖帽；5-凸台。

具体实施方式

下面结合实例和附图来详细说明本实用新型，本实用新型并不局限于此。

实施例1：如图1所示，本制备痰涂片的痰液收集管包括离心收集管1、滴管2、收集管盖3，离心收集管1的底部为中空的倒圆锥形，收集管盖设置在离心收集管上端且螺纹连接，滴管一端穿过收集管盖设置在离心收集管内，另一端通过盖帽4设置在收集管盖上，收集管盖3为带有凸台5的盖子，盖帽与凸台螺纹连接，滴管2管体上部(位于滴管胶头下方)为可伸缩管。

实施例2：本实施例结构同实施例1相同，不同在于离心收集管1上设置有刻度；滴管2上设置有刻度。